腫瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)

1、第第第第第第十七十七十七十七十七十七章章章章章章 腫瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)?zāi)[瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)?zāi)[瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)?zāi)[瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)?zāi)[瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)?zāi)[瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)第一節(jié)第一節(jié) 概概 述述 第二節(jié)第二節(jié) 腫瘤標(biāo)志物測(cè)定腫瘤標(biāo)志物測(cè)定 腫瘤是一類嚴(yán)重危害人類健康的疾腫瘤是一類嚴(yán)重危害人類健康的疾病。病。 為了提高對(duì)腫瘤的早期檢測(cè)、鑒別為了提高對(duì)腫瘤的早期檢測(cè)、鑒別診斷、療效觀察以及預(yù)后判斷，人們從腫診斷、療效觀察以及預(yù)后判斷，人們從腫瘤細(xì)胞的化學(xué)特性、細(xì)胞病理、免疫反應(yīng)瘤細(xì)胞的化學(xué)特性、細(xì)胞病理、免疫反應(yīng)和基因表達(dá)產(chǎn)物等諸多方面尋找各種特異和基因表達(dá)產(chǎn)物等諸多方面尋找各種特異性強(qiáng)、靈敏度高的腫瘤標(biāo)志物。腫瘤標(biāo)志性強(qiáng)、靈敏度高

2、的腫瘤標(biāo)志物。腫瘤標(biāo)志物的研究對(duì)腫瘤的診斷有極其重要的意義。物的研究對(duì)腫瘤的診斷有極其重要的意義。第一節(jié)第一節(jié)第一節(jié)第一節(jié)第一節(jié)第一節(jié) 概概概概概概 述述述述述述一、腫瘤標(biāo)志物的概念一、腫瘤標(biāo)志物的概念 所謂腫瘤標(biāo)志物，指在腫瘤發(fā)生和增殖所謂腫瘤標(biāo)志物，指在腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞合成、釋放，存在于組過程中，由腫瘤細(xì)胞合成、釋放，存在于組織、細(xì)胞或體液中，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的織、細(xì)胞或體液中，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)。一類物質(zhì)。通過對(duì)這類物質(zhì)的分析，能幫助通過對(duì)這類物質(zhì)的分析，能幫助人們從正常組織中區(qū)別腫瘤或測(cè)定腫瘤細(xì)胞人們從正常組織中區(qū)別腫瘤或測(cè)定腫瘤細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)以及對(duì)細(xì)胞膜上

3、的特性進(jìn)行分析，核、細(xì)胞質(zhì)以及對(duì)細(xì)胞膜上的特性進(jìn)行分析，以此作為辨認(rèn)腫瘤細(xì)胞的標(biāo)志。以此作為辨認(rèn)腫瘤細(xì)胞的標(biāo)志。 理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)該具有下列條件：理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)該具有下列條件： 1. 標(biāo)志物的含量變化應(yīng)與腫瘤的生長(zhǎng)、標(biāo)志物的含量變化應(yīng)與腫瘤的生長(zhǎng)、消退、轉(zhuǎn)移有直接的定性或定量的比例關(guān)系。消退、轉(zhuǎn)移有直接的定性或定量的比例關(guān)系。 2. 標(biāo)志物應(yīng)具有較高的特異性，能比較標(biāo)志物應(yīng)具有較高的特異性，能比較明顯地區(qū)別于正常人群和良性腫瘤。明顯地區(qū)別于正常人群和良性腫瘤。 3. 能在臨床上尚未確定腫瘤前檢測(cè)出來。能在臨床上尚未確定腫瘤前檢測(cè)出來。 4. 檢測(cè)這類標(biāo)志物的方法簡(jiǎn)便，易推廣，檢測(cè)這類標(biāo)志

4、物的方法簡(jiǎn)便，易推廣，而且成本較低。而且成本較低。二、腫瘤標(biāo)志物的分類二、腫瘤標(biāo)志物的分類腫瘤標(biāo)志物的分類常用的有兩種：其一按腫瘤標(biāo)志物的分類常用的有兩種：其一按腫瘤標(biāo)志物的來源腫瘤標(biāo)志物的來源以及它的特異性，可分為兩大以及它的特異性，可分為兩大類。類。 1.1.腫瘤特異性標(biāo)志物腫瘤特異性標(biāo)志物 是一種腫瘤所產(chǎn)生的是一種腫瘤所產(chǎn)生的特異性物質(zhì)。例如前列腺特異性抗原特異性物質(zhì)。例如前列腺特異性抗原（PSA）就就是前列腺腫瘤所產(chǎn)生的特異性標(biāo)志物質(zhì)，只有患是前列腺腫瘤所產(chǎn)生的特異性標(biāo)志物質(zhì)，只有患前列腺癌時(shí)，前列腺癌時(shí)，PSA才會(huì)顯著性升高。才會(huì)顯著性升高。 2.2.腫瘤輔助標(biāo)志物腫瘤輔助標(biāo)志物 由

5、一類組織類型相似而由一類組織類型相似而性質(zhì)不同的腫瘤產(chǎn)生，其含量有較大的變化。這性質(zhì)不同的腫瘤產(chǎn)生，其含量有較大的變化。這類標(biāo)志物往往易同良性腫瘤或正常組織發(fā)生混淆。類標(biāo)志物往往易同良性腫瘤或正常組織發(fā)生混淆。 第二是按腫瘤標(biāo)志物本身的化學(xué)特第二是按腫瘤標(biāo)志物本身的化學(xué)特性，可分為以下幾類：性，可分為以下幾類： 1. 腫瘤胚胎性抗原標(biāo)志物腫瘤胚胎性抗原標(biāo)志物 AFP 2. 糖類標(biāo)志物糖類標(biāo)志物 CA19-9 3. 酶類標(biāo)志物酶類標(biāo)志物 PAP 4. 激素類標(biāo)志物激素類標(biāo)志物 HCG 5. 蛋白質(zhì)類標(biāo)志物蛋白質(zhì)類標(biāo)志物 2m 6. 基因類標(biāo)志物基因類標(biāo)志物 ras三、腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用三、腫瘤

6、標(biāo)志物的臨床應(yīng)用 近年來，腫瘤標(biāo)志物在臨床上已得近年來，腫瘤標(biāo)志物在臨床上已得到較廣泛的應(yīng)用，到較廣泛的應(yīng)用， 目前主要應(yīng)用于：目前主要應(yīng)用于： 1. 腫瘤的普查；腫瘤的普查； 2. 腫瘤高危人群的篩選；腫瘤高危人群的篩選； 3. 腫瘤的診斷和鑒別診斷；腫瘤的診斷和鑒別診斷； 4. 腫瘤監(jiān)測(cè)；腫瘤監(jiān)測(cè)； 5. 腫瘤分類、分期、定位；腫瘤分類、分期、定位； 6. 腫瘤治療。腫瘤治療。第二節(jié)第二節(jié)第二節(jié)第二節(jié)第二節(jié)第二節(jié) 腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定一、胚胎性抗原標(biāo)志物的測(cè)定一、胚胎性抗原標(biāo)志物的測(cè)定在人類發(fā)育過程中，許多原本只在

7、在人類發(fā)育過程中，許多原本只在胚胎期才具有蛋白類物質(zhì)，應(yīng)隨胎兒的出胚胎期才具有蛋白類物質(zhì)，應(yīng)隨胎兒的出生而逐漸停止合成和分泌，但因某種因素生而逐漸停止合成和分泌，但因某種因素的影響，特別是腫瘤狀態(tài)時(shí)，會(huì)使得機(jī)體的影響，特別是腫瘤狀態(tài)時(shí)，會(huì)使得機(jī)體一些一些“關(guān)閉關(guān)閉”的基因激活，出現(xiàn)了返祖現(xiàn)的基因激活，出現(xiàn)了返祖現(xiàn)象，而重新開啟并重新生成和分泌這些胚象，而重新開啟并重新生成和分泌這些胚胎、胎兒期的蛋白。胎、胎兒期的蛋白。胚胎類腫瘤標(biāo)志物胚胎類腫瘤標(biāo)志物 名名 稱稱 性性 質(zhì)質(zhì) 相相 關(guān)關(guān) 腫腫 瘤瘤 甲胎蛋白甲胎蛋白 糖蛋白糖蛋白70ku 肝細(xì)胞、胚細(xì)胞（非精原細(xì)胞瘤）肝細(xì)胞、胚細(xì)胞（非精原細(xì)胞

8、瘤） -癌胚抗原癌胚抗原 80ku 結(jié)腸結(jié)腸 癌胚鐵蛋白癌胚鐵蛋白 糖蛋白糖蛋白600ku 肝肝 癌胚抗原癌胚抗原 糖蛋白糖蛋白22ku 結(jié)腸、直腸、胰腺、肺、乳腺結(jié)腸、直腸、胰腺、肺、乳腺 胰癌胚抗原胰癌胚抗原 糖蛋白糖蛋白40ku 胰腺胰腺 鱗狀細(xì)胞抗原鱗狀細(xì)胞抗原 糖蛋白糖蛋白44-48ku 肺、皮膚、頭和頸部肺、皮膚、頭和頸部 組織多肽抗原組織多肽抗原 細(xì)胞角蛋白細(xì)胞角蛋白8.18.19 乳腺、結(jié)腸乳腺、結(jié)腸 這類蛋白雖然與腫瘤組織不一定都具有特定的相關(guān)性，但與腫瘤的這類蛋白雖然與腫瘤組織不一定都具有特定的相關(guān)性，但與腫瘤的發(fā)生存在著內(nèi)在的聯(lián)系，故被作為一種較為常見的腫瘤標(biāo)志物。發(fā)生存

9、在著內(nèi)在的聯(lián)系，故被作為一種較為常見的腫瘤標(biāo)志物。 （一）甲胎蛋白（一）甲胎蛋白（AFPAFP） AFP主要是由胎肝細(xì)胞和卵黃囊合成的主要是由胎肝細(xì)胞和卵黃囊合成的單一多聚體肽鏈的糖蛋白。其分子量平均為單一多聚體肽鏈的糖蛋白。其分子量平均為70ku，含糖含糖4。AFP在電場(chǎng)中泳動(dòng)于在電場(chǎng)中泳動(dòng)于-球蛋球蛋白區(qū)，是胎兒血清中的主要蛋白質(zhì)。白區(qū)，是胎兒血清中的主要蛋白質(zhì)。1964年年Tatarinov發(fā)現(xiàn)肝癌患者血清中檢測(cè)到發(fā)現(xiàn)肝癌患者血清中檢測(cè)到AFP?！緟⒖挤秶砍扇搜獫{參考范圍】成人血漿AFP濃度低于濃度低于25g/L。 【臨床意義】【臨床意義】AFP是原發(fā)性肝癌的是原發(fā)性肝癌的最靈敏、最特

10、異的腫瘤標(biāo)志物，最靈敏、最特異的腫瘤標(biāo)志物，80%以以上的原發(fā)性肝癌患者血清上的原發(fā)性肝癌患者血清AFP明顯增高，明顯增高，AFP檢測(cè)診斷肝癌的標(biāo)準(zhǔn)為：檢測(cè)診斷肝癌的標(biāo)準(zhǔn)為：血清血清AFP測(cè)定結(jié)果大于測(cè)定結(jié)果大于500g/L持續(xù)持續(xù)4周；周；AFP含量有不斷增高者；血清含量有不斷增高者；血清AFP測(cè)定結(jié)果大于測(cè)定結(jié)果大于200g/L持續(xù)持續(xù)8周。周。 肝癌患者血清肝癌患者血清AFP含量變化的速率和含量變化的速率和程度與腫瘤組織分化程度高低有一定相關(guān)程度與腫瘤組織分化程度高低有一定相關(guān)性，分化程度較高的腫瘤性，分化程度較高的腫瘤AFP含量常大于含量常大于200g/L。 血清血清AFP含量的檢測(cè)對(duì)

11、其它腫瘤的監(jiān)含量的檢測(cè)對(duì)其它腫瘤的監(jiān)測(cè)亦有重要臨床價(jià)值。如睪丸癌、畸胎瘤、測(cè)亦有重要臨床價(jià)值。如睪丸癌、畸胎瘤、胃癌、胰腺癌等患者血清胃癌、胰腺癌等患者血清AFP含量可以升含量可以升高。高。 （二）癌胚抗原（二）癌胚抗原（CEACEA） 癌胚抗原是癌胚抗原是1965年年Gold和和Freedman首首先從胎兒及結(jié)腸癌組織中發(fā)現(xiàn)的，先從胎兒及結(jié)腸癌組織中發(fā)現(xiàn)的，CEA是一是一種分子量為種分子量為22ku的多糖蛋白復(fù)合物，的多糖蛋白復(fù)合物，45為為蛋白質(zhì)。一般情況下，蛋白質(zhì)。一般情況下，CEA是由胎兒胃腸道是由胎兒胃腸道上皮組織、胰和肝的細(xì)胞所合成，通常在妊上皮組織、胰和肝的細(xì)胞所合成，通常在妊娠

12、前娠前6個(gè)月內(nèi)個(gè)月內(nèi)CEA含量增高，出生后血清中含量增高，出生后血清中含量很低。含量很低。 【參考范圍】【參考范圍】成人血清成人血清2.5g/L。 【臨床意義】【臨床意義】 當(dāng)當(dāng)CEA大于大于60g/L時(shí)，可時(shí)，可見于結(jié)腸癌、直腸癌、胃癌和肺癌。見于結(jié)腸癌、直腸癌、胃癌和肺癌。CEA值升高，表明有病變殘存或進(jìn)展。如肺癌、值升高，表明有病變殘存或進(jìn)展。如肺癌、乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌患者血清乳腺癌、膀胱癌和卵巢癌患者血清CEA量量會(huì)明顯升高，大多顯示為腫瘤浸潤，其中會(huì)明顯升高，大多顯示為腫瘤浸潤，其中約約70為轉(zhuǎn)移性癌。一般來說，手術(shù)切除為轉(zhuǎn)移性癌。一般來說，手術(shù)切除后后6周，周，CEA水平恢復(fù)正

13、常，否則提示有水平恢復(fù)正常，否則提示有殘存腫瘤，若殘存腫瘤，若CEA濃度持續(xù)不斷升高，或濃度持續(xù)不斷升高，或其數(shù)值超過正常其數(shù)值超過正常5-6倍者均提示預(yù)后不良。倍者均提示預(yù)后不良。二、糖類抗原標(biāo)志物的測(cè)定二、糖類抗原標(biāo)志物的測(cè)定 腫瘤標(biāo)志物相關(guān)物質(zhì)是指由腫瘤細(xì)胞表腫瘤標(biāo)志物相關(guān)物質(zhì)是指由腫瘤細(xì)胞表面的抗原物質(zhì)或者是腫瘤細(xì)胞所分泌的物面的抗原物質(zhì)或者是腫瘤細(xì)胞所分泌的物質(zhì)，這類物質(zhì)含糖量高，故又稱為糖類抗質(zhì)，這類物質(zhì)含糖量高，故又稱為糖類抗原（原（carbohydrate antigen，CA）。）。這類標(biāo)這類標(biāo)志物出現(xiàn)為臨床腫瘤的診斷帶來方便，糖志物出現(xiàn)為臨床腫瘤的診斷帶來方便，糖類抗原標(biāo)志

14、物產(chǎn)生可分為兩大類，即類抗原標(biāo)志物產(chǎn)生可分為兩大類，即高分高分子粘蛋白類子粘蛋白類和和血型類抗原血型類抗原。糖類高分子粘蛋白抗原腫瘤標(biāo)志物糖類高分子粘蛋白抗原腫瘤標(biāo)志物 名名 稱稱性性 質(zhì)質(zhì) 癌癌 腫腫 常用單克隆抗體常用單克隆抗體 CA125 糖蛋白糖蛋白200ku 卵巢、子宮內(nèi)膜卵巢、子宮內(nèi)膜 OC125 CA15-3 糖蛋白糖蛋白400ku 乳腺、卵巢乳腺、卵巢 DF3和和115D3 CA549 高分子量糖蛋白高分子量糖蛋白 乳腺、卵巢乳腺、卵巢 BC4E549 BC4n154 CA27.29 高分子量糖蛋白高分子量糖蛋白 乳腺乳腺 B27.29 DU-PAN-2 粘蛋白粘蛋白100-5

15、00ku 胰腺、卵巢、胃胰腺、卵巢、胃 DU-PAN-2 血型類抗原腫瘤標(biāo)志物血型類抗原腫瘤標(biāo)志物名名 稱稱性性 質(zhì)質(zhì) 癌癌 腫腫 常用單克隆抗體常用單克隆抗體 CA19-9 唾液酸化唾液酸化Lexa 胰腺、胃腸、胰腺、胃腸、肝肝 116NS19-9 CA19-5 唾液酸化唾液酸化Lea和和Leag 胃腸、卵巢胃腸、卵巢 116NS19-5 CA50 唾液酸化唾液酸化Lea 胰腺、胃腸、胰腺、胃腸、結(jié)腸結(jié)腸 Colo-50 CA72-4 唾液酸化唾液酸化Tn 卵巢、乳腺、卵巢、乳腺、胃腸、結(jié)腸胃腸、結(jié)腸 B27.3.cc49 CA242 唾液酸化唾液酸化CHO 結(jié)腸、直腸、結(jié)腸、直腸、胰腺胰腺

16、 C242 這類抗原標(biāo)志物的命名是沒有規(guī)律的，有些是這類抗原標(biāo)志物的命名是沒有規(guī)律的，有些是腫瘤細(xì)胞株的編號(hào)，有些是抗體的物質(zhì)編號(hào)，常用腫瘤細(xì)胞株的編號(hào)，有些是抗體的物質(zhì)編號(hào)，常用檢測(cè)方法是單克隆抗體法。檢測(cè)方法是單克隆抗體法。 （一）（一）CA19-9 CA19-9是是1979年年Koprowski等用結(jié)腸癌細(xì)胞免等用結(jié)腸癌細(xì)胞免疫小鼠，并與骨髓瘤雜交所得疫小鼠，并與骨髓瘤雜交所得116NS19-9單克隆抗單克隆抗體，它是一種分子量為體，它是一種分子量為5000ku的低聚糖類腫瘤相的低聚糖類腫瘤相關(guān)糖類抗原，其結(jié)構(gòu)為關(guān)糖類抗原，其結(jié)構(gòu)為L(zhǎng)ea血型抗原物質(zhì)與唾液酸血型抗原物質(zhì)與唾液酸Lexa的

17、結(jié)合物。的結(jié)合物。 【參考范圍】【參考范圍】血清血清CA19-9含量為含量為216U/ml（RIA法）。法）。 【臨床意義】【臨床意義】 CA19-9是胰腺癌和結(jié)、是胰腺癌和結(jié)、直腸癌的標(biāo)志物。血清直腸癌的標(biāo)志物。血清CA19-9陽性臨界值為陽性臨界值為37U/ml。胰腺癌患者胰腺癌患者85以上為陽性。腫瘤切以上為陽性。腫瘤切除后除后CA19-9濃度會(huì)下降，如再上升，則可表濃度會(huì)下降，如再上升，則可表示復(fù)發(fā)。結(jié)直腸癌、膽囊癌、膽管癌、肝癌示復(fù)發(fā)。結(jié)直腸癌、膽囊癌、膽管癌、肝癌和胃癌的陽性率也會(huì)很高，若同時(shí)檢測(cè)和胃癌的陽性率也會(huì)很高，若同時(shí)檢測(cè)CEA和和AFP可進(jìn)一步提高陽性檢測(cè)率。良性疾患可進(jìn)

18、一步提高陽性檢測(cè)率。良性疾患時(shí)如胰腺炎和黃疸，時(shí)如胰腺炎和黃疸，CA19-9濃度也可增高，濃度也可增高，但往往呈但往往呈“一過性一過性”，而且其濃度多低于，而且其濃度多低于120U/ml，必須加以鑒別。必須加以鑒別。 （二）（二）CA125 CA125是一種大分子多聚糖蛋白，是重要的是一種大分子多聚糖蛋白，是重要的卵卵巢癌巢癌相關(guān)抗原。分子量為相關(guān)抗原。分子量為200ku，加熱至加熱至100時(shí)時(shí)CA125的活性破壞。的活性破壞。 【參考范圍】【參考范圍】血清血清CA12535.0U/ml（RIA法）。法）。 【臨床意義】【臨床意義】 CA125是是上皮性卵巢癌上皮性卵巢癌和和子宮內(nèi)膜子宮內(nèi)膜癌

19、癌的標(biāo)志物。當(dāng)卵巢癌復(fù)發(fā)時(shí)，在臨床確診前幾個(gè)的標(biāo)志物。當(dāng)卵巢癌復(fù)發(fā)時(shí)，在臨床確診前幾個(gè)月便可呈現(xiàn)月便可呈現(xiàn)CA125增高，尤其卵巢癌轉(zhuǎn)移患者的血清增高，尤其卵巢癌轉(zhuǎn)移患者的血清CA125更明顯高于參考值。動(dòng)態(tài)觀察血清更明顯高于參考值。動(dòng)態(tài)觀察血清CA125濃度濃度有助于卵巢癌的預(yù)后評(píng)價(jià)和治療控制，經(jīng)治療后，有助于卵巢癌的預(yù)后評(píng)價(jià)和治療控制，經(jīng)治療后，CA125含量可明顯下降，若不能恢復(fù)至正常范圍，應(yīng)含量可明顯下降，若不能恢復(fù)至正常范圍，應(yīng)考慮有殘存腫瘤的可能?？紤]有殘存腫瘤的可能。 （三）（三）CA15-3 CA15-3是一種是一種乳腺癌乳腺癌相關(guān)抗原，于相關(guān)抗原，于1984年由年由Kufu和

20、和Hilkens等人發(fā)現(xiàn)，等人發(fā)現(xiàn)，CA15-3分子量為分子量為400ku，分子結(jié)構(gòu)尚未清楚。分子結(jié)構(gòu)尚未清楚。 【參考范圍】【參考范圍】血清血清CA15-328U/ml（RIA法）。法）。 【臨床意義】【臨床意義】乳腺癌乳腺癌患者患者CA15-3明顯升高，也明顯升高，也是監(jiān)測(cè)乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的最佳指標(biāo)，當(dāng)是監(jiān)測(cè)乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的最佳指標(biāo)，當(dāng)CA15-3大于大于100U/ml時(shí)，可認(rèn)為有轉(zhuǎn)移性病變，其含量的變時(shí)，可認(rèn)為有轉(zhuǎn)移性病變，其含量的變化與治療結(jié)果密切相關(guān)。肺癌、胃腸癌、卵巢癌及化與治療結(jié)果密切相關(guān)。肺癌、胃腸癌、卵巢癌及宮頸癌患者的血清宮頸癌患者的血清CA15-3也可升高，應(yīng)予以鑒

21、別，也可升高，應(yīng)予以鑒別，特別要排除部分妊娠引起的含量升高。特別要排除部分妊娠引起的含量升高。 （四）（四）CA50 CA50是是1983年年Lindholm等從抗人結(jié)、等從抗人結(jié)、直腸癌直腸癌Colo-205細(xì)胞株的一系列單克隆抗細(xì)胞株的一系列單克隆抗體中篩選出來的，對(duì)結(jié)、直腸癌有強(qiáng)烈反體中篩選出來的，對(duì)結(jié)、直腸癌有強(qiáng)烈反應(yīng)。所能識(shí)別的抗原稱應(yīng)。所能識(shí)別的抗原稱CA50。CA50存在存在于細(xì)胞膜內(nèi)，其抗原決定簇為唾液酸于細(xì)胞膜內(nèi)，其抗原決定簇為唾液酸Lea血血型物質(zhì)與唾液酸型物質(zhì)與唾液酸-N-四氧神經(jīng)酰胺。四氧神經(jīng)酰胺。 【參考范圍】【參考范圍】血清血清CA5020U/ml（RIA法）。法）

22、。 【臨床意義】【臨床意義】 CA50是是胰腺胰腺和和結(jié)、直腸結(jié)、直腸癌癌的標(biāo)志物，因的標(biāo)志物，因CA50廣泛存在胰腺、膽囊、廣泛存在胰腺、膽囊、肝、胃、結(jié)直腸、膀胱、子宮，當(dāng)細(xì)胞惡變肝、胃、結(jié)直腸、膀胱、子宮，當(dāng)細(xì)胞惡變時(shí)，由于糖基轉(zhuǎn)化酶的失活或胚胎期才能活時(shí)，由于糖基轉(zhuǎn)化酶的失活或胚胎期才能活躍的某些轉(zhuǎn)化酶被激活，造成細(xì)胞表面糖類躍的某些轉(zhuǎn)化酶被激活，造成細(xì)胞表面糖類結(jié)構(gòu)性質(zhì)改變而形成結(jié)構(gòu)性質(zhì)改變而形成CA50，因此，它又是因此，它又是一種普遍的腫瘤標(biāo)志相關(guān)抗原。所以在多種一種普遍的腫瘤標(biāo)志相關(guān)抗原。所以在多種惡性腫瘤中可檢出不同的陽性率。惡性腫瘤中可檢出不同的陽性率。三、酶類抗原標(biāo)志物的

23、測(cè)定三、酶類抗原標(biāo)志物的測(cè)定酶及同工酶是最早出現(xiàn)和使用的腫瘤標(biāo)酶及同工酶是最早出現(xiàn)和使用的腫瘤標(biāo)志物之一。在腫瘤標(biāo)志酶中根據(jù)來源可將其志物之一。在腫瘤標(biāo)志酶中根據(jù)來源可將其分為兩類：分為兩類： 1.組織特異性酶：組織特異性酶：因組織損傷或變化而因組織損傷或變化而使儲(chǔ)存在細(xì)胞中的酶釋放，如前列腺特異性使儲(chǔ)存在細(xì)胞中的酶釋放，如前列腺特異性抗原等；抗原等； 2.非組織特異性酶非組織特異性酶：主要是腫瘤細(xì)胞代：主要是腫瘤細(xì)胞代謝加強(qiáng)。特別是無氧酵解增強(qiáng)。謝加強(qiáng)。特別是無氧酵解增強(qiáng)。酶類腫瘤標(biāo)志物酶類腫瘤標(biāo)志物 名名 稱稱 分子量及同工酶分子量及同工酶 相相 關(guān)關(guān) 腫腫 瘤瘤 醛縮酶醛縮酶 160ku

24、 3個(gè)個(gè) 肝肝 堿性磷酸酶堿性磷酸酶 95ku 7個(gè)個(gè) 骨、肝、白血病、肉瘤、卵巢等骨、肝、白血病、肉瘤、卵巢等 淀粉酶淀粉酶 45ku 胰腺等胰腺等 谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶 80ku 多種多種 肝、胃、結(jié)腸肝、胃、結(jié)腸 肌酸激酶肌酸激酶 83ku 4個(gè)個(gè) 前列腺、肺、結(jié)腸、卵巢等前列腺、肺、結(jié)腸、卵巢等 -谷氨酰轉(zhuǎn)移酶谷氨酰轉(zhuǎn)移酶 90ku 12個(gè)個(gè) 肝肝 乳酸脫氫酶乳酸脫氫酶 135ku 5個(gè)個(gè) 肝、淋巴瘤、白血病肝、淋巴瘤、白血病 神經(jīng)原特異性烯醇神經(jīng)原特異性烯醇化酶化酶 73ku 2個(gè)個(gè) 肺（小細(xì)胞）、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、肺（小細(xì)胞）、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、類癌、黑色素瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤類癌、黑色

25、素瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤 5-核苷酸酶核苷酸酶 6區(qū)帶區(qū)帶 肝肝 -L巖藻糖苷酶巖藻糖苷酶 230ku 8個(gè)個(gè) 肝肝 核糖核酸酶核糖核酸酶 2個(gè)個(gè) 卵巢、肺、大腸等卵巢、肺、大腸等 在酶標(biāo)志物分析中，腫瘤標(biāo)志同工酶可分在酶標(biāo)志物分析中，腫瘤標(biāo)志同工酶可分為三大類型：為三大類型：異位型同工酶：異位型同工酶：指某種瘤組織指某種瘤組織改變了自己的分泌特性，而去分泌表達(dá)了其它改變了自己的分泌特性，而去分泌表達(dá)了其它成年組織的同工酶的類型；成年組織的同工酶的類型；胚胎型同工酶：胚胎型同工酶：某些組織在腫瘤狀態(tài)時(shí)，使酶的同工酶譜退化某些組織在腫瘤狀態(tài)時(shí)，使酶的同工酶譜退化到胚胎時(shí)未分化狀態(tài)，而分泌出大量的胚胎期到

26、胚胎時(shí)未分化狀態(tài)，而分泌出大量的胚胎期的同工酶，這種變化往往與腫瘤的惡性程度成的同工酶，這種變化往往與腫瘤的惡性程度成正比；正比；胎盤型同工酶：胎盤型同工酶：有些腫瘤組織會(huì)分泌有些腫瘤組織會(huì)分泌出某些原屬胎盤階段的同工酶譜。出某些原屬胎盤階段的同工酶譜。 （一）前列腺特異性抗原（一）前列腺特異性抗原（PSA） PSA是是1979由由Wang等從前列腺組織中等從前列腺組織中分離出來的絲氨酸蛋白酶，分子量分離出來的絲氨酸蛋白酶，分子量34ku，PSA僅存在于前列腺上皮組織和精液內(nèi)，具僅存在于前列腺上皮組織和精液內(nèi)，具有糜蛋白酶樣和胰蛋白酶的活性，有糜蛋白酶樣和胰蛋白酶的活性，PSA具有具有高度的組

27、織特異性。高度的組織特異性。 【參考范圍】【參考范圍】男性：男性：2.5g/L（RIA法、法、ElA法）。法）。 【臨床意義】【臨床意義】 PSA是是前列腺癌前列腺癌的特的特異性標(biāo)志物，也是目前少數(shù)器官特異性腫異性標(biāo)志物，也是目前少數(shù)器官特異性腫瘤標(biāo)志物之一。前列腺癌是男性泌尿系統(tǒng)瘤標(biāo)志物之一。前列腺癌是男性泌尿系統(tǒng)的主要囊性腫瘤，前列腺癌患者血清的主要囊性腫瘤，前列腺癌患者血清PSA明顯增高，放療后療效顯著者，明顯增高，放療后療效顯著者，50%以上以上2個(gè)月內(nèi)血清個(gè)月內(nèi)血清PSA降至正常。故降至正常。故PSA測(cè)定測(cè)定可作為監(jiān)測(cè)前列腺癌病情變化和療效的重可作為監(jiān)測(cè)前列腺癌病情變化和療效的重要指

28、標(biāo)。要指標(biāo)。 （二）前列腺酸性磷酸酶（二）前列腺酸性磷酸酶（PAP） PAP是前列腺分泌的一種含有兩條肽鏈?zhǔn)乔傲邢俜置诘囊环N含有兩條肽鏈的糖蛋白酶，分子量的糖蛋白酶，分子量102ku，含糖量含糖量13%。在在pH5.0的酸性環(huán)境中活性最強(qiáng)，能水解各的酸性環(huán)境中活性最強(qiáng)，能水解各種有機(jī)磷酸酯。種有機(jī)磷酸酯。 【參考范圍】【參考范圍】4U/L（RIA、ELISA法）法） 【臨床意義】【臨床意義】 測(cè)定測(cè)定PAP診斷前列腺癌的診斷前列腺癌的特異性比特異性比PSA高，可達(dá)高，可達(dá)96%。但靈敏度較。但靈敏度較PSA低，低，PAP和和PSA聯(lián)合使用可提高診斷的聯(lián)合使用可提高診斷的陽性率。陽性率。 （三）

29、神經(jīng)原特異性烯醇化酶（三）神經(jīng)原特異性烯醇化酶（NSE） 烯醇化酶是催化糖原酵解途徑的酶。由烯醇化酶是催化糖原酵解途徑的酶。由3個(gè)不同的亞基個(gè)不同的亞基、 、 、， ，組成組成5種二聚體形式的種二聚體形式的同工酶同工酶、 、 、 、 、。 。亞基同工酶存在亞基同工酶存在于神經(jīng)原和神經(jīng)內(nèi)分泌組織，稱為于神經(jīng)原和神經(jīng)內(nèi)分泌組織，稱為NSE。NSE的分子量為的分子量為78ku 。細(xì)胞癌變時(shí)，細(xì)胞增細(xì)胞癌變時(shí)，細(xì)胞增殖周期加快，細(xì)胞內(nèi)的殖周期加快，細(xì)胞內(nèi)的NSE釋放入血增多。釋放入血增多。 【參考范圍】【參考范圍】0.6-5.4g/L。 【臨床意義】【臨床意義】 NSE是是神經(jīng)母細(xì)胞瘤神經(jīng)母細(xì)胞瘤和和

30、小細(xì)小細(xì)胞肺癌胞肺癌的標(biāo)記物。的標(biāo)記物。NSE作為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)志作為神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)志物，對(duì)該病的早期診斷具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。物，對(duì)該病的早期診斷具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。小細(xì)胞肺癌（小細(xì)胞肺癌（SCLC）是一種惡性程度高的神經(jīng)是一種惡性程度高的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤，約占肺癌的內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤，約占肺癌的25%30%，它可，它可表現(xiàn)神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的特性，有過量的表現(xiàn)神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的特性，有過量的NSE表達(dá)，表達(dá)，比其它肺癌和正常對(duì)照高比其它肺癌和正常對(duì)照高5-10倍以上。倍以上。SCLC患患者血清者血清NSE檢出的陽性率可高達(dá)檢出的陽性率可高達(dá)65%-100%，目，目前已公認(rèn)為前已公認(rèn)為NS

31、E可作為可作為SCLC高特異性、高靈敏高特異性、高靈敏性的腫瘤標(biāo)志物。性的腫瘤標(biāo)志物。 （四）（四）-L巖藻糖苷酶（巖藻糖苷酶（AFU） AFU是存在于血清中的一種溶酶體酸性水解是存在于血清中的一種溶酶體酸性水解酶，分子量酶，分子量230ku，廣泛分布于人體組織細(xì)胞、血廣泛分布于人體組織細(xì)胞、血液和體液中。液和體液中。 【參考范圍】【參考范圍】32490mol/L（化學(xué)法）?；瘜W(xué)法）。 【臨床意義】【臨床意義】AFU是是原發(fā)性肝癌原發(fā)性肝癌的一種新的診的一種新的診斷標(biāo)志物，廣泛分布于人體組織細(xì)胞、血液和體液斷標(biāo)志物，廣泛分布于人體組織細(xì)胞、血液和體液中，原發(fā)性肝癌患者血清中，原發(fā)性肝癌患者血清

32、AFU活力顯著高于其它各活力顯著高于其它各類疾患。類疾患。 目前，目前，AFU升高的機(jī)制不甚明了，可能有升高的機(jī)制不甚明了，可能有以下幾種原因：以下幾種原因： 1. 肝細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的壞死使溶酶體大量肝細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的壞死使溶酶體大量釋放入血；釋放入血； 2. 正常肝細(xì)胞的變性壞死可使攝取和清除正常肝細(xì)胞的變性壞死可使攝取和清除糖苷酶的功能下降；糖苷酶的功能下降； 3. 腫瘤細(xì)胞合成糖苷酶的功能亢進(jìn)；腫瘤細(xì)胞合成糖苷酶的功能亢進(jìn)； 4. 腫瘤細(xì)胞可能分泌某種抑制因子，抑制腫瘤細(xì)胞可能分泌某種抑制因子，抑制肝細(xì)胞對(duì)糖苷酶的清除能力或釋放某些刺激因肝細(xì)胞對(duì)糖苷酶的清除能力或釋放某些刺激因子，促進(jìn)肝

33、細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞本身合成糖苷酶。子，促進(jìn)肝細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞本身合成糖苷酶。四、激素類抗原標(biāo)志物的測(cè)定四、激素類抗原標(biāo)志物的測(cè)定當(dāng)具有分泌激素功能的細(xì)胞癌變時(shí)，就當(dāng)具有分泌激素功能的細(xì)胞癌變時(shí)，就會(huì)使所分泌的激素量發(fā)生異常。這稱為會(huì)使所分泌的激素量發(fā)生異常。這稱為正位正位激素異常激素異常。而在正常情況下不能生成激素的。而在正常情況下不能生成激素的那些細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞后所產(chǎn)生的激素，那些細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞后所產(chǎn)生的激素，或者是那些能產(chǎn)出激素的細(xì)胞癌變后，分泌或者是那些能產(chǎn)出激素的細(xì)胞癌變后，分泌出其它分泌細(xì)胞所產(chǎn)生的激素。出其它分泌細(xì)胞所產(chǎn)生的激素。稱為異位激稱為異位激素素。激素類腫瘤標(biāo)志物激素

34、類腫瘤標(biāo)志物激激 素素 性性 質(zhì)質(zhì) 相相 關(guān)關(guān) 腫腫 瘤瘤 兒茶酚胺類兒茶酚胺類 嗜鉻細(xì)胞嗜鉻細(xì)胞 促腎上腺皮質(zhì)激素促腎上腺皮質(zhì)激素 4.5ku 庫欣綜合征、肺（小細(xì)胞）庫欣綜合征、肺（小細(xì)胞） 抗利尿激素抗利尿激素 肺（小細(xì)胞）、原發(fā)性類癌等肺（小細(xì)胞）、原發(fā)性類癌等 降鈣素降鈣素 3.5ku 甲狀腺髓質(zhì)甲狀腺髓質(zhì) 生長(zhǎng)激素生長(zhǎng)激素 21ku 垂體腺瘤、腎、肺垂體腺瘤、腎、肺 HGG 45ku 胚胎絨毛膜、睪丸（非精原細(xì)胞癌）胚胎絨毛膜、睪丸（非精原細(xì)胞癌） 人胎盤催乳素人胎盤催乳素 22ku 滋養(yǎng)層、性腺、肺、乳腺滋養(yǎng)層、性腺、肺、乳腺 甲狀旁腺素甲狀旁腺素 肝、腎、乳腺、肺等肝、腎、乳腺

35、、肺等 催乳素催乳素 22ku 垂體腺瘤、腎、肺垂體腺瘤、腎、肺 胰高糖素胰高糖素 3ku 胰高糖素瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤胰高糖素瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤 （一）人絨毛膜促性腺激素（一）人絨毛膜促性腺激素（HCG）HCG是由胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞所分泌的一是由胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞所分泌的一類糖蛋白類激素類糖蛋白類激素，在正常妊娠婦女血中可，在正常妊娠婦女血中可以測(cè)出以測(cè)出HCG。HCG有有、 、兩個(gè)亞基，兩個(gè)亞基，-亞亞基的分子量約為基的分子量約為13000，-亞基的生物特性亞基的生物特性與卵泡刺激素（與卵泡刺激素（FSH）和黃體生成激素和黃體生成激素（LH）的的-亞基相同。亞基相同。-亞基的分子量約亞基的分子量約15000

36、，-亞基為特異性鏈，可被單克隆抗亞基為特異性鏈，可被單克隆抗體檢測(cè)，也是一個(gè)較好的標(biāo)志物。體檢測(cè)，也是一個(gè)較好的標(biāo)志物。 （二）降鈣素（二）降鈣素（CT） CT是由甲狀腺濾泡是由甲狀腺濾泡C細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞分泌的一種多肽激素，分子量多肽激素，分子量3.5ku。 【參考范圍】參考范圍】100ng/L 【臨床意義】臨床意義】CT是是甲狀腺髓樣癌甲狀腺髓樣癌的腫的腫瘤標(biāo)志物。肺癌、乳腺癌、胃腸道癌及嗜瘤標(biāo)志物。肺癌、乳腺癌、胃腸道癌及嗜鉻細(xì)胞瘤病人可因高血鈣或異位分泌使血鉻細(xì)胞瘤病人可因高血鈣或異位分泌使血清清CT增高增高。 （三）兒茶酚胺類及其衍生物（三）兒茶酚胺類及其衍生物兒茶酚胺類激素是由腎

37、上腺髓質(zhì)中的兒茶酚胺類激素是由腎上腺髓質(zhì)中的一些交感神經(jīng)節(jié)纖維末梢終止髓質(zhì)細(xì)胞一些交感神經(jīng)節(jié)纖維末梢終止髓質(zhì)細(xì)胞（又稱嗜鉻細(xì)胞）產(chǎn)生和分泌，包括腎上（又稱嗜鉻細(xì)胞）產(chǎn)生和分泌，包括腎上腺素（腺素（E）、）、去甲腎上腺素（去甲腎上腺素（NE）和多和多巴胺（巴胺（DA）等，它們既是激素又是神經(jīng)等，它們既是激素又是神經(jīng)遞質(zhì)。遞質(zhì)。 1.變腎上腺素變腎上腺素 變腎上腺素是兒茶酚變腎上腺素是兒茶酚胺的甲基化代謝產(chǎn)物，甲基化是在肝細(xì)胞胺的甲基化代謝產(chǎn)物，甲基化是在肝細(xì)胞微粒體中進(jìn)行，而兒茶酚胺的形成是在腎微粒體中進(jìn)行，而兒茶酚胺的形成是在腎上腺髓質(zhì)的嗜鉻細(xì)胞及交感神經(jīng)末梢處形上腺髓質(zhì)的嗜鉻細(xì)胞及交感神經(jīng)末

38、梢處形成。成。 【參考范圍】【參考范圍】0.30-1.50mol/24h尿。尿。變腎上腺素濃度增高是變腎上腺素濃度增高是分泌型嗜鉻細(xì)胞瘤分泌型嗜鉻細(xì)胞瘤的主要標(biāo)志物。的主要標(biāo)志物。 2.香草扁桃酸（香草扁桃酸（3-甲氧甲氧-4羥苦杏仁酸，羥苦杏仁酸，VMA） 是腎上腺素和去甲腎上腺素經(jīng)單胺氧是腎上腺素和去甲腎上腺素經(jīng)單胺氧化酶（化酶（MAO）和兒茶酚胺和兒茶酚胺-O-甲基轉(zhuǎn)移酶甲基轉(zhuǎn)移酶（COMT）的作用下，甲基化和脫氨基的的作用下，甲基化和脫氨基的降解產(chǎn)物。降解產(chǎn)物。VMA主要是從尿中排出。主要是從尿中排出。 【參考范圍】【參考范圍】成人成人5.0-35.0mol/24h 尿。尿。 【臨床意

39、義】【臨床意義】常被認(rèn)為是常被認(rèn)為是神經(jīng)母細(xì)胞神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)節(jié)瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤瘤、神經(jīng)節(jié)瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤的標(biāo)志物。約的標(biāo)志物。約有有70神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者均有神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者均有VMA增高，增高，在兒童的神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者中，在兒童的神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者中，VMA也是也是一項(xiàng)重要指標(biāo)。一項(xiàng)重要指標(biāo)。 VMA又可作為嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷首選又可作為嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷首選標(biāo)志物，但有時(shí)增高程度不穩(wěn)定，宜同時(shí)標(biāo)志物，但有時(shí)增高程度不穩(wěn)定，宜同時(shí)測(cè)定尿中兒茶酚胺和變腎上腺素。測(cè)定尿中兒茶酚胺和變腎上腺素。五、基因類標(biāo)志物的測(cè)定五、基因類標(biāo)志物的測(cè)定 隨著分子生物學(xué)的理論和技術(shù)的發(fā)展，隨著分子生物學(xué)的理論和技術(shù)的發(fā)展

40、，癌基因和抑癌基因的檢測(cè)已成為腫瘤臨床診癌基因和抑癌基因的檢測(cè)已成為腫瘤臨床診斷新一代的標(biāo)志物。斷新一代的標(biāo)志物。 （一）癌基因類腫瘤標(biāo)志物（一）癌基因類腫瘤標(biāo)志物癌基因或腫瘤基因是指在自然或?qū)嶒?yàn)條癌基因或腫瘤基因是指在自然或?qū)嶒?yàn)條件下，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的基因。件下，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的基因。從目前的資料分析，引起細(xì)胞惡變功能的基從目前的資料分析，引起細(xì)胞惡變功能的基因已達(dá)因已達(dá)30余種。余種。 常見癌基因類腫瘤標(biāo)志物常見癌基因類腫瘤標(biāo)志物 癌基因癌基因 細(xì)胞株或細(xì)胞株或原發(fā)腫瘤原發(fā)腫瘤 相相 關(guān)關(guān) 腫腫 瘤瘤 N-myc 細(xì)胞株細(xì)胞株 神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、肺癌神經(jīng)

41、母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、肺癌（小細(xì)胞）（小細(xì)胞） 原發(fā)腫瘤原發(fā)腫瘤 神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、橫紋神經(jīng)母細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤肌肉瘤 C-erb-2 原發(fā)腫瘤原發(fā)腫瘤 胃腺癌、腎腺癌、乳腺癌胃腺癌、腎腺癌、乳腺癌 N-ras 細(xì)胞株細(xì)胞株 胃腺癌胃腺癌 C-myc 細(xì)胞株細(xì)胞株 乳腺癌、胃腺癌、肺癌（巨細(xì)胞）乳腺癌、胃腺癌、肺癌（巨細(xì)胞） 原發(fā)腫瘤原發(fā)腫瘤 急性粒細(xì)胞白血病、結(jié)腸腺癌急性粒細(xì)胞白血病、結(jié)腸腺癌 H-ras 細(xì)胞株細(xì)胞株 黑色瘤黑色瘤 原發(fā)腫瘤原發(fā)腫瘤 膀胱癌、皮膚鱗癌膀胱癌、皮膚鱗癌 K-ras 細(xì)胞株細(xì)胞株 結(jié)腸癌、骨肉瘤結(jié)腸癌、骨肉瘤 原發(fā)腫瘤原發(fā)腫瘤 膀

42、胱癌、胰腺癌、卵巢癌膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌 1.ras基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物 ras基因基因表達(dá)產(chǎn)物是由表達(dá)產(chǎn)物是由188個(gè)或個(gè)或189個(gè)氨基酸組成的個(gè)氨基酸組成的21ku蛋白質(zhì)，故蛋白質(zhì)，故ras基因編碼產(chǎn)物為基因編碼產(chǎn)物為p21ras蛋白。其本質(zhì)為蛋白。其本質(zhì)為G蛋白，具有蛋白，具有GTP酶活性，酶活性，可水解可水解GTP生成生成GDP。當(dāng)機(jī)體發(fā)生腫瘤時(shí)，編碼當(dāng)機(jī)體發(fā)生腫瘤時(shí)，編碼p21ras蛋白的蛋白的第第12、13及及61位氨基酸的核苷酸可以發(fā)生位氨基酸的核苷酸可以發(fā)生點(diǎn)突變，突變型的點(diǎn)突變，突變型的p21ras蛋白不具有蛋白不具有GTP酶酶活化，無法使活化，無法使G

43、TP水解為水解為GDP。另外尚可另外尚可在腫瘤中發(fā)現(xiàn)在腫瘤中發(fā)現(xiàn)p21ras蛋白表達(dá)過度。蛋白表達(dá)過度。rasras基因檢測(cè)的方法基因檢測(cè)的方法（1）PCR-SSCP（單鏈構(gòu)象多態(tài)性）、單鏈構(gòu)象多態(tài)性）、DGGE（變性梯度凝膠電泳，）、變性梯度凝膠電泳，）、PCR-ASO（等位基因特異性寡核苷酸雜交，）和等位基因特異性寡核苷酸雜交，）和測(cè)序技術(shù)：探測(cè)點(diǎn)突變。測(cè)序技術(shù)：探測(cè)點(diǎn)突變。 （2）免疫組織化學(xué)：用）免疫組織化學(xué)：用RAP-5單抗。單抗。 （3）Southern印跡法及印跡法及Northern印跡法。印跡法。 （4）ELISA法及法及Western印跡法。印跡法。 ras基因家族與腫瘤的關(guān)

44、系 腫瘤類型腫瘤類型 臨臨 床床 意意 義義 乳腺癌乳腺癌 c-Ha-ras基因基因mRNA水平升高與惡性腫瘤進(jìn)展期中水平升高與惡性腫瘤進(jìn)展期中p21ras水平相關(guān)水平相關(guān) 結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌 50的腫瘤出現(xiàn)的腫瘤出現(xiàn)c-Ki-ras 基因點(diǎn)突變基因點(diǎn)突變 肺癌肺癌 20-30腫瘤出現(xiàn)腫瘤出現(xiàn)ras基因家族成員點(diǎn)突變，其中基因家族成員點(diǎn)突變，其中c-Ki-rad基因點(diǎn)突變與預(yù)后不良相關(guān)基因點(diǎn)突變與預(yù)后不良相關(guān) 胰腺癌胰腺癌 90左右的腫瘤出現(xiàn)左右的腫瘤出現(xiàn)c-Ki-ras基因點(diǎn)突變基因點(diǎn)突變 胃癌胃癌 在惡性腫瘤中在惡性腫瘤中p21表達(dá)水平明顯升高，表達(dá)水平明顯升高，c-Ha-ras基因編基因編

45、碼第碼第12位氨基酸突變與腫瘤轉(zhuǎn)移及預(yù)后不良相關(guān)位氨基酸突變與腫瘤轉(zhuǎn)移及預(yù)后不良相關(guān) 髓性白血病髓性白血病 10-50的腫瘤中出現(xiàn)的腫瘤中出現(xiàn)c-N-ras基因突變基因突變 膀胱癌膀胱癌 部分病例可出現(xiàn)部分病例可出現(xiàn)c-Ha-ras基因點(diǎn)突變及基因點(diǎn)突變及p21ras表達(dá)過度表達(dá)過度 2.myc基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物基因家族及其表達(dá)產(chǎn)物 1997年年Duesbery等發(fā)現(xiàn)等發(fā)現(xiàn)myc癌基因與癌基因與禽類禽類MC29病毒具有相似性。病毒具有相似性。Myc基因家族基因家族共有共有6成員：成員：C-myc、N-myc、L-myc、P-myc、R-myc及及B-myc。其中其中C-myc、N-myc及及

46、L-myc與一些人類腫瘤相關(guān)。當(dāng)機(jī)體發(fā)與一些人類腫瘤相關(guān)。當(dāng)機(jī)體發(fā)生腫瘤時(shí)，生腫瘤時(shí)，myc基因家族成員可以發(fā)生染基因家族成員可以發(fā)生染色體基因易位、基因擴(kuò)增以及表達(dá)過度。色體基因易位、基因擴(kuò)增以及表達(dá)過度。 mycmyc基因檢測(cè)的方法基因檢測(cè)的方法（1）標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞核型分析：基因易位。）標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞核型分析：基因易位。（2）原位雜交：）原位雜交：ELISA法。法。（3）Southern印跡法及印跡法及Northern印跡法。印跡法。（4）RT-PCR方法。方法。mycmyc基因家族成員與腫瘤的關(guān)系基因家族成員與腫瘤的關(guān)系 腫瘤種類腫瘤種類 臨臨 床床 意意 義義 神經(jīng)母細(xì)胞瘤神經(jīng)母細(xì)胞瘤 在在20的

47、腫瘤中有的腫瘤中有N-myc基因擴(kuò)增基因擴(kuò)增 乳腺癌乳腺癌 6-57的腫瘤中可見的腫瘤中可見c-myc基因擴(kuò)增?；驍U(kuò)增。c-myc基因基因mRNA水平升高與預(yù)后不良相關(guān)水平升高與預(yù)后不良相關(guān) 結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌 10-20的腫瘤中可見的腫瘤中可見c-myc基因擴(kuò)增基因擴(kuò)增 小細(xì)胞肺癌小細(xì)胞肺癌 30腫瘤可見腫瘤可見L-myc基因過度表達(dá)基因過度表達(dá) 宮頸癌宮頸癌 c-myc過度表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)過度表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān) （二）抑癌基因（二）抑癌基因機(jī)體中有一類對(duì)正常細(xì)胞增殖起負(fù)調(diào)節(jié)作用的機(jī)體中有一類對(duì)正常細(xì)胞增殖起負(fù)調(diào)節(jié)作用的基因稱為抑癌基因。當(dāng)這類基因丟失、失活或變異基因稱為抑癌基因。當(dāng)這類基

48、因丟失、失活或變異時(shí)，往往會(huì)促使細(xì)胞失控而呈惡性生長(zhǎng)。時(shí)，往往會(huì)促使細(xì)胞失控而呈惡性生長(zhǎng)。 常見抑癌基因類腫瘤標(biāo)志物常見抑癌基因類腫瘤標(biāo)志物抑癌基因抑癌基因 染染 色色 體體 相相 關(guān)關(guān) 腫腫 瘤瘤 RB 13q14 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、肺癌肺癌 WT1 11p13 Wilms腫瘤腫瘤 NF-1 17q11.1q 神經(jīng)纖維瘤神經(jīng)纖維瘤 DCC 13q21.3 結(jié)腸癌結(jié)腸癌 P53 17p21-1q 肺癌、結(jié)腸癌、胃癌肺癌、結(jié)腸癌、胃癌 Erb-B-2 7p 乳腺癌乳腺癌 1.1.RBRB基因及其表達(dá)產(chǎn)物基因及其表達(dá)產(chǎn)物 1986年年Friend等成功

49、地克隆了等成功地克隆了RB基因?；颉B基因定位于第基因定位于第13號(hào)染色體的號(hào)染色體的13q14區(qū)，共有區(qū)，共有27個(gè)個(gè)外顯子，外顯子，26個(gè)內(nèi)含子，個(gè)內(nèi)含子，DNA長(zhǎng)度約長(zhǎng)度約200kb。其編其編碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物為碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物為p110。當(dāng)機(jī)體發(fā)生腫瘤時(shí)，當(dāng)機(jī)體發(fā)生腫瘤時(shí)，RB基因的主要變化形式基因的主要變化形式有：缺失、突變、甲基化、表達(dá)失活及與病毒和有：缺失、突變、甲基化、表達(dá)失活及與病毒和細(xì)胞癌蛋白結(jié)合引起功能性失活。細(xì)胞癌蛋白結(jié)合引起功能性失活。 RBRB基因檢測(cè)的方法基因檢測(cè)的方法 （1）PCR-SSCP、DGGE、PCR-ASO及測(cè)序及測(cè)序技術(shù)：檢測(cè)點(diǎn)突變。技術(shù)：檢測(cè)點(diǎn)突變。

50、（2）PR-PCR、PCR。（3）PCR-RFLP限制片段長(zhǎng)度多態(tài)性。限制片段長(zhǎng)度多態(tài)性。 RBRB基因與腫瘤的關(guān)系基因與腫瘤的關(guān)系（1）RB基因突變約見于基因突變約見于40的視網(wǎng)膜母細(xì)胞的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤。瘤。（2）RB基因還與成骨細(xì)胞肉瘤、軟組織肉瘤、基因還與成骨細(xì)胞肉瘤、軟組織肉瘤、小細(xì)胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、食管癌、卵巢癌小細(xì)胞肺癌、乳腺癌、前列腺癌、食管癌、卵巢癌及膀胱癌有關(guān)及膀胱癌有關(guān) 2.2.p53p53基因及其產(chǎn)物基因及其產(chǎn)物 1981年年Crawford等發(fā)現(xiàn)了等發(fā)現(xiàn)了p53基因，基因，并認(rèn)為其為癌基因。以后并認(rèn)為其為癌基因。以后Hinds、Finlay等通過研究發(fā)現(xiàn)傳染了等通過研究發(fā)現(xiàn)傳染了myc或或ras癌基因癌基因的細(xì)胞中，若存在野生型的細(xì)胞中，若存在野生型p53基因，則出基因，則出現(xiàn)生長(zhǎng)抑制。因此提出現(xiàn)生長(zhǎng)抑制。因此提出p53基因?qū)儆谝职┗驅(qū)儆谝职┗??；颉?P53基因定位于第基因定位于第17號(hào)染色體號(hào)染色體17p13區(qū)，區(qū)，由由11個(gè)外顯子和個(gè)外顯子和10個(gè)內(nèi)含子組成，編碼個(gè)內(nèi)含子組成，編碼393個(gè)個(gè)氨基酸殘基的