微生物復(fù)習(xí)——南開大學(xué)

1、微生物學(xué)復(fù)習(xí)一、緒論思考題1、微生物包括哪些類群？病毒、亞病毒真細(xì)菌、古細(xì)菌真菌、藻類、原生動(dòng)物2、微生物有哪些特殊的屬性？形體微小、比表面積大吸收營(yíng)養(yǎng)多、生長(zhǎng)旺盛、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)類型多樣對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)易變異分布廣、數(shù)量多3、巴斯德的什么著名實(shí)驗(yàn)是如何擊敗了自然發(fā)生理論的？曲頸瓶實(shí)驗(yàn)4、柯赫原則是如何證明疾病的因果關(guān)系？（1）病原微生物一定存在于一切患病個(gè)體中；（2）能從患病個(gè)體中分離出這種微生物，并能純培養(yǎng)；（3）將分離出的純培養(yǎng)微生物接種健康的個(gè)體時(shí)，同樣導(dǎo)致相同的疾?。唬?）從試驗(yàn)發(fā)病的個(gè)體中能重新分離培養(yǎng)出這種病原微生物。5、誰(shuí)是第一人在微生物學(xué)中使用固體培養(yǎng)基的？科赫6、舉例說明微生

2、物在生命科學(xué)發(fā)展中的重大貢獻(xiàn)？動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù);基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)、發(fā)酵工程技術(shù)、抗體工程技術(shù)的建立和實(shí)施做出了巨大貢獻(xiàn)二、形態(tài)結(jié)構(gòu)思考題G+、G-菌細(xì)胞壁化學(xué)組成的主要區(qū)別是什么？都由肽聚糖組成，但肽聚糖G-交聯(lián)低，無肽橋，DAP取代L-Lys,G+有磷壁酸，G-有脂多糖G+、G-菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的主要區(qū)別是什么？G+:肽聚糖分子組成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)磷壁酸分子包埋在其中周質(zhì)（膜壁間）G-:內(nèi)壁層：肽聚糖外壁層：外膜（含脂多糖層）周質(zhì)（外膜與膜間隙）從G+、G-菌細(xì)胞壁化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)的區(qū)別闡明革蘭氏染色的基本原理。1、用堿性染料結(jié)晶紫對(duì)菌液涂片進(jìn)行初染2、用碘溶液進(jìn)行媒染,其作

3、用是提高染料和細(xì)胞間的相互作用從而使二者結(jié)合得更牢固。3、用乙醇或丙酮沖洗進(jìn)行脫色。在經(jīng)歷脫色后仍將結(jié)晶紫保留在細(xì)胞內(nèi)的為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,而革蘭氏陰性細(xì)菌的結(jié)晶紫被洗掉（溶解掉了脂多糖）,細(xì)胞呈無色。4、用一種與結(jié)晶紫具有不同顏色的堿性染料對(duì)涂片進(jìn)行復(fù)染。例如沙黃,它使原來無色的革蘭氏陰性細(xì)菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色,而革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌繼續(xù)保持深紫色革蘭氏染色后,細(xì)胞內(nèi)形成一種不溶性的結(jié)晶紫-碘復(fù)合物,這種復(fù)合物可以用乙醇從革蘭氏陰性菌中抽提出來。革蘭氏陽(yáng)性菌因?yàn)槎鄬与木厶墙宦?lián)成的厚細(xì)胞壁,被乙醇脫水后,壁上小孔罐壁,阻止了不溶性復(fù)合物的逸出。而乙醇容易滲入富含脂質(zhì)的革蘭氏陰性菌外膜。思考題試根據(jù)細(xì)菌

4、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的特點(diǎn),分析并舉例說明為什么它們能在自然界中分布廣泛。細(xì)菌體積小,面積大,且具有芽孢結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)述細(xì)菌與古生菌在細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成、細(xì)胞質(zhì)膜脂類結(jié)構(gòu)等方面的區(qū)別。細(xì)胞壁的區(qū)別假肽聚糖與肽聚糖（甲烷桿菌屬）熱原體屬?zèng)]有細(xì)胞壁（1）肽聚糖雙糖單位為N-乙酰葡萄糖胺（NAG）和N-乙酰胞壁酸（NAM）假肽聚糖為N-乙酰葡萄糖胺（NAG）和N-乙酰塔羅糖苷糖醛酸（NAT）（2）連接雙糖的是p-1,3-糖苷鍵而不是p-1,4糖苷鍵，不能被溶菌酶水解（3）肽尾有三個(gè)L型氨基酸組成肽聚糖由兩個(gè)L型氨基酸和兩個(gè)D型氨基酸組成（4）肽橋?yàn)橐粋€(gè)氨基酸組成,肽聚糖的肽橋由五個(gè)氨基酸或無肽橋細(xì)胞膜的區(qū)別（1）磷脂

5、疏水部位不是長(zhǎng)鏈脂肪酸而是異戊二烯重復(fù)單位（2）烴鏈和甘油成醚鍵而非酯鍵（3）古細(xì)菌存在單分子層,是二甘油四醚二植烷單層膜青霉素與溶菌酶破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的機(jī)制有何不同？溶菌酶破壞細(xì)胞壁，青霉素組織細(xì)胞壁再生簡(jiǎn)述細(xì)菌芽胞和營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在結(jié)構(gòu)，化學(xué)組成和抵抗極端環(huán)境條件的能力有何不同。芽胞的耐熱機(jī)制是什么？芽孢結(jié)構(gòu)：胞外壁芽孢衣皮層核心（芽孢壁芽孢膜芽孢質(zhì)核區(qū)）最外兩層由蛋白質(zhì)組成皮層是芽孢肽聚糖核心含吡啶二磷酸抵御極端環(huán)境能力強(qiáng)耐熱機(jī)制：（1）吡啶二磷酸與鈣結(jié)合形成吡啶二磷酸鹽可降低核心含水量（2）皮層的肽聚糖交聯(lián)松弛，滲透壓高，吸水性強(qiáng)，可進(jìn)一步降低芽孢核心含水量核心脫水，核心細(xì)胞質(zhì)呈膠體狀，大大提

6、高了抗熱性和抗輻射能力。請(qǐng)描述細(xì)菌鞭毛的結(jié)構(gòu)與功能。鞭毛結(jié)構(gòu)：鞭毛絲鉤形鞘基體（G-含P環(huán)L環(huán)MS環(huán)和C環(huán)Mot蛋白和Fli蛋白G+不含P環(huán)和L環(huán)）功能運(yùn)動(dòng)器官實(shí)現(xiàn)其趨性運(yùn)動(dòng)能量來源：質(zhì)子動(dòng)勢(shì)三、形態(tài)結(jié)構(gòu)（真核）磷壁酸存在于G+真細(xì)菌細(xì)胞中m-二氨基庚二酸存在于G-真細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖分子中吡啶二羧酸鈣存在于真細(xì)菌分化形成的芽孢皮層中甘油磷脂存在于真細(xì)菌原生質(zhì)膜中植烷甘油醚存在于古生菌原生質(zhì)膜中菌絲變態(tài)結(jié)構(gòu)：厚垣孢子、吸器、附著胞、菌環(huán)、菌網(wǎng)、假根、匍匐枝特化結(jié)構(gòu)：菌索、菌核、子座菌絲頂端生長(zhǎng)：囊泡假說思考題請(qǐng)給真菌下個(gè)定義。具有真正細(xì)胞核;分枝繁茂的絲狀體菌絲頂端生長(zhǎng)；有堅(jiān)硬細(xì)胞壁，成分為幾丁

7、質(zhì)與葡聚糖為主，少數(shù)為纖維素；營(yíng)養(yǎng)方式為化能有機(jī)異養(yǎng)型好氧；以產(chǎn)生有性孢子和無性孢子兩種方式繁殖絲狀真菌的隔膜類型有哪些？封閉型單孔型多孔型桶孔型菌絲的變態(tài)類型、特殊結(jié)構(gòu)有哪些？變態(tài)類型：厚垣孢子吸器附著胞粘球、菌環(huán)和菌網(wǎng)匍匐菌絲和假根特殊結(jié)構(gòu)：菌索菌核子座簡(jiǎn)述真菌細(xì)胞壁的組成和結(jié)構(gòu)。組成：（1）多糖：幾丁質(zhì)纖維素葡聚糖（2）蛋白質(zhì)（3）脂質(zhì)黑色素?zé)o機(jī)離子結(jié)構(gòu)：（1）最內(nèi)層幾丁質(zhì)微纖維緊連質(zhì)膜，起支撐作用。（2）中層是p-1,3-葡聚糖鏈借助氫鍵聯(lián)接形成內(nèi)部的網(wǎng)絡(luò)骨架結(jié)構(gòu)，與幾丁質(zhì)緊密相連；（3）外層p-1,6-葡聚糖可以直接與幾丁質(zhì)相連，也可以聯(lián)接于p-1,3-葡聚糖鏈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上；些聯(lián)接到細(xì)

8、胞壁上的GPI-CWPs蛋白經(jīng)由糖基磷脂酰肌醇錨定在p-1,6-葡聚糖上而位于壁的外部；Pir-CWP蛋白以共價(jià)鍵連接于p-1,3-葡聚糖上。真核微生物（低等水生真菌）的游動(dòng)孢子的鞭毛結(jié)構(gòu)與功能。由9根微管二聯(lián)體包圍對(duì)鑲嵌在中央鞘的微管形成的9+2型結(jié)構(gòu)。有質(zhì)膜包裹。功能：運(yùn)動(dòng)請(qǐng)?jiān)囀鼋湍傅募?xì)胞循環(huán)。G1期是DNA合成的準(zhǔn)備時(shí)期，染色體解螺旋成伸展的染色質(zhì)狀態(tài)，同時(shí)各種酶類開始合成；S期是DNA合成期，DNA進(jìn)行復(fù)制期間細(xì)胞核發(fā)生分裂，核的分裂與開始形成芽體是相關(guān)的；G2期是有絲分裂準(zhǔn)備期，DNA合成停止，核延伸成細(xì)長(zhǎng)的葫蘆狀，一部分進(jìn)入新芽，此刻紡錘極體位于核的長(zhǎng)軸兩端,微管連于其間；M期是有

9、絲分裂期,復(fù)制好的染色單體在此期間向兩個(gè)子核分配,最后形成兩個(gè)子細(xì)胞,在出芽基部形成隔膜,最后芽體從母細(xì)胞上脫落。病毒思考題什么是病毒,如何理解病毒是種特殊的生命形式？病毒（virus）是類既具有化學(xué)大分子屬性,又具有生物體基本特征；既具有細(xì)胞外的感染性顆粒形式,又具有細(xì)胞內(nèi)的繁殖性基因形式的獨(dú)特生物類群病毒不具有般生物所具有的細(xì)胞結(jié)構(gòu),但卻可以像生物樣復(fù)制傳遞,是種介于生物和非生物之間的生命形式。病毒粒有哪幾種對(duì)稱形式？螺旋對(duì)稱衣殼二十面體對(duì)稱衣殼雙對(duì)稱衣殼（二十面體對(duì)稱+螺旋對(duì)稱病毒復(fù)制循環(huán)分為哪幾個(gè)階段?各個(gè)階段的主要過程如何?分3個(gè)階段，六個(gè)步驟：病毒感染宿主細(xì)胞i侵染起始：（1）吸附

10、吸附力來源：病毒表面蛋白與細(xì)胞受體的結(jié)合-特異性，不可逆吸附靜電引力、氫鍵、范德華力-可逆吸附，（2）侵入侵入又稱病毒內(nèi)化，（3）脫殼病毒侵入后，病毒的包膜和/或衣殼除去而釋放出病毒核酸的過程。脫殼是病毒基因組進(jìn)行功能表達(dá)所必需的感染事件病毒編碼蛋白的表達(dá)和基因組的復(fù)制i大分子合成（4）增殖（復(fù)制與生物合成）病毒利用宿主的生物合成機(jī)構(gòu)和場(chǎng)所，使病毒核酸表達(dá)和復(fù)制，產(chǎn)生大量的病毒蛋白質(zhì)和核酸早期蛋白和中期蛋白：參與DNA酶復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的酶；晚期蛋白：是頭部和尾部蛋白以及參與成熟噬菌體顆粒從細(xì)胞釋放出來的酶。噬菌體編碼的一些蛋白可以調(diào)節(jié)宿主RNA聚合酶與啟動(dòng)子的結(jié)合能力，調(diào)節(jié)早期、中期、病毒的裝配與

11、釋放（5）裝配新合成的毒粒結(jié)構(gòu)組分組裝成完整的病毒顆粒，稱做病毒的裝配/成熟（6）釋放當(dāng)宿主細(xì)胞內(nèi)的大量子代噬菌體已成熟后，由于水解細(xì)胞膜的脂肪酶和水解細(xì)胞壁的溶菌酶的作用，從細(xì)胞內(nèi)部促進(jìn)了細(xì)胞的裂解，從而實(shí)現(xiàn)了子代噬菌體的釋放。試結(jié)合一步生長(zhǎng)曲線分析病毒的特點(diǎn)，并與細(xì)菌進(jìn)行比較。病毒：潛伏期釋放穩(wěn)定細(xì)菌：遲緩期對(duì)數(shù)期穩(wěn)定期衰退期1）病毒在潛伏期不會(huì)增長(zhǎng)，細(xì)菌緩慢增長(zhǎng)2）病毒在釋放過程速率相對(duì)穩(wěn)定，而細(xì)菌對(duì)數(shù)期速率在變化3）病毒到達(dá)穩(wěn)定期后數(shù)量不會(huì)衰減，但細(xì)菌在穩(wěn)定期后會(huì)衰亡亞病毒有哪幾類？各自有何特點(diǎn)？類病毒只含RNA，專性寄生，分子病原體。無抗原性，無蛋白質(zhì)外殼，有侵染活性，不需要輔助病毒

12、獨(dú)立復(fù)制，單鏈共價(jià)閉合環(huán)狀小RNA分子，是目前已知最小的具有侵染性的致病因子，完全依賴宿主聚合酶，在細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行滾環(huán)式擬病毒無蛋白質(zhì)外殼，依賴輔助病毒在細(xì)胞質(zhì)復(fù)制，ssRNA，單獨(dú)擬病毒不具有病毒可干擾輔助病毒的復(fù)制并減輕其對(duì)宿主的病害。侵染性阮病毒蛋白質(zhì)侵染因子，疏水性強(qiáng)的糖蛋白，高度保守，傳染性，改變蛋白高級(jí)構(gòu)象PrPcPrPsc衛(wèi)星病毒需要特異性輔助病毒，與輔助病毒沒有同源性，基因組可以編碼自身外殼蛋白，干擾輔助病毒復(fù)制干擾缺損顆?；蚪M不完整或者因基因某一點(diǎn)突變而產(chǎn)生的不能正常進(jìn)行復(fù)制的病毒，也稱缺陷病毒，需要借助輔助病毒DI顆粒與輔助病毒核酸序列同源，但不完整DI顆粒有蛋白質(zhì)外殼不能

13、干擾異種病毒五、營(yíng)養(yǎng)思考題以紫色非硫細(xì)菌為例，解釋微生物的營(yíng)養(yǎng)類型可變性及對(duì)環(huán)境條件變化適應(yīng)能力的靈活性。紫色非硫細(xì)菌（purpienonsulphurbacteria）:沒有有機(jī)物時(shí)，同化CO2,為自養(yǎng)型微生物；有機(jī)物存在時(shí)，利用有機(jī)物進(jìn)行生長(zhǎng)，為異養(yǎng)型微生物；光照和厭氧條件下，利用光能生長(zhǎng)，為光能自養(yǎng)型微生物；黑暗與好氧條件下，依靠有機(jī)物氧化產(chǎn)生的化學(xué)能生長(zhǎng)，為化能異養(yǎng)型微生物；試比較營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入微生物細(xì)胞的幾種方式的特點(diǎn)1不通過膜上載體蛋白被動(dòng)擴(kuò)散：擴(kuò)散過程不消耗能量、無載體蛋白參與、不能逆濃度梯度擴(kuò)散。不是主要方式2通過膜上載體蛋白（1）不耗能量：促進(jìn)擴(kuò)散（2）耗能：主動(dòng)運(yùn)輸：需要消耗

14、能量，可以進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸；物質(zhì)運(yùn)送須借助細(xì)胞膜上的底物特異載體蛋白的協(xié)助初級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸：H+的膜外運(yùn)輸：消耗呼吸能、化學(xué)能、光能能化膜：膜外表面高能次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸：由初級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸在細(xì)胞質(zhì)膜（能化膜）上所建立起來的H+質(zhì)子濃度差（電勢(shì)差），在其消失過程中所偶聯(lián)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)輸，稱為次級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸Na+K+-ATP酶系統(tǒng)：Na+,K+-ATP酶利用ATP的能量將Na+由細(xì)胞內(nèi)泵出胞外，并將K+泵入胞內(nèi)。ATP結(jié)合性盒式轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白系統(tǒng):ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白由兩個(gè)疏水性跨膜域和兩個(gè)核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域組成，核苷酸結(jié)合結(jié)構(gòu)域可與ATP結(jié)合。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白可與專一性的溶質(zhì)結(jié)合蛋白結(jié)合基團(tuán)轉(zhuǎn)位：物質(zhì)運(yùn)送須借助細(xì)胞膜上的底物特異

15、載體蛋白的協(xié)助，需要消耗能量；溶質(zhì)在運(yùn)送前后發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化；鐵載體運(yùn)輸吸收：微生物細(xì)胞通過向胞外分泌鐵載體（siderophore）來運(yùn)輸鐵離子。鐵載體是一類能與Fe3+形成復(fù)合物并將其運(yùn)輸?shù)桨麅?nèi)的小分子物質(zhì)蛋白質(zhì)輸出:Sec（Secretory）移位酶在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)中起重要作用。SecYEG是一種膜介導(dǎo)的移位酶，廣泛地分布在原核生物中，特異性地將某些蛋白質(zhì)或酶插入膜中，然后向膜外分泌。3膜泡運(yùn)輸原生生物六、代謝分子氧對(duì)專性厭氧菌的抑制或致死作用是因細(xì)胞內(nèi)缺乏超氧化物歧化酶和過氧化氫酶。硝酸鹽還原菌兼性厭氧；在有氧條件下，硝酸鹽還原酶活性被抑制，所利用的硝酸鹽作為氮源營(yíng)養(yǎng)物，稱為同化性硝

16、酸鹽還原作用固定CO2的途徑1）Calvin循環(huán)（光能自養(yǎng)、和許多化能自養(yǎng)）CO2固定1、5二磷酸核酮糖羧化酶CO2還原3磷酸甘油酸還原酶受體再生5磷酸核酮糖激酶2）還原性TCA循環(huán)（綠色硫細(xì)菌）3）羥基丙酸循環(huán)（綠色非硫細(xì)菌）4）厭氧乙酰-CoA循環(huán)（化能自養(yǎng)菌）思考題微生物營(yíng)養(yǎng)與動(dòng)、植物相比，碳源和氮源譜非常廣泛，為什么說微生物的能源譜也非常廣泛？微生物可以利用光能,有機(jī)物,無機(jī)物不同營(yíng)養(yǎng)類型的微生物在不同條件下產(chǎn)生ATP和還原力的方式與特點(diǎn)。光能營(yíng)養(yǎng)型：環(huán)式光合磷酸化（紅螺菌目、厭氧菌）光合磷酸化生成ATP；在強(qiáng)還原環(huán)境下，由外源電子供體氧化釋放的電子逆電子傳遞鏈生成NAD（P）H特點(diǎn)：

17、1）電子傳遞途徑屬于循環(huán)方式，在光能驅(qū)動(dòng)下，電子從菌綠素逐出，又回到菌綠素；2產(chǎn)ATP與產(chǎn)還原力H分別進(jìn)行；3）還原力來自H2S、H2等的無機(jī)氫供體；4）不產(chǎn)生氧非環(huán)式光合磷酸化藻類、藍(lán)細(xì)菌（有氧）H2O作為氫供體特點(diǎn)：1）電子傳遞途徑非循環(huán)；2）有氧條件；3）有兩個(gè)光合系統(tǒng)，其中的PSI（含葉綠素a）可以利用紅光，PSII（含葉綠素b）可利用藍(lán)光；4）反應(yīng)中同時(shí)有ATP（產(chǎn)自PSII）、還原力H（產(chǎn)自PSI）和O2（產(chǎn)自PSII進(jìn)行水光解釋放氧）產(chǎn)生；5）還原力NADPH2中的H是來自H2O分子光解后的H+和e-。綠色細(xì)菌（厭氧）H2S作為氫供體嗜鹽菌紫膜光合作用（光介導(dǎo)ATP合成）在無氧有

18、光下，光介導(dǎo)視紫紅質(zhì)蛋白輔基視黃醛分子順、反式結(jié)構(gòu)變化形成質(zhì)子跨膜動(dòng)勢(shì)（不斷把質(zhì)子驅(qū)至膜外），經(jīng)ATP酶產(chǎn)生ATP。化能異養(yǎng)型還原力形成：主要靠EMP途徑，HMP途徑發(fā)酵：將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未完全氧化的某種中間產(chǎn)物無氧呼吸一類呼吸鏈末端的氫受體為外源無機(jī)氧化物（少數(shù)為有機(jī)氧化物）的生物氧化有氧呼吸有機(jī)物是氫供體O2為氫受體化能自養(yǎng)型化能自養(yǎng)微生物從無機(jī)底物，例如，NH4+、N02-、H2S、SO、H2和Fe2+的氧化中得到能量ATP和還原力H,同化CO2合成細(xì)胞物質(zhì)。CO2是氫受體酵母酒精發(fā)酵的三種類型。酵母菌三型發(fā)酵：控制發(fā)酵條件，產(chǎn)生不同產(chǎn)物I型發(fā)酵；氐叱酮酸祗皿乙醛乙

19、醇+2ATPEirEMPII型發(fā)酵：Glc薛卩亞硫釀氧仙）*e11+c西弗IK.我戲聘E丙酮酸”乙醛：亞硫酸氫鈉価化坯基乙軽匸卩一二輕丙酮P甘一_*甘油+旳,、丙酮酸乙醛歧化反覽.乙醇+乙酸in型發(fā)酵；gicf堿性條件卩H7,6）Lv-羥丙酮至地聖-卩-甘1甘油磁思考題如何利用微生物的生長(zhǎng)規(guī)律來指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)?會(huì):遲緩期會(huì)增加生產(chǎn)周期，應(yīng)縮短:對(duì)數(shù)期生活力強(qiáng)，在工業(yè)生產(chǎn)中?！胺N子”:常用于進(jìn)行生物化學(xué)、生理學(xué)研究:穩(wěn)定期是積累代謝產(chǎn)物的時(shí)期，如放線菌產(chǎn)生抗生素，應(yīng)采取措施補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)或去除代謝物或改善培養(yǎng)條件。在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，對(duì)啤酒、接種環(huán)、培養(yǎng)血肉湯蛋白胨固體培養(yǎng)基及無菌室內(nèi)空氣分別來用哪些方

20、法進(jìn)行滅菌?寫出滅菌條件。對(duì)啤酒:采用巴氏消毒法，60-85C下處理30min至15s對(duì)接種環(huán):下熱、濕熱或火焰灼燒法均可，通常將接種環(huán)在調(diào)精燈火焰上充分燒紅，冷卻后。接種對(duì)培養(yǎng)組:在烘箱中，150-170C下維持1-2h，或混熱火商，121C,20min對(duì)肉湯蛋白胨固體培養(yǎng)基。濕熱滅菌，121C.20min.無菌室內(nèi)空氣：先噴消35%的石炭酸溶液、再用紫外燈照射15mi.可增強(qiáng)殺菌效果試比較細(xì)菌酒精發(fā)酵與酵母酒精發(fā)酵的異同點(diǎn)。微生物發(fā)酵是指在無氧等外源氧受體條件下，是指微生物細(xì)胞將有機(jī)物氧化釋放的電子直接交給底物本身未光全氧化的某種中間產(chǎn)物、同時(shí)釋放能量并產(chǎn)生各種不同的代謝產(chǎn)物的過程。細(xì)菌酒

21、精發(fā)酵是指某些細(xì)菌利用葡萄糖經(jīng)ED途徑產(chǎn)生的丙酮酸在無氧條件下被還原生成乙醇的過程。酵母酒精發(fā)酵是指酵母菌利用葡萄糖經(jīng)EMP途徑產(chǎn)生的丙酮酸，在無氧條件下被還原生成乙醇的過程。二者相同點(diǎn):都是無氧條件下的微生物發(fā)酵作用，被還原的中產(chǎn)物是丙酮酸，生成的是乙醇。二者不相同點(diǎn):a微生物種類不同：前者是某些細(xì)菌，原核生物，后者是酵母菌，真核生物；b代謝途徑不同:前者是經(jīng)ED途徑產(chǎn)生丙酮酸，后者是經(jīng)EMP途徑產(chǎn)生的丙酮酸；c發(fā)酵特點(diǎn)不同:細(xì)菌酒精發(fā)酵的代謝速率和產(chǎn)物轉(zhuǎn)化率高，菌體及代謝副產(chǎn)物生成量小，發(fā)酵溫度高，不必定期供養(yǎng)，而酵母酒精發(fā)酵生長(zhǎng)pH低，不易污染雜菌，并且對(duì)乙醇的耐受力比細(xì)菌高。七、生長(zhǎng)繁

22、殖避免出現(xiàn)細(xì)菌的耐藥性的措施第一次使用的藥物劑量要足；避免在一個(gè)時(shí)期或長(zhǎng)期多次使用同種抗生素；不同的抗生素(或與其他藥物)混合使用；對(duì)現(xiàn)有抗生素進(jìn)行改造；篩選新的更有效的抗生素思考題細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖與高等動(dòng)植物的有哪些異同？細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖：染色體雙向復(fù)制：復(fù)制時(shí)環(huán)狀DNA附著在膜上，DNA在胞膜上復(fù)制，壁、膜隨著生長(zhǎng)，兩套DNA分離后，細(xì)胞出現(xiàn)橫膈壁，細(xì)胞分裂。細(xì)胞壁擴(kuò)增：細(xì)胞壁擴(kuò)增位點(diǎn)（肽聚糖生長(zhǎng)點(diǎn)）球菌：赤道板插入、背靠背合成桿菌：多間隔位點(diǎn)插入、分散合成生長(zhǎng)分裂調(diào)節(jié)：肽聚糖主鏈裂解酶、閉合酶肽鏈間解交聯(lián)酶：內(nèi)肽酶等一系列相關(guān)酶肽鏈交聯(lián)相關(guān)酶：D-Ala-D-Ala-羧肽酶、轉(zhuǎn)肽酶異：細(xì)菌是

23、無性繁殖，方法有二分法和產(chǎn)生芽孢，染色體為自我復(fù)制，高等動(dòng)植物有性繁殖，染色體在繁殖過程中有拆分。同：什么樣微生物在什么條件下可作出典型生長(zhǎng)曲線？單細(xì)胞、二分裂法、液體培養(yǎng)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)恒定、培養(yǎng)條件適宜利用細(xì)菌作科學(xué)研究或發(fā)酵生產(chǎn)為什么要首先繪制其生長(zhǎng)曲線？細(xì)菌在生長(zhǎng)曲線的對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)旺盛，菌株個(gè)體穩(wěn)定，特征明顯，適合用作科研以及生產(chǎn)，而在遲緩期、平臺(tái)期、以及衰退期都不適合，所以需要利用生長(zhǎng)曲線指導(dǎo)。真菌的無性孢子和有性孢子的類型。無性孢子：厚垣孢子、節(jié)孢子、芽胞子、分生孢子、孢囊孢子、游動(dòng)孢子有性孢子：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、擔(dān)孢子控制微生物生長(zhǎng)繁殖的主要方法有哪些？其原理是什么化學(xué)方法非選

24、擇性抑菌劑：抑制生長(zhǎng)而不殺死殺菌劑：殺死而不裂解溶菌劑：裂解而殺死消毒劑：可殺死微生物，通常用于非生物材料的滅菌或消毒防腐劑：能殺死微生物或抑制其生長(zhǎng)，但對(duì)人及動(dòng)物的體表組織無毒性或毒性低，可作為外用抗微生物藥物選擇性抗代謝物磺胺藥與對(duì)氨基苯甲酸競(jìng)爭(zhēng)二氫葉酸合成酶，干擾堿基合成對(duì)人無影響與正常代謝物競(jìng)爭(zhēng)相關(guān)酶類，抑制微生物生長(zhǎng)必需物質(zhì)的生物合成；替代正常代謝物組入合成物，使合成物失去正常生理活性與功能；作為合成途徑終產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)類似物，經(jīng)反饋調(diào)節(jié)抑制正常終產(chǎn)物的合成抗生素（1）抑制胞壁合成（青霉素G:抑制肽鏈間交聯(lián)）（2）抑制蛋白質(zhì)合成（3）破壞細(xì)胞質(zhì)膜抑制DNA復(fù)制（5）抑制DNA轉(zhuǎn)錄物理方法

25、高溫滅菌：高溫可引起蛋白質(zhì)、核酸和脂類等重要生物高分子發(fā)生降解或改變其空間結(jié)構(gòu)等輻射滅菌：形成胸腺嘧啶二聚體、電離輻射作用超聲波滅菌：超聲波可通過其高頻率震動(dòng)與細(xì)胞振動(dòng)的不和諧而造成細(xì)胞周圍環(huán)境的局部真空，導(dǎo)致細(xì)胞周圍壓力的極大變化，這種壓力變化促使細(xì)胞破裂，引起機(jī)體死亡。過濾除菌/高滲透壓殺菌/干燥抑菌/防腐抑菌八、遺傳E.coli人工誘導(dǎo)感受態(tài)高濃度鈣離子低溫培養(yǎng)；電擊法高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)以入和入dgal+同時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)菌，形成雙重溶源化細(xì)菌。誘導(dǎo)裂解時(shí)，正常的噬菌體可以補(bǔ)償:dgal+缺失的功能，產(chǎn)生等量的入和入dgal+,受體菌獲得一半的gal+轉(zhuǎn)導(dǎo)子。雙組分調(diào)控系統(tǒng)：最簡(jiǎn)單的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)。分為感受

26、器激酶和應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白。感受器激酶位于細(xì)胞膜上,是一種起著被磷酸化作用的酶。在細(xì)胞質(zhì)膜表面，感受器激酶可感受到來自環(huán)境的信號(hào)，并在特異性組氨酸殘基上發(fā)生自身磷酸化。然后磷酸化基團(tuán)被轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中相對(duì)的應(yīng)答調(diào)節(jié)蛋白上。準(zhǔn)性生殖的過程形成異核體核融合形成二倍體體細(xì)胞交換和單倍體化菌種退化及保藏復(fù)壯：積極：未退化退前經(jīng)常進(jìn)行純種分離和生產(chǎn)性狀測(cè)定，選擇正變個(gè)體消極：從發(fā)生衰退的菌種中分離未退化個(gè)體防止退化：控制傳代次數(shù)；利用不易衰退的細(xì)胞傳代；采用適宜的培養(yǎng)條件及有效菌種保藏方法保藏斜面低溫、液體石蠟、沙土管、冷凍干燥、液氮超低溫思考題如果兩個(gè)不同營(yíng)養(yǎng)缺陷標(biāo)記(a-b-c+d+和a+b+c-d-)的菌株

27、經(jīng)混合后能產(chǎn)生在基本培養(yǎng)基平板上生長(zhǎng)的原養(yǎng)型重組菌株，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)來決定該遺傳轉(zhuǎn)移過程是轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)還是接合?采用U形管，中間隔有細(xì)菌濾器，左右管加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基滅菌。左管接入A,右管接入B通氣培養(yǎng)24小時(shí)后，左右分別在上涂平板觀察是否有野生型出現(xiàn)若兩側(cè)均有野生型，則說明是轉(zhuǎn)化，若一側(cè)出現(xiàn)一側(cè)不出現(xiàn)，則說明是轉(zhuǎn)導(dǎo)，若兩側(cè)均不出現(xiàn)，則說明是接合。自然遺傳轉(zhuǎn)化與人工轉(zhuǎn)化之間有什么關(guān)系?為什么在一般情況下它們轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的成功率有如此大的差別?自然轉(zhuǎn)化時(shí)，雙鏈DNA被感受態(tài)細(xì)胞吸附后，細(xì)胞水解其中一條鏈，只有一條鏈進(jìn)入細(xì)胞，這樣質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)被破壞，只有通過多個(gè)質(zhì)粒分子DNA片段的重組才能重新恢復(fù)到可自主復(fù)制

28、的狀態(tài)，效率相對(duì)低，人工轉(zhuǎn)化時(shí)，進(jìn)入細(xì)胞的質(zhì)粒DNA結(jié)構(gòu)未被破壞，因此效率相對(duì)高九、生態(tài)微生物之間相互關(guān)系：中性作用；協(xié)同作用；偏利作用；共生；競(jìng)爭(zhēng)；寄生；拮抗；捕食思考題試論微生物與水體富營(yíng)養(yǎng)化作用，朮體的富營(yíng)養(yǎng)化柞用和;水blnom;、；赤潮(redtide)藻類相藍(lán)魴囲等過宜主隹，產(chǎn)生大童的有機(jī)物異養(yǎng)農(nóng)生物軌化這些有機(jī)鶴I,疑盡水中的孰，低厭職曹開始大和代涮II分解含號(hào)化合物.產(chǎn)生h乩從而#建水育璉聞的豈昧.匿水悴出現(xiàn)犬盤機(jī)靛物和異常顧芭水悴大雖的有機(jī)物或無機(jī)物.特刖是磷醸鹽和無機(jī)氮化令物水的富營(yíng)養(yǎng)化伽nwhi珥物理方法、化學(xué)方法、生物方法（優(yōu)點(diǎn)可以預(yù)防、缺點(diǎn)引入新物種）試用些典型例子說

29、明微生物與生物環(huán)境之間的相互關(guān)系。微生物與微生物之間：互生（可單獨(dú)生活）：纖維素分解菌與固氮菌（協(xié)同作用）亞硝化細(xì)菌與硝化細(xì)菌（偏利作用共生（不能獨(dú)立生活）：藻類或藍(lán)細(xì)菌與真菌形成的地衣競(jìng)爭(zhēng)：嗜冷菌和低溫菌寄生：病毒對(duì)活體細(xì)胞拮抗：乳酸菌產(chǎn)乳酸、酵母菌產(chǎn)乙醇微生物與植物之間：寄生：小麥銹病、玉米黑粉病互惠共生：菌根、根瘤微生物與人和動(dòng)物之間：互生：人腸道微生物共生：瘤胃微生物與反芻動(dòng)物寄生：病原微生物微生物在生態(tài)系統(tǒng)中有哪些作用?1）有機(jī)物主要分解者2）參與地球化學(xué)循環(huán)的重要成員3）初級(jí)生產(chǎn)者4）物質(zhì)與能量貯存者5）生物進(jìn)化中先鋒種類簡(jiǎn)述微生物參與的碳循環(huán)、氮循環(huán)和硫循環(huán)。北好細(xì)苗掃慟.込直網(wǎng)

30、菌、址能無機(jī)自養(yǎng)微宙撈二、氮素循環(huán)庭歸此3D曲.特抹胸幀”&-人工臺(tái)成曲有機(jī)樹、護(hù)物只能琳微主物舉片餉毎.簡(jiǎn)述污水生物處理的流程及沼氣發(fā)酵過程，并說明其與微生物生態(tài)學(xué)的關(guān)系襯水沼吒雄靜是一*+井恆雜的生優(yōu)過程可分為三降解肘醫(yī)住)產(chǎn)醴階段判戟思考題1.微生物的分布比動(dòng)植物更廣泛，其生態(tài)學(xué)意義在哪里？微生物的分布比動(dòng)、植物更加廣泛的生態(tài)意義主要體現(xiàn)在能使地球生物圈中的能量流動(dòng)、物質(zhì)循環(huán)更加通暢，不致出現(xiàn)阻滯。微生物的生態(tài)功能主要在于其分解者的分解功能，主要分解動(dòng)物、植物、微生物的殘?bào)w及相關(guān)的代謝產(chǎn)物。而實(shí)際上在生物圈中動(dòng)、植物殘?bào)w及其代謝產(chǎn)物由于自然力的原因可以遷移到遠(yuǎn)離原來生活的地點(diǎn)，這樣微生物

31、要完成分解者的功能，其分布范圍就必須比動(dòng)、植物更加廣遠(yuǎn)。2.可以從哪些方面說明微生物具有降解環(huán)境污染物的巨大潛力？答:微生物對(duì)環(huán)境污染物具有巨大降解潛力是微生物生理、遺傳、生態(tài)分布等多方面的特點(diǎn)的綜合結(jié)果，這些方面包括:經(jīng)過漫長(zhǎng)的地球生物演化，現(xiàn)存的微生物已經(jīng)具有對(duì)已存在的各種有機(jī)物的強(qiáng)大降解能力。對(duì)大量目前微生物不能降解的污染物(現(xiàn)存降解酶不能以之為底物)。微生物可以通過適應(yīng)進(jìn)化(主要是基因突變，基因轉(zhuǎn)移、基因重組)而獲得新的降解能力。對(duì)不能進(jìn)化出新降解能力的污染物。微生物還能通過共代謝或生理過程中產(chǎn)生氧化性物質(zhì)(氧自由基)來間接氧化分解微生物具有體積小，比表面大、生長(zhǎng)繁殖快、分布廣泛等生態(tài)

32、多方面的優(yōu)勢(shì)有助于發(fā)揮其分解作用的優(yōu)力十、進(jìn)化與分類思考題為什么能用生物大分子作為衡量生物進(jìn)化的分子時(shí)鐘?選用原則有哪些?建立16SrRNA系統(tǒng)發(fā)育樹的意義何在？大量研究表明，蛋白質(zhì)、DNA、RNA序列進(jìn)化變化的顯著特點(diǎn)是進(jìn)行速率相對(duì)恒定。也就是說，分子序列進(jìn)化的改變量（氨基酸或者核苷酸替換數(shù)或替換百分率）與分子進(jìn)化的時(shí)間成正比。因此，這些生物大分子被看作是分子計(jì)時(shí)器或者進(jìn)化鐘。（1）在所研究的種群范圍內(nèi)，必須普遍存在。（2）在所有物種中該分子的功能相同。（3）為了鑒定大分子序列的同源位置或同源區(qū)，要求所選擇的分子序列必須嚴(yán)格線性排列。（4）分子序列的改變頻率應(yīng)與進(jìn)化的測(cè)量尺度相適應(yīng)。2為什么

33、16SrRNA（18SrRNA）基因作為研究生物進(jìn)化的主要對(duì)象？（1）rRNA普遍存在，含量高，約占細(xì)胞中RNA的90%，易于提取，且具有重要而恒定的生理功能。（2）在16SrRNA分子中，即含有高度保守區(qū)和中度保守區(qū)，又含有高度變化的序列區(qū)域。（3）16SrRNA分子量大小適中，既能提供足夠的信息又便于序列分析。（4）原核生物中的16SrRNA與真核生物中的18SrRNA3為什么在現(xiàn)代微生物分類中，任何能穩(wěn)定地反映微生物種類特征的資料，都有分類學(xué)意義，都可以作為分類鑒定的依據(jù)?你知道有哪些項(xiàng)目已被用于細(xì)菌學(xué)分類和鑒定?表型特征形態(tài)學(xué)特征、生理生化特征、血清學(xué)分型、噬菌體分型、細(xì)胞組分（細(xì)胞壁

34、多糖、脂肪酸）分析系統(tǒng)進(jìn)化相關(guān)特征16SrRNA序列分析，G+Cmol%分析，DNA-DNA分子雜交，DNA指紋圖譜思考題1為什么在從事微生物的工作中不僅要注意種名還要注意菌株名稱？答:同種不同菌株雖然它們主要的鑒別特征相同，但其他非鑒別特征，如某些生化性狀（產(chǎn)生某些酶、抗生素、有機(jī)酸的種類和產(chǎn)量等等）不同，是否具有某種質(zhì)粒等等，而這些性狀或許正是我們所需要的。有一個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)物要求鑒定，你如何將其鑒定到種？（擬定實(shí)驗(yàn)方案）答:大致步驟是:（1）檢查是否是純培養(yǎng)，若不純則需純化:（2）測(cè)定一些最基本的形態(tài)和生理生化特征，確定菌株屬于哪一大類:（3）查閱有關(guān)類群的分類檢索表或相關(guān)資料，根據(jù)資料提示的鑒別特征進(jìn)行特征測(cè)定;（4）根據(jù)特征測(cè)定結(jié)果，逐步縮小菌株歸屬范圍，確定其所屬的科屬:（5）根據(jù)有關(guān)屬的分種檢索表或相關(guān)資料進(jìn)步進(jìn)行特征測(cè)定，初步確定其所歸屬的種一、免疫思考題病原微生物是怎樣侵害機(jī)體的?為什么說感染不是疾病的同義詞?不同的病原體侵人機(jī)體的途徑不同。主要門徑有：消化道、呼吸道、皮膚創(chuàng)口、泌尿生殖道、其他途徑（垂直傳播途徑）。感染：指外源或內(nèi)源性病原體突破其宿主的三道免疫“防線”（指機(jī)械防御、非特異性免疫和特異性性免疫）后，在宿主的特定部位定植、生長(zhǎng)繁殖或（和）產(chǎn)生酶及毒素，從而引起一系列病理生理的過程。感染不是疾病的同義詞，大多數(shù)的