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實驗六 RPMI-1640的配制1不完全RPMI-1640培養(yǎng)液配方RPMI-1640干粉 1袋(1,000mL量)L-谷氨酰胺 0.29gNaHCO3溶液 2.2gHEPEs 2.39g去離子水 1,000mL 溶解,過濾除菌,分裝,-20保存。2合成培養(yǎng)基的配制1、將RPMI-1640粉袋豎立輕彈,使袋中干粉下沉,剪開袋口,將干粉倒入3,000mL三角瓶中;2、加入1,000mL去離子水,快速旋轉(zhuǎn)搖動三角瓶,或用磁力攪拌器攪拌一定時間使干粉培養(yǎng)基充分溶解;3、稱取3.7g NaHCO3、2.39g HEPEs加入三角瓶,快速旋轉(zhuǎn)搖動充分溶解;4、在超凈臺中安裝好滅菌過濾器,對溶液進行濾過除菌,分裝入250mL或500mL瓶中,瓶口用膠塞塞緊;3合成培養(yǎng)基的配制5、用塑料膜將瓶口封好,加皮筋扎緊,4冰箱或-20貯存?zhèn)溆?,此為不完全RPMI-1640液。6、完全RPMI-1640培養(yǎng)液的配制:不完全RPMI-1640培養(yǎng)液占8090,小牛血清占1020。按1體積分別加入雙抗貯存液(青霉素+鏈霉素),使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100UmL。4
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