給學生-綜合實驗-羅望子多糖的提取-wyy

1、羅望子多糖的提取一、實驗目的一、實驗目的掌握用有機酸萃取法或熱水抽提法提取羅望子膠的原理及其方法； 了解多糖沉降的原理、基本操作及其應用。 二、實驗原理二、實驗原理羅望子又稱酸角、酸豆, 為高大的常綠喬木,主要分布在我國云南、海南、廣西、廣東、福建等省區(qū), 以及印度、孟加拉、緬甸、老撾等國, 我國羅望子資源最豐富的地區(qū)是云南省的南部、西南部和西部地區(qū)。羅望子多糖( Tamarind seed polysaccharide, 簡稱TSP), 又稱為羅望子膠( Tamarind gum ), 它是從豆科羅望子屬植物羅望子(Tamarindus indica ) 的種子中提取出來的一種帶淺棕色的灰白

2、粉末。據(jù)報道, 在羅望子種子中, 非纖維碳水化合物含量為65% 73 %，蛋白質含量15% 20%，脂肪含量為6% 8%，纖維為3% 5% , 灰分為2.5% 3.2%。由此可以看出, 在羅望子種子中, 絕大多數(shù)為非纖維碳水化合物, 即多糖類物質, 所以, 它的利用價值極高。目前羅望子多糖的提取方法主要有兩種目前羅望子多糖的提取方法主要有兩種: 一種是熱水抽提法; 另一種是有機酸萃法！實驗方案一：熱水抽提法工藝流程：工藝流程：羅望子種子羅望子種子去皮、粉碎去皮、粉碎三、實驗儀器與藥品三、實驗儀器與藥品 藥品：藥品： 羅望子種子，蒸餾水，異丙醇或乙醇羅望子種子，蒸餾水，異丙醇或乙醇儀器：儀器：天

3、平，烘箱，粉碎機，燒杯天平，烘箱，粉碎機，燒杯(錐形瓶錐形瓶)，玻璃棒，玻璃棒，電熱套，溫度計，離心設備，抽濾裝置，恒溫干燥箱電熱套，溫度計，離心設備，抽濾裝置，恒溫干燥箱1. 羅望子種仁粉的制備羅望子種仁粉的制備:(1) 將將羅望子羅望子種子直接放入恒溫干燥箱中種子直接放入恒溫干燥箱中, 在在140150 下烘下烘67 h, 有烤松仁香味時取出有烤松仁香味時取出, 稱其量。輕敲羅望子種子仁稱其量。輕敲羅望子種子仁, 去去殼殼, 得白色或米黃色的胚乳得白色或米黃色的胚乳, 稱量。去殼的羅望子種子仁用粉稱量。去殼的羅望子種子仁用粉碎機粉碎碎機粉碎, 過過6080目篩目篩, 備用；備用；(2) 將

4、羅望子種子用清水按質量比將羅望子種子用清水按質量比1:2 浸泡浸泡24 h后，瀝干水分，后，瀝干水分，烘干、冷卻、剝除種皮、粉碎機粉碎，然后過烘干、冷卻、剝除種皮、粉碎機粉碎，然后過6080 目篩目篩, 備用。備用。四、實驗步驟四、實驗步驟2. 提膠：提膠：稱取稱取5 g的羅望子種子仁粉的羅望子種子仁粉, 按按1:30 的質量比放入的質量比放入90 的熱水中的熱水中, 攪拌下保持恒溫攪拌下保持恒溫50 min。靜置。靜置24 h, 分層分層, 離心分離心分離離, 壓濾；壓濾；3. 沉降：沉降：在膠液中加入同體積的異丙醇在膠液中加入同體積的異丙醇(乙醇乙醇), 攪拌后靜置攪拌后靜置, 將沉淀物放

5、入醇中洗滌將沉淀物放入醇中洗滌23 次次, 輕壓沉淀物輕壓沉淀物, 去除溶劑；去除溶劑；4. 干燥：干燥：將沉淀物放入恒溫干燥箱中在將沉淀物放入恒溫干燥箱中在40 50 下干燥下干燥24 h 以上；以上；5. 粉碎：粉碎：將干燥的沉淀物放入攪拌機中粉碎將干燥的沉淀物放入攪拌機中粉碎, 過過100 目篩目篩, 得得到羅望子多糖粉末。到羅望子多糖粉末。實驗方案二：有機酸萃取法工藝流程：工藝流程： 試劑：試劑：羅望子種仁羅望子種仁，檸檬酸，檸檬酸， NaOH 稀溶液，稀溶液， 30% 過氧化氫或少量過氧化氫或少量NaHCO3溶液；溶液；儀器：儀器：天平，烘箱，粉碎機，燒杯天平，烘箱，粉碎機，燒杯(錐

6、形瓶錐形瓶)，玻璃，玻璃棒，電熱套，溫度計，離心設備，抽濾裝置，恒溫棒，電熱套，溫度計，離心設備，抽濾裝置，恒溫干燥箱，干燥箱，pH試紙試紙(或或pH 計計)。三、實驗儀器與藥品三、實驗儀器與藥品1. 羅望子種仁粉的制備羅望子種仁粉的制備:(1) 將將羅望子羅望子種子直接放入恒溫干燥箱中種子直接放入恒溫干燥箱中, 在在140150 下烘下烘67 h, 有烤松仁香味時取出有烤松仁香味時取出, 稱其量。輕敲羅望子種子仁稱其量。輕敲羅望子種子仁, 去去殼殼, 得白色或米黃色的胚乳得白色或米黃色的胚乳, 稱量。去殼的羅望子種子仁用粉稱量。去殼的羅望子種子仁用粉碎機粉碎碎機粉碎, 過過6080目篩目篩,

7、 備用；備用；(2) 將羅望子種子用清水按質量比將羅望子種子用清水按質量比1:2 浸泡浸泡24 h后，瀝干水分，后，瀝干水分，烘干、冷卻、剝除種皮、粉碎機粉碎，然后過烘干、冷卻、剝除種皮、粉碎機粉碎，然后過6080 目篩目篩, 備用。備用。四、實驗步驟四、實驗步驟2. 煮沸煮沸: 取取5 g 種仁粉，加入種仁粉，加入2540 倍的清水，充分攪拌均勻，倍的清水，充分攪拌均勻，用檸檬酸調(diào)節(jié)用檸檬酸調(diào)節(jié)pH，使水溶液的，使水溶液的pH 控制在控制在4.25.6 之間，加熱之間，加熱攪拌，煮沸攪拌，煮沸2030 min，得到粘稠的漿狀液；，得到粘稠的漿狀液；3. 靜置沉降靜置沉降: 在漿狀液中加入原體

8、積在漿狀液中加入原體積50%的熱水稀釋漿狀液，的熱水稀釋漿狀液，然后攪拌均勻，靜置沉降然后攪拌均勻，靜置沉降8 12 h，讓漿狀液中的蛋白質、固，讓漿狀液中的蛋白質、固體顆粒等雜質充分沉降；體顆粒等雜質充分沉降；4. 分離過濾分離過濾: 將上清液分離，即為羅望子膠將上清液分離，即為羅望子膠 (抽出靜置沉降后上抽出靜置沉降后上清液清液, 下層混懸漿狀液用離心或壓濾的方法分離除去沉降物下層混懸漿狀液用離心或壓濾的方法分離除去沉降物, 而而獲濾液。合并上清液和濾液獲濾液。合并上清液和濾液, 得到乳白色的漿狀液得到乳白色的漿狀液)；5. 濃縮濃縮: 在乳白色漿液中加入少量在乳白色漿液中加入少量NaOH

9、 稀溶液，將其稀溶液，將其pH 調(diào)至中性，然后加熱濃縮至半流體狀時停止，加入調(diào)至中性，然后加熱濃縮至半流體狀時停止，加入30%過氧過氧化氫化氫1 mL(或少量或少量NaHCO3溶液溶液)；6. 烘干粉碎烘干粉碎: 將粘稠的半流體漿狀液倒入白色淺瓷盤中，將粘稠的半流體漿狀液倒入白色淺瓷盤中，在在7080 的溫度下進行熱風干燥，得到片狀羅望子多糖。的溫度下進行熱風干燥，得到片狀羅望子多糖。最后將片狀羅望子膠粉碎，即可得到灰白色或淺黃色的粉末最后將片狀羅望子膠粉碎，即可得到灰白色或淺黃色的粉末狀羅望子膠。狀羅望子膠。五、注意事項五、注意事項 烘烤溫度要控制好，不可以太高；去皮時要充分，盡量不烘烤溫度要控制好，不可以太高；去皮時要充分，盡量不能含有皮。能含有皮。 提膠時要注意控制好溫度，并不斷攪拌，加熱期間人絕對提膠時要注意控制好溫度，并不斷攪拌，加熱期間人絕對不可離開。不可離開。 沉降后的沉淀物不能用水洗，會形成膠液堵塞濾紙，而無沉降后的沉淀物不能用水洗，會形成膠液堵塞濾紙，而無法過濾。法過濾。 加熱濃縮時，注意溫度的控制，并不斷攪拌，加熱濃縮時，注意溫度的控制，并不斷攪拌， 防止焦糊。防止焦糊。 六