有機分析前沿聯(lián)用技術(shù)及應(yīng)用

1、有機分析前沿：聯(lián)用技術(shù)及應(yīng)用 2011年年3月月主要內(nèi)容主要內(nèi)容n一、概述一、概述n二、儀器基本結(jié)構(gòu)二、儀器基本結(jié)構(gòu)n三、基本術(shù)語三、基本術(shù)語n四、應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測四、應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測一、概述一、概述1、鑒定（定性）面臨的挑戰(zhàn)、鑒定（定性）面臨的挑戰(zhàn)n傳統(tǒng)色譜用保留時間傳統(tǒng)色譜用保留時間n色相的雙柱色相的雙柱n保留值保留值n有很多問題有很多問題n專用檢測器：聯(lián)用的專用檢測器：聯(lián)用的技術(shù)，在有傳統(tǒng)的優(yōu)技術(shù)，在有傳統(tǒng)的優(yōu)點，還保證了定性的點，還保證了定性的更科學(xué)：質(zhì)譜檢測器更科學(xué)：質(zhì)譜檢測器（MSD）（可與氣）（可與氣液相聯(lián)用液相聯(lián)用GC-MS，LC-MS）；二極管陣）；二極管陣列檢測器（利用

2、分析列檢測器（利用分析物的紫外可見光譜差物的紫外可見光譜差異）；紅外檢測器異）；紅外檢測器2、對色質(zhì)聯(lián)用的理解、對色質(zhì)聯(lián)用的理解n站在色譜儀的角度來站在色譜儀的角度來講，質(zhì)譜也是相同的講，質(zhì)譜也是相同的檢測器，質(zhì)譜檢測器檢測器，質(zhì)譜檢測器本身根據(jù)原理有四極本身根據(jù)原理有四極桿、離子阱、飛行質(zhì)桿、離子阱、飛行質(zhì)譜等譜等n從質(zhì)譜儀的角度來講從質(zhì)譜儀的角度來講色譜儀是一個進樣器，色譜儀是一個進樣器，它可以是氣相色譜也它可以是氣相色譜也可是液相色譜等可是液相色譜等GC-MS的應(yīng)用的應(yīng)用n熱穩(wěn)定性好熱穩(wěn)定性好n小分子量小分子量n高揮發(fā)性高揮發(fā)性LC/MS的應(yīng)用的應(yīng)用n難揮發(fā)化合物的結(jié)構(gòu)分析難揮發(fā)化合物的

3、結(jié)構(gòu)分析n極性化合物的結(jié)構(gòu)分析極性化合物的結(jié)構(gòu)分析n熱不穩(wěn)定化合物的結(jié)構(gòu)分析熱不穩(wěn)定化合物的結(jié)構(gòu)分析n大分子量聚合、生物樣品的結(jié)構(gòu)分析大分子量聚合、生物樣品的結(jié)構(gòu)分析LC/MS聯(lián)用中的難度聯(lián)用中的難度n1、從高效液相色譜流出的化合物存在于、從高效液相色譜流出的化合物存在于大氣壓條件下的溶液之中。大氣壓條件下的溶液之中。n2、質(zhì)譜檢測器是高真空、質(zhì)譜檢測器是高真空n液質(zhì)聯(lián)機的接口必須解決：液質(zhì)聯(lián)機的接口必須解決：n 去溶劑化去溶劑化n 保留樣品保留樣品n 電離化合物電離化合物1898 W. Wien 發(fā)現(xiàn)帶正電荷的離子束在磁場中發(fā)生偏轉(zhuǎn)。1910 J. J. Thompson 使用簡單的電場-磁

4、場組合裝置, 獲得了拋 物線族的質(zhì)譜, 證明了20Ne, 22Ne兩種同位 素的存在。1918 A. J. Dempster 采用電子轟擊技術(shù)使分子離子化。 1919 F. W. Aston 制得了第一臺速度聚焦質(zhì)譜儀。提出每種同 位素的質(zhì)子和中子在結(jié)合成原子核時, 具有 特定的質(zhì)量虧損(并非整數(shù)值)。 1942 商品MS出現(xiàn), 用于石油精煉和橡膠工業(yè)。3、質(zhì)譜發(fā)展史、質(zhì)譜發(fā)展史質(zhì)譜不屬波譜范圍質(zhì)譜圖與電磁波的波長和分子內(nèi)某種物理量 的改變無關(guān)質(zhì)譜是分子離子及碎片離子的質(zhì)量與其相對強度的譜, 譜圖與分子結(jié)構(gòu)有關(guān) 質(zhì)譜法進樣量少, 靈敏度高, 分析速度快質(zhì)譜是唯一可以給出分子量, 確定分子式的方

5、法, 而分子式的確定對化合物的結(jié)構(gòu)鑒定是至關(guān)重要的。 二、基本原理和結(jié)構(gòu)二、基本原理和結(jié)構(gòu)計算機數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)真空系統(tǒng)加速區(qū)進樣系統(tǒng)離子源質(zhì)量分析器檢測器Sample inlet質(zhì)譜計框圖IonisationsourceIon separationDetectorOutput1、進樣、進樣Sample Introduction:Liquid Chromatography-MS (LC-MS)nDirect infusion of sample in solutionnSyringe pump: slow steady infusionnOutput from HPLCnSeparation an

6、d identification of componentsnVast majority of solution is solventnMust remove solvent to “see” analytenHistorically: extra pumping and heatingnApplicable to electrospray ionisationnESI: see later電子轟擊電離 Electron Impact Ionization, EI化學(xué)離子化 Chemical Ionization, CI場電離，場解吸 Field Ionization FD, Field De

7、sorption FD快原子轟擊 Fast Atom Bombardment, FAB基質(zhì)輔助激光解析電離 Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization, MALDI電噴霧電離 Electrospray Ionization, ESI大氣壓化學(xué)電離 Atmospheric Pressure Chemical Ionization, APCI2、離子化的方法、離子化的方法質(zhì)譜的離子源質(zhì)量分析器等要求要高真空質(zhì)譜的離子源質(zhì)量分析器等要求要高真空: : 101044 10 1055 Pa Pa和和101055 10 1066PaPa。主要是保證離子基本不與其

8、它離子和分子碰撞主要是保證離子基本不與其它離子和分子碰撞, ,有足夠壽命有足夠壽命, ,這樣才能保證被質(zhì)量分析器和檢這樣才能保證被質(zhì)量分析器和檢測器捕捉到足夠的數(shù)量測器捕捉到足夠的數(shù)量, ,同時避免引起額外的同時避免引起額外的離子分子反應(yīng)，改變裂解模型，使譜圖復(fù)雜離子分子反應(yīng)，改變裂解模型，使譜圖復(fù)雜化，如果有空氣存在，離子源燈絲壽命會非常化，如果有空氣存在，離子源燈絲壽命會非常短，還容易引起在高壓下的加速離子產(chǎn)生放電。短，還容易引起在高壓下的加速離子產(chǎn)生放電。3、為什么質(zhì)譜需要高真空?真空系統(tǒng)：真空系統(tǒng)：2級真空：級真空：n機械泵和渦輪分子泵機械泵和渦輪分子泵n機械泵一般時前級真空，也就是在

9、機械機械泵一般時前級真空，也就是在機械泵把真空降到一定水平后才啟動渦輪分泵把真空降到一定水平后才啟動渦輪分子泵，以保護分子泵。子泵，以保護分子泵。n所以儀器從大氣壓到真空合適的狀態(tài)一所以儀器從大氣壓到真空合適的狀態(tài)一般要經(jīng)過一段時間的。般要經(jīng)過一段時間的。三GC-MS 分子質(zhì)量精確測定與化合物結(jié)構(gòu)分析的重要工具；第一臺質(zhì)譜儀：1912年； 早期應(yīng)用早期應(yīng)用：原子質(zhì)量、同位素相對豐度等； 40年代年代：高分辨率質(zhì)譜儀出現(xiàn)，有機化合物結(jié)構(gòu)分析； 60年代末年代末：色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀出現(xiàn)，有機混合物分離分析； 促進天然有機化合物結(jié)構(gòu)分析的發(fā)展； 同位素質(zhì)譜儀同位素質(zhì)譜儀；無機質(zhì)譜儀無機質(zhì)譜儀；有機質(zhì)譜

10、儀有機質(zhì)譜儀； m/z15294357859911314271EI源 能量較高的電子與樣品分子碰撞，發(fā)生分子-離子反應(yīng)，按照一定規(guī)律形成一系列的不同質(zhì)量/電荷比的離子EI： （ ELECTRON IONIZATION）特點70eV下，電子轟擊后得到的碎片比較 穩(wěn)定，可以在不同的時間和不同的儀器上實現(xiàn)比較：譜庫檢索。目前比較應(yīng)用廣泛的是：NIST（National Institute of Science and Technology）庫：64K張譜圖NIST/EPA/NIH庫：129K張譜圖Wiley庫：275K（可能包括不同來源的質(zhì)譜圖，內(nèi)容為相同化合物） CI（Chemical Impac

11、t） ReactGas：一般為甲烷、氨氣、正丁烷等。 反映氣的作用是讓高能的電子首先與反映氣碰撞，然后再與樣品發(fā)生分子-離子反應(yīng)，產(chǎn)生的碎片相對較少，稱為一種更軟的電離。質(zhì)量分析器質(zhì)量分析器是質(zhì)譜儀的核心部件，因此常以質(zhì)量分析器的類型來命名一臺質(zhì)譜儀。nSeparate ions according to m/z rationFive basic types of analyser:1) Magnetic sector (electrostatic)2) Quadrupole3) Ion traps4) Time of flight5) FTICR質(zhì)量分析器 Mass AnalysersMas

12、s Analysers:Factors to ConsidernUpper mass limit:nHighest m/z that can be detectednMay be offset by multiple chargesnResolution:nDistinct signals for similar m/z ratiosnTransmission:nRatio of ions reaching detector: ions producednCostMass Analysers:Resolution (Resolving Power)nAbility to resolve two

13、 signals of similar m/znResolved if valley is 10%nHigher resolution: greater accuracyne.g. R=20,000:Separatem/z 100.0000 from m/z 100.0050nAccuracy needed:nHigh Resolution Mass Spectrometry (HRMS)nDetermine elemental composition of an ionnVital to confirm structureMass Analysers:Calculation of Resol

14、ution: RResolution =MassMass differenceRelative abundance %50100499502m/zM1500M2501R = M/DMM = M1M2 (500)DM = M2-M1 (1)R = 500/1 = 500QUDRAPOLE ：四極桿質(zhì)量分析器目前臺式質(zhì)譜中應(yīng)用最多的一種。我們化學(xué)實驗中心的氣質(zhì)聯(lián)用就是四級桿質(zhì)量分析器。四極桿Quadrupole Mass Analyzer+ Ions scanned by varying the DC/RF voltages across the quadrupole rodsMass Analy

15、sers:Quadrupole Mass AnalysersnRelatively cheap and compactnLow (unit) resolutionnR 2,000nUpper mass limit of m/z 4,000nCan be offset by use of ESI (multiple charges)nSimple to operate and controlnSimple interfacing with inlet systemsnGC, DIP, etc.nWorkhorses of mass spectrometryMass Analysers: Quad

16、rupole:Generating The Mass SpectrumnDC and RF voltages cause ion oscillationnStable oscillation: ions pass through (detected)nUnstable oscillation: discharged (not detected)nVary DC and RF to detect each m/z in turnnGenerates mass spectrumnUsed for low MW simple organicsnHRMS not possible: R 2-4,000

17、nUnit (Dalton) resolution onlynInterfaced with GC: swift, reliable analysis離子阱（離子阱（Ion Trap Mass Analysers）nType of quadrupole mass analysernSimilar resolution of 2-4,000nIon is trapped in an electromagnetic fieldnIn a stable oscillationnField strength variednUnstable oscillation: ion ejected and de

18、tectednVary field strength: scan for all m/znGenerate mass spectrumnMS-MS and MSn possible離子阱質(zhì)量分析器 特定m/z離子在阱內(nèi)一定軌道上穩(wěn)定旋轉(zhuǎn)，改變端電極電壓，不同m/z離子飛出阱到達檢測器；離子漂移管-飛行時間質(zhì)譜計（Time of Fligh MS, TOFMS） TOFMS的核心部分是一個無場的離子漂移管 加速后的離子具有相同的動能 zVmv2212/1)2(mzVv m/z小的離子，漂移運動的速度快，最先通過漂移管，到達檢測器。 m/z大的離子，漂移運動的速度慢，最后通過漂移管，到達檢測器。

19、檢測通過漂移管的時間( t )及其相應(yīng)的信號強度，可得到質(zhì)譜圖，t為 或s數(shù)量級。 適合于生物大分子，靈敏度高，掃描速度快，結(jié)構(gòu)簡單，分辨率隨m/z的增大而降低。 飛行時間質(zhì)量分析器Mass Analysers:Time of Flight (TOF)nDeveloped in 1950snPopularised in 1980snAdvantage: no upper mass limitnDisadvantage: poor resolutionnR2-5,000nTime between ion generation & detectionnApproximately 10-7

20、secondsnVery fast electronics requirednVery low maintenancenIt is just an empty tube!Mass Analysers:Schematic Diagram of a TOFnAllowed to drift to detectorField free regionnIons accelerated by electric fieldIon acceleration regionMass Analysers:TOF: Determining m/z RationAssume all ions have same KE

21、 (filters)nKinetic Energy = Electrostatic Energymv2 = zV v2 = 2zV/mnTime taken to reach detector t =d/vnd = distance travelled, v = velocity t2 = d2/v2 = md2/2zV m/z = 2Vt2 /d2Mass Analysers:Time of Flight ReflectronnImproves resolution of TOFnR5-20,000 (high enough for most HRMS)nIons generated and

22、 accelerated as TOFnIn field free region the ions are “reflected”nSlower (less energetic) ions penetrate reflecting field less: quick turn aroundnFaster (more energetic) ions penetrate reflecting field more: slow turn aroundnIons of same m/z: detected at same instantMass Analysers:Schematic of a TOF

23、 ReflectronnReflectron: KE filter: improved resolutionIon acceleration regionField free region檢測器檢測器Ion Detectionn電子倍增器Electron multiplier n光電倍增管and scintillation counter5.1 電子倍增管（電子倍增管（Electron Multiplier）nIon collides with dynode nBeryllium/coppernCauses emission of electronsnRepeated 10-20 timesn

24、Current gain 106nCurrent is then measurednSensitive: single ion detectionnLifetime of 1-2 years5.2 光電倍增管（閃爍計數(shù)器光電倍增管（閃爍計數(shù)器Scintillation Counter）nIon strikes dynodenBeryllium/coppernElectrons then hit phosphorus screennLight signal amplified by 106nPhotomultiplier tubesnSensitive: single ion detection

25、nLifetime of approximately 5 years6、數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)采集n6.1全掃描模式（全掃描模式（SCAN），主要用來做），主要用來做未知化合物的定性分析未知化合物的定性分析n6.2選擇離子掃描模式（選擇離子掃描模式（SIM），主要用），主要用于目標(biāo)化合物檢測和復(fù)雜混合物中雜質(zhì)于目標(biāo)化合物檢測和復(fù)雜混合物中雜質(zhì)的定量分析，可大大提高靈敏度。的定量分析，可大大提高靈敏度。 三、基本術(shù)語三、基本術(shù)語1、質(zhì)譜術(shù)語 基峰: RI 100 , RA 100 質(zhì)荷比: m / z , z = 1, z = 2; m的計算：組成離子的各元素同位素的質(zhì)子和中子之和。 精確質(zhì)量: 精確質(zhì)

26、量的計算基于天然豐度最大的同位素 的精確原子量，如： 1H 1.007825 、 12C 12.000000、 14N 14.003074 、 16O 15.994915 精確度與質(zhì)譜計的分辨率有關(guān)。 質(zhì)譜圖質(zhì)譜圖 橫坐標(biāo)為離子的質(zhì)核比，縱坐標(biāo)為離子相對橫坐標(biāo)為離子的質(zhì)核比，縱坐標(biāo)為離子相對強度或相對豐度。強度或相對豐度。 乙醇的質(zhì)譜圖如下：乙醇的質(zhì)譜圖如下：分子離子: M+ , M - e M+ z=1時， 其m/z等于天然豐度最大的同位素的原子量之和。 碎片離子：廣義上指除分子離子以外的所有離子。 重排離子：經(jīng)過重排，斷裂一個以上化學(xué)鍵所生成的離子。 母離子與子離子：任何一個離子進一步裂解

27、為質(zhì)荷比較小 的離子，前者是后者的母離子或前體離 子，后者是前者的子離子。 質(zhì)譜中的離子 奇電子離子OE+：帶單電荷的離子，如 M+, A+, C+ 在質(zhì)譜解析中，奇電子離子很重要，因質(zhì)荷比較小的奇電子離子是由質(zhì)荷比較大的奇電子離子裂解生成的。 偶電子離子EE+： 帶雙電荷的離子，如 B+, D+ , E+, 多電荷離子： 如 z=2的離子，存在于穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)中。 準(zhǔn)分子離子： MH+, M-H+同位素離子： 非單一同位素的元素在電離過程中產(chǎn)生同 位素離子，同位素離子構(gòu)成同位素峰簇。 亞穩(wěn)離子 離子在離子源的運動時間106s數(shù)量級, 壽命105s，足以到達檢測器。 壽命106-105 s的離子，

28、從離子源出口到達檢測器之前裂解并被記錄的離子稱亞穩(wěn)離子，以m*表示. m*=m22/m1 亞穩(wěn)離子的峰有不同程度的擴散，達23質(zhì)量單位，這是因為m1+ 裂解時，部分內(nèi)能轉(zhuǎn)化為動能。 在質(zhì)譜解析中，m*可提供前體離子和子離子之間的關(guān)系。 分子離子或準(zhǔn)分子離子峰 質(zhì)譜中分子離子峰的識別及分子式的確定是至關(guān)重要的.分子離子峰的識別 假定分子離子峰: 高質(zhì)荷比區(qū),RI 較大的峰(注意：同位素峰) 判斷其是否合理: 與相鄰碎片離子(m/z較小者)之間關(guān)系是否 合理 m1231516171820丟失HH2H2, HCH3OOHH2O NH2 m = 4-14, 21-24, 37-38通常認為是不合理丟失

29、判斷其是否符合N律 不含N或含偶數(shù)N的有機分子, 其分子離子峰的m/z為偶數(shù)。含奇數(shù)N的有機分子, 其分子離子峰的m/z為奇數(shù)。 使用CI電離時，可能出現(xiàn) M+H, MH, M+C2H5, M+C3H5 使用FAB時，可出現(xiàn) M+H, MH, M+Na, M+K 較高分子量的化合物，可能同時生成 M+H, M+2H, M+3H等 分子離子峰的相對強度分子離子峰的相對強度( (RI RI ) ) 不同的電離方式, 其分子離子的RI不等。 不穩(wěn)定的分子, 大分子, 其分子離子的RI較弱。 穩(wěn)定的分子, 大共軛分子, 其分子離子的RI較強。 大約20%的分子離子峰弱或不出現(xiàn). 其大致規(guī)律如下: 采用

30、EI:芳香族化合物 共軛多烯 脂環(huán)化合物 低分子鏈烴, 某些含硫化合物 羰基化合物(醛, 酮, 酸, 酯, 酰氯, 酰胺)分子離子峰不出現(xiàn)或弱 脂肪族醇類, 胺類, 硝基化合物等 分子離子往往不出現(xiàn) 2、譜庫檢索：、譜庫檢索：n 定性的依據(jù)（掃描模式定性的依據(jù)（掃描模式scan）n常用商品庫常用商品庫 NIST庫、 農(nóng)藥庫 Wiley庫四、在農(nóng)殘檢測中的應(yīng)用四、在農(nóng)殘檢測中的應(yīng)用nGB/T 5009.146-2008植物性食品中有植物性食品中有機氯及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多種殘留的測機氯及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多種殘留的測定定nGB/T 5009.162-2008 動物性食品中動物性食品中有機氯和擬除蟲菊

31、酯農(nóng)藥多組分殘留量有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分殘留量的測定（第一法的測定（第一法GC-MS）1、 GB/T5009.146-2008nGB/T5009.146-2008（3、4）植）植物性食品有機氯及擬除蟲菊酯的多種物性食品有機氯及擬除蟲菊酯的多種農(nóng)藥殘留的測定農(nóng)藥殘留的測定n40種有機氯和擬除蟲菊酯種有機氯和擬除蟲菊酯n毛細柱，毛細柱，DB-5MS， 30m.25mmnGC-MSn分析條件：分析條件：He氣：氣：1.2ml/min,不分不分流進樣口、接口溫度：流進樣口、接口溫度：280n柱溫：程序升溫柱溫：程序升溫50-180-270 50-180-270 n檢測方式檢測方式SIMSIM，一

32、個定量離子加，一個定量離子加2 2至至3232個定性離子個定性離子樣品處理流程樣品處理流程n25g丙酮提取，旋蒸，丙酮提取，旋蒸，GPC凈化，過活凈化，過活性碳性碳SPE柱，濃縮，乙酯乙酯定容至柱，濃縮，乙酯乙酯定容至2mln檢出限檢出限0.005-0.0125mg/kgn回收率在回收率在68-120%2、 GB/T5009.162-2008nGB/T5009.162-2008動物性食品中動物性食品中有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分殘留有機氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分殘留量的測定（第一法量的測定（第一法GC-ECD）n36種有機氯和擬除蟲菊酯，使用種有機氯和擬除蟲菊酯，使用13C-六氯六氯苯和苯和13

33、C-滅蟻靈為同位素內(nèi)標(biāo)滅蟻靈為同位素內(nèi)標(biāo)n毛細柱，毛細柱，CP-sil 8或等效，或等效， 30m.25mmnGC-MSn分析條件：分析條件：He氣：氣：6psi,不分流不分流n進樣口：進樣口：230;接口溫度接口溫度285；離子源；離子源250250n柱溫：程序升溫柱溫：程序升溫50-150-185-280 n檢測方式檢測方式SIM，二個定量離子，二個定量離子樣品處理流程樣品處理流程n1-20g提取方式因樣品不同而不同，提取方式因樣品不同而不同，GPC凈化，濃縮，正己烷至凈化，濃縮，正己烷至1mln檢出限檢出限0.0005-0.002mg/kg3、 SN/T1978-2007進出口食進出口食

34、品中狄氏劑和異狄氏劑殘留的測品中狄氏劑和異狄氏劑殘留的測定定 氣質(zhì)法氣質(zhì)法4、SN/T 2149-2008進出口食品中解草嗪、莎稗磷、二丙烯草胺等種農(nóng)藥殘留量的檢測方法氣相色譜質(zhì)譜法n多農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)配制：標(biāo)準(zhǔn)分組多農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)配制：標(biāo)準(zhǔn)分組n儲備液：標(biāo)準(zhǔn)品（精確至），用丙酮溶解，配制成濃度為 的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液， 冷凍避光保存，有效期個月。n混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液：將種農(nóng)藥分成五個組。移取一定體積的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液用丙酮配制成 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液， 冷藏避光保存，有效期個月。n基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別移取一定體積的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，添加至經(jīng)過凈化的空白樣品基質(zhì)溶液，混勻，用丙酮定容至?；|(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。n分

35、組情況：分組情況：nA： 烯丙菊酯、二丙烯草胺、莠滅凈、烯丙菊酯、二丙烯草胺、莠滅凈、莎稗磷莎稗磷 、 莠去津莠去津 、 氧環(huán)唑氧環(huán)唑 、保棉磷、保棉磷 、乙丁氟靈乙丁氟靈 、解草嗪、解草嗪 、 煙酰胺煙酰胺 、乙基溴、乙基溴硫磷硫磷 、乙嘧酚磺酸酯、噻嗪酮、英拜除、乙嘧酚磺酸酯、噻嗪酮、英拜除草劑、硫線磷、丁硫克百威、草劑、硫線磷、丁硫克百威、 萎銹靈、萎銹靈、 殺螨醚、殺螨醚、 氯氧磷、蟲螨腈、殺螨酯、氯氯氧磷、蟲螨腈、殺螨酯、氯草敏草敏 等等 nB、地茂散、氯酞酸甲酯、炔草酸、氯甲、地茂散、氯酞酸甲酯、炔草酸、氯甲酰草胺、解草酯酰草胺、解草酯 等等nC：硫丹硫酸鹽、：硫丹硫酸鹽、 氟環(huán)唑

36、、氟環(huán)唑、氰戊菊酯、氰戊菊酯、乙丁烯氟靈、乙硫磷乙丁烯氟靈、乙硫磷 等等nD：抑霉唑、茚草酮、茚蟲威、氯唑磷、：抑霉唑、茚草酮、茚蟲威、氯唑磷、異丙威、稻瘟靈異丙威、稻瘟靈 等等nE： 丙蟲磷、苯胺靈、吡菌磷、吡丙醚、丙蟲磷、苯胺靈、吡菌磷、吡丙醚、咯喹酮咯喹酮 等等5、107種農(nóng)藥在種農(nóng)藥在DB35ms，DB5ms及及DB1701色譜柱上的保留時間和比保留值色譜柱上的保留時間和比保留值英文名稱中文名稱DB35ms色譜柱DB5 ms色譜柱DB1701色譜柱tRrtRrtRr1Dichlorvos敵敵畏8.3530.257.0520.2410.6080.302Methamidophos甲胺磷9.

37、7840.307.0970.2513.2580.373EPTC丙草丹10.0130.309.0490.3111.4320.324Butylate丁草特11.2880.3411.2260.3913.1540.375Oxamyl殺線威13.0620.3914.6850.5124.1010.676Trichlorfon 敵百蟲15.7220.4712.3360.4319.6640.557Acephate乙酰甲胺磷16.6570.5011.9780.4221.8810.618Isoprocarb異丙威17.6570.5314.4280.5020.7880.589Trifluralin三氟草靈18.93

38、30.5718.6660.6523.9370.6710Bpmc仲丁威19.7860.6016.5840.5722.9210.6411Ethoprophos丙線磷20.3370.6117.4740.6122.1440.6212Chlorpropham氯苯胺靈20.7680.6318.3360.6424.2390.6813Demeton-methyl甲基內(nèi)吸磷21.2270.6416.9970.5923.2560.6514Phorate甲拌磷22.30.6719.2630.6723.8260.6715-666甲-六六六23.1630.7019.2720.6724.8290.6916Thiometo

39、n二甲硫吸磷23.7410.7219.9230.6925.1240.7017Bendiocarb惡蟲威24.0720.7318.8220.6525.420.7118Terbufos叔丁硫磷24.4110.7421.9510.7626.2610.7319PCNB五氯硝基苯25.1820.7620.9240.7325.620.72英文名稱中文名稱DB35ms色譜柱DB5 ms色譜柱DB1701色譜柱tRrtRrtRr20Diazinon二嗪磷25.2830.7622.6850.7926.8310.7521Lindane(-666)林丹25.8330.7821.1070.7327.5140.7722

40、Dimethoate樂果26.6770.8020.4830.7130.4270.8523Etrimfos乙嘧硫磷26.6770.8023.6320.8228.0680.7824Heptachlor七氯28.090.8525.7490.8928.6120.8025-666乙-六六六28.090.8521.3450.7432.7110.9126Pirimicarb抗蚜威29.1730.8824.1620.8429.9740.8427Terbacil特氯啶29.2830.8823.7310.8234.1950.9528Alachlor甲草胺29.4020.8925.7680.8931.8290.89

41、29-666丁-六六六29.7780.9023.4370.8133.9280.9530Ethiofencarb乙硫苯威29.9250.9024.5290.8532.2870.9031Dimethipin噻節(jié)因29.9980.9121.2720.7432.9190.9232Aldrin艾氏劑30.0350.9127.9050.9730.2070.8433Tolclofos-methyl甲基托氯磷30.4850.9225.6580.8931.210.8734Parathion-methyl甲基對硫磷30.8430.9325.7120.8933.2510.9335Pirimiphos-methyl蟲

42、螨磷30.9990.9427.3550.9532.1930.90英文名稱中文名稱DB35ms色譜柱DB5 ms色譜柱DB1701色譜柱tRrtRrtRr36Metribuzin嗪草酮31.10.9425.4280.8832.6490.9137Metolachlor異丙甲草胺31.5950.9528.0890.9733.9630.9538Chlorpyrifos毒死蜱32.210.9728.3270.9833.1150.9239Carbaryl甲萘威32.2740.9726.2180.9134.5840.9740Fenitrothion殺螟硫磷32.3290.9827.3550.9534.643

43、0.9741Malathion馬拉硫磷32.3840.9828.190.9834.5750.9742Thiobencarb殺草丹32.4390.9828.3550.9832.6890.9143Dichlofluanid苯氟磺胺32.4580.9827.5660.9634.6430.9744Diethofencarb敵粉威32.5040.9828.9521.0037.2511.0445Methiocarb滅梭威32.7240.9927.5290.9534.3760.9646Parathion對硫磷33.1461.0028.851.0035.8181.0047Fenthion倍硫磷33.5581.

44、0128.630.9934.1950.9548Dicofol三氯殺螨醇33.6591.0229.1161.0133.6790.9449Dimethylrinphos甲基毒蟲畏33.6961.0228.5110.9935.1220.9850Pendimethalin二甲戊樂靈34.3841.0430.3371.0535.9461.0051Isofenphos稻土磷34.651.0531.1071.0836.941.0352Triflumizole特富靈34.8891.0532.0071.1139.1761.0953Penconazole配那唑35.1091.0630.7681.0737.3961

45、.0454Chlorfenvinphos毒蟲畏35.661.0831.2171.0837.2351.0455Triadimenol三唑醇35.8161.0831.9241.1139.4081.10英文名稱中文名稱DB35ms色譜柱DB5 ms色譜柱DB1701色譜柱tRrtRrtRr56Phenthoate稻豐散36.3571.1031.421.0937.2861.0457Bentazone苯達松36.8251.1130.4751.0642.2621.1858Paclobutrazol多效唑37.0271.1232.7861.1440.8381.1459Pyrfenox啶斑肟37.1091.1

46、230.9971.0735.5850.9960Cinerin瓜菊酯37.6221.1435.6031.2339.5891.1161Captan克菌丹37.8681.1431.2171.0838.8991.0962Chinomethionat滅螨猛37.9161.1431.9881.1136.3991.0263Butamifos丁胺磷37.9711.1533.411.1640.4581.1364DDD滴滴涕38.1461.1534.411.1937.8761.0665Dieldrin狄氏劑38.2091.1534.31.1938.5431.0866Folpet滅菌丹38.2191.1531.59

47、41.1038.3191.0767Methidathion殺撲磷38.431.1632.1441.1139.2791.1068Flutolanil氟酰胺38.5041.1634.191.1942.81.1969Imazalil益滅菌唑39.11.1834.0621.1840.9581.1470Jasmolin茉莉菊酯39.6681.2037.8421.3141.6541.1671Flusilazole氟硅唑39.8251.2035.1081.2242.691.1972Vamidothion蚜滅多40.0091.2133.0431.1543.2041.2173Endrin異狄氏劑40.1181.

48、2135.521.2339.7431.1174Chlorobenzilate乙酯殺螨醇40.3021.2236.6131.2741.81.1775Pyrethrin除蟲菊酯40.5581.2238.0991.3242.4771.1976Myclobutanil滅克落40.7151.2334.971.2144.3381.24英文名稱中文名稱DB35ms色譜柱DB5 ms色譜柱DB1701色譜柱tRrtRrtRr77Cyproconazole環(huán)唑醇40.8521.2335.7781.2444.2041.2378o,p-DDT滴滴涕41.0361.2436.9881.2840.5431.1379p,

49、p-DDT滴滴涕41.0361.2436.9881.2840.5431.1380Ethion乙硫磷41.7241.2637.2451.2943.0761.2081Fensulfothion豐索磷43.2771.3132.0091.1145.5151.2782DDE滴滴涕43.5311.3139.2091.3643.5421.2283Propiconazle氧環(huán)三寶43.8431.3239.0071.3545.1461.2684Diflufenican敵莠氟芬44.3481.3440.7781.4146.2791.2985Tebuconazole立克莠44.8631.3540.1811.3948

50、.1541.3486Edifenphos敵瘟磷45.2191.3638.7321.3445.0271.2687Sethoxydim稀禾啶46.1461.3940.4471.4048.9281.3788Iprodione異菌脲47.2471.4342.081.4649.7611.3989Captafol敵菌丹47.5221.4340.4471.4048.4491.3590EPN苯硫磷48.0461.4542.31.4749.211.37英文名稱中文名稱DB35ms色譜柱DB5 ms色譜柱DB1701色譜柱tRrtRrtRr91Cinerin瓜菊酯48.4111.4644.9431.5650.37

51、71.4192Bifenox甲羧除草醚49.3851.4943.4751.5150.4781.4193Jasmolin茉莉菊酯50.1731.5146.9341.6352.1591.4694Pyrethrin除蟲菊酯50.9521.5447.1271.6352.8731.4895Fenarimol氯苯嘧啶醇51.9811.5745.8791.5952.5561.4796Permethrin氯菊酯52.5411.5948.3281.6851.9621.4597Bitertanol雙苯三唑醇53.2751.6148.2371.6754.5931.5298Pyridaben達螨酮53.4681.61

52、48.6311.6953.3471.4999Prochloraz丙氯靈54.1931.6348.7781.6956.5621.58100Cyfluthrin氟氯氰菊酯54.9361.6650.641.7657.1471.60101Cycloxydim噻草酮55.3581.6747.6131.6556.8261.59102Cypermethrin滅百可55.8351.6851.2371.7857.4361.60103Quizalofop-ethyl喹禾靈57.221.7351.641.7956.3341.57104Fluvalinate氟胺氰菊酯58.1931.7654.8611.9062.50

53、61.75105Fenvalerate氰戊菊酯59.3671.7953.9891.8760.1311.68106Difenoconazole惡醚唑63.2111.9155.5031.9263.0051.76107Deltamethrin溴氰菊酯63.3941.9156.4381.9663.9151.78四、LC-MS聯(lián)用儀器hyphenated technology of LC-MS1. 1. 大氣壓電離技術(shù)（大氣壓電離技術(shù)（APIAPI）（1）電噴霧電離（）電噴霧電離（ API Electrospray）RayleighLimitReached+-+-+-+-Evaporation+Char

54、ged Droplets試樣離子準(zhǔn)分子離子Analyte Ions Solvent Ion ClustersSalts/Ion pairsNeutrals+-其他離子Electrospray， API 電噴霧電離電噴霧電離流出液在高電場下形成帶電噴霧，在電場力作用下穿過氣簾；氣簾的作用：霧化；蒸發(fā)溶劑；阻止中性溶劑分子EI 與與 ESIESI電噴霧電離源是一種軟電離方式，即便是分子量大，穩(wěn)定性差的化合物，也不會在電離過程中發(fā)生分解，它適合于分析極性強的大分子有機化合物，如蛋白質(zhì)、肽、糖等。電噴霧電離源的最大特點是容易形成多電荷離子。這樣，一個分子量為10000Da的分子若帶有10個電荷，則其質(zhì)

55、荷比只有1000Da，進入了一般質(zhì)譜儀可以分析的范圍之內(nèi)。根據(jù)這一特點，目前采用電噴霧電離，可以測量分子量在300000Da以上的蛋白質(zhì)。APCIn大氣壓化學(xué)電離源主要用來分析中等極大氣壓化學(xué)電離源主要用來分析中等極性的化合物。有些分析物由于結(jié)構(gòu)和極性的化合物。有些分析物由于結(jié)構(gòu)和極性方面的原因，用性方面的原因，用ESI不能產(chǎn)生足夠強的不能產(chǎn)生足夠強的離子，可以采用離子，可以采用APCI方式增加離子產(chǎn)率，方式增加離子產(chǎn)率，可以認為可以認為APCI是是ESI的補充。的補充。APCI主要主要產(chǎn)生的是單電荷離子，所以分析的化合產(chǎn)生的是單電荷離子，所以分析的化合物分子量一般小于物分子量一般小于1000

56、Da。用這種電。用這種電離源得到的質(zhì)譜很少有碎片離子，主要離源得到的質(zhì)譜很少有碎片離子，主要是準(zhǔn)分子離子是準(zhǔn)分子離子。（2）大氣壓化學(xué)電離（ APCI ）熱噴霧(100-120C)，化學(xué)電離;適用于熱穩(wěn)定化合物分析大氣壓化學(xué)電離（ APCI ）Dielectric capillaryHigh wattage heaterHPLC inletCorona discharge needleVaporizerNebulizer gas+ESI和和APCI的異同的異同n共同點共同點:1.使用高電壓元件和霧化氣噴霧法產(chǎn)生離子使用高電壓元件和霧化氣噴霧法產(chǎn)生離子2.通常產(chǎn)生通常產(chǎn)生(M+H)+或或(M-H

57、)-等準(zhǔn)分子離子等準(zhǔn)分子離子3.產(chǎn)生極少的碎片，但可以控制產(chǎn)生結(jié)構(gòu)碎片產(chǎn)生極少的碎片，但可以控制產(chǎn)生結(jié)構(gòu)碎片、非常靈敏的電離技術(shù)。、非常靈敏的電離技術(shù)。n不同點不同點1.生成離了方式不同生成離了方式不同 ESI-液相離子化液相離子化APCI-氣相離子化氣相離子化n2.樣品兼容性樣品兼容性ESI-極性化合物和生物大分子極性化合物和生物大分子APCI非極性，小分子化合物非極性，小分子化合物(相對相對ESI而言而言)且有一定揮發(fā)性且有一定揮發(fā)性3.流速兼容性流速兼容性ESI-0.001到到1ml/minAPCI-0.2到到2ml/minnESI的適用范圍要遠遠大于的適用范圍要遠遠大于APCI 5、質(zhì)

58、量分析器、質(zhì)量分析器1）、四極桿）、四極桿 Quadrupole2）、離子阱）、離子阱Ion traps3）、飛行時間）、飛行時間 Time of flightn 適合于聯(lián)用，適合于聯(lián)用，體積小，操作簡體積小，操作簡單；分辨率中等；單；分辨率中等；Quadrupole Mass Analyzer+ Ions scanned by varying the DC/RF voltages across the quadrupole rods四極質(zhì)譜結(jié)構(gòu)簡單，價廉，體積小，易操作，無磁滯現(xiàn)象，掃描速度快，適合于GC-MS, LC-MS。分辯率不高。 LC-MS (四極桿)聯(lián)用儀器結(jié)構(gòu)示意圖離子阱示意圖

59、離子阱示意圖TheThe Quadrupole Quadrupole Ion Trap Ion TrapTop endcapBottom EndcapRing ElectrodeGC column inletFilament assemblyIon MultiplierDetectorQuartz spacer離子阱特點離子阱特點n特定特定m/z離子在阱內(nèi)一定軌道上離子在阱內(nèi)一定軌道上穩(wěn)定旋轉(zhuǎn)，改變端電極電壓，不穩(wěn)定旋轉(zhuǎn)，改變端電極電壓，不同同m/z離子飛出阱到達檢測器；離子飛出阱到達檢測器；n可以做多級質(zhì)譜可以做多級質(zhì)譜MSn質(zhì)質(zhì)-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)質(zhì)聯(lián)用技術(shù)原理圖：第一級MS選擇母離子第二級MS選

60、擇子離子質(zhì)質(zhì)-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)質(zhì)聯(lián)用技術(shù)原理圖：第一級MS選擇母離子第二級MS選擇子離子LC-MS (離子阱)聯(lián)用儀器結(jié)構(gòu)示意圖飛行時間飛行時間 Time of flight6、譜庫的差別、譜庫的差別n與氣質(zhì)不同，沒有完善的譜庫。與氣質(zhì)不同，沒有完善的譜庫。n定性的要求：一個母離子加兩個子離子。定性的要求：一個母離子加兩個子離子。7、質(zhì)譜工作模式、質(zhì)譜工作模式1）全掃描）全掃描nFull Scan：全掃描，指質(zhì)譜采集時，掃描一段范圍，選擇這個工作模式后，你自己來設(shè)定一個范圍，比如：150500 amu。n對于未知物，一定會做這種模式，因為只有Full Scan了，才能知道這個化合物的分子量。n對于二級質(zhì)譜M