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1、實(shí)驗(yàn)二 溫度、激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響 溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解溫度對(duì)酶活性的影響,學(xué)會(huì)檢測(cè)酶最適溫度的方法。2、了解激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響。3、學(xué)習(xí)檢測(cè)激活劑和抑制劑影響酶促反應(yīng)速度的原理和方法。溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響二、實(shí)驗(yàn)原理(一)溫度對(duì)酶活性的影響一方面是溫度升高,酶促反應(yīng)速度加快。另一方面,溫度升高,也將導(dǎo)致酶活性降低甚至喪失。 因此大多數(shù)酶都有一個(gè)最適溫度(即酶促反應(yīng)速度最快時(shí)的環(huán)境溫度)酶的最適溫度不是一個(gè)常數(shù),它與作用時(shí)間長(zhǎng)短有關(guān)。 溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響人唾液中淀粉酶為-為淀粉酶,在唾液腺細(xì)胞內(nèi)合成。在唾液淀粉酶的作用
2、下,淀粉被水解,經(jīng)過一系列被稱為糊精的中間產(chǎn)物,最后生成麥芽糖。不同階段的糊精遇碘有不同顏色反應(yīng),分別呈現(xiàn)為: 藍(lán)色 紫色 褐色 紅色棕黃色(遇碘不顯色)。溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響(二)激活劑和抑制劑對(duì)酶反應(yīng)的影響 酶活力常受到有些物質(zhì)的影響,有些物質(zhì)能使酶活力增強(qiáng),稱為酶的激活劑; 另一些物質(zhì)則能使酶活力降低,稱為酶的抑制劑。 劑i溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響三、試劑和器材1、實(shí)驗(yàn)器材 (1)恒溫水浴鍋 (2)試管 (3)燒杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板 (7)鐵三角架 (8)酒精燈 (10 )試管夾 (11)試管架 (12)秒表 2、實(shí)驗(yàn)試劑 (1) 0.5%淀粉的
3、0.3%氯化鈉溶液 (2) KI-I2 (3) 1% NaCl (4) 1% CuSO4 (5) 1% Na2SO4 (6) 0.1%淀粉溶液 (7) 唾液淀粉酶溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響四、操作步驟(一)溫度對(duì)酶活性的影響 取6支試管,編號(hào),按下表的順序準(zhǔn)確地加入各種試劑,記錄結(jié)果。溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響 管 號(hào)1230.5%淀粉的0.3%氯化鈉(mL)2.02.02.0 溫度()冰浴3770各保溫10 min 管 號(hào)1E2E3E唾液淀粉酶(mL)1.01.01.0 溫度()冰浴3770各保溫10 min 1和1E,2和2E各對(duì)應(yīng)管混和并搖勻后,置各溫度保溫5-10 min
4、* KI-I2液(滴)111 記錄觀察結(jié)果*溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響(二) 激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響試 劑 管 號(hào)12341% NaCl(mL)1.01% CuSO4( mL)1.0蒸餾水( mL)1.01% Na2SO4( mL)1.00.1%淀粉( mL )1.51.51.51.5 唾液淀粉酶1.01.01.01.0搖勻,置37水浴中515分鐘,取出冷卻。 KI-I2(滴)1-2滴1-2滴1-2滴1-2滴 記錄結(jié)果溫度激活劑和抑制劑對(duì)酶活力的影響五、注意事項(xiàng) 1、 本實(shí)驗(yàn)中的保溫時(shí)間是5 min-10 min,因不同的唾液淀粉酶的活性是不同的。 2、淀粉溶液與酶液務(wù)必充分混勻,反應(yīng)后才能得到理想的顏色梯度變化結(jié)果。思考題 1、 高溫導(dǎo)致酶活性喪失的分子機(jī)理是什么?如何在酶 的
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