中醫(yī)藥對心肌細胞損傷保護作用的研究

1、中醫(yī)藥對心肌細胞損傷保護作用的研究對缺糖缺氧損傷的保護作用大量實驗研究說明，培養(yǎng)的心肌細胞如缺糖缺氧6小時，那么迅速引起細胞內(nèi)能量耗竭，導致細胞功能受損，LDH等酶溢出，并伴有細胞超微構造損害。研究發(fā)現(xiàn)，中藥能有效地對上述損害起保護作用。張家新1研究發(fā)現(xiàn)：在LDH酶程度顯著高于正常對照組(P0.01)的缺糖缺氧心肌細胞培養(yǎng)液中，參加玫瑰茄提取液后，培養(yǎng)液中的LDH顯著低于未加藥物的缺糖缺氧組(P0.05)，提示該藥物能較好的對缺糖缺氧損傷起保護作用。陳興堅2等將中藥提取物酸棗仁總皂甙分別用兩種濃度(33g/l和11g/l)參加模型組中，結果發(fā)現(xiàn)高濃度組可減輕缺糖缺氧心肌細胞LDH的釋放，低濃度

2、組那么沒有這樣的作用，說明該藥對心肌細胞的保護作用存有量效關系。值得一提的是：培養(yǎng)的心肌細胞對不同中藥的濃度反響也有較大差異，杜銳生3研究發(fā)現(xiàn)，100g/l與250g/l的三七總皂甙均能減少缺糖缺氧組心肌細胞的LDH與-羥丁酸脫氫酶(-HBD)的釋放，但作用以100g/l濃度為明顯，250g/l的濃度反有減弱的趨勢，提示中藥保護心肌細胞與適宜的濃度相關，過大過小均不能到達最大效應。有關中藥保護心肌細胞缺糖缺氧損傷機理的研究，近年來也獲得了長足的進展。洪行球4采用中藥復方何氏心悸方(黨參、五味子、麥冬等)觀察其對細胞內(nèi)琥珀酸脫氫酶(SDH)活性的影響，該酶是三羧酸循環(huán)及線粒體氧化磷酸化有關的主要

3、酶。實驗發(fā)現(xiàn)，缺糖缺氧組細胞內(nèi)SDH染色示活性明顯降低，參加該藥抽濾液后可明顯進步SDH的活性，且使細胞搏動恢復，說明何氏心悸方是通過改善心肌細胞內(nèi)代謝起到保護心肌細胞作用。汪長華5等采用計算機技術和SDH染色相結合的方法。將該酶活性量化，并檢測LDH.心肌細胞內(nèi)總磷酯和總膽固醇含量以及a2+g2+ATP酶活性進展綜合分析發(fā)現(xiàn)，大豆磷脂脂質體可抑制心肌細胞培養(yǎng)液中LDH的活性和心肌細胞內(nèi)SDH的反響性增加，減輕心肌細胞a2+g2+ATP酶活性的降低，進步心肌細胞總磷脂和總膽固醇的含量，說明大豆磷脂脂質體減輕培養(yǎng)心肌細胞缺糖缺氧性損傷，可能與其作用于細胞膜脂質有關。近年來，有關中心肌細胞保護作用

4、機理研究已到達分子程度。杜銳生3用同位素標記法研究發(fā)現(xiàn)，三七總皂甙可以減少缺糖缺氧心肌細胞DNA合成的降低。王瑋67用精制血府膠囊(柴胡、赤芍、紅花、桃仁等)取藥給兔灌胃后，心臟采血，別離含藥血清，研究其對缺糖缺氧心肌細胞的保護作用，發(fā)現(xiàn)該藥可以進步缺糖缺氧心肌細胞的3Hurid(尿嘧啶核苷)及3HLeu(亮氦酸)的摻入率，提示中藥可以減輕缺糖缺氧心肌細胞的DNA、RNA、蛋白質等大分子物質的合成，起到保護心肌細胞的作用。王瑋進一步研究顯示，該藥可以改善心肌細胞-氧化氦合成酶(NS)基因的表達，可能亦是精制血府膠囊保護心肌細胞的重要機理之一。心肌細胞超微構造的研究，進一步對中藥保護心肌細胞提供

5、形態(tài)學根據(jù)。陳家暢810發(fā)現(xiàn)缺糖缺氧6小時的心肌細胞核畸形，染色體邊緣濃縮，線粒體腫脹，嵴消失，甚至出現(xiàn)空泡變性，此外，肌原構造破壞，有些區(qū)域偶見Z膜和A帶，I帶模糊不清或消失。有些肌原纖維有斷裂和破碎，分別加用黃芪、當歸，當歸養(yǎng)血湯等后，大部分細胞核正常、染色質均一，肌原纖維內(nèi)粗細肌絲排列整齊，Z膜、A帶和I帶清楚。部分未見肌原纖維斷裂破碎，說明上述中藥有較好的抗心肌細胞缺糖缺氧損傷作用。金花淑11發(fā)現(xiàn)，熊膽可以明顯恢復缺糖缺氧心肌細胞的核畸形、線粒體及肌漿網(wǎng)腫脹，并與對照組比擬，糖元增加，分布均勻。另外，中藥對缺氧再給氧對心肌細胞構造性損傷也有很好的保護作用。萬華印12發(fā)現(xiàn)：正常細胞超微構

6、造明晰，缺氧15分鐘心肌細胞構造根本正常，僅偶見線粒體嵴變平、消失，而缺氧復氧組心肌線粒體損傷明顯，腫脹、嵴溶解消失，并可見致密體，A帶和I帶消失。參加酸棗仁皂甙組及SD組細胞超微構造明顯改善，僅見部分線粒體腫脹，肌原纖維排列整齊，A帶、I帶明晰可見。提示：酸棗仁總皂甙有明顯的抗缺氧復氧損傷作用。對缺氧再給氧損傷的保護作用現(xiàn)代病理生理學研究提示：缺氧再給氧損傷主要表如今自由基損傷及鈣超載兩個方面。參照Laurse13法建立心肌細胞缺氧再給氧損傷模型。萬華印14發(fā)現(xiàn)：缺氧再給氧時，心肌細胞內(nèi)超氧化構歧化酶(SD)活性降低，過氧化產(chǎn)物丙二醛(DA)升高，細胞膜脂質流動性下降，酸棗仁總皂甙可以劑量依

7、賴地顯著降低缺氧再給氧心肌細胞DA的含量。進步SD活性。增加細胞膜流動性。說明其具有抗自由損傷的作用。楊世杰15研究外源性自由基損傷黃嘌呤一次黃嘌呤氧化酶(x-x)系統(tǒng)，損傷的心肌細胞，發(fā)現(xiàn)損傷后細胞起搏比例明顯降低，電參數(shù)(動作電位幅度、超射、閾電位及最大除極速度)等均變小，呈膜損傷改變，參加西洋參莖葉皂甙后細胞起搏比例及電參數(shù)與正常組比照改變不明顯，說明該藥有抗外源性自由基損傷的作用。在眾多抗自由基損傷中藥中，人參的研究尤為深化。鐘國贛16應用電子自旋共振法(ESR)檢測人參各組份抗外源性自由基損傷(x-x系統(tǒng))時，心肌細胞內(nèi)自由基的含量，發(fā)現(xiàn)11種人參皂戒單體中，有8種單體(Rg1、Rb

8、1、Re、Rb2、RL、Rg2、Rb3、Rk1)可使心肌細胞內(nèi)自由基明顯少于對照組，有一種單體Rd對自由基含量無明顯影響，另二組單體Rf、R0使細胞內(nèi)自由基數(shù)量明顯高于對照組。提示：人參皂甙凈效應有良好的抗自由基損傷作用，但不同組份可出現(xiàn)效應迥異。作者認為，這主要取決于與甙元相連的糖基鏈，其中達瑪烷型四環(huán)三萜被認為是抗自由基作用最主要的甙元基團。鈣離子超載是缺氧再給氧損傷的又一病理生理過程。唐景榮17應用同位素45a示蹤法，發(fā)現(xiàn)50400g/l丹皮磺酸鈉可以顯著地抑制正常及受損心肌細胞內(nèi)鈣攝取量，并使心肌細胞膜唾液酸(SA)含量恢復正常，后者是維持心肌細胞正常Na+a2+交換的主要陰離子成份，

9、提示鈣阻滯是該藥保護心肌細胞的機理之一。該作者的另一項研究18證實丹皮酚有同樣的作用，且可以降低過氧化酯質LP程度。戰(zhàn)術1920采用微電極細胞動作電位分析，發(fā)現(xiàn)刺五加莖葉皂甙單體Sb(200g/l)和S1(5080g/l)可使心肌細胞動作電位波幅、波寬、閾電位、最大舒張電位、最大除極速度均減低，類似于尼莫地平的電生理效應，可見Sb、S1的心肌細胞保護作用是其鈣離子阻滯所致。應用一樣的方法，齊暉21驗證了大豆皂甙的鈣離子阻滯作用。近年來，應用膜片鉗技術成功地觀察到心肌細胞膜上不同離子電流進展離子通道的研究。鐘國贛22應用該技術確證了人參二醇組、人參三醇組單體有鈣通道阻滯作用，表現(xiàn)為鈣離子通道的開

10、放時間及開放頻率減少。進一步研究人參皂甙單體Rh1等，結論根本一樣，說明人參保護心肌細胞的另一可能機理為鈣阻滯。對病毒、化療藥物損傷的保護作用郭祺23應用45a示蹤發(fā)現(xiàn)，黃芪可以減輕柯薩其病毒B3(B3)感染心肌細胞的繼發(fā)性鈣超載，并對細胞內(nèi)病毒的RNA復制具有抑制作用。崔燕崗24研究證實：?；撬峥杀ＷoB3病毒感染的心肌細胞，其作用可能與a2+阻滯有關。近年來，中藥復方制劑抗病毒感染也出現(xiàn)了可喜的苗頭，崔新穎25發(fā)現(xiàn)心肌寧可明顯抑制B3吸附細胞外表，并直接滅活病毒，為臨床中藥抗病毒性心肌損傷提供可靠的實驗根據(jù)。葉丹26在臨床中觀察到，生脈散可以減輕化療病人的心肌受損，但在培養(yǎng)的心肌細胞實驗中并

11、未發(fā)現(xiàn)生脈散有直接心肌細胞保護作用。提示中藥抗化療損傷心肌作用，體液因素不可無視。參考文獻1張家新.玫瑰茄提取液對體外培養(yǎng)乳鼠心肌細胞損傷的保護作用J.第一軍醫(yī)大學學報.1992，(3)：2432452陳興堅.酸棗仁總甙對培養(yǎng)大鼠心肌細胞的保護作用J.中國藥理學報，1990，(2)：1533杜銳生.三七總皂甙對體外培養(yǎng)乳鼠心肌細胞缺血性損傷模型的保護作用J.中華兒科雜志，1992，(2)：744洪行球.何氏心悸方對培養(yǎng)心肌細胞缺糖缺氧性損傷的保護作用J.浙江中醫(yī)雜志，1992，(12)：5625汪長華.大豆磷脂脂質體對培養(yǎng)心肌細胞缺氧缺糖性損傷的影響J.中國循環(huán)，1995，10(5)：2932

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