血型的鑒定課件(PPT 24頁(yè))

1、檢 驗(yàn) 科血 型 的 鑒 定第1頁(yè)，共24頁(yè)。1ABO血型系統(tǒng)2ABO血型的鑒定3Table of Contents內(nèi) 容 大 綱RH血型系統(tǒng)45RH血型的鑒定常見(jiàn)疑難血型的鑒定血型鑒定在生活中的應(yīng)用6第2頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型系統(tǒng)O型血 O型血是人類最古老的血型 出現(xiàn)于4萬(wàn)-6萬(wàn)年前A型血 A型血產(chǎn)生于農(nóng)耕時(shí)代 出現(xiàn)于1.7萬(wàn)年-2.7萬(wàn)年前B型血 B型血產(chǎn)生于游牧民族 出現(xiàn)于公元前1.7萬(wàn)-1.2萬(wàn)年前AB型血 AB型血 出現(xiàn)不到1000年血型傳說(shuō)第3頁(yè)，共24頁(yè)。不具有AB凝集原同時(shí)具有AB凝集原只有B凝集原只有A凝集原凝集原B型血A型血ABO血型系統(tǒng)抗原O型血AB型血ABO血型系統(tǒng)是

2、根據(jù)紅細(xì)胞表面所含的凝集原不同而命名的。 凝集原：附著在紅細(xì)胞表面的一種抗原。第4頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型系統(tǒng)抗體凝集素(抗體)：存在于血清中，與其同名凝集原會(huì)發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集。人血清中含有兩類凝集素：即抗A和抗B。屬于天然抗體，天然抗體多以IgM型為主，不能通過(guò)胎盤，而免疫性抗體多以IgG型為主，能通過(guò)胎盤。凝集素對(duì)血液中紅細(xì)胞的影響第5頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型系統(tǒng)抗A凝集素抗B凝集素同時(shí)含有抗A和抗B凝集素不含有抗A和抗B凝集素B血型的血清中A血型的血清中AB血型的血清中O血型的血清中第6頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型系統(tǒng)抗原遺傳顯性基因：控制顯性性狀的基因。 隱性基因：控制隱性

3、性狀的基因。 ABO 血型系統(tǒng)的基因位點(diǎn)在第 9 對(duì)染色體上。人的 ABO 血型受控于A、B、O三個(gè)基因。其中A、B為顯性基因，O為隱性基因。第7頁(yè)，共24頁(yè)。AB型ABO血型鑒定抗原遺傳O型B型A型思考：A、B、AB以及O型血的基因型分別是什么? ABBBAAAoBooo遺傳規(guī)律第8頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型的鑒定實(shí)驗(yàn)方法：血凝試驗(yàn)(玻片法、試管法、全自動(dòng)微板法)，微柱凝膠試驗(yàn)，流式細(xì)胞技術(shù)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。第9頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型的鑒定實(shí)驗(yàn)原理：血型抗原與相應(yīng)的抗體在反應(yīng)介質(zhì)中形成免疫復(fù)合物，出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象。第10頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型的鑒定實(shí)驗(yàn)用具：載玻片 膠頭滴管 棉簽

4、酒精 抗A、B標(biāo)準(zhǔn)血清 一次性采血針 第11頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型的鑒定準(zhǔn)備載玻片1取一載玻片，左右兩側(cè)分別標(biāo)記字母AB。采血3采血針輕刺手指尖，輕輕擠壓傷口使血液流出，分別滴在載玻片的兩側(cè)。消毒常規(guī)消毒，用棉簽沾取75%的酒精，對(duì)采血部位進(jìn)行消毒。2滴標(biāo)準(zhǔn)血清在載玻片兩側(cè)相應(yīng)的滴加抗A(藍(lán)色)和抗B(橙色)血清后，用棉簽棍將兩側(cè)血液與血清混勻，注意一定要換不同的棉簽棍。4混勻觀察5混均后，靜置3-5分鐘后，觀察現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)過(guò)程：第12頁(yè)，共24頁(yè)。ABO血型的鑒定實(shí)驗(yàn)結(jié)果：第13頁(yè)，共24頁(yè)。RH血型系統(tǒng)人類血型目前發(fā)現(xiàn)有30多種，除了ABO血型系統(tǒng)外，還有Rh血型系統(tǒng)等。Rh血型系統(tǒng)根據(jù)有

5、無(wú)D抗原分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性。第14頁(yè)，共24頁(yè)。RH血型系統(tǒng)抗原及抗體Rh血型系統(tǒng)抗原Rh血型系統(tǒng)能識(shí)別的抗原共43種，常見(jiàn)的抗原有五種，分別是D、C、 E、c、e。以D抗原的抗原性最強(qiáng)，故常以其存在與否定為Rh陽(yáng)性或陰性，即凡含D抗原者為Rh陽(yáng)性，不含D抗原者為Rh陰性。Rh血型系統(tǒng)抗體天然Rh抗體很少，絕大多數(shù)Rh抗體由輸血或妊娠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的IgG型免疫性抗體。主要Rh血型系統(tǒng)抗體有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五種，其中抗D最為常見(jiàn)。在鹽水介質(zhì)試驗(yàn)系統(tǒng)中可檢測(cè)出某些Rh抗體，表明這些Rh抗體具有IgM的性質(zhì)可能來(lái)自免疫反應(yīng)抗體形成早期。第15頁(yè)，共24頁(yè)。Rh血型的鑒定方法及

6、原理 酶介質(zhì)法 紅細(xì)胞表面的唾液酸帶負(fù)電荷，使用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸，降低紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，減少細(xì)胞間的排斥力，促進(jìn)Rh抗原與相應(yīng)抗體間的結(jié)合從而產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集。 聚凝胺試驗(yàn) 聚凝胺是帶高價(jià)陽(yáng)離子的季銨鹽，溶解后產(chǎn)生的正電荷中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，減少細(xì)胞間的排斥力，有利于紅細(xì)胞凝集。如果是由Rh抗體致敏的紅細(xì)胞產(chǎn)生的凝集，是特異的不可逆凝集。非抗體致敏紅細(xì)胞凝集則是可逆性凝集。 鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn) 采用免疫球蛋白變性劑處理人源IgG類抗D血清，使小分子的IgG抗體分子增大成為具有大分子的“IgM”的性質(zhì)，能在鹽水介質(zhì)中與相應(yīng)紅細(xì)胞發(fā)生凝集，可用于Rh血型的快速鑒定。第16頁(yè)，

7、共24頁(yè)。Rh血型的鑒定方法及原理 抗球蛋白試驗(yàn) 又稱Coombs試驗(yàn)，是檢測(cè)紅細(xì)胞上不完全抗體的經(jīng)典方法。不完全抗體多與其相應(yīng)的紅細(xì)胞結(jié)合，在鹽水介質(zhì)中不出現(xiàn)凝集反應(yīng)，Coombs試驗(yàn)利用抗球蛋白抗體作為第2抗體，通過(guò)連接致敏紅細(xì)胞表面的特異性Rh抗體，使致敏紅細(xì)胞出現(xiàn)特異性凝集。 低離子強(qiáng)度試驗(yàn) 紅細(xì)胞外圍的陰離子是紅細(xì)胞的穩(wěn)定因素之一，降低反應(yīng)介質(zhì)的離子強(qiáng)度可減少細(xì)胞外圍的陰離子，促進(jìn)帶正電荷的IgG型Rh抗體與紅細(xì)胞結(jié)合發(fā)生凝集反應(yīng)，從而增加紅細(xì)胞的凝集強(qiáng)度。第17頁(yè)，共24頁(yè)。常見(jiàn)疑難血型定義：疑難血型是指一種血型難以鑒定或判定的現(xiàn)象。特點(diǎn)：正定型凝集弱于2+或反定型弱于1+（正常凝

8、集3+4+） 正反定性不一致干擾因素：生理因素(年齡、ABO亞型、先天無(wú)抗體、冷凝集素) 臨床治療（大量輸液、近期輸過(guò)異性紅細(xì)胞或血漿） 實(shí)驗(yàn)技術(shù)原因（標(biāo)本混淆、試劑質(zhì)量問(wèn)題、靜脈輸液處采樣）分類：紅細(xì)胞抗原減弱或丟失（ABO亞型、白血病、輸異性血、急性大出血） 紅細(xì)胞額外反應(yīng)（自身抗體、紅細(xì)胞未洗滌、紅細(xì)胞上粘附大量蛋白） 混合凝集（近期輸異性血、造血干細(xì)胞移植） 血型定型減弱或無(wú)反應(yīng)（年齡、先天性ABO抗體缺失）第18頁(yè)，共24頁(yè)。常見(jiàn)疑難血型的鑒定分析思路（三步法）第一步：排除人為因素或在技術(shù)上可能發(fā)生的操作失誤； 重新采集血樣，核對(duì)試劑、器材，規(guī)范地復(fù)檢ABO血型第二步：了解臨床資料，分析可能出現(xiàn)的原因；第三步：排除不可能的原因，歸納不能排除的原因，設(shè)計(jì)驗(yàn)證試驗(yàn)。舉例說(shuō)明紅細(xì)胞抗原減弱或丟失(ABO亞型、正定型ABO抗原減弱)紅細(xì)胞額外反應(yīng)（自身抗體）第19頁(yè)，共24頁(yè)。常見(jiàn)疑難血型的鑒定ABO亞型實(shí)驗(yàn)結(jié)果：正定型與反定型不一致、正定型被檢紅細(xì)胞凝集弱解決方法：加抗-AB、抗-H、抗Bc第20頁(yè)，共24頁(yè)。常見(jiàn)疑難血型的鑒定正定型AB抗原減弱實(shí)驗(yàn)結(jié)果：正定型與反定型不一致、正定型被檢紅細(xì)胞凝集弱、正定型呈mf樣解決方法：加抗-AB第21頁(yè)，共24頁(yè)。常