環(huán)氧乙烷殘留量的測定

1、環(huán)氧乙烷的綜述 環(huán)氧乙烷（EO）為一種最簡單的環(huán)醚。低溫時為無色易流動液體，沸點10.4，在該溫度以上為無色氣體。EO液體在室溫下易揮發(fā)，有醚味。 環(huán)氧乙烷的綜述 環(huán)氧乙烷滅菌環(huán)氧乙烷滅菌 EO具有頑強的擴(kuò)散和穿透能力，對細(xì)菌芽孢、真菌和病毒等各種微生物均有滅殺作用，屬于廣譜滅菌劑。環(huán)氧乙烷的綜述 環(huán)氧乙烷對人體的危害（1）急、慢性毒性（2）三致作用（3）急性中毒與局部刺激（4）神經(jīng)系統(tǒng)損害與慢性毒性（5）生殖毒性醫(yī)療器械環(huán)氧乙烷的接觸量限度 前24小時（mg）前30天(mg) 一生(g)短期接觸EO: 4 ECH: 9 長期接觸EO: 4 60 ECH: 9 60 持久接觸EO: 4 60

2、2.5ECH: 9 60 10 參照標(biāo)準(zhǔn)：參照標(biāo)準(zhǔn)：ISO10993-7:2008 環(huán)氧乙烷殘留量分析方法一 、 比色分析法二 、 氣相色譜法環(huán)氧乙烷殘留量測定環(huán)氧乙烷殘留量測定比色分析法比色分析法檢測依據(jù)、原理檢測依據(jù)、原理 一、檢測依據(jù)一、檢測依據(jù) GB/T 14233.1-2008 醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法 第1部分：化學(xué)分析方法二、原理二、原理 環(huán)氧乙烷在酸性條件下水解成乙二醇，乙二醇經(jīng)高碘酸氧化生成甲醛，甲醛與品紅-亞硫酸試液反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色化合物，通過比色分析可求得環(huán)氧乙烷含量。 溶液配制溶液配制 三、溶液配制三、溶液配制 0.1mol/L鹽酸:取9mL鹽酸稀釋至1000mL

3、。 高碘酸溶液（5g/L）:稱取高碘酸0.5g，溶于水，稀釋至100mL。 硫代硫酸鈉溶液（10g/L）：稱取硫代硫酸鈉1.0g，溶于水，稀釋至100mL。 亞硫酸鈉溶液（100g/L）：稱取10.0g無水亞硫酸鈉，溶于水，稀釋至100mL。 品紅-亞硫酸試液：稱取0.1g堿性品紅，加入120mL熱水溶解，冷卻后加入10%亞硫酸鈉溶液20mL、鹽酸2mL，置于暗處。試液應(yīng)無色，若發(fā)現(xiàn)有微紅色，應(yīng)重新配置。 溶液配制溶液配制 三、溶液配制三、溶液配制乙二醇標(biāo)準(zhǔn)貯備液：取一個外部干燥、清潔的50mL容量瓶，加水約30mL，精確稱重。精確量取0.5mL乙二醇，迅速加入瓶中，搖勻，精確稱重。兩次稱重之

4、差即為溶液中所含乙二醇的重量，加水至刻度，混勻，按下式計算其濃度： C= m/50 1000式中： C - 乙二醇標(biāo)準(zhǔn)貯備液濃度，單位為克每升（g/L） m-溶液中乙二醇的質(zhì)量，單位為克（g） 乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（濃度C1=C10-3）：精確量取標(biāo)準(zhǔn)貯備液1.0mL，用水稀釋至1000mL。樣品浸提方法樣品浸提方法 四、四、樣品浸提方法樣品浸提方法取樣品上有代表性的部分，截為5mm長碎片，稱取2.0g置于容器中，加0.1mol/L鹽酸10mL，室溫放置1h，作為供試液。對于容器類樣品，可加0.1mol/L鹽酸至公稱容量，在371下恒溫1h，作為供試液。步驟步驟 五、五、步驟步驟取五只納氏比色管，分

5、別精確加入0.1mol/L鹽酸2mL，再精確加入0.5mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液。另取一只納氏比色管，精確加入0.1mol/L鹽酸2mL作為空白對照。于上述各管中分別加入高碘酸溶液（5g/L）0.4mL，搖勻，放置1h。然后分別滴加硫代硫酸鈉溶液（10g/L）至出現(xiàn)的黃色恰好消失。再分別加入品紅-亞硫酸試液0.2mL，用蒸餾水稀釋至10mL，搖勻，3537條件下放置1h，于560nm波長處以空白液作為參比，測定吸光度。繪制吸光度-體積標(biāo)準(zhǔn)曲線。精確量取供試液2.0mL于納氏比色管中，按上述步驟操作，以測得的吸光度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試液相應(yīng)的體積。結(jié)

6、果計算結(jié)果計算絕對含量絕對含量 六、六、結(jié)果計算結(jié)果計算 環(huán)氧乙烷殘留量用絕對含量或相對含量表示： WEO=1.775VC1m 式中：WEO -單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷絕對含量，mg V -標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出的供試液相應(yīng)的體積，mL C1 -乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/L m -單位產(chǎn)品的質(zhì)量，g結(jié)果計算結(jié)果計算相對含量相對含量 六、六、結(jié)果計算結(jié)果計算 計算樣品中環(huán)氧乙烷相對含量： CEO=1.775VC1103 式中：CEO -單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷相對含量，g/L V -標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出的供試液相應(yīng)的體積，mL C1 -乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/L結(jié)果計算結(jié)果計算（容器類）絕對含量（容器類）絕對含量 六、六、

7、結(jié)果計算結(jié)果計算 對于容器類樣品，按下式計算容器中環(huán)氧乙烷絕對含量： WEO=0.335VC1V1 式中： WEO-單位產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷絕對含量，mg V-標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出的供試液相應(yīng)的體積，mL C1-乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/L V1-單位樣品的公稱容量，mL結(jié)果計算結(jié)果計算 （容器類）單位體積含量（容器類）單位體積含量六、六、結(jié)果計算結(jié)果計算 對于容器類樣品，按下式計算單位體積中環(huán)氧乙烷含量： CEO=0.335VC1103 式中： CEO-樣品中單位體積中環(huán)氧乙烷含量，mg/L V-標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出的供試液相應(yīng)的體積，mL C1-乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，g/L環(huán)氧乙烷殘留量檢測環(huán)氧乙烷殘留量檢測

8、-色譜法 （GC-HS) 氣相色譜法 1 氣相色譜法簡述 氣相色譜法系采用氣體為流動相（載氣）流經(jīng)裝有填充劑的色譜柱進(jìn)行分離測定的色譜方法。物質(zhì)或其衍生物氣化后，被載氣帶入色譜柱進(jìn)行分離，各組分先后進(jìn)入檢測器，用記錄儀、積分儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜信號。 氣相色譜儀由載氣源、進(jìn)樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。進(jìn)樣部分、色譜柱和檢測器的溫度均在控制狀態(tài)。氣相色譜法 1.1 載氣源載氣源 氣相色譜法的流動相為氣體，稱為載氣，氦、氮和氫可用作載氣，可由高壓瓶或高純度氣體發(fā)生器提供，經(jīng)過適當(dāng)?shù)臏p壓裝置，以一定的流速經(jīng)過進(jìn)樣器和色譜柱；根據(jù)供試品的性質(zhì)和檢測器種類選擇載氣，除另有規(guī)定外

9、，常用載氣為氮氣。 氣相色譜法 1.2 進(jìn)樣部分 進(jìn)樣方式一般可采用溶液直接進(jìn)樣、氣體進(jìn)樣。 溶液直接進(jìn)樣采用微量注射器、微量進(jìn)樣閥或有分流裝置的氣化室進(jìn)樣。采用溶液直接進(jìn)樣時，進(jìn)樣口溫度應(yīng)高于柱溫30 50 ；進(jìn)樣量一般不超過數(shù)微升；柱徑越細(xì)，進(jìn)樣量應(yīng)越少，采用毛細(xì)管柱時，一般應(yīng)分流以免過載。 氣相色譜法 頂空進(jìn)樣適用于固體和液體供試品中揮發(fā)性組分的分離和測定。將固態(tài)或液態(tài)的供試品制成供試液后，置于密閉小瓶中，在恒溫控制的加熱室中加熱至供試品中揮發(fā)性組分在非氣態(tài)和氣態(tài)達(dá)至平衡后，由進(jìn)樣器自動吸取一定體積的頂空氣注入色譜柱中。氣相色譜法 1.3 色譜柱 色譜柱為填充柱或毛細(xì)管柱。 極性大小分：

10、強極性，弱極性，非極性 氣相色譜法 新填充柱和毛細(xì)管柱在使用前需老化以除去殘留溶劑及低分子量的聚合物， 色譜柱如長期未用，使用前應(yīng)老化處理，使基線穩(wěn)定。氣相色譜法 1.4 柱溫箱 由于柱溫箱穩(wěn)定的波動會影響色譜 分析結(jié)果的重現(xiàn)性，因此柱溫箱精度應(yīng)在1，且溫度波動小于每小時0.1。溫度控制系統(tǒng)分為恒溫和程序升溫兩種。氣相色譜法 1.5 檢測器 適合氣相色譜法的檢測器 火焰離子化檢測器（FID） 熱導(dǎo)檢測器（TCD） 氮磷檢測器（NPD） 火焰光度檢測器（FPD） 電子捕獲檢測器（ECD） 檢測EO選擇的檢測器是？選擇的毛細(xì)管柱？氣相色譜法 1.6 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 可分為記錄儀、積分儀以及計算機(jī)工作

11、站等。 氣相色譜法 2 原理 在一定溫度下，用萃取劑水 萃取樣品中所含環(huán)氧乙烷（EO），用頂空氣相色譜法測定環(huán)氧乙烷含量。氣相色譜法 3. 測定方法 3.1 取環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)品適量（怎么取法？），制成六個濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，各取10ml，制備六個濃度的標(biāo)準(zhǔn)品試樣。 3.2 當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品試樣達(dá)到氣液平衡時，不同濃度的液體對應(yīng)于不同濃度的氣體，取平衡后的氣體，注入進(jìn)樣器，記錄環(huán)氧乙烷的峰高（或面積）。 氣相色譜法 3.3 根據(jù)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)的峰高（或面積） ，繪制峰高（或面積） 濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。 3.4 取樣品適量，配制成樣品試樣，同法測定峰高（或面積） ，以測得的峰高（或面積）從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的

12、標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。 3.5 根據(jù)公式，計算出環(huán)氧乙烷殘留量。氣相色譜法 4 氣相色譜儀條件 4.1 氫火焰離子檢測器： 4.2 色譜柱：所用色譜柱應(yīng)能使試樣中雜質(zhì)和環(huán)氧乙烷完全分開，并有一定的耐水性。（通常選用非極性柱，比如OV-1)氣相色譜法 4.3 儀器各部位溫度 a）氣化室200 b）檢測室250 4.4 氣流量 a）N2 2.0ml/min b）H2 40 ml/min c）空氣 400ml/min 氣相色譜法 5 環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備（稱重法） 取外部干燥的50ml容量瓶，加水約30ml，加瓶塞，稱重，精確到0.1mg。用注射器注入約0.6ml環(huán)氧乙烷，不加瓶塞，輕輕搖勻，蓋好瓶塞

13、，稱重，前后兩次稱重之差，即為溶液中所含環(huán)氧乙烷的重量。加水至刻度再將此溶液稀釋成1 10-2g/L作為標(biāo)準(zhǔn)貯備液。 在移取標(biāo)準(zhǔn)液最好在冰水浴中進(jìn)行氣相色譜法 6 樣品試樣制備 6.1 將樣品長碎塊，取2.0g放入萃取容器中，加5.0ml水浸提，浸提時間（1h)與溫度（37或25）根據(jù)樣品的特性來定。氣相色譜法 7 試驗步驟 7.1 用儲備液配制1 10-3g/L 1 10-2g/L六個系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。各取10ml按6.2方法處理。 用玻璃注射器依次從平衡后的標(biāo)準(zhǔn)樣和試樣中迅速取1ml上部氣體，注入進(jìn)樣器，記錄環(huán)氧乙烷的峰高（或面積）。氣相色譜法 注 1 在一個分析中盡量一人操作，并使用同一只1ml玻璃注射器； 2 注射器預(yù)先恒溫到樣品相同溫度； 3 每次注意環(huán)氧乙烷保留時間的變化，以防進(jìn)樣氣化墊漏氣； 4 每個樣品（包括標(biāo)樣）在盡可能短的時間內(nèi)分析三次，三次分析中必須有兩次結(jié)果相差不大于5%，否則此樣品應(yīng)重新進(jìn)行分析。氣相色譜法 7.2 用標(biāo)準(zhǔn)樣所測數(shù)據(jù)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線（X：E