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文檔簡介
1、組織學(xué)與胚胎學(xué)的學(xué)案組織學(xué)(histology):研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu) 及其相關(guān)功能的科 學(xué) 胚胎學(xué)(embryology):研究人體發(fā)生、 生長及其發(fā)育機(jī) 制的一門科學(xué) 組織學(xué)緒論 Histology Introduction 三、組織學(xué)技術(shù) 一、 組織學(xué)的概念 二、顯微鏡的應(yīng)用四 、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法一、組織學(xué)的概念 機(jī)體的微細(xì)結(jié)構(gòu)是用顯微鏡及其相關(guān)功能的科學(xué) 。(細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng))研究 紅細(xì)胞 白細(xì)胞 肌細(xì)胞 精子 神經(jīng)細(xì)胞 組織器官系統(tǒng) 細(xì)胞 細(xì)胞間質(zhì) (細(xì)胞外基質(zhì))+上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織(cell)(tissue)(organ)(system)成人有11015個(gè)細(xì)胞,約21
2、0種. 細(xì)胞膜 細(xì)胞質(zhì) 細(xì)胞核細(xì)胞提出組織建立形成21種 透射電鏡 -觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu) 掃描電鏡 -觀察組織或細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu)電子顯微鏡光學(xué)顯微鏡解剖光學(xué)顯微鏡(放大鏡)組織光學(xué)顯微鏡1、顯微鏡的分類二、顯微鏡的應(yīng)用0.2um物體放大1000倍 鏡下結(jié)構(gòu)簡稱 LM 結(jié)構(gòu)發(fā)明于16世紀(jì)0.2nm物體放大1000倍 鏡下結(jié)構(gòu)簡稱 EM 結(jié)構(gòu)發(fā)明于1932年2、顯微鏡的特點(diǎn)三、組織學(xué)技術(shù) 石蠟切片法(用于教學(xué)) 冷凍切片法(用于臨床檢驗(yàn)) (肝、腎、淋巴結(jié)等)非切片法(牙齒、血液、疏松結(jié)締組織等)切片法涂片鋪片(撕片) 磨 片 取材(一)、石蠟切片法1、快速殺死動物取材。2、組織愈新鮮愈好。 3、
3、材料大小一般不超過 0.5cm3。固定1、動物的組織在離體后便很快地進(jìn)行解體 , 這些變化可能是由于細(xì)菌或是由于其 本身所含酶的作用。2、在動物死后應(yīng)立即將其固定起來,停止其分解作用 , 盡可能保存其結(jié)構(gòu)及成分,并能抵抗各個(gè)步驟處理時(shí)所產(chǎn)生的損壞作用。 3、常用的固定液有 10% 福爾馬林 , Bouin 液 , 苦味酸、乙醇。4、固定時(shí)間為24小時(shí)-很長。沖洗1、用水將固定液置換。2、時(shí)間為24小時(shí)。脫水1、組織必須先脫去水分 , 才能包埋于蠟中。2、脫水的步驟是陸續(xù)經(jīng) 70% 、 80% 、 90% 、 95% 、 100 % 各級酒精 , 以去凈組織塊內(nèi)的水分 , 并完全由酒精所代替 。
4、3、時(shí)間為3-6小時(shí) 透明1、因石蠟不溶于 酒精而溶于二甲苯 , 因而再用二甲苯替代酒精 , 同時(shí)因組織浸于油質(zhì)二甲苯 中也就變得透明了。2、時(shí)間為24小時(shí)。 浸蠟1、將透明好的組織快放入溶化 的石蠟中,置于保溫箱。2、時(shí)間為35小時(shí)。包埋最后把組織放在保持于 52 58C 的已溶解的石蠟中,置于常溫下。 切片待冷卻后就變成堅(jiān)硬的組織蠟塊 , 便可以進(jìn)行切片了。 貼片染色(二)染色方法 蘇木精(Hematoxylin)伊紅(Eosin)堿性染料將嗜堿性物質(zhì)(本身酸性)染成藍(lán)色酸性染料將嗜酸性物質(zhì)(本身堿性)染成紅色細(xì)胞核中的DNA、RNA,細(xì)胞質(zhì)中的RNA細(xì)胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)(線粒體、溶酶體、滑面
5、內(nèi)質(zhì)網(wǎng))(嗜堿性)(嗜酸性) Giemsa染色 、銀染色特殊染色:HE染色: 嗜中性巨噬細(xì)胞 消化分解1、形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系3、立體和斷面的關(guān)系5、前后聯(lián)系,對比總結(jié)功能(有溶酶體)四、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法2、理論和實(shí)踐的關(guān)系4、靜態(tài)與動態(tài) 組織學(xué)研究技術(shù)、細(xì)胞自學(xué)!多糖PA氧化醛Schiff試劑紫紅色沉淀五、 Histochemistry and Cytochemistry 組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué) 試劑 + 組織中待檢物質(zhì) 有色沉淀 (多糖、酶、脂類、核酸) ( periodic acid Schiff reaction): 是確定組織或細(xì)胞中有無多糖的方法。 原理:PAS反應(yīng)PAS染色單柱上皮不
6、同方位的切片圖結(jié)構(gòu)與功能舒張狀態(tài)收縮狀態(tài)靜態(tài)與動態(tài)綜合與比較六、細(xì)胞 一 細(xì)胞膜 cell membrane 二 細(xì)胞質(zhì) cytoplasm 三 細(xì)胞核 nucleus細(xì)胞膜(一)、 cytoplasm 基質(zhì) 核糖體 ribosome 細(xì)胞器 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) ER 高爾基復(fù)合體 Golgi 溶酶體 Lys 線粒體 Mit 過氧化物酶體 peroxisome 中心體 centrosome 細(xì)胞骨架 cytoskeleton 包含物:糖原、脂滴、分泌顆粒細(xì)胞器 organelle核糖體 ribosome attached ribosome 附著核糖體:合成分泌蛋白 free ribosome 游離核糖體:
7、合成結(jié)構(gòu)蛋白核糖體豐富的細(xì)胞LM下胞質(zhì)嗜堿性 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) ER 粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(RER):合成分泌型蛋白質(zhì) 嗜堿性 滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(SER):嗜酸性 合成類固醇激素腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 參與脂類代謝(小腸吸收細(xì)胞,肝細(xì)胞) 解毒作用-(肝細(xì)胞) 離子貯存、調(diào)節(jié)(橫紋肌Ca2+)高爾基復(fù)合體 Golgi complex 功能: 蛋白質(zhì)加工站 ( 酶原顆粒 、粘原顆粒 、初級溶酶體 )蛋白質(zhì)分泌旺盛細(xì)胞Golgi發(fā)達(dá)溶酶體 lysosome 嗜酸性 初級lys 次級lys 吞噬體功能: 含酸性水解酶, 細(xì)胞內(nèi)消化器-清除外來異物與內(nèi)源性殘余物。 線粒體 Mit : 能量供應(yīng)站 細(xì)胞骨架 cytoskeleton: 細(xì)胞特定形狀,運(yùn)動有關(guān) 微管: 微絲: 肌細(xì)胞( 粗絲+細(xì)絲 ) 中間絲: 神經(jīng)絲-神經(jīng)元 角質(zhì)蛋白絲-復(fù)層扁平上皮 神經(jīng)角質(zhì)絲-星形膠質(zhì)細(xì)胞 結(jié)蛋白絲 波形蛋白絲(二) 細(xì)胞核 nucleus 1 核膜 nuclear envelop :核孔 nuclear pore 功能活躍強(qiáng)嗜堿性 + 2 核仁 功能靜止() 形成核糖體前身的部位 3 核基質(zhì): 核液 + 核骨架 4 染色質(zhì): 常染色質(zhì)功能活躍淺 異染色質(zhì)功能靜止深 成纖維細(xì)胞線粒體粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)細(xì)胞的微細(xì)結(jié)構(gòu)LM: 1 細(xì)胞的形態(tài) 2 細(xì)胞質(zhì)(酸堿性、特殊物質(zhì)) 3 細(xì)胞核(位置
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