食用菌生產(chǎn)技術(shù)項(xiàng)目1-食用菌生產(chǎn)概述課件

1、食用菌生產(chǎn)技術(shù)項(xiàng)目1 食用菌生產(chǎn)概述項(xiàng)目1 食用菌生產(chǎn)概述任務(wù)1 食用菌的種類任務(wù)2 食用菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)任務(wù)3 食用菌的生活史任務(wù)4 食用菌的營養(yǎng)任務(wù)5 食用菌對環(huán)境條件的要求任務(wù)6 食用菌的育種技術(shù)任務(wù)1 食用菌的種類了解食用菌種類是認(rèn)識、研究食用菌的基礎(chǔ)，同時也是進(jìn)行野生食用菌采集、馴化、鑒定、雜交育種等工作的前提。食用菌的分類系統(tǒng)主要是以其形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理生化、遺傳特性等為依據(jù)建立的，其中以子實(shí)體形態(tài)結(jié)構(gòu)及孢子顯微結(jié)構(gòu)為最主要依據(jù)。一、食用菌的分類地位注：食用菌指真菌界中可供人食用的肉質(zhì)、膠質(zhì)或膜質(zhì)的大型真菌，它僅為一種命名方式，而非分類學(xué)中的分類單位。擔(dān)子菌亞門有隔擔(dān)子菌亞綱無隔擔(dān)子菌亞綱

2、銀耳目木耳目層菌綱腹菌綱非褶菌目傘 菌目猴頭菌科：如猴頭菌多孔菌科：如茯苓、豬苓牛肝菌科：美味牛肝菌口蘑科蘑菇科：如雙孢蘑菇 光柄菇科：如草菇鬼筆目：如竹蓀馬勃目香菇、平菇口蘑、金針菇2擔(dān)子菌中的食用菌耳類桂花耳毛木耳馬勃竹蓀短裙長裙黃裙子囊菌麥角菌目、麥角菌科 冬蟲夏草盤菌目馬鞍菌科馬鞍菌屬 馬鞍菌鹿花菌屬 鹿花菌羊肚菌科、羊肚菌屬羊肚菌1、子囊菌亞門種類少，經(jīng)濟(jì)價值高，多為野生菌。 特點(diǎn)冬蟲夏草馬鞍菌鹿花菌羊肚菌4食用菌分類檢索表教師挑選一種非常見食用菌圖片，同學(xué)們根據(jù)圖片所示食用菌特點(diǎn)，對照檢索表找出該食用菌。任務(wù)2 食用菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)自然界的食用菌看起來千差萬別，顏色不一，但基本結(jié)構(gòu)大致

3、相同，如同植物，雖樣子顏色千差萬別，但都少不了根、莖、葉、花、果實(shí)、種子幾個部分。成熟的食用菌主要由菌絲體、子實(shí)體、孢子三部分組成1 菌絲體孢子是食用菌的繁殖單位。在適宜條件下，孢子萌發(fā)形成管狀細(xì)胞，它們聚集形成絲狀體，每根絲狀體叫菌絲。菌絲大都無色透明，有分枝，直徑約613m。菌絲由頂端生長，在基質(zhì)中蔓延伸展，許多分枝的菌絲交織在一起形成菌絲體。它的功能是分解基質(zhì)、吸收營養(yǎng)和水分，供食用菌生長發(fā)育需要，因此它是食用菌的營養(yǎng)器官，相當(dāng)于高等植物的根莖葉。1.1 菌絲的分類按照有無隔膜有隔菌絲、無隔菌絲；核個數(shù)單核菌絲、雙核菌絲；生長位置基內(nèi)菌絲、氣生菌絲；菌絲發(fā)育的順序、細(xì)胞中細(xì)胞核的數(shù)目等初

4、生菌絲、次生菌絲、三生菌絲。1.2 菌絲體的形態(tài)（1）初生菌絲 由孢子直接萌發(fā)而形成的菌絲。孢子萌發(fā)后，初期形成的菌絲無隔膜，細(xì)胞核多數(shù)，即多核的單細(xì)胞菌絲；隨后產(chǎn)生隔膜，將菌絲分成許多個細(xì)胞，每細(xì)胞內(nèi)僅含一個細(xì)胞核，故又稱為單核菌絲或一次菌絲。絕大多數(shù)的食用菌孢子萌發(fā)都形成單核菌絲。初生菌絲一般都不會形成子實(shí)體，只有和另一條可親和的單核菌絲質(zhì)配之后變成雙核菌絲，才會產(chǎn)生子實(shí)體。初生菌絲質(zhì)配形成雙核菌絲（2）次生菌絲 由兩條初生菌絲結(jié)合，經(jīng)過質(zhì)配而形成的菌絲稱為次生菌絲，又稱為二次菌絲。 在形成次生菌絲的過程中，兩個初生菌絲細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)融合，而細(xì)胞核并未發(fā)生融合，因此次生菌絲每個細(xì)胞中含兩個細(xì)

5、胞核，因此又稱為雙核菌絲。次生菌絲是食用菌菌絲存在的主要形式，也只有雙核菌絲才能形成子實(shí)體，在食用菌生產(chǎn)中使用的菌種基本都是雙核菌絲。*鎖狀聯(lián)合 大部分食用菌的雙核菌絲頂端細(xì)胞上常發(fā)生鎖狀聯(lián)合，它是一種形狀類似鎖臂的菌絲連接，擔(dān)子菌中許多種類的雙核菌絲都是靠鎖狀聯(lián)合進(jìn)行細(xì)胞分裂，不斷增加細(xì)胞數(shù)目。鎖狀聯(lián)合，主要存在于擔(dān)子菌中，如香菇、平菇、木耳等，但也有例外，如草菇、雙孢蘑菇等。極少數(shù)的子囊菌其菌絲也形成鎖狀聯(lián)合，如地下真菌中的塊菌。鎖狀聯(lián)合的形成過程（3）三生菌絲 次生菌絲在不良條件下或到達(dá)生理成熟時，就緊密扭結(jié)、分化成特殊菌絲組織體，這種次生菌絲進(jìn)一步發(fā)育而成的已組織化的雙核菌絲，稱為三生

6、菌絲或三次菌絲，如菌核、菌索、子實(shí)體中的菌絲。1.3 菌絲的組織體（1）菌核 菌核是由雙核菌絲發(fā)育而成的一種質(zhì)地堅(jiān)硬、顏色較深、大小不等的團(tuán)塊狀或顆粒狀的組織。菌核對干燥、高溫或低溫均有較強(qiáng)的抵抗能力，如茯苓菌核。（2）菌索 菌索是雙核菌絲交織成繩索狀的組織束，外形似根，內(nèi)有髓部能疏導(dǎo)水分和養(yǎng)分，常分叉或角質(zhì)化，對不良環(huán)境抵抗性強(qiáng)。如蜜環(huán)菌菌索。（3）子座 子座是由菌絲組織構(gòu)成的可容納子實(shí)體的褥座狀結(jié)構(gòu)。子座是真菌從營養(yǎng)生長階段到生殖生長階段的一種過渡形式。如冬蟲夏草子座。（4）菌絲束 菌絲束是由大量平行的雙核菌絲緊密排列形成的束狀組織，常為子實(shí)體原基的前身。菌絲束與菌索相似，都有疏導(dǎo)功能，不

7、同之處在于它沒有頂端分生組織。（5）菌膜 有的食用菌菌絲緊密交織成一層薄膜即稱為菌膜，如香菇栽培過程中形成的褐色被膜。 2 子實(shí)體 產(chǎn)生有性孢子的肉質(zhì)或膠質(zhì)的大型菌絲組織體稱為子實(shí)體，是食用菌的繁殖器官。 食用菌的子實(shí)體常生長于基質(zhì)表面，是人們通常稱之為“菇、蘑、耳”的那一部分。子囊菌的子實(shí)體能產(chǎn)生子囊孢子，是子囊菌的果實(shí)，故又稱之為子囊果。擔(dān)子菌的子實(shí)體能產(chǎn)生擔(dān)孢子，故又稱之為擔(dān)子果，目前人們食用的多為擔(dān)子果，因此以下以擔(dān)子果子實(shí)體為例對子實(shí)體進(jìn)行講解。 擔(dān)子菌的子實(shí)體像一把小雨傘，一般由菌蓋、菌柄、菌褶或菌管、菌環(huán)和菌托組成*菌蓋 菌蓋又叫菌帽。菌蓋是食用的主要部分，也是食用菌的主要繁殖器

8、官 (1)菌蓋的形狀 食用菌的菌蓋形態(tài)多種多樣，但大部分食用菌的菌蓋呈傘狀，即使是傘形的菌蓋，其形狀也不完全相同有圓形、半圓形圓錐形，卵圓形，鐘形、半球形和斗笠形等。其菌蓋的中央部形狀心不相同，有平展、凸起，突尖或下凹等。 1、圓形 2、半圓形3、圓錐形4、卵圓形5、鐘形6、半球形7、斗笠形8、匙形9、扇形10、漏斗形11、喇叭形12、淺漏斗形13、圓筒形菌蓋的中部特征 1、平頂，2、凸起，3、突尖，4、臍狀，5、下凹菌蓋的表面特征 菌蓋表面大多是光滑的，有的干燥、有的濕潤粘滑、有的有皺紋、條紋或龜裂等，還有的表面粗糙具有纖毛，絨毛、鱗片等。 1、光滑無毛；9、角錐狀鱗片；2、皺紋；3、具纖毛

9、；4、條紋；5、具絨毛；6、龜裂；7、被粉末；8、叢毛狀鱗片10、塊狀鱗片；11、具顆粒狀結(jié)晶；12、具小疣菌蓋的顏色 菌蓋的頗色也是多種多樣的，不同的食用菌其菌蓋顏色也不同。 雙孢蘑菇為白色，草菇為灰色，滑菇為褐色，金針菇為黃褐色，金頂側(cè)耳為鮮黃色，粘乳菇的菌蓋為綠色。即使同一種菌蓋的不同部位顏色也不同，一般菌蓋中央的顏色比邊緣深。 另外不同發(fā)育時期和環(huán)境條件，也影響菌蓋的顏色，如平菇幼小時為深灰色，成熱期為淡灰色，金針菇生長在自然界為赭色，在無光線的情況下為黃白色。 *菌肉 菌蓋表皮下面是菌肉。菌肉是菌蓋的實(shí)體部分，也是菇、蕈最有食用價值的部分。絕大多數(shù)食用菌的菌肉為肉質(zhì)，易腐爛。少數(shù)為蠟

10、質(zhì)，革質(zhì)和膠質(zhì)等。菌肉的顏色絕大部分是白色，受傷后不變色，但也有些食用菌的菌肉受傷后會變色。 菌肉的構(gòu)造分為兩大類：一類菌肉全部由絲狀的菌絲體組成，稱絲狀菌肉。另一類菌肉大部分由泡囊狀細(xì)胞及少數(shù)絲狀菌絲組成。泡囊狀細(xì)胞是菌絲分支膨大而來，常失去再生能力。 1、絲狀菌肉；2、泡囊狀態(tài)菌肉*菌褶和菌管 菌褶生長在菌蓋的下方，由菌柄向菌蓋邊緣呈片狀輻射排列。它由菌髓，子實(shí)下層和子實(shí)層三部分組成。 菌褶與菌柄的著生關(guān)系，通常有下面四種類型： 離生：菌褶不與菌柄連接，因而在菌褶與菌柄之間有距離。 彎生：菌褶與菌柄連接處稍微向上彎。 直生：菌褶直接與菌柄連接，不向下延長，也不向上彎曲。 延生：菌褶沿菌柄延

11、伸。菌褶、菌管結(jié)構(gòu)圖（左：示意圖 右：顯微圖）1.孢子 2.乳管 3.囊狀體 4.菌褶5.擔(dān)子 6.菌髓 7.管孔 8.緣囊體 菌褶與菌柄著生關(guān)系1、直生；2、彎生；3、離生；4、延生*菌柄菌柄的形狀 菌柄又叫菇柄，它是菌蓋的支撐部分。其形狀、長短、粗細(xì)等因種類而不同，有的菌柄較長，有的較短，有的甚至無柄。菌柄的顏色多為白色或近白色，其形狀多為圓柱狀，少數(shù)為棒形或紡錘形，還有的菌柄呈分枝狀，有的基部膨大呈齊頭或圓頭。菌柄中央的組成，不同的食用菌也不同，有中實(shí)型，中空型，中松型。 菌 柄 的 特 征*菌柄的著生情況：A、中央生：菌柄生于菌蓋中央。 如蘑菇、草菇等。 B、側(cè)生：菌柄生于菌蓋的一側(cè)。

12、 如側(cè)耳等。 C、偏生：菌柄生于菌蓋的偏心處。 如香菇等。 多數(shù)食用菌的菌柄為肉質(zhì)，與菌蓋同質(zhì)。少數(shù)食用菌，如毛柄金錢菌，其菌柄下部為革質(zhì)，與菌蓋異質(zhì)。 菌柄在菌蓋上的著生情況有三種： 菌 柄 內(nèi) 部 特 征 有些食用菌的內(nèi)菌幕由柔軟的絲狀物組成，從外觀看來好像蜘蛛網(wǎng)，因此它的內(nèi)菌幕又稱蛛絲式內(nèi)菌幕。*內(nèi)菌幕和菌環(huán) 有些傘菌在幼年時，菌蓋與菌柄間有包膜稱內(nèi)菌幕。子實(shí)體長大后內(nèi)菌幕破裂，部分殘留在菌蓋邊緣，部分殘留在菌柄上。所以，菌環(huán)是由殘留在菌柄上的內(nèi)菌幕發(fā)育來的。 菌環(huán)呈環(huán)狀，膜質(zhì)，有薄有厚，有大有小，有的固定不動，有的能移動，有的位于菌柄的頂部(上位)，有的位于菌柄的中部(中位)，有的位于

13、菌柄的下部(下位)。 內(nèi) 菌 幕 和 菌 環(huán)*外菌幕和菌托 某些傘菌幼年時有包裹在整個菌蕾外面的菌膜，稱外菌幕。 菌蕾長大后，留在菌柄基部的外菌幕就發(fā)育成菌托(或腳苞)。 菌托有環(huán)狀、鞘狀、囊狀、鱗莖狀和裂片狀等多種。 菌托的上緣有開裂、波狀等數(shù)種。此外，不同種的菌托在大小、深度、質(zhì)地、厚薄，色澤和存在時間長短等均有不同，這些都是食用菌分類的重要依據(jù)。菌托形狀1、苞狀2、鞘狀3、鱗莖狀4、環(huán)狀5、瓣?duì)?、裂片狀7、環(huán)鱗狀8、頭狀 子囊菌的子囊孢子和擔(dān)子菌的擔(dān)孢子，都是有性孢子。子囊孢子是在子囊內(nèi)產(chǎn)生的內(nèi)生孢子，擔(dān)孢子則是在擔(dān)子上產(chǎn)生的外生孢子。它們的形成過程比較復(fù)雜。 食用菌的種類不同，其孢子

14、的形狀、大小，表面特征及顏色也不相同。孢子的形狀常見的有球形、卵形、橢圓形、腎形、多角形，檸檬形、紡錘形、星形及棱形等。 孢子的表面也因種不同，有的光滑，有的粗糙，表面有小疣、小瘤、刺棱、縱條紋網(wǎng)紋等 3 孢子1、圓球形；2、卵圓形；3、橢圓形；4、星形；5、紡錘形；6、檸檬形；7、長方形；8、腎形；9、多角形；10、棱形； 孢子印制備方法是取已成熟的新鮮子實(shí)體，剪去菌柄，把菌蓋復(fù)蓋在白色或黑色的臘光紙上，靜置2小時或2小時以上(因種而異)，輕輕取去菌蓋，大量的孢子按菌褶或菌管的排列方式散落在紙上，即成孢子印，白色的孢子印在黑色紙上顯示出來，其它顏色的孢子印在白色紙上也顯示出來，孢子的顏色得到

15、了鑒別 孢子多數(shù)是無色透明的，少數(shù)有顏色，而大量孢子成堆時；能呈現(xiàn)出各自的群體色彩。孢子堆的顏色通常是以孢子印來鑒別的。4 子實(shí)體形態(tài)發(fā)生任務(wù)3 食用菌的生活史所謂生活史，是指生物一生所經(jīng)歷的生長發(fā)育和繁殖階段的全部過程。食用菌的生活史是指從孢子到孢子的整個生長發(fā)育過程，即從孢子在適宜的條件下萌發(fā)形成單核菌絲，具親和性的單核菌絲相互融合形成雙核菌絲，雙核菌絲發(fā)育到生理成熟階段，扭結(jié)生長形成子實(shí)體，子實(shí)體產(chǎn)生新一代孢子的全部過程，如此周而復(fù)始，物種得以延續(xù)。 與其它生物一樣，食用菌的生活史可分為營養(yǎng)生長階段和生殖生長階段。營養(yǎng)生長階段1.1 孢子萌發(fā)為初生菌絲 孢子是食用菌最初的繁殖單位，其生活

16、史也是以孢子為起點(diǎn)。孢子在適宜的條件下可直接萌發(fā)長出芽管，芽管不斷分支伸長形成菌絲體（初生菌絲、單核），并形成隔膜。 在不適宜其萌發(fā)的條件下，孢子可以存活較長時間，待環(huán)境適宜后再萌發(fā)。一般初生菌絲體不產(chǎn)生子實(shí)體，但金針菇的初生菌體絲體能產(chǎn)生子實(shí)體，且這種子實(shí)體小，發(fā)育不完全。1.2初生菌絲融合形成次生菌絲 初生菌絲之間可以融合，融合后即形成次生菌絲。食用菌的交配系統(tǒng)分為同宗結(jié)合和異宗結(jié)合兩大類。 1.2.1同宗結(jié)合 由同一孢子萌發(fā)的菌絲間能通過自體結(jié)合的方式產(chǎn)生有性孢子，這一自交可孕的生殖方式稱為同宗結(jié)合，又叫同宗配合或同宗接合。（1）初級同宗結(jié)合 擔(dān)孢子內(nèi)只含有一個經(jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生的細(xì)胞核，這

17、種擔(dān)孢子萌發(fā)之后形成的單核菌絲能自己進(jìn)行雙核化，并完成全部生活史。代表：草菇（2）次級同宗結(jié)合 每個擔(dān)子只產(chǎn)生2個擔(dān)孢子，每個擔(dān)孢子內(nèi)均含有減數(shù)分裂產(chǎn)生的2個具不同交配類型的核，雙核擔(dān)孢子萌發(fā)后，形成多核的異核菌絲體，這種菌絲體自身可孕，不與其他菌絲交配即可自行完成生活史。代表：雙孢菇1.2.2異宗結(jié)合 異宗結(jié)合是擔(dān)子菌綱有性生殖最普遍的交配類型，約有90%的擔(dān)子菌屬于該種交配類型。 同一擔(dān)孢子萌發(fā)形成的初生菌絲帶有一個自交不親和的細(xì)胞核，不能自行交配，只有2個不同交配類型的擔(dān)孢子萌發(fā)產(chǎn)生的初生菌絲之間交配才能完成有性生活史，這種自交不育的有性生殖方式稱為異宗結(jié)合，又叫異宗配合或異宗接合。 又

18、可以分為二極性異宗結(jié)合和四極性異宗結(jié)合。 簡單地說，可理解為異宗結(jié)合的食用菌其初生菌絲有“雌”“雄”之別（常用“+”“-”表示），同性別的菌絲間是不親和的，必須由不同性別的菌絲接合產(chǎn)生雙核菌絲才具有結(jié)實(shí)性，可產(chǎn)生有性孢子。又稱為單因子異宗結(jié)合。屬于該交配類型的食用菌其親和性由一個具有復(fù)等位基因的A因子所控制，擔(dān)子在進(jìn)行減數(shù)分裂時，一對復(fù)等位基因彼此分離，減數(shù)分裂后形成的孢子成為兩種不同交配類型的擔(dān)孢子（A1和A2），只有A1與A2交配結(jié)合成的雙核菌絲才產(chǎn)生有性孢子，完成生活史又稱為雙因子異宗結(jié)合。屬于該交配類型的食用菌其親和性由兩個具有復(fù)等位基因的、互補(bǔ)連鎖的A、B因子所控制。2對交配因子在減

19、數(shù)分裂時獨(dú)立分離和自由組合，使得每個擔(dān)子上都產(chǎn)生4種不同交配類型的擔(dān)孢子，即A1 B1、A1 B2、A2 B1、A2B2。只有A、B兩個因子均不相同的單核菌絲交配時才能完成有性生活史。1.3次生菌絲分裂生長 次生菌絲每一個細(xì)胞中都含有分別來自兩個親本（初生菌絲）的細(xì)胞核。次生菌絲粗壯、隔膜處有鎖狀聯(lián)合，生長快，可以獨(dú)立的、無限的生長發(fā)育。次生菌絲具有結(jié)實(shí)性，可形成子實(shí)體完成有性生殖。 有些食用菌在次生菌絲生長階段會形成無性孢子，如金針菇的粉孢子、滑菇的分生孢子等，這類無性孢子在適宜的環(huán)境條件下萌發(fā)仍能生成雙核菌絲，并完成其生活史。1.4子實(shí)體的形成 雙核菌絲大量增殖后，在溫度、濕度等環(huán)境條件適

20、宜時，則形成火柴頭狀的扭結(jié)團(tuán)，稱為子實(shí)體原基。之后它逐漸發(fā)育成菌蕾，進(jìn)一步分化出菌蓋、菌柄。菌蓋成熟時，可從了實(shí)體層上散發(fā)出孢子。 成熟的子實(shí)體菌管或菌褶處形成子實(shí)層，子實(shí)層的雙核菌絲先端細(xì)胞發(fā)育成棒狀的擔(dān)子細(xì)胞。擔(dān)子細(xì)胞的形成，標(biāo)志著生殖生長階段的開始。2生殖生長階段2.1擔(dān)子和擔(dān)孢子的形成 典型的擔(dān)子是由次生菌絲頂端的一個細(xì)胞形成的，雙核菌絲頂端的一個細(xì)胞逐漸膨大，兩個細(xì)胞核結(jié)合，經(jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生4個單倍體的核。同時，擔(dān)子頂端產(chǎn)生4個小梗，小梗的頂端膨大形成擔(dān)孢子原基，4個核通過小梗進(jìn)入擔(dān)孢子原基，最后形成單核的擔(dān)孢子。2.2擔(dān)孢子的釋放孢子從產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)上脫下來的過程稱為孢子釋放。擔(dān)孢子發(fā)育成

21、熟后，子實(shí)體打開，進(jìn)行孢子釋放。食用菌孢子有的主動彈射傳播，有的則靠風(fēng)、雨水、昆蟲等傳播，還有少數(shù)靠動物傳播。孢子釋放之后，在適宜環(huán)境條件下萌發(fā)，開始新的生活史。3食用菌生活史中的核相交替 核相交替指生活史中與有性生殖有關(guān)的染色體數(shù)的單倍期和二倍期交替出現(xiàn)的現(xiàn)象。在食用菌的整個生活史中，經(jīng)歷了三個不同的時期。（1）單倍體階段 從減數(shù)分裂開始，經(jīng)過擔(dān)孢子、擔(dān)孢子萌發(fā)形成單核菌絲，直到單核菌絲進(jìn)行質(zhì)配以前的階段。該階段內(nèi)為單倍體，其染色體數(shù)為n。（2）雙核階段 初生菌絲質(zhì)配形成雙核菌絲，雙核菌絲生長、發(fā)育到形成子實(shí)體的整個階段，為雙核階段。在該階段內(nèi)，細(xì)胞內(nèi)具有兩個單倍體的細(xì)胞核，其細(xì)胞染色體數(shù)目

22、為n+n。（3）二倍體階段 子實(shí)體中的擔(dān)子內(nèi)雙核進(jìn)行核配形成二倍體單核，到減數(shù)分裂之前的短暫階段。該階段內(nèi)細(xì)胞內(nèi)染色體為2n。任務(wù)4 食用菌的營養(yǎng)食用菌的營養(yǎng)類型食用菌是異養(yǎng)生物，在適宜的環(huán)境條件下，不斷地吸收營養(yǎng)物質(zhì)，并進(jìn)行新陳代謝活動，支撐其完成生活史。根據(jù)自然狀態(tài)下食用菌營養(yǎng)物質(zhì)的來源，可將食用菌分為腐生、共生和寄生三種不同的營養(yǎng)類型。腐生從動植物尸體上或無生命的有機(jī)物中吸收養(yǎng)料的食用菌稱為腐生菌。這類食用菌能夠分泌各種胞外酶和胞內(nèi)酶，分解已經(jīng)死亡的有機(jī)體，從中吸收養(yǎng)料。腐生包括只營腐生生活的專性腐生和以寄生為主兼營腐生的兼性腐生。根據(jù)腐生性食用菌適宜分解的植物尸體不同和生活環(huán)境的差異，

23、可分為木腐型（木生型）、土生型和糞草生型三個生態(tài)類群。絕大多數(shù)食用菌都營腐生生活。腐生包括只營腐生生活的專性腐生和以寄生為主兼營腐生的兼性腐生。目前能人工栽培的食用菌都是腐生菌。腐生性食用菌 木腐型:土生型:草腐型:主要生活在枯立木、樹樁、倒木、斷樹枝上。如香菇、黑木耳、茶樹菇等。多生活在腐熟堆肥、廄肥、腐爛草堆及有機(jī)廢料上。如草菇多生于爛草堆上。是以土壤中的腐爛樹葉、雜草、朽根為營養(yǎng)源，分布在林地、草原、牧場、肥沃的田野中。如各種野生食用菌。 寄生 生活于寄主體內(nèi)或體表，從活著的寄主細(xì)胞中吸取養(yǎng)分進(jìn)行生長繁殖的食用菌為寄生菌。專性寄生的典型代表是星孢寄生菇（寄主稀褶黑菇）兼性寄生的典型代表是

24、密環(huán)菌兼性腐生的典型代表是冬蟲夏草共生 能與高等植物、昆蟲、原生動物或其他菌類相互依存、互利共生的食用菌稱為共生菌。食用菌與某些植物、動物及真菌之間都存在著共生現(xiàn)象。菌根菌是食用菌與植物共生的典型代表，食用菌的菌絲與植物根系結(jié)合成復(fù)合體菌根。菌根有分為外生菌根和內(nèi)生菌根兩種外生菌根是菌根菌的菌絲不侵入植物根細(xì)胞內(nèi)部，木本植物的菌根多時是外生菌根，如赤松根和松口蘑。菌根菌的菌絲侵入根細(xì)胞內(nèi)部的內(nèi)生菌根：如密環(huán)菌的菌索侵入天麻塊莖中。菌根食用菌到目前還很難進(jìn)行人工培養(yǎng)。鱗柄口蘑橙蓋鵝膏外生菌根菌鞘天麻食用菌與動物構(gòu)成的共生關(guān)系中最典型的是不少熱帶食用菌類與白蟻或螞蟻存在著很密切的共生關(guān)系。如雞樅菌

25、和白蟻在食用菌與微生物的共生關(guān)系中最典型的是銀耳屬。現(xiàn)在已經(jīng)很明確，銀耳與香灰菌、金耳與韌革菌存在一種偏共生關(guān)系。食用菌的營養(yǎng)生理食用菌的生長發(fā)育需要一定的營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)在食用菌的生長發(fā)育中起著十分重要的作用，它是食用菌生命活動的基礎(chǔ)，也是構(gòu)成食用菌細(xì)胞的原料，為食用菌生命活動提供了能源，同時也是栽培食用菌獲得豐產(chǎn)的根本保證。所需營養(yǎng)碳源氮源無機(jī)鹽生長因素水分食用菌吸收和利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程稱為營養(yǎng)或營養(yǎng)作用 能夠滿足食用菌完成各種生理活動所需的物質(zhì)稱為 營養(yǎng)物質(zhì)碳源 指凡是可以構(gòu)成細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳架來源的營養(yǎng)物質(zhì)均稱為碳源。作用構(gòu)成細(xì)胞結(jié)構(gòu)物質(zhì)提供生命活動所需的能量來源簡單：單糖、雙糖等

26、吸收利用復(fù)雜：纖維素、木質(zhì)素等胞外酶水解后吸收利用常用主要：植物性下腳料輔助：白糖誘導(dǎo) 孢外酶產(chǎn)生促進(jìn)菌絲生長玉米芯碳素來源栽培種生產(chǎn)-植物殘體：稻草、木屑、廢棉等 原種、母種-蔗糖、葡萄糖、麩皮、米糠無機(jī)碳源：包括二氧化碳和碳酸鹽；食用菌一般不能利用 碳源是食用菌最重要的，也是需求量最大的營養(yǎng)源； 葡萄糖是利用最廣泛的碳源；但是葡萄糖濃度過高，亦會抑制菌絲生長，一般使用濃度為0.55%。氮源 凡用于構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)或代謝產(chǎn)物中氮素來源的營養(yǎng)物質(zhì)，均稱為氮源。作用構(gòu)成核酸、蛋白質(zhì)的要素來源 有機(jī)氮（主要）無機(jī)氮（NH4+、NO3-)尿 素胞外酶吸收利用輔助氮源牛糞效果只有無機(jī)氮，易生長慢、不結(jié)菇無

27、機(jī)氮源多，降低食用菌品質(zhì)銨態(tài)氮比硝態(tài)氮效果好！C/N適宜菌絲生長期：2025：1子實(shí)體生長期：3040：1太?。壕z易徒長，不易結(jié)菇太大：生長慢，產(chǎn)量低營養(yǎng)基質(zhì)中的碳、氮濃度要有適當(dāng)比值，稱為碳氮比（C/N）。尿素經(jīng)高溫處理后易分解，釋放出氨和氫氰酸有害與菌絲生長，所以其用量應(yīng)控制在0.1%0.2%； 菌絲沒有充分利用無機(jī)氮合成細(xì)胞所需的全部氨基酸的能力，所以不能一無機(jī)氮為唯一氮源； 在菌絲體生長階段對氮的需求量偏高，培養(yǎng)基中的含氮量以0.016%0.064%為宜，在子實(shí)體發(fā)育階段，培養(yǎng)基的適宜含氮量在0.016%0.032%之間。礦質(zhì)元素作用參與細(xì)胞組成酶的組成部分或激活劑調(diào)節(jié)細(xì)胞透性培養(yǎng)基

28、pH、滲透壓等大量元素：P、S、Ca、Mg、K等微量元素：Cu、Zn、Mn、B、Co等分為生產(chǎn)中只補(bǔ)充少量的大量元素微量元素一般不特殊添加石膏粉草木灰過磷酸鈣熟石灰等如維生素和生長因子 種類氨基酸堿基、核苷酸維生素 （B族）生長素類作用酶的組成部分或活性基團(tuán)調(diào)節(jié)代謝和促進(jìn)生長來源 牛肉膏 酵母膏麩皮 土豆汁 米糠 玉米漿 水分結(jié)合水：參與細(xì)胞組成自由水基本溶劑代謝介質(zhì)調(diào)節(jié)胞溫維持膨壓鮮重90%左右在細(xì)胞中 對營養(yǎng)物質(zhì)的需求規(guī)律任務(wù)5 食用菌對環(huán)境條件的要求食用菌的生活習(xí)性與環(huán)境之間的關(guān)系的科學(xué)，是食用菌學(xué)的一個重要分支。食用菌的生長與其所生存的環(huán)境有著密切的聯(lián)系。有人曾指出，有25種因素不同程

29、度地影響著食用菌的生長發(fā)育，但其中最主要的是溫度、水分、濕度、空氣、光照和酸堿度等因子。適宜的環(huán)境條件是食用菌旺盛生長的保證，不同食用菌、同種食用菌的不同生長階段對外界環(huán)境的需求都有不同。因此，學(xué)習(xí)掌握影響食用菌生長發(fā)育的環(huán)境因素對食用菌栽培意義重大。溫度 溫度是影響食用菌生長發(fā)育的重要環(huán)境因素之一，不同的食用菌因其野生環(huán)境不同而有其不同的溫度適應(yīng)范圍，并都有其最適生長溫度、最低生長溫度和最高生長溫度。除此之外，不同生長階段對溫度也有著不同的需求。92孢子萌發(fā)對溫度的要求 各種食用菌的孢子均在一定溫度條件下才能萌發(fā)。多數(shù)食用菌擔(dān)孢子萌發(fā)的適溫為2030，在適溫范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，孢子的萌發(fā)

30、率也升高，而一旦超出適溫范圍，萌發(fā)率則下降。低溫狀態(tài)下，孢子一般呈休眠狀態(tài)，而極端高溫下，孢子則會死亡。最適溫度：香菇2427、草菇36、平菇27 、木耳和茯苓30、銀耳27、猴頭菌、金針菇、大肥菇、雙孢蘑菇、松口蘑24。 在實(shí)際生產(chǎn)實(shí)踐中，為了培育健壯的菌絲體，常常要求比菌絲體生長的最適溫度（生理最適溫度）略低 23 。94菌絲體生長對溫度的要求低溫 食用菌菌絲能耐低溫。大多數(shù)食用菌的菌絲體如果有10甘油等防凍劑的保護(hù)，在液氮中超低溫保藏?cái)?shù)年仍能存活。但草菇菌絲抗寒能力極差，在5條件下很快死亡，草菇菌種不能在冰箱內(nèi)保藏。95高溫食用菌耐高溫能力弱香菇等食用菌栽培時，菇木不可曝曬。平菇菌絲體在

31、40時均死亡。其它食用菌的致死溫度也在40左右但草菇例外，在40下仍能生長良好。96子實(shí)體分化與發(fā)育對溫度的要求一般而言，子實(shí)體分化和發(fā)育的適溫范圍都比較窄，其最適溫度比菌絲體生長所需的最適溫度低。如香菇菌絲生長最適溫度為25左右，而子實(shí)體分化的最適溫度則在15左右，21停止分化。子實(shí)體發(fā)育的溫度略高于子實(shí)體分化的溫度。根據(jù)子實(shí)體形成所需要的最適溫度，可將食用菌劃分為三種溫度類型：低溫型、中溫型、高溫型。97食用菌的溫度類型低溫型子實(shí)體分化最高溫度在24以下，最適溫度為20以下。如香菇、金針菇、雙孢蘑菇、平菇、羊肚菌及猴頭菌等，這類菌通常在冬季或秋末、初春發(fā)生。平菇類型多：低溫型子實(shí)體在5-2

32、0環(huán)境下形成，中溫型15-24 ，高溫型15-35 。98中溫型 子實(shí)體分化最高溫度在28以下，最適溫度為2224。如木耳、銀耳及各種牛肝菌等，它們多在春、秋季發(fā)生。高溫型 子實(shí)體分化最高溫度在30以上，最適溫度在24以上。如草菇等。它們多在盛夏發(fā)生。99根據(jù)食用菌子實(shí)體分化時對溫度變化的反應(yīng)不同，又可把食用菌分為兩種類型：恒溫結(jié)實(shí)型與變溫結(jié)實(shí)型。有些種類的食用菌在子實(shí)體分化時，不僅要求較低的溫度，而且要求有一定的溫差刺激才能形成子實(shí)體，通常把這種類型的食用菌稱為變溫結(jié)實(shí)型食用菌，如香菇、平菇、杏鮑菇等。有些種類的食用菌子實(shí)體分化不需要溫差，保持一定的恒溫就能形成子實(shí)體，該類食用菌則稱為恒溫結(jié)

33、實(shí)型食用菌，如雙孢蘑菇、草菇、金針菇、黑木耳、銀耳、猴頭、靈芝等?？諝庹Ｇ闆r下，空氣中氧氣含量為21%，二氧化碳含量為0.03%。一般而言，食用菌都是好氧性的，不同種類的食用菌和同種食用菌在不同生長階段，對氧氣需求及二氧化碳的耐受能力皆不同。食用菌菌絲體耐缺氧耐高二氧化碳的能力較強(qiáng)，在通氣良好的培養(yǎng)料中均能良好生長。而空氣對食用菌子實(shí)體的影響較大。101在適宜的CO2含量下，菌蓋的直徑隨著CO2含量增大而變小，抑制開傘，但同時促進(jìn)了菌柄的伸長。人們利用這種特性，獲得柄長蓋小、不易開傘、顏色淡的優(yōu)質(zhì)金針菇。為了提高金針菇的商品價值，在菇蕾形成后，將CO2體積分?jǐn)?shù)增至1，產(chǎn)量提高。但如果CO2體

34、積分?jǐn)?shù)達(dá)3時，則會抑制子實(shí)體的形成。 102靈芝子實(shí)體在 CO2體積分?jǐn)?shù)為 0.1的環(huán)境中發(fā)育時，一般不形成菌蓋，只是菌柄幾度分化，呈鹿角狀 。草菇在菇蕾形成時， CO2含量達(dá)最高峰。如 CO2過量積聚，會使菇體停止生長。這時應(yīng)加大通風(fēng)換氣量，但通風(fēng)換氣也不可過急，以免使菇舍內(nèi)溫度、濕度變化過快，不利于菌體發(fā)育。103在子實(shí)體發(fā)育期比菌絲生長期更需要水分。在播種時培養(yǎng)料的最適合水量65左右 。菌絲生長階段要求空氣濕度65左右。子實(shí)體分化階段90左右?？赏ㄟ^噴水來保證空氣濕度。 104水分 菇房的空氣相對濕度低于 60時，平菇等子實(shí)體的生長就會停止；當(dāng)空氣相對濕度降至4045時，子實(shí)體不再分化，

35、即使已分化的幼菇也會干枯死亡。 菇房的相對濕度也不宜超過96，易使病菌生長，不利于菇體蒸騰作用，菇體發(fā)育也就不好。 105食用菌子實(shí)體生長發(fā)育雖然都喜歡潮濕環(huán)境，但根據(jù)濕度的需求量，可以將食用菌分為喜濕性食用菌和厭濕性食用菌兩大類。喜濕性食用菌：對濕度有較高的適應(yīng)性，濕度高子實(shí)體也能發(fā)育良好，如銀耳、平菇、草菇、黑木耳等；厭濕性食用菌：當(dāng)濕度過大時，其子實(shí)體發(fā)育不良，如金針菇、香菇、雙孢蘑菇等。 喜濕性菌類對高濕有較強(qiáng)的適應(yīng)性，厭濕性菌類對高濕環(huán)境耐受力差。106酸堿度不同食用菌要求的最適 pH值是不同的。木耳菌絲體生長的最適pH值55.4，香菇45.4，金針菇5.46，猴頭菌4，雙孢蘑菇6.

36、87，平菇55.3，銀耳56，草菇7.5。草菇喜堿性環(huán)境，草菇孢子發(fā)芽和菌絲體生長的最適pH在7.5左右，在pH值為8的草堆中，其子實(shí)體仍能發(fā)育良好。 107上面所提到的最適pH值并不是配制培養(yǎng)基的酸堿度。因?yàn)榕囵B(yǎng)基在滅菌后pH值要下降；同時，食用菌培養(yǎng)過程中，由新陳代謝產(chǎn)生的有機(jī)酸如醋酸、琥珀酸、草酸等的積累，也會使pH值降低。在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)將pH值適當(dāng)調(diào)高，以使菌絲生長處于最適pH值。如平菇菌絲生長最適pH值為55.3，但在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)調(diào)節(jié)PH值為6.57.5。注意108為了穩(wěn)定培養(yǎng)基的pH值，在配制培養(yǎng)基時，常添加適量的磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀等緩沖物質(zhì)。若食用菌在生長過程中產(chǎn)酸過

37、多，則可添加少許中和劑碳酸鈣，使培養(yǎng)基不至于因pH值下降過多而影響食用菌的生長。109光照菌絲體的生長對光的要求大多數(shù)食用菌菌絲體生長不需要光線。光線對某些食用菌菌絲體生長具有抑制作用，如猴頭菌、靈芝、金針菇、香菇等。應(yīng)對培養(yǎng)對象進(jìn)行包扎或遮蓋，以防止強(qiáng)光照對菌絲產(chǎn)生的不良影響。 110子實(shí)體分化與發(fā)育對光照的要求一般的食用菌在子實(shí)體分化和發(fā)育階段都需要一定量的散射光。如香菇、草菇等在完全黑暗環(huán)境下不形成子實(shí)體；金針菇、靈芝、平菇等在無光條件下雖可形成子實(shí)體，但菇體畸形、長柄，不長蓋，不產(chǎn)孢子。金針菇菌絲長滿容器的 34時開始光照，最適光照度624850lx，每日光照1114h，可促進(jìn)菌絲生長

38、迅速地轉(zhuǎn)入子實(shí)體生長發(fā)育階段。111食用菌與微生物的關(guān)系 對食用菌有益的微生物* 有些食用菌需與其它微生物伴生* 其它微生物可為食用菌提供營養(yǎng)物質(zhì)* 有些微生物能促進(jìn)食用菌子實(shí)體的形成112生物對食用菌有害的微生物對食用菌有害的微生物主要與食用菌爭奪養(yǎng)料，污染菌種和培養(yǎng)料，引起子實(shí)體腐爛，造成食用菌的病害等。主要有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、絲狀真菌及病毒等。絲狀真菌: 曲霉、青霉、根霉、木霉、毛霉等，常污染菌種和培養(yǎng)料。 113食用菌與植物的關(guān)系植物對于食用菌提供養(yǎng)料氧氣遮蔭環(huán)境形成菌根食用菌對于植物提供C02分解轉(zhuǎn)化復(fù)雜有機(jī)物形成菌根益害腐解木料致樹木病害115對食用菌有害的動物昆蟲吞噬菌絲體或

39、咬食子實(shí)體，傳染病害。危害較為嚴(yán)重的主要有蠅蚊類、螨類、跳蟲類、線蟲類、蛞蝓、家鼠等。對食用菌有益的動物有些動物對食用菌亦有益，如白蟻常與雞縱菌形成共生關(guān)系；竹林的孢子靠蠅類傳播；塊菌的子囊果長在地下，只有通過動物的挖掘才能傳播它的孢子。 116食用菌與動物的關(guān)系117動物益害是傳播雜菌的媒介害蟲咬食培養(yǎng)料及食用菌是食用菌孢子傳播的媒介白蟻和雞樅菌共生雞 樅 菌白蟻巢任務(wù)6 食用菌的育種技術(shù)食用菌栽培是一系列復(fù)雜操作的工作程序，包括種菇選擇、母種選育與保存、菌種制備、出菇管理及市場銷售等，每個程序都有至關(guān)重要的細(xì)節(jié)操作。但育種是這些工作中首要的一項(xiàng)工作，沒有優(yōu)良的菌種，不管其他工作程序準(zhǔn)備及管

40、理得多么好，都會造成減產(chǎn)或失敗。育種的首選目標(biāo)1、高產(chǎn)2、優(yōu)質(zhì)3、抗逆性強(qiáng)4、具有廣泛的適應(yīng)性5、特殊的育種目標(biāo)引種與選擇育種（一）引種引種應(yīng)遵照以下原則和程序進(jìn)行：了解供種單位了解品種了解擬引進(jìn)品種的生物學(xué)特性和栽培要點(diǎn)先試種再擴(kuò)大品種配套（二）選擇育種 選擇育種是最古老、最簡便、應(yīng)用最廣的選種方法。它是先分離和收集各地的有關(guān)菌株，然后通過生產(chǎn)試驗(yàn)比較各菌株的生產(chǎn)性能，選留最優(yōu)者。不斷淘汰劣等菌株，選留優(yōu)秀菌株，就能使生產(chǎn)豐收，質(zhì)量穩(wěn)定。1、資源的收集與采集 不同菌株采集地點(diǎn)的地理?xiàng)l件應(yīng)有明顯的差別，采集野生標(biāo)本時，還應(yīng)注意兩個采集點(diǎn)之間盡量遠(yuǎn)一些，同時采集不同地形、坡度、坡向的野生標(biāo)本。2

41、、純種分離3、生理性狀測定 菌株擷頏性試驗(yàn)同工酶譜和酶活性測定 菌絲生長速度測定4、品比試驗(yàn) 通過各種途徑獲得的菌株，與本地主要品種在同樣條件下栽培，進(jìn)行出菇試驗(yàn)，選出綜合性狀比較好的優(yōu)良菌株。試驗(yàn)按照生物統(tǒng)計(jì)學(xué)的原理進(jìn)行設(shè)計(jì)，各菌株產(chǎn)量要單收單計(jì)，同時對每個菌株的菇形、色澤、干鮮比等做詳細(xì)觀察和記錄。5、擴(kuò)大栽培試驗(yàn) 上述的品種評比結(jié)果僅是個階段性的成果，還應(yīng)和當(dāng)?shù)氐漠?dāng)家菌株同時進(jìn)行栽培，證實(shí)它是更優(yōu)良的菌株。6、示范推廣試驗(yàn) 經(jīng)擴(kuò)大試驗(yàn)后，將選出的優(yōu)良品種放到有代表性的試驗(yàn)點(diǎn)進(jìn)行示范性生產(chǎn)，待試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步確定之后，再由點(diǎn)到面推廣。雜交育種 雜交育種是培育菌種的有效手段。雜交是通過2個或幾

42、個親株的染色體片段的交換或重行組合而獲得新性狀的。進(jìn)行雜交時，親代必需有標(biāo)記。通過雜交親代的選擇，就能得到融合親代優(yōu)點(diǎn)而除去親代缺點(diǎn)的優(yōu)良菌種,使生產(chǎn)水平大幅度地提高。 雜種優(yōu)勢：食用菌通過有性雜交，進(jìn)行基因的重新組合后，在雜交菌株中可能出現(xiàn)在生長速度、生活力、繁殖力、抗逆性以及產(chǎn)量和品質(zhì)上的明顯改進(jìn)，這種現(xiàn)象叫雜種優(yōu)勢。按其性狀大致可以分為三類:雜種營養(yǎng)體發(fā)育比較旺的營養(yǎng)型雜種生殖器官比較旺的生殖型對外界不良環(huán)境條件適應(yīng)能力較強(qiáng)的適應(yīng)型 1.親本的選擇雙親本都要有突出的優(yōu)點(diǎn) 親本之間要有較大的遺傳差異 雜交親本應(yīng)具有較好的配合力雜交育種的基本程序雜交育種的一般程序?yàn)椋哼x擇親本 單孢分離 單核

43、菌株標(biāo)記 雜交配對 轉(zhuǎn)管繁殖 雜合子的檢驗(yàn) 品比試驗(yàn) 示范推廣2.單孢分離 玻片稀釋分離法平板稀釋分離法顯微操作器分離法3.單核菌株的標(biāo)記 營養(yǎng)缺陷標(biāo)記 同工酶標(biāo)記 DNA分子標(biāo)記單單雜交 在培養(yǎng)皿的平板培養(yǎng)基上接入兩個雜交親本的距離為2.5-3cm,適溫培養(yǎng)后，當(dāng)兩單孢菌絲接觸后，如出現(xiàn)雙核菌絲，即可挑取少量雙核菌絲至斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)。4. 雜交單雙雜交 以香菇為例，在平板培養(yǎng)基上接種一小塊單核菌絲體，25培養(yǎng)10天后，在單核菌落邊緣1cm處接種一小塊雙核菌絲體，繼續(xù)培養(yǎng)，當(dāng)單雙核菌落交接時，挑取小塊菌落鏡檢，如發(fā)現(xiàn)雙核化，即可挑取少量菌絲至斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)。（單核菌絲與雙核菌絲其中的一個核

44、融合）四極性的異宗結(jié)合的食用菌，由于自交不育，經(jīng)配對后，凡出現(xiàn)雙核菌絲的組合，并能正常結(jié)實(shí)者，即證明雜交成功。次級同宗結(jié)合食用菌（如雙孢蘑菇），首先經(jīng)過單孢子分離、培養(yǎng)，獲取不孕菌絲。隨后進(jìn)行不孕性菌絲間的配對。6.雜合子的檢驗(yàn) 根據(jù)不同單核菌絲標(biāo)記類型采取不同方法檢驗(yàn)雜合子?，F(xiàn)在認(rèn)為DNA分子標(biāo)記技術(shù)檢驗(yàn)是最為可靠方便的早期診斷雜合子的方法。將可親和的組合移入新的斜面保存?zhèn)溆谩?.轉(zhuǎn)管繁殖7.小面積栽培試驗(yàn)： 將復(fù)篩菌株置于不同地域的栽培區(qū)進(jìn)行栽培，以考察其適應(yīng)性與性狀的穩(wěn)定性，并做相關(guān)的詳細(xì)記錄。8.大面各示范推廣： 逐步擴(kuò)大栽培面積，進(jìn)行示范性的推廣，將種性優(yōu)良、優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的菌株逐漸定為當(dāng)

45、家菌株。9.為確定保留下來的雜交新品種正式定名，并申請有關(guān)部門批準(zhǔn)。原生質(zhì)體融合育種原理：細(xì)胞內(nèi)由原生質(zhì)組成的各種結(jié)構(gòu)統(tǒng)稱為原生質(zhì)體，由原生質(zhì)特化而來，包括細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)（包括各種細(xì)胞器、細(xì)胞骨架系統(tǒng)及胞基質(zhì)）和細(xì)胞核等部分。利用物理、化學(xué)或生物學(xué)方法，可誘導(dǎo)遺傳特性不同的兩個親本原生質(zhì)體融合，經(jīng)染色體交換、重組而達(dá)到雜交的目的，經(jīng)篩選獲得集雙親優(yōu)良性狀于一體的穩(wěn)定融合子。原生質(zhì)體融合技術(shù)的目的，就是要拆除細(xì)胞壁這道天然屏障，進(jìn)行種內(nèi)、種間等遠(yuǎn)緣雜交，達(dá)到較大基因重組的目的。通過原生質(zhì)體融合，可以使遺傳性狀不同的兩個細(xì)胞融合，從而導(dǎo)致兩套基因組之間的接觸、交換而進(jìn)行重組。然后就可以篩選出遺傳性

46、狀變異的后代。 原生質(zhì)體融合育種的特點(diǎn) 重組頻率較高。 由于沒有細(xì)胞壁的障礙，而且在融合時又加入了融合促進(jìn)劑或用電融合儀助融，因此，原生質(zhì)體間的重組頻率高于其他雜交方法。受結(jié)合型的限制較小。 兩親株中任何一株都可起受體與供體的作用，因此有利于不同種屬間的雜交。重組體種類多。 兩個親本的整套基因之間發(fā)生相互接觸，有機(jī)會發(fā)生多次交換，所以可以產(chǎn)生各種各樣的基因組合而得到多種類型的重組體。有助于外源基因的轉(zhuǎn)化。 由于原生質(zhì)體已失去了細(xì)胞壁，因此它較完整的細(xì)胞更易進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化。遺傳物質(zhì)傳遞更為完整。 原生質(zhì)體融合是兩親株的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核進(jìn)行類似合二為一的過程，既有質(zhì)配也有核配，比其他形式對遺傳物質(zhì)的傳

47、遞更為完整。原生質(zhì)體融合育種的一般程序和方法 1、原生質(zhì)體制備 主要步驟包括菌絲培養(yǎng)、酶解、洗滌并純化原生質(zhì)體等。菌絲體的生理狀況、酶和酶解條件以及滲透壓穩(wěn)定劑等都影響原生質(zhì)體的制備。 菌絲體的生理狀況 一般情況下，處于線性生長期前期的菌絲體最適宜制備原生質(zhì)體。液體培養(yǎng)的菌絲體適宜制備原生質(zhì)體，產(chǎn)量和穩(wěn)定性較為理想。酶及酶解條件目前，用于原生質(zhì)體制備的商品化的酶主要有纖維素酶、-葡聚糖酶等多種酶類。其中較重要的有幾丁質(zhì)酶、-1，3-葡聚糖酶等。酶濃度、種類及組合方式等都影響原生質(zhì)體的產(chǎn)量。對于酶的粗制品，一般使用濃度為15-20mg/mL,較純的酶則相應(yīng)降低使用濃度。其他酶解條件如溫度、時間、

48、PH等也影響原生質(zhì)形成。多數(shù)食用菌酶解溫度為28-30，最佳PH為4.5-6.5，酶解時間一般為2-6h，有些科學(xué)家則認(rèn)為控制在1-1.5最佳。滲透壓穩(wěn)定劑 由于原生質(zhì)體對滲透壓非常敏感，滲透壓穩(wěn)定劑對于原生質(zhì)體的制備起著重要作用，常用的滲透壓穩(wěn)定劑有KCl，NaCl等無機(jī)鹽和蔗糖、甘露糖、山梨醇等。不同食用菌的最佳滲透壓穩(wěn)定劑相差很大，滲透壓穩(wěn)定劑的成分對酶的活性也有很大影響。2、原生質(zhì)體融合PEG誘導(dǎo)融合 是目前進(jìn)行原生質(zhì)體融合的主要方法。具體操作步驟如下： 將純化的原生質(zhì)體以0.60.7mol/L甘露糖醇制成濃度為106/mL的懸浮液，將兩親本的原生質(zhì)體按照1:1的比例混合，取1ml混合

49、液與1ml 50%的PEG混勻；在2830下靜置20分鐘后，1000r/min離心5min，小心棄去上清液，沉淀物再生培養(yǎng)洗滌兩次，最后用再生培養(yǎng)基培養(yǎng)。電融合 主要由兩個步驟構(gòu)成：首先是施加低強(qiáng)度非均勻交流電場，使細(xì)胞膜發(fā)生極化形成偶極子，之后向高強(qiáng)度方向運(yùn)動，整個過程叫雙向電泳。然后施加直流脈沖，誘導(dǎo)細(xì)胞的融合。3、原生質(zhì)體再生 是指原生質(zhì)體重新長出細(xì)胞壁，再經(jīng)細(xì)胞分裂回復(fù)到菌絲狀態(tài)的復(fù)雜過程。但由于原生質(zhì)體本身的生理狀況及再生培養(yǎng)條件等一系列內(nèi)外因素，都可能產(chǎn)生大量無核的失去再生能力的亞原生質(zhì)體，有時亞原生質(zhì)體比例甚至高達(dá)50%以上。再生培養(yǎng)基的成分對原生質(zhì)體影響較大，據(jù)報道，改善再生條

50、件，可提高再生頻率。 兩個不同親本的原生質(zhì)體融合后，會形成同源融合子、異源融合子以及大量未經(jīng)融合的親本原生質(zhì)體，如何從這一龐大的混合群體中準(zhǔn)確、迅速選出異源融合子，對融合親本進(jìn)行標(biāo)記是選擇和鑒定異源融合子的必要手段。有營養(yǎng)缺陷標(biāo)記、抗藥性標(biāo)記、熒光染色標(biāo)記、滅活標(biāo)記、同工酶標(biāo)記、RFLP標(biāo)記及RAPD標(biāo)記等方法。4、親本的標(biāo)記5、融合子的鑒定 食用菌原生質(zhì)體的融合子是處于質(zhì)配階段的異核體，它可能結(jié)實(shí)也可能不結(jié)實(shí)。鑒定融合子時最好 用幾種方法互相驗(yàn)證。菌落形態(tài) 食用菌原生質(zhì)體的異源融合子與親本菌株在相同條件下培養(yǎng)，其菌絲粗細(xì)、生長速度、菌落形態(tài)以及色素分泌等均可能與親本不同，可仔細(xì)觀察比較。拮抗

51、反應(yīng) 出菇試驗(yàn) 比較子實(shí)體的形態(tài)、大小、顏色、產(chǎn)量和結(jié)實(shí)時間等特征。四分體分析 若融合子產(chǎn)生擔(dān)孢子，對孢子進(jìn)行遺傳分析是一種非?？煽康姆椒?。融合子形成的子實(shí)體能產(chǎn)生成4種類型的擔(dān)孢子。其中兩種為親本型，另外兩種為重組型。在重組型中，一種為基因互補(bǔ)產(chǎn)生的野生型，另一種為具有雙親標(biāo)記的雙重營養(yǎng)缺陷型或雙重抗藥性菌株。誘變育種 誘變育種是利用物理或化學(xué)因子處理食用菌的細(xì)胞群，促使其細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而引起其遺傳性變異，然后從變異的細(xì)胞中篩選出少數(shù)具有優(yōu)良新性狀變異的菌株。 在學(xué)習(xí)誘變育種之前，首先要熟悉突變相關(guān)概念。（一）基因突變 突變：是指遺傳物質(zhì)發(fā)生了穩(wěn)定的可遺傳的變化。 包

52、括染色體畸變和基因突變兩大類。 基因突變的類型 按突變體表型特征的不同，將突變分為4個類型：形態(tài)突變型 發(fā)生細(xì)胞形態(tài)、菌落形態(tài)或子實(shí)體改變。生化突變型 沒有形態(tài)改變而生化特性發(fā)生改變。致死突變型 由于基因突變而造成個體死亡或生 活力下降的突變型。條件致死突變型 某些條件下成活，而另外條件下致死。按突變所引起的遺傳信息的改變可將突變分為3類： 錯義突變 突變造成一個不同氨基酸的置換。 同義突變 堿基突變后編碼的氨基酸與野生型氨 基酸相同。 無義突變 堿基突變后形成終止密碼子，使蛋白質(zhì)合成提前終止。按遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變，可分：堿基置換、移碼、DNA片段插入和缺失。 堿基置換：是指DNA中核苷酸的一個

53、堿基被另一個堿基所取代。有顛倒和轉(zhuǎn)換兩種。顛倒是一個嘌呤被一個嘧啶或一個嘧啶被一個嘌呤取代，而轉(zhuǎn)換是一個嘌呤被另一個嘌呤或一個嘧啶被另一個嘧啶取代。 A:T T:A A T C:G G:C C G 對角線=轉(zhuǎn)換 縱橫線=顛倒 基因突變的分子基礎(chǔ) 移碼:由于在DNA分子的編碼區(qū)插入或缺失非3的整數(shù)倍個核苷酸而導(dǎo)致的閱讀框架的位移。因?yàn)檫z傳是按3個堿基為一組依次排列而成的，當(dāng)在起始密碼子后加入非3的整數(shù)倍個核苷酸后，整個氨基酸序列就會打亂。 缺失或重復(fù): 大片段的缺失或重復(fù)是基因突變的主要原因之一。 遺傳育種上常用的幾種突變體 營養(yǎng)缺陷突變體 由于代謝障礙而成為必須添加某種物質(zhì)才能生長的突變體。溫度敏感突變體 可在某一溫度下生長而在另一溫度下