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文檔簡介
1、 實(shí)驗(yàn)三1、血紅蛋白的測定(比色法)2、紅細(xì)胞脆性的測定3、影響血液凝固的因素1血紅蛋白的測定(P80)1 目的 掌握比色法測定動物血紅蛋白含量的方法。2 實(shí)驗(yàn)原理 血紅蛋白的量與血液顏色呈正相關(guān)23 主要材料 家兔、沙里氏血紅蛋白計(jì)、0.1N鹽酸4 方法與步驟 4.1 清洗:血紅蛋白吸管、比色管;4.2 將0.1N鹽酸加入比色管中至刻度“2”處;4.3 加樣:用血紅蛋白吸管取血20L,加入鹽酸中,并利用上層鹽酸將吸管內(nèi)壁洗滌2-3次(避免起泡);4.4 酸化10min以上;4.5 比色;4.6 讀數(shù): 絕對數(shù):每100mL血液中血紅蛋白的克數(shù); 相對數(shù):35 注意事項(xiàng)5.1 血紅蛋白吸管和比
2、色管要清潔;5.2 取血要準(zhǔn)確;5.3 避免比色管內(nèi)起泡;5.4 蒸餾水要逐滴加入,防止過量;5.5 酸化時(shí)間不能少于10min;5.6 在自然光下比色,比色無刻度一方朝外。4紅細(xì)胞脆性的測定(P82)1 目的 學(xué)習(xí)測定紅細(xì)胞滲透脆性的方法,理解溶液滲透壓在維持細(xì)胞正常形態(tài)中的作用。2 原理 紅細(xì)胞膜對低滲溶液的抵抗力,稱為RBC滲透脆性。 用低滲NaCL溶液的濃度表示:最小抵抗、最大抵抗 53 實(shí)驗(yàn)動物:家兔4 方法與步驟4.1 溶液配置表2 不同濃度NaCl溶液配制管 號123456789101%NaCl(mL)9.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸餾水(mL)1.
3、03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl濃度(%)0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.2564.2 制備抗凝血:檸檬酸鈉抗凝血。4.3 加抗凝血:每只試管加1滴,輕輕混勻。4.4 靜置1h4.5 觀察結(jié)果4.5.1 未溶血試管: 出現(xiàn)分層現(xiàn)象,下層紅色渾濁,上層為無色透明。4.5.2 不完全溶血試管: 出現(xiàn)分層現(xiàn)象,下層紅色渾濁,上層為淡紅色透明。4.5.3 完全溶血試管: 無分層現(xiàn)象,完全淡紅色透明。76 注意事項(xiàng)6.1 試管要潔凈、干燥;6.2 配液要準(zhǔn)確;6.3 加血量要一致,1D;6.4 輕輕傾倒試管2-3次混勻,避免機(jī)械
4、溶血;6.5 靜置時(shí)間保證1h,防止中途人為振動;6.6 在光線明亮處觀察結(jié)果。8影響血液凝固的因素(P88) 1 目的 以凝血時(shí)間為指標(biāo),了解影響凝血的因素。2 原理 血凝是一個(gè)酶促過程,有多種凝血因子參與,分為內(nèi)源性和外源性凝血兩個(gè)途徑。 93 動物:家兔4 方法與步驟4.1 家兔的麻醉、保定與手術(shù) 33%乙醇溶液,6mL/kg,耳緣靜脈注射。4.2 試管準(zhǔn)備4.3 頸動脈采血4.4 記錄凝血時(shí)間105 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1 血液凝固及其影響因素116 注意事項(xiàng)6.1 采血過程要盡量快,以減少計(jì)時(shí)誤差;6.2 每支試管口徑大小及采血量要相對一致;6.3 液體石蠟管內(nèi)多余石蠟應(yīng)盡量棄除;6.4 判斷
5、凝血的標(biāo)準(zhǔn)要一致,一般以傾斜試管 達(dá)30-45時(shí)試管內(nèi)血液不見流動為準(zhǔn)。12表1 不同濃度NaCl溶液配制管 號123456789101%NaCl(mL)9.06.56.05.55.04.54.03.53.02.5蒸餾水(mL)1.03.54.04.55.05.56.06.57.07.5NaCl濃度(%)0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.25表2: 血液凝固及其影響因素13實(shí)驗(yàn)報(bào)告撰寫格式有要求14家兔Hb、RBC脆性測定及影響血凝因素的觀察 1 實(shí)驗(yàn)相關(guān)信息及目的 2 材料 2.1 動物 2.2 主要藥品: 2.3 主要儀器: 3 實(shí)驗(yàn)方法:簡述或按生理實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書ab頁介紹方法進(jìn)行1 4 結(jié)果 4.1 家兔Hb、RBC脆性測定:見表1。分組實(shí)驗(yàn)組對照組Hb(g/L)RBC脆性(NaCL%)最小抵抗最大抵抗80-1500.6 0.550.4 0.35表1:家兔Hb、RBC脆性測定4.2 家兔血凝時(shí)間的測定:見表2。 表2:不同因素對家兔血凝時(shí)間的影響5 討論5.1 家兔Hb測定結(jié)果與對照比較,其值?,原因:5.2 家兔RBC脆性測定結(jié)果與對照比較,其值?,原因:5.3 家兔血凝時(shí)間測定結(jié)果表明,時(shí)間長短,原因:參考文獻(xiàn)1. 陳杰,家畜生理學(xué)M,第四版
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