菊花的組織培養(yǎng)(1)ppt課件

1、 經(jīng)過(guò)初中的學(xué)習(xí)，我們?cè)?jīng)了解到大多綠色開花植物都是靠種子來(lái)繁衍的。那么，有沒(méi)有不用種子來(lái)培育植物的方法呢？ 組織培育營(yíng)養(yǎng)繁衍扦插嫁接壓條 扦插嫁接壓條 愈傷組織胚狀體1958，美國(guó)，斯圖爾德 植物組織培育離體回想知識(shí)二思索這個(gè)實(shí)驗(yàn)闡明了動(dòng)物曾經(jīng)分化的細(xì)胞核具有什么特性？高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核有發(fā)育成完好個(gè)體的潛能多利羊的誕生動(dòng)物細(xì)胞有沒(méi)有這種才干？曾經(jīng)分化的細(xì)胞，依然具有發(fā)育成完好個(gè)體的潛能。即細(xì)胞的全能性思索為什么曾經(jīng)分化的細(xì)胞具有全能性呢？生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是由同一個(gè)受精卵有絲分裂而來(lái)的，所以高度分化的細(xì)胞含有堅(jiān)持物種發(fā)育所需求的全套遺傳信息植物組織培育技術(shù)動(dòng)物的克隆技術(shù)一、植物

2、組織培育的實(shí)際根底課本P32當(dāng)植物細(xì)胞脫離了原來(lái)所在植物體的器官或組織而處于離體形狀時(shí)，在一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件的作用下，就能夠表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完好的植株。植物組織培育原理：植物細(xì)胞的全能性1、培育無(wú)病毒植株2、 大規(guī)模培育愈傷組織提取紫草素，治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化裝品的原料4、基因工程中亦需用到植物組織培育的方法受體細(xì)胞為植物細(xì)胞植物組織培育的運(yùn)用： 3、人工種子處理有些作物種類繁衍才干差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問(wèn)題菊花的組織培育什么叫細(xì)胞分化？愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)？什么叫脫去分化、再分化？如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化？ 閱讀32-33頁(yè)第一段處理以下問(wèn)題二、植物

3、組織培育的根本過(guò)程愈傷組織三、掌握幾個(gè)概念外植體:用于離體培育的植物器官或組織片段.細(xì)胞分化： 植物的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞在形狀、構(gòu)造和生 理功能上都會(huì)出現(xiàn)穩(wěn)定性的差別，構(gòu)成這些差別 的過(guò)程叫做細(xì)胞分化。愈傷組織：離體的植物組織或細(xì)胞，培育一段時(shí)間后，會(huì)通 過(guò)細(xì)胞有絲分裂，構(gòu)成愈傷組織。 愈傷組織的細(xì)胞陳列疏松而無(wú)規(guī)那么，是一種高度液泡化的呈無(wú)定外形狀的薄壁細(xì)胞。脫分化去分化：由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷 組織的過(guò)程，稱為植物細(xì)胞的脫分化或 者叫做去分化。再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)展培育，又可以重新 分化成根或芽等器官，這個(gè)過(guò)程叫做再分化。二、植物組織培育的根本過(guò)程影響植物組織培

4、育的要素1、外植體的影響1不同的植物組織培育的難易程度差別很大，容易進(jìn)展無(wú)性繁衍的植物也容易進(jìn)展組織培育。2)同一種資料，資料的年齡，保管時(shí)間也有影響。幼齡、保管時(shí)間短的資料容易培育勝利。 菊花的組織培育普通選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝，由于這種嫩枝生理形狀良好，易誘導(dǎo)脫分化和再分化。2、營(yíng)養(yǎng)要素的影響：MS培育基主要成分包括： 大量元素N、P、S、K、Ca、Mg等無(wú)機(jī)物 微量元素Fe、Mn、B、Zn、Mo、 Cu、Co、I等有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等討論：他能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2中微生物培育基的配方相比，MS培育基的配

5、方有哪些明顯的不同？P83、84答：微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，同時(shí)可以維持細(xì)胞的浸透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑遭到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。 微生物培育基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培育不同，MS培育基那么需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必需的大量元素和微量元素兩大類。3、激素的影響 在配置好的MS培育基中，經(jīng)常需求添加植物激素，最常用的是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。它們是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵要素。 生長(zhǎng)素的作用：促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)。 細(xì)胞分裂素的作用：促進(jìn)細(xì)胞的分裂、生長(zhǎng)和發(fā)育。1)按照不同的順序運(yùn)用

6、這兩類激素，會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但不利分化先使用細(xì)胞分裂素后使用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂、也分化同時(shí)使用分化頻率高2)當(dāng)同時(shí)運(yùn)用這兩類激素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向 課本P33使用比例實(shí)驗(yàn)結(jié)果生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素利于根的分化，抑制芽的分化生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素利于芽的分化，抑制根的分化生長(zhǎng)素=細(xì)胞分裂素促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)所以植物激素的濃度、運(yùn)用的先后順序以及用量的比例等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。留意:不是一切外植體都需求植物激素，菊花嫩枝的組織培育比較容易，因此不用添加植物激素。4、消毒和滅菌對(duì)植物組織培育的影響 如外植體的消毒、器械的滅菌不

7、徹底會(huì)導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)前功盡棄。5、其它要素的影響 PH 5.8左右 溫度 1822 光照 普通前14d進(jìn)展暗培育，構(gòu)成愈傷組織后進(jìn)展光照，由于葉片中的葉綠素只需在有光照的條件下才干構(gòu)成，普通光照12h/d。植物組織培育過(guò)程:離體組織或細(xì)胞植物體脫分化細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素愈傷組織芽根細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素再分化植物細(xì)胞培育不需求光需求光影響植物組織培育的要素資料的種類、年齡及保管時(shí)間長(zhǎng)短等營(yíng)養(yǎng)植物激素消毒和滅菌PH、溫度、光照等條件五、實(shí)驗(yàn)操作1、植物組織培育的操作流程 制備MS固體培育基 外植體的消毒 接種 培育 移栽 栽培2、各步詳細(xì)操作及本卷須知1MS固體培育基的配制1配制各種母液為什

8、么？無(wú)機(jī)物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍，常溫保管激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物普通可按1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨(dú)配制成母液用母液配制培育基時(shí)，需求根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計(jì)算用量2配制培育基 配制培育液 調(diào)PH 培育基的分裝 分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50ml或100ml，由于菊花的莖段的組織培育比較容易，因此不用添加植物激素3滅菌分裝好的培育基連同其他器械一同進(jìn)展高壓蒸汽滅菌1、選材：菊花莖段，取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝2外植體消毒2、消毒流水沖洗菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷悄然刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右 酒精處置用無(wú)菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入體積分?jǐn)?shù)

9、為70的酒精中搖動(dòng)23次，繼續(xù)67s，立刻將外植體取出，在無(wú)菌水中清洗 消毒液處置取出后用無(wú)菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在無(wú)菌水中至少清洗3次，漂凈消毒液本卷須知： 1.在消毒過(guò)程中，我們既要思索藥劑的消毒效果，又要思索外植體的耐受才干，不同藥劑不同植物資料甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待。 2.外植體滅菌用過(guò)的有毒藥品要妥善處置氯化汞以免引起環(huán)境污染。普通搜集后一致交給有關(guān)專業(yè)部門處置。思索題： 為什么要對(duì)外植體進(jìn)展一系列的消毒？對(duì)外植體的消毒需求留意什么？ 外植體資料的體積小抗性很差，剛?cè)』貋?lái)的外植體帶有很多微生物，假設(shè)不進(jìn)展一系列的消毒，這些微

10、生物就會(huì)與外植體競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)會(huì)產(chǎn)生一些有害物質(zhì)，因此要對(duì)外植體進(jìn)展一系列的消毒。對(duì)外植體的消毒既要思索藥劑的消毒效果，又要思索外植體的耐受才干。3接種污染的主要來(lái)源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。接種前用70的酒精噴霧使空氣消毒， 用70酒精或新潔爾滅擦拭一遍任務(wù)臺(tái)并用紫外線照射20分鐘。任務(wù)臺(tái)消毒后，首先點(diǎn)燃酒精燈。1、接種室消毒2、無(wú)菌操作要求一切操作都要在酒精燈火焰旁完成，每次運(yùn)用器械后，都需求用火焰灼燒滅菌，接種后立刻蓋好瓶蓋。3、資料的切取和接種課本P34頁(yè)4、接種本卷須知每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為70的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，

11、冷卻后再接種外植體在培育基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，普通胡蘿卜34塊，菊的莖或葉68塊，也不要太少，以充分利用培育基中的營(yíng)養(yǎng)成分和光照條件插入時(shí)應(yīng)留意方向，外植體的形狀學(xué)上端朝上，不要倒插。4.培育：1.將接種后的錐形瓶及對(duì)照組放在無(wú)菌培育箱中進(jìn)展培育，并且定期消毒，溫度控制在1822，前14天進(jìn)展暗培育，愈傷組織構(gòu)成后每天光照12h，愈傷組織為乳白色或黃色的瘤狀2.愈傷組織構(gòu)成后，改換培育基進(jìn)展叢芽培育3.再改換培育基進(jìn)展生根培育就能得到完好的植株。思索題：1.為什么愈傷組織構(gòu)成后需求光照？答：愈傷組織構(gòu)成后進(jìn)展叢芽培育,培育中會(huì)構(gòu)成 葉片，而葉片中葉綠素的構(gòu)成需求光

12、照。 2.為什么植物組織培育過(guò)程中需求改換培育基？答：愈傷組織構(gòu)成后培育基中的營(yíng)養(yǎng)也幾乎耗 盡，生根培育和叢芽培育所需的激素的量或 比例也不一樣，因此需求改換培育基。5.移栽： 移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先翻開培育瓶的封口膜，讓試管苗在培育間生長(zhǎng)幾日1、翻開封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移 用流水清洗根部的培育基，將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時(shí)間3、移栽幼苗長(zhǎng)壯后，移栽到土壤中本卷須知：移栽過(guò)程中既要充分清洗根系外表的培育基，又不能傷及根系。6.栽培：將幼苗移栽后每天察看并記錄幼苗生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水，施肥，直至開花。正常苗污染苗1、外植體帶菌2、培育基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時(shí)帶入4、環(huán)境不清潔污染途徑思索： 植物組織培育的整個(gè)操作過(guò)程中如何實(shí)現(xiàn)無(wú)菌 環(huán)境？ 1器械及培育基的滅菌高壓蒸汽滅菌 2 外植體的消毒70%酒精、0.1%氯化汞 3接種的無(wú)菌操作酒精、酒精燈、灼燒 4無(wú)菌培育箱中培育 5移栽到消毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間思索：他計(jì)劃做幾組反復(fù)？他計(jì)劃設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎？答：每種資料或配方至少要做一組以上的反復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培育基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培育，用以闡明培育基制造合格，沒(méi)有被雜菌污染。三、課題延伸1、普通來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)展無(wú)性繁衍的植物，也