有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程編制/修訂人：部門審核人：分管負(fù)責(zé)人：質(zhì)量審核人：企業(yè)負(fù)責(zé)人：實(shí)施日期：日期：年月日日期：年月日日期：年_月_一日日期：年_月_一日日期：年_月_一日年月日文件類別：管理標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)受控狀態(tài)生產(chǎn)部采購(gòu)部商務(wù)部質(zhì)量部1物資部存檔1V工作標(biāo)準(zhǔn)本文件由質(zhì)量部頒布，根據(jù)需要分發(fā)于以下部門:行政人事部工程部計(jì)財(cái)部【目的】規(guī)范有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法檢驗(yàn)的程序和方法，確保有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠?！具m用范圍】適用于本公司有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法的檢驗(yàn)?！韭氊?zé)】1QC檢驗(yàn)人員負(fù)責(zé)起草，按審批后的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。2質(zhì)量部經(jīng)理、質(zhì)量負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)審核、監(jiān)督執(zhí)行。3總經(jīng)理

2、負(fù)責(zé)審批?！緝?nèi)容】1簡(jiǎn)述有機(jī)氯類農(nóng)藥是農(nóng)藥史中使用量最大，使用歷史最長(zhǎng)的一類農(nóng)藥，具化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，脂溶性強(qiáng)，殘效期長(zhǎng)（可達(dá)3050年之久），易在脂肪組織中蓄積，造成慢性中毒，嚴(yán)重危及人體健康。本法通過提取、凈化和富集等步驟制備供試品溶液，采用氣相色譜法，電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定。2儀器與用具2.1 氣相色譜儀，帶有63Ni-ECD電子捕獲檢測(cè)器，載氣為高純氮，必須安裝脫氧管。2.2 超聲波處理器。2.3 離心機(jī)。2.4 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。2.5 色譜柱：SE-54或DB-1701彈性石英毛細(xì)管柱（30mX0.32mnK0.25m）2.6 具塞刻度離心管（10ml）,刻度濃縮瓶，具塞錐形瓶（100ml）,移

3、液管等。3試藥與試液3.1 丙酮、石油醴（6090C）和二氯甲烷均為分析純，且全部經(jīng)過全玻璃蒸儲(chǔ)裝置重蒸儲(chǔ)，經(jīng)氣相色譜法確認(rèn)，符合農(nóng)殘檢測(cè)的要求。3.2 無水硫酸鈉和氯化鈉均為分析純，硫酸為優(yōu)級(jí)純。3.3 農(nóng)藥對(duì)照品：六六六（BHC包括a-BHC,B-BHC,丫-BHC和6-BHC四種異構(gòu)體,滴滴涕（DDT）包括pp'-DDE,pp'-DDD,op'-DDT和pp'-DDT四種異構(gòu)體及五氯硝基苯（PCNB,由中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院提供標(biāo)示含量（濃度）的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，也可采用國(guó)際認(rèn)可的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品自行配制。49種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法4.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以（

4、14%制丙基-苯基）甲基聚硅氧烷或（5啾基）甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細(xì)管柱（30mX0.32mmX0.25um）：Ni-ECD電子捕獲檢測(cè)器。進(jìn)樣口溫度230C,檢測(cè)器溫度300C,不分流進(jìn)樣。程序升溫：初始溫度100C,每分鐘10c升至220C,再以每分鐘8c升至250C,彳持10分鐘。按上述條件操作，理論板數(shù)以a-BHC峰計(jì)算應(yīng)不低于1X106,兩個(gè)相鄰色譜峰白分離度應(yīng)大于1.5。4.2 操作方法4.2.1 對(duì)照品貯備液的制備精密稱取六六六（BHC）（a-BHCB-BHC丫-BHC,6-BHQ、滴滴涕（DDT）P,P'-DDE,P,P'-DDD,O,P'-D

5、DT,P,P'-DDT及五氯硝基苯（PCNB/藥對(duì)照品溶液適量，用石油醴（6090C）分別制成每1ml約含45用的溶液，即得。4.2.2 混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備精密量取上述各對(duì)照品貯備液0.5ml,置10mI量瓶中，用石油醴60-90C）稀釋至刻度，搖勻，即得。4.2.3 混合對(duì)照品溶液的制備精密量取上述混合對(duì)照品貯備液，用石油醴（60-90C）制成每1L分別含0ug,1g,5g,10g,50仙g,100仙g和250仙g的溶液，即得。4.2.4 供試品溶液制備方法1（藥材或飲片）取供試品，粉碎成粉末（過三號(hào)篩），取約2g,精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加水20ml浸泡過夜，精密加

6、丙酮40ml,稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用丙酮補(bǔ)足減失的重量，再加氯化鈉約6g,精密加二氯甲烷30ml,稱定重量，超聲處理15分鐘，再稱定重量，用二氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，靜置（使分層），將有機(jī)相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具塞錐形瓶中，放置4小時(shí)。精密量取35ml,于40c水浴上減壓濃縮至近干，加少量石油醴（6090）如前反復(fù)操作至二氯甲烷及丙酮除凈，用石油醴（6090c）溶解并轉(zhuǎn)移至10ml具塞刻度離心管中，加石油醴（6090C）精密稀釋至5ml,小心加入硫酸1ml,振搖1分鐘，離心（3000轉(zhuǎn)/分鐘）10分鐘，精密量取上精液2ml,置具刻度濃縮瓶中，連接旋轉(zhuǎn)蒸

7、發(fā)器，40c下（或用氮?dú)猓⑷芤簼饪s至適量，精密稀釋至1ml,即得。同法制備空白樣品。4.2.5 方法2（制劑）取供試品，研成細(xì)粉（蜜丸切碎，液體直接量?。?，精密稱取適量（相當(dāng)于藥材2g）,以下按方法1,制備供試品溶液。4.2.6 測(cè)定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對(duì)應(yīng)濃度的混合對(duì)照品溶液各1仙1,注入氣象色譜儀，按外標(biāo)法計(jì)算供試品中9種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量。522種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法5.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)分析柱：以50%苯基50%C甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細(xì)管柱（30mX0.25mmX0.25um）O僉柱：以100萬甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細(xì)管柱（30mX0.2

8、5mmX0.25um）63Ni-ECD電子捕獲檢測(cè)器。進(jìn)樣口溫度240C,檢測(cè)器溫度300C,不分流進(jìn)樣，流速為恒壓模式（初始流速為1.3ml/min）。程序升溫：初始70C,保持1分鐘，每分鐘10c升至180C,保持5分鐘，再以每分鐘5c升至220C,最后以每分鐘100c升至280C,保持8分鐘。理論板數(shù)以a-BHC計(jì)算應(yīng)不低于1X106,兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。5.2 操作方法5.2.1 對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備精密稱取表1中農(nóng)藥對(duì)照品適量，用異辛烷分別制如表1中濃度，即得。5.2.2 混合對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備精密量上述對(duì)照品貯備溶液各1ml,置100ml量瓶中，用異辛烷稀釋至刻度，搖

9、勻，即得。5.2.3 混合對(duì)照品溶液的制備分別精密量取上述對(duì)照品備貯溶液，用異辛烷制成每1L分別含10pg、20pg、50g、100g、200仙g、500仙g的溶液，即得（其中B-六六六，異狄氏劑、P,P'-滴滴滴、O,P'-滴滴涕每1L分別含20/、40/、100/、200/、400仙g、1000Pg）。5.2.4 供試品溶液制備取供試品，粉碎成粉末（過三號(hào)篩），取約1.5g,精密稱定，置于50ml聚苯乙烯具塞離心管中，加水10ml,混勻，放置2小時(shí)，精密加入乙月青15ml,劇烈振搖提取1分鐘，再加人預(yù)先稱好的無水硫酸鎂4g與氯化鈉1g的混合粉末，再次劇烈振搖1分鐘后，離心（

10、4000轉(zhuǎn)/分鐘）1分鐘。精密吸取上清液10ml,40C減壓濃縮至近干，用環(huán)己烷-乙酸乙酯（1:1）混合溶液分次轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加環(huán)己烷-乙酸乙酯（1:1）混合溶液至刻度，搖勻，轉(zhuǎn)移至預(yù)先加入1g無水硫酸鈉的離心管中，振搖，放置1小時(shí)，離心（必要時(shí)濾過），取上清液5ml過凝膠滲透色譜柱（400mmX25mm,內(nèi)裝BIO-BeadsS-X3填料；以環(huán)己烷-乙酸乙酯（1:1）混合溶液為流動(dòng)相；流速為每分鐘5.0ml）凈化，收集18?30分鐘的洗脫液，于40c水浴減壓濃縮至近干，加少量正己烷替換兩次，加正己烷1ml使溶解，轉(zhuǎn)移至弗羅里硅土固相萃取小柱1000mg/6ml,用正己烷-丙酮（95:

11、5）混合溶液10ml和正己烷10ml預(yù)洗上，殘?jiān)谜和橄礈?次，每次1ml,洗液轉(zhuǎn)移至同一弗羅里硅土固相萃取小柱上，再用正己烷-丙酮（95:5）混合溶液10ml洗脫，收集全部洗脫液，置氮吹儀上吹至近干，加異辛烷定容至1ml,渦旋使溶解，即得。5.2.5 測(cè)定法分別精密吸取供試品溶液和混合對(duì)照品溶液各1ul,注入氣相色譜儀，按外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算供試品中22種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量。5.2.6 限度除另有規(guī)定外，每1kg中藥材或飲片中含總六六六（a-BHC,B-BHC,丫-BHC,6-BH£和）不得過0.2mg；總滴滴涕（P,P'-DDE,P,P'-DDD,O,P'-

12、DDT,P,P'-DDT之和）不得過0.2mg；五氟硝基苯（Quintozene）不得過0.1mg；六氯苯（Hexachlorobenzene）不得過0,1mg;七氯（Heptachlor）、順式環(huán)氧七氯（HeptachIorexo-epoxide）和反式環(huán)氧七氯（Heptachlor*endo-epoxide）之和不得過0.05mg;艾氏劑（AIdrin）和狄氏劑（Dieldrin）之和不得過0.05mg;異狄氏劑（Endrin）不得過0.05mg;順式氯丹Chlordane）、反式氯丹（trans-Chlordane）和氧化氯丹（oxy-Chlordane）之和不得過0.05mg;

13、a-硫丹（a-Endosulfan）伊硫丹（伊Endosulfan）和硫丹硫酸鹽（Endosulfansulfate）之和不得過3mg【附注】（1）當(dāng)供試品中有農(nóng)藥檢出時(shí)，可在驗(yàn)證柱中確認(rèn)檢出的結(jié)果，再進(jìn)行定量。必要時(shí)，可用氣相色譜一質(zhì)譜法進(jìn)行確證。加樣回收率應(yīng)在70府120尤問表122種有機(jī)氯類農(nóng)藥對(duì)照品貯備液濃度、相對(duì)保留時(shí)間及檢出限參考值序號(hào)中文名英文名對(duì)照品貯備液(ug/ml)相對(duì)保留時(shí)間（分析柱）檢出限（mg/kg）12345678910111213141516171819202122六氯苯Hexachlorobenzene1000.5740.001a-六六六a-BHC1000.60

14、10.004五硝基苯Quintozene1000.6450.007T-六六六y-BHC1000.6670.003，六六六,BHC2000.7050.七M(jìn)Heptachlor1000.7130.007A六六六8-BHC1000.750艾氏劑Aldrin1000.7600.006氧化氯丹Oxy-Chlordane1000.8160.007順式環(huán)氧七氟Heptachlor-exo-epoxide1000.833反式環(huán)氧七氟Heptachlor-endo-epoxide1000.844反式氯丹trans-Chlordane1000.8540.005順式氯丹cis-Chlordane1000.8670,008a-琉丹a-Endosulfan1000.8720.01p,p/滴滴伊p,p/-DDE1000.8920狄氏劑Dieldrin1000.9010.005異狄氏劑Endrin2000.9320.009o,p/滴滴涕o,p/f-DDT2000.p,p/滴滴滴p,p/f-DDD2000.3-硫丹的Endosulfan1000.9560p,/p-滴滴涕p,p/-DDT1000.9700.硫丹硫酸Endosulfansulfate1001.0000.0040080.0030.0