免疫組化在腫瘤病理診斷中應用

1、關于免疫組化在腫瘤病理診斷中的應用第一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 免疫組織（或細胞）化學技術是免疫學與組織化學兩種技術的結合，它的基本原理是應用抗原與抗體的特異性結合，再用顯色劑顯色達到標記細胞的某種抗原物質(zhì)的定性與定位檢測技術，是一種方法簡單，且有效的腫瘤標記技術。 當前在免疫組化技術圍繞著提高敏感性與特異性不斷改進和發(fā)展，但它仍有其局限性應用于蛋白水平，敏感性與特異性不足，故應與其他組織化學、電鏡及分子生物學技術相結合。 第二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月一、免疫組化在診斷中的應用原則1防止假陽性與假陰性，防止操作中的污染，規(guī)范操作，設陽性與陰性對照。2選用2種

2、以上同類抗體：目前腫瘤均為相關抗原，特異性不足，多種同類抗體可提高陽性率。 3正確評價免疫組化的結果：其結果受抗體、特異性與質(zhì)量、操作、標本固定等多種因素影響。 第三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月4合理的選擇抗體：既要符合設計的要求，價廉物美，分1、2、3線抗體。5待檢標本抗原保存要好：要求快速、新鮮、充份的固定，合適固定劑，福爾馬林液固定標本要修復抗原。第四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月二、免疫組化在腫瘤診斷中的應用（一）上皮性腫瘤標記1角蛋白（Keratin）：一種中間絲蛋白，分（1）表皮角蛋白（Epidermal keratin，EK）鱗狀上皮或高分化鱗癌標記；（

3、2）細胞角蛋白（cytokeratin，CK）低分子角蛋白，對腺癌、移行細胞部及低分化鱗癌標記。一般用廣譜型角蛋白抗體為好，常用。 第五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2上皮膜抗原（Epithelial membrane antigen，EMA）：這亦是常用的上皮細胞標記抗體，細胞膜陽性，用Zankers、Bouin或B5固定液中固定為好。其在低分化和未分化上皮中表達好，但亦可在間變性大細胞淋巴瘤、惡性橫紋肌樣瘤中表達。 3橋粒蛋白（Desmoplakin）：主要標記上皮橋粒，Desmo僅表達于復層上皮。 第六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月4癌胚抗原（Carcinoemb

4、rgonic antigen，CEA）：是從結腸癌中分離而得一種球蛋白，定位于細胞膜上，對腸、胃、肺、胰、肝、乳腺等腺癌標記陽性，但個別非上皮腫瘤也可陽性。 5甲胎蛋白（Alpha Fetoprotein，AFP）：由胎肝細胞提取的一種酸性糖蛋白，細胞漿和膜上表達，它對肝細胞癌、卵黃囊癌的特異性標記。 第七張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）間葉源性腫瘤免疫組化標記間葉組織包括纖維結締組織、脂肪、肌肉、血管、骨、軟骨及外周神經(jīng)等，間葉組織腫瘤往往由多向分化的原始間葉細胞產(chǎn)生，存在共性，標記抗體特異性不足，有交叉反應。 1波紋蛋白（Vimentin，Vim）：是一種細胞中間絲蛋白抗體

5、，在多數(shù)軟組織腫瘤均可表達，但纖維細胞較明顯，在一些上皮性腫瘤也有陽性反應。常用作間葉源與上皮源腫瘤的第一線鑒別抗體 第八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2結蛋白（Desmin，Des）：平滑肌、橫紋肌均可陽性。3肌動蛋白（Actin）：平滑肌、血管內(nèi)皮、肌上皮細胞標記，HHF35特異。4肌球蛋白（Myotlobin），肌紅蛋白（myosin）：對橫紋肌標記較好。 5第8因子，CD34：對血管內(nèi)皮細胞腫瘤標記較特異。 第九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月6S-100蛋白：是一種周圍神經(jīng)雪旺氏細胞特異標記抗體，后發(fā)現(xiàn)對脂細胞、朗格罕氏細胞、肌上皮細胞、黑色素細胞及其腫瘤均可陽

6、性。 7酸性或堿性磷酸酶：對骨與軟骨腫瘤標記好。 第十張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）雙向分化腫瘤標記 即有上皮與間葉兩種細胞分化的腫瘤的標記，如滑膜肉瘤、間皮肉瘤、腦膜瘤、癌肉瘤、上皮樣肉瘤等，一般采用CK、EMA標記上皮，Vim等標記間葉細胞。另外有一種惡性纖維組織細胞瘤，由纖維細胞、肌纖維母細胞和組織細胞混合組成的惡性腫瘤，故應用Vim和組織細胞標記來診斷。 第十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（四）神經(jīng)細胞、膠質(zhì)細胞及神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標記1神經(jīng)原特異性烯醇化酶（Neuron Specific Enolase，NSE）：神經(jīng)原腫瘤標記。2膠質(zhì)纖維酸性蛋白（Gli

7、al Fibrillaly Acidic protein，GFAP）：腦膠質(zhì)細胞特異性標記抗體。第十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標記：包括類癌、胰島、垂體瘤、甲狀腺髓樣癌、皮膚Merkel細胞癌、原始神經(jīng)外胚層瘤（PNET）等，目前應用NSE、嗜鉻蛋白顆粒A（CgA）及觸突素（Syn）三種抗體同時或兩種一起用，因NSE不夠特異。 第十三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（五）淋巴網(wǎng)狀組織腫瘤（淋巴瘤）標記1B細胞標記抗體：CD20（L26），Ig重鏈（IgG、M、A、E）、輕鏈（、）、CD79a。2T細胞標記抗體：CD45RO（UCHL-1），CD3較好

8、。 3組織細胞標記抗體：Mac387、CD14、抗溶菌酶（lysozyme）、抗糜蛋白酶（-1 Antichymotrypsin）等。 第十四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月4霍奇金淋巴瘤（Hodgkins lymphoma，HL）R-S細胞（Reed-Sternberg cell）標記抗體：CD15、CD305白細胞共同抗原（leucocyte common Antigen，LCA）：它對淋巴網(wǎng)狀細胞均為膜陽性，作第一線抗體為好。注：（1）國際上將百余種標記抗體統(tǒng)稱為CD（Cluster Designation）系列。 （2）淋巴細胞標記與R-S細胞多數(shù)為膜陽性，而Ig與組織細胞標

9、記為胞漿陽性。 第十五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（六）腫瘤細胞增殖活性與細胞凋亡標記抗體 瘤細胞增殖指數(shù)反應細胞增殖活性，是瘤細胞新生（惡性）狀況的客觀指標，與凋亡指數(shù)呈反比關系。常用抗體有：1增殖細胞核抗原（proliferative neuclear Antigen，PCNA），核陽性。 2Ki-67，Brdu抗體：原要求新鮮組織，新近有Ki-67石蠟切片標記抗體問世。 第十六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月3細胞凋亡（Apoptosis）標記抗體：開始發(fā)現(xiàn)細胞凋亡發(fā)生于正常細胞受基因調(diào)控性自然性死亡。后發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞亦可發(fā)生，而且某些藥物放、化療亦可誘發(fā)細胞凋亡，

10、故成了研究腫瘤發(fā)生、發(fā)展、治療的熱點。其標記抗體有：（1）凋亡抑制基因蛋白抗體：Bcl-2、Bcl-XL、mtp53。（2）促凋亡基因蛋白抗體：Fas/FasL系統(tǒng)，wtp53、Bax、Bcl-xs、Fas等。Tunel標記。 第十七張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（七）癌基因與抗癌基因，促轉移與轉移抑制基因蛋白抗體標記。 目前應用很多，因方法比分子生物學技術簡單，但是這種結果不能直接反應腫瘤基因的活性，只能間接反應腫瘤基因代謝活性，要注意正確評價它的價值。 第十八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十張，PPT共三十九頁，創(chuàng)

11、作于2022年6月第二十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十七張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)