(炮哥教案)__課題1_菊花的組織培養(yǎng)

1、高二生物選修一菊花的組織培養(yǎng)教學(xué)設(shè)計(jì)： “學(xué)導(dǎo)式教學(xué)模式” 四川省內(nèi)江市第二中學(xué)校 岳捷普通高中課程標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)教科書(shū)生物選修1人教版專(zhuān)題三 課題1 菊花的組織培養(yǎng)學(xué)校：四川省內(nèi)江市第二中學(xué)校姓名：岳捷一、教案背景1.面向?qū)W生：高二學(xué)生2.學(xué)科：生物3.課時(shí)：5課時(shí)（講2課時(shí)；操作及分析3課時(shí)） 4.課前準(zhǔn)備：教師：學(xué)導(dǎo)式教學(xué)教學(xué)、多媒體、相關(guān)教學(xué)資料學(xué)生：復(fù)習(xí)專(zhuān)題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 ，特別是培養(yǎng)基配制方法、無(wú)菌操作技術(shù)；復(fù)習(xí)必修一細(xì)胞的分化、必修三植物激素等相關(guān)知識(shí)。二、教案課題教學(xué)內(nèi)容：人教版高中生物(選修1) 專(zhuān)題三 課題1 菊花的組織培養(yǎng)課題目標(biāo)：（一）知識(shí)與技能1、說(shuō)出植物組織培養(yǎng)的基

2、本原理，熟悉植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程。2、簡(jiǎn)述影響植物組織培養(yǎng)或花藥培養(yǎng)的各種因素，理解細(xì)胞分化的概念及離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化3、通過(guò)聯(lián)系農(nóng)業(yè)生產(chǎn)實(shí)際，培養(yǎng)學(xué)生活學(xué)活用，理論聯(lián)系實(shí)際的能力（二）過(guò)程與方法1、嘗試培養(yǎng)基制備、外植體消毒、接種、培養(yǎng)、移栽以及栽培等基本操作技術(shù)。2、歸納MS培養(yǎng)基的配制方法，并設(shè)計(jì)表格比較微生物培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基的配方的異同。（三）情感、態(tài)度與價(jià)值觀 通過(guò)閱讀植物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展史，課下查閱植物組織培養(yǎng)技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的資料，關(guān)注學(xué)生科學(xué)態(tài)度的教育，拓展學(xué)生視野，感受科學(xué)技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的重要價(jià)值。課題重點(diǎn)：植物組織培養(yǎng)過(guò)程中使用的無(wú)菌技術(shù)課題難點(diǎn)：植物

3、組織培養(yǎng)過(guò)程中使用的無(wú)菌技術(shù)三、 教材分析1.內(nèi)容分析：（1）該課題是人教版高中生物(選修1) 專(zhuān)題三的重點(diǎn)內(nèi)容、必選內(nèi)容，課標(biāo)要求嘗試培養(yǎng)基制備、外植體消毒、接種、培養(yǎng)、移栽以及栽培等基本操作技術(shù)。需要專(zhuān)題二中的培養(yǎng)基配制方法和無(wú)菌操作技術(shù)。（2）該課題與必修模塊的聯(lián)系：必修1模塊中細(xì)胞的分化、細(xì)胞的全能性、讓植物細(xì)胞全能性表達(dá)的外界條件、組織培養(yǎng)的過(guò)程以及細(xì)胞中的元素、化合物；必修3 模塊中植物激素調(diào)節(jié)；必修2模塊中單倍體育種(3)植物組織培養(yǎng)是一項(xiàng)操作復(fù)雜而精細(xì)，操作難度較大的實(shí)踐活動(dòng)，其操作流程包括：配制母液、培養(yǎng)基配制與滅菌、外植體選擇和消毒、接種、形成愈傷組織、誘導(dǎo)叢芽和生根、組培

4、苗移栽等操作環(huán)節(jié)，在具體的教學(xué)中老師可以先準(zhǔn)備讓學(xué)生在課堂上觀察，得點(diǎn)學(xué)習(xí)組培的基本原理和進(jìn)行外植體接種操作為主。(4)為使實(shí)驗(yàn)正常完成可成立課外活動(dòng)小組，培養(yǎng)學(xué)生中的積極分子十分重要。2.學(xué)情分析：學(xué)生已學(xué)習(xí)專(zhuān)題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用，對(duì)培養(yǎng)基配制、無(wú)菌操作技術(shù)有一定基礎(chǔ)；已修完必修課一二三模塊，具有該課題的相關(guān)理論知識(shí)，如細(xì)胞的分化、細(xì)胞的全能性、植物激素的調(diào)節(jié)作用、單倍體育種等。四、教法分析1、教學(xué)方法：?jiǎn)l(fā)引導(dǎo)自主學(xué)習(xí)；實(shí)驗(yàn)（不在本教案中） “立體引學(xué)”即“教師啟發(fā)引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí)”。教學(xué)程序簡(jiǎn)化為“提出問(wèn)題探索引導(dǎo)自主解答 矯正強(qiáng)化”。教學(xué)過(guò)程第一步課題引入；第二步呈現(xiàn)知識(shí)結(jié)構(gòu)；第三步

5、圍繞“知識(shí)結(jié)構(gòu)”提出一個(gè)個(gè)問(wèn)題，引導(dǎo)學(xué)生一個(gè)個(gè)解決。特別要注意提出的問(wèn)題要與學(xué)生原有知識(shí)有機(jī)接軌，新學(xué)知識(shí)在原有知識(shí)基礎(chǔ)上生長(zhǎng)、發(fā)展、創(chuàng)新。2、教學(xué)輔助：引學(xué)案，多媒體。3、教學(xué)課時(shí)安排：第1課時(shí)：完成基礎(chǔ)知識(shí)教學(xué)，植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程及影響因素、MS培養(yǎng)基配制；第2課時(shí)：完成外植體消毒、接種、培養(yǎng)、移栽、栽培；結(jié)果分析、課題延伸，觀看整個(gè)培養(yǎng)的視頻 【實(shí)驗(yàn)計(jì)劃：3課時(shí)。本課題耗時(shí)較長(zhǎng)，有關(guān)培養(yǎng)基母液的配制、培養(yǎng)基高壓滅菌、組培苗的培養(yǎng)和繼代以及栽培管理等工作，可在課下進(jìn)行。如果課時(shí)緊張，外植體的消毒和接種也可以在課下進(jìn)行。課上學(xué)生只需做一些關(guān)鍵步驟的操作，如愈傷組織的繼代、分化轉(zhuǎn)瓶、叢芽繼

6、代、生根轉(zhuǎn)瓶等。大田栽培或盆栽管理工作可以在課外組織同學(xué)來(lái)做。】五、教學(xué)過(guò)程【第1課時(shí)】（一）課題引入植物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展史：大自然中存在著許多有趣的植物無(wú)性生殖現(xiàn)象。例如，馬鈴薯的塊莖能夠發(fā)芽生根，秋海棠的葉片能夠長(zhǎng)成新植株。這些現(xiàn)象促發(fā)科學(xué)家去思考、解釋。1902年，有一位德國(guó)的植物學(xué)家大膽地預(yù)言：“植物的體細(xì)胞在一定條件下，可以如同受精卵一樣，具有潛在的發(fā)育成植株的能力?！?958年，美國(guó)科學(xué)家斯圖爾德（F.C.Steward）將胡蘿卜韌皮部的一些細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，由于細(xì)胞分化而最終發(fā)育成完整的新植株。這個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果在生物學(xué)界引起了很大的震動(dòng)，它表明已經(jīng)高度分化的植物細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植

7、株的能力。已經(jīng)分化的細(xì)胞所具有的這種潛在發(fā)育能力稱(chēng)作細(xì)胞全能性。既然胡蘿卜的單個(gè)細(xì)胞能發(fā)育為完整植株，小塊的植物組織就更不應(yīng)該有什么問(wèn)題。此后很多年，科學(xué)家和技術(shù)人員將許多植物進(jìn)行了組織培養(yǎng)，并獲得了成功。如今，植物組織培養(yǎng)已不再神秘莫測(cè)，而發(fā)展成為常規(guī)技術(shù)：其應(yīng)用有：實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖；花卉的連續(xù)生產(chǎn)；培育脫毒作物（無(wú)病毒植株）（取“未被病毒侵染根尖芽尖組織”培養(yǎng)）；制作人工種子（胚狀體外包裹人工種皮）；培育作物新品種（基因工程）細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)（由愈傷組織產(chǎn)生的紫草素是一種很好的燙傷藥膏）等。（二）課題知識(shí)結(jié)構(gòu)菊花的組織培養(yǎng)基本原理基本過(guò)程影響因素操作流程組織培養(yǎng)概念結(jié)果分析與評(píng)價(jià)

8、課題延伸（三）提出系列問(wèn)題 “引D學(xué)” A，基礎(chǔ)知識(shí)1知識(shí)回顧：閱讀P32課題背景，聯(lián)系必修一P117細(xì)胞的分化，思考回答下列問(wèn)題（寫(xiě)出來(lái)）：細(xì)胞分化？學(xué)生回答在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程，叫細(xì)胞分化。細(xì)胞分化的特點(diǎn)？學(xué)生回答普遍性,持久性，不可逆性(穩(wěn)定性)，全能性。細(xì)胞分化的意義？學(xué)生回答細(xì)胞分化是生物個(gè)體發(fā)育的基礎(chǔ)。使多細(xì)胞生物體中的細(xì)胞走向?qū)ｉT(mén)化，有利于提高各種生理功能的效率。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)：師問(wèn)就一個(gè)個(gè)體來(lái)說(shuō)，各種細(xì)胞具有完全相同的遺傳信息，但形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能卻有很大差異？這是怎么回事？（學(xué)生回顧、思考、討論）學(xué)生回答細(xì)胞

9、發(fā)生分化是因?yàn)樵趥€(gè)體發(fā)育過(guò)程中，不同的細(xì)胞中遺傳信息的執(zhí)行情況不同引起的。即在不同細(xì)胞中選擇表達(dá)執(zhí)行的基因不同（或者說(shuō)是基因的選擇性表達(dá)）。細(xì)胞分化的結(jié)果? 細(xì)胞產(chǎn)生了不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)即出現(xiàn)了不同的結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)胞,形成了不同的組織和器官.學(xué)生實(shí)戰(zhàn)練習(xí)：人體的肌肉細(xì)胞、肝臟細(xì)胞、胰島細(xì)胞等形態(tài)結(jié)構(gòu)功能不同，其直接原因是 根本原因是 （2）什么叫細(xì)胞的全能性？已經(jīng)分化的細(xì)胞還有全能性嗎？為什么？所有細(xì)胞都有全能性嗎？有例外嗎？細(xì)胞的全能性高低相同嗎？學(xué)生討論回答細(xì)胞的全能性是指：已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。學(xué)生討論回答因?yàn)橐呀?jīng)分化的細(xì)胞仍然具有該生物的全套遺傳信息。思考：植物的導(dǎo)

10、管細(xì)胞、人的成熟紅細(xì)胞有全能性嗎、為什么？學(xué)生討論回答沒(méi)有全能性，因?yàn)閷?dǎo)管細(xì)胞是死細(xì)胞、人的成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核比較全能性高低：受精卵是生殖細(xì)胞如花粉、蜜蜂的卵細(xì)胞體細(xì)胞；植物體細(xì)胞動(dòng)物體細(xì)胞。動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，但細(xì)胞核仍具有全能性如“多利羊”。學(xué)生討論回答全能性：受精卵大于生殖細(xì)胞大于體細(xì)胞；植物體細(xì)胞大于動(dòng)物體細(xì)胞。以下舉例哪些全能性已表達(dá)？為什么？A、玉米種子長(zhǎng)成植株；B、癌細(xì)胞體外繁殖數(shù)代；C、病毒增殖數(shù)代；D、細(xì)菌分裂N次； E、DNA擴(kuò)增1000次； F、棉花葉肉細(xì)胞培養(yǎng)成抗蟲(chóng)棉植株學(xué)生討論回答F 判斷的關(guān)鍵是細(xì)胞全能性的含義：已分化的細(xì)胞生物個(gè)體生物個(gè)體內(nèi)的各種細(xì)胞并沒(méi)有表達(dá)全

11、能性，為什么？細(xì)胞的全能性怎樣才能實(shí)現(xiàn)？學(xué)生討論回答在生物體內(nèi)的各種細(xì)胞在特定的條件下，通過(guò)基因的選擇性表達(dá)已構(gòu)成不同的組織和器官。細(xì)胞全能性的實(shí)現(xiàn)需要條件：離體、營(yíng)養(yǎng)、植物激素、無(wú)菌條件、適宜的PH、溫度、光照等。學(xué)生總結(jié)整理：具有某種生物全套遺傳信息的任何一個(gè)活細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力，即每個(gè)生物細(xì)胞都具有全能性。但在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中并不表現(xiàn)出來(lái)，這是因?yàn)樵谔囟ǖ臅r(shí)間和空間條件下，通過(guò)基因的選擇性表達(dá)，構(gòu)成不同組織和器官。當(dāng)植物細(xì)胞離體、并在一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件下，就可能表現(xiàn)出全能性、發(fā)育成完整植株。2、閱讀P32“植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程”，討論并完成以下問(wèn)題：

12、植物組織培養(yǎng)的概念: 用文字與前頭表示：植物組織培養(yǎng)的過(guò)程。（）離體的（又叫外植體）（） （） 什么叫脫分化（去分化）？學(xué)生討論回答什么叫再分化？學(xué)生討論回答愈傷組織有什么特點(diǎn)？學(xué)生討論回答愈傷組織是通過(guò)細(xì)胞分裂形成的，其細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則，高度液泡化呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。聯(lián)想思考：填表比較根尖分生組織和愈傷組織的異同：學(xué)生討論填空組織類(lèi)型細(xì)胞來(lái)源細(xì)胞形態(tài)細(xì)胞結(jié)構(gòu)細(xì)胞排列細(xì)胞去向根尖分生組織受精卵正方形無(wú)液泡緊密分化成多種細(xì)胞組織愈傷組織高度分化細(xì)胞 相同點(diǎn)都通過(guò) 分裂進(jìn)行細(xì)胞增殖3、閱讀P33“影響植物組織培養(yǎng)的條件”，討論并完成以下問(wèn)題：(1)材料：植物的種類(lèi)、材料的 和保存時(shí)間的 等

13、都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開(kāi)化植物的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料。思考:一般來(lái)說(shuō)，容易進(jìn)行 繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。思考:選取生長(zhǎng)旺盛嫩枝進(jìn)行組培的原因是 ，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。教師引導(dǎo)小結(jié)：選擇外植體時(shí)需要考慮的一些因素及說(shuō)明：考慮的因素說(shuō)明外植體的年齡一般情況外植體的年齡越小，分化的程度越小，組培的成功率就越高，因此，盡量選擇幼嫩的植物組織或器官作為外植體外植體的大小外植體很小和很大都不合適，很小的外植體極容易死亡，很大的外植體不容易消毒，因此，要選擇大小適中的外植體。例如，如果用菊花的芽進(jìn)行組培，選取的芽可為3mm左右外植體所在的部位一般選擇植物的芽尖、根尖或幼嫩的莖作

14、為外植體，這些部位的組織分裂能力強(qiáng)，容易形成愈傷組織外植體的外觀形態(tài)由于外植體的消毒工作非常重要，因此，要選擇哪些表面相對(duì)光滑容易消毒的外植體較好(2)營(yíng)養(yǎng)：常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co，有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。搜索百度：MS培養(yǎng)基的由來(lái)？MS是穆拉希吉（Murashige）和斯庫(kù)克（Skoog）兩位科學(xué)家第一個(gè)字母的縮寫(xiě)，他們于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的，其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽和離子濃度較高，是較穩(wěn)定的離子平衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適，能滿(mǎn)足植物

15、細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣，多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。 由此，這種培養(yǎng)基就用他們的名字來(lái)命名了。 P33旁欄思考：你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專(zhuān)題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？學(xué)生討論回答微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的 ；蔗糖提供 ，同時(shí)能夠維持細(xì)胞的 ；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿(mǎn)足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的 營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以 營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量 營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的 元素和 元素兩大類(lèi)。(3)激素：在培養(yǎng)基中需要添加 和

16、細(xì)胞分裂素等植物激素，其 、使用的先后順序、用量的比例等都影響結(jié)果。學(xué)生回顧：必修三：第三章，植物激素，生長(zhǎng)素作用？細(xì)胞分裂素作用？參考資料：組培中常用的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的類(lèi)型及作用。調(diào)節(jié)劑名稱(chēng)濃度范圍作用生長(zhǎng)素類(lèi)2，4二氯苯氧乙酸（2，4D）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）等0.015mg/L促進(jìn)細(xì)胞的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)，促進(jìn)愈傷組織和根的形成細(xì)胞分裂素類(lèi)激動(dòng)素（KT）、6芐基腺嘌呤（BA或6BA）、玉米素（ZT）等0.510mg/L促進(jìn)細(xì)胞的橫向生長(zhǎng)和分裂，促進(jìn)芽的分化和形成看書(shū)思考:填表完成：激素使用的先后順序及其用量比例對(duì)細(xì)胞分裂和分化的影響。生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果比值高時(shí)促根分化，抑芽

17、形成比值低時(shí)促芽分化，抑根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)使用順序?qū)嶒?yàn)結(jié)果先生長(zhǎng)素，后細(xì)胞分裂素有利于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，后生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高(4)環(huán)境條件：PH、溫度、光等環(huán)境條件。菊花組培所需PH為 ，溫度為 ，光照條件為每日用日光燈照射 小時(shí)。【第2課時(shí)】1實(shí)驗(yàn)操作流程：2、閱讀P34“制備MS固體培養(yǎng)基”，填空下列問(wèn)題：（1）配制各種母液：將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。使用時(shí)根據(jù)母液的 倍數(shù)，計(jì)算用量，并加 稀釋。(2)配制培養(yǎng)基：應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、 、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用 定容到1000毫升。在菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加

18、，原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。(3)滅菌：采取的滅菌方法是 滅菌。教師提醒注意：配制母液很復(fù)雜，請(qǐng)注意以下幾點(diǎn)：母液中含有大量元素、微量元素、激素（植物生物調(diào)節(jié)劑）和維生素等有機(jī)成分，母液濃度是實(shí)際溶液濃度的510倍。配制母液花費(fèi)時(shí)間多，需要用到溶量瓶、移液管等精密儀器，無(wú)法由每位學(xué)生親自操作，教師可帶領(lǐng)部分學(xué)生在課外進(jìn)行。母液的類(lèi)型和配制順序如下：配制母液的注意事項(xiàng)：自來(lái)水或河水中含有大量的礦質(zhì)元素，勿用配制母液；配制大量元素和微量元素母液時(shí)，應(yīng)將每種化合物單獨(dú)溶解后，再一一混合，同時(shí)還應(yīng)用適量的蒸餾水清洗燒杯內(nèi)壁，并將清洗后的蒸餾水倒入混合溶液中，這樣可以保證每種元素的濃度，混合時(shí)要按

19、照教材附表中的順序進(jìn)行，最后加入的是氯化鈣溶液，這樣可以避免發(fā)生沉淀；配制好的母液要先倒入1 000 ml燒杯中，再由燒杯轉(zhuǎn)入1 000 ml細(xì)口瓶中，不可由容量瓶直接倒入細(xì)口瓶中；注意觀察母液中是否有絮狀物，出現(xiàn)絮狀物表明離子之間發(fā)生反應(yīng)，需要重新配制母液；植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑難溶于水，需要堿或酸助溶，一般生長(zhǎng)素類(lèi)物質(zhì)用堿（0.1 mol/LNaOH13 ml）或酒精（7595的酒精13ml）助溶，細(xì)胞分裂素類(lèi)物質(zhì)一般用酸（0.1 mol/LHCL13 ml）助溶，加入蒸餾水定溶時(shí)要緩慢，也可用水浴法助溶；用棕色細(xì)口瓶盛裝有機(jī)物母液和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑母液，避免透射光損害母液中的有機(jī)成分；在瓶壁上貼好

20、各種母液的標(biāo)簽（下圖所示）；將配制好的母液放入冰箱中或陰涼處保存。小結(jié)并抄寫(xiě)：MS培養(yǎng)基。配制培養(yǎng)基的流程如下：上述的培養(yǎng)基配制流程中，加入各種母液的時(shí)間是在瓊脂溶化之后，這樣既可避免加熱使母液中的各種離子發(fā)生反應(yīng)，又可避免有機(jī)物母液和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑因高溫受到損害。將母液加入培養(yǎng)基的順序是：先提取大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)物母液，后提取植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑母液，切勿先提取植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑母液，這是因?yàn)樵撊芤褐泻兴峄驂A，容易與其他元素形成沉淀而失敗。培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌，滅菌時(shí)間一般為1520min，滅好菌的培養(yǎng)基不易保存過(guò)長(zhǎng)時(shí)間，通常是現(xiàn)用現(xiàn)配。在對(duì)培養(yǎng)基滅菌的同時(shí)，也要對(duì)解剖刀、鑷子、燒

21、杯、錐形瓶、牛皮紙等必要的儀器設(shè)備進(jìn)行滅菌。3、閱讀“外植體消毒”，填寫(xiě)下列流程圖： 嫩枝( )沖洗（ ）20分鐘左右( )吸干表面水分( )搖動(dòng)2-3次6-7秒( )清洗( )吸干表面水分( )溶液浸泡12分鐘( )清洗3次思考：在此消毒過(guò)程中，是不是強(qiáng)度越大越好，為什么？學(xué)生討論回答 不是。對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，既要考慮到藥劑的消毒效果，又要考慮到植物的耐受力。4閱讀“接種、培養(yǎng)、移栽和栽培”，填寫(xiě)：（1）前期準(zhǔn)備：用 的酒精消毒工作臺(tái)，點(diǎn)燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進(jìn)行，器械使用前后都要用 滅菌。（2）接種操作：接種過(guò)程中插入外植體時(shí) 上端朝上，每個(gè)錐形瓶接種78個(gè)外植體

22、。思考回答：外植體接種與細(xì)菌接種相似之處是 相同，而且都要求 操作。（3）培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該放在 中進(jìn)行，并定期進(jìn)行 ，保持適宜的 和 。（4）移栽前應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)瓶的 ，讓其在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到 或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時(shí)間，進(jìn)行壯苗。最后進(jìn)行露天栽培。思考：外植體在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)被污染，你認(rèn)為造成污染的原因有哪些？學(xué)生討論回答外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。C、閱讀“結(jié)果分析與評(píng)價(jià)”，思考并填寫(xiě)：1.對(duì)接種操作中污染情況的分析接種34 d后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。屆時(shí)要適時(shí)統(tǒng)計(jì)污染率，分

23、析接種操作是否符合無(wú)菌要求。思考：分析細(xì)胞污染的原因可能有 ；真菌污染的原因可能是 2.是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織，記錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培養(yǎng)基后愈傷組織進(jìn)一步分化成根和芽的比例和時(shí)間。思考：至少更換 次培養(yǎng)基， 且每次都要求 操作；為什么要更換培養(yǎng)基？3.是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄做好觀察、記錄、統(tǒng)計(jì)和對(duì)照，填好結(jié)果記錄表，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)記錄表：（四）生根苗的移栽是否合格生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的 ，又不能傷及 。一般使用 的辦法。培養(yǎng)基質(zhì)要提前 ，可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的 ，并用塑料薄膜覆蓋

24、12 h。掀開(kāi)塑料薄膜后24 h才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室 幾天，等 后再定植大田或進(jìn)行盆栽。在課后統(tǒng)計(jì)自己移栽的成活率，看看移栽是否合格。特別提醒注意：1.為什么說(shuō)無(wú)菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關(guān)鍵？教師引導(dǎo)學(xué)生歸納總結(jié)，學(xué)生書(shū)面整理：植物組織培養(yǎng)不同于扦插、分根、葉插等常規(guī)無(wú)性繁殖。由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，所以對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高，對(duì)無(wú)菌操作的要求非常嚴(yán)格。MS培養(yǎng)基也適合微生物生長(zhǎng)，而微生物生長(zhǎng)比植物組織細(xì)胞快得多。如果不小心引起污染，將可能造成培養(yǎng)工作的前功盡棄。無(wú)菌技術(shù)包括培養(yǎng)基消毒滅菌和植物材料（外植體）的消毒滅菌。對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)，一方

25、面要考慮藥劑的消毒效果；另一方面還要考慮植物材料的耐受能力。不同藥劑、不同植物材料，甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待。培養(yǎng)環(huán)境要求無(wú)菌、定期消毒；培養(yǎng)器械要求嚴(yán)格滅菌；學(xué)生的操作過(guò)程要求嚴(yán)格的無(wú)菌操作。所以教師在課前要培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)骨干。2.妥善處理被污染的培養(yǎng)物即使對(duì)于有經(jīng)驗(yàn)的操作人員，操作后出現(xiàn)培養(yǎng)物被污染的情況也常有。一般情況下，細(xì)菌污染可能是由接種人員造成的，如未戴口罩，接種時(shí)說(shuō)話(huà)，或手及器械消毒不嚴(yán)等。真菌污染可能是植物材料滅菌不當(dāng)。需要特別注意的是，一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)材料被污染，特別是真菌性污染，一定不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶。應(yīng)先將所有被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽鍋內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，然后再打開(kāi)培養(yǎng)瓶，進(jìn)行

26、清洗。3.有毒藥品的用后處理外植體滅菌用過(guò)的有毒藥品要妥善處理（如氯化汞等），以免引起環(huán)境污染。一般應(yīng)收集后統(tǒng)一交給有關(guān)專(zhuān)業(yè)部門(mén)處理。(四)、課堂總結(jié)：學(xué)生復(fù)述課題內(nèi)容要點(diǎn)（五）、實(shí)例探究例1 甘薯種植多年后易積累病毒而導(dǎo)致品種退化。目前生產(chǎn)上采用莖尖分生組織離體培養(yǎng)的方法快速繁殖脫毒的種苗，以保證該品種的品質(zhì)和產(chǎn)量水平。這種通過(guò)分生組織離體培養(yǎng)獲得種苗的過(guò)程不涉及細(xì)胞的 A.有絲分裂B.分化C.減數(shù)分裂D.全能性解析：離體的植物器官、組織或細(xì)胞，在培養(yǎng)一段時(shí)間后，脫分化，通過(guò)細(xì)胞分裂，形成愈傷組織；脫分化的愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng)，又可重新分化成根或芽等器官；再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育

27、成完整的植物體。由愈傷組織發(fā)育為完整的植物體體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性。植物組織培養(yǎng)的過(guò)程是無(wú)性繁殖的過(guò)程，不涉及減數(shù)分裂，減數(shù)分裂是生物在進(jìn)行有性生殖的過(guò)程中的一種分裂方式。本題解決的關(guān)鍵是要了解植物的組織培養(yǎng)過(guò)程。答案：C例2植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是A.導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因 B.將成熟的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中C.用適當(dāng)濃度的秋水仙素處理 D.脫離母體后，給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和適宜的溫度等外界條件解析：植物細(xì)胞只有脫離了植物體，在一定的外部因素作用下，經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂形成愈傷組織，才能表現(xiàn)出全能性，由愈傷組織細(xì)胞發(fā)育、分化出新的植物體。答案：D例3、在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織

28、的過(guò)程中，下列哪一項(xiàng)條件是不需要的A.消毒滅菌 B.適宜的溫度 C.充足的光照 D.適宜的養(yǎng)料和激素解析：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化過(guò)程是在無(wú)菌條件下進(jìn)行的，在愈傷組織形成過(guò)程中，需要適宜的溫度、一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物激素的誘導(dǎo)，但不需要陽(yáng)光。答案：C（六）、當(dāng)堂練習(xí)：1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)之一是：A.植物細(xì)胞的完整性 B.植物細(xì)胞的多樣性 C.植物細(xì)胞的全能性 D.植物細(xì)胞雜交2.要大量繁殖用植物體細(xì)胞雜交方法獲得的植物，應(yīng)該采用哪種繁殖方式？A.種子繁殖 B.分裂生殖 C.出芽生殖 D.營(yíng)養(yǎng)生殖3.下列關(guān)于愈傷組織的說(shuō)法中不正確的是A.愈傷組織的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂 B.用葉培

29、養(yǎng)形成的愈傷組織細(xì)胞能夠進(jìn)行光合作用C.培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中應(yīng)含有有機(jī)養(yǎng)料 D.人們可以從愈傷組織中提取所需物質(zhì)4.在一個(gè)多細(xì)胞生物體內(nèi)，存在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上具有穩(wěn)定性差異的細(xì)胞，是因?yàn)?A.細(xì)胞失去全能性 B不同的細(xì)胞，基因是不同的C.不同細(xì)胞中基因選擇性表達(dá)的結(jié)果 D變異一般是不定向的5.細(xì)胞具有全能性的原因是 A.生物體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能 B.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都具有全能性C.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有個(gè)體發(fā)育的全部基因 D.生物體的每一個(gè)細(xì)胞都是由受精卵發(fā)育來(lái)的6.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的脫分化是指 A.植物體的分生組織通過(guò)細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞B.未成熟的種子經(jīng)過(guò)處理

30、培育出幼苗的過(guò)程C.植物的器官、組織或細(xì)胞，通過(guò)離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過(guò)程7.下列植物細(xì)胞全能性最高的是 A.形成層細(xì)胞 B.韌皮部細(xì)胞 C.木質(zhì)部細(xì)胞 D.葉肉細(xì)胞8植物組織培養(yǎng)是指A離體的植物器官或細(xì)胞培育成愈傷組織 B愈傷組織培育成植株C離體的植物器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植物體 D愈傷組織形成高度液泡化組織9某園藝場(chǎng)經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期精心選育，培養(yǎng)出一株形態(tài)優(yōu)美的蘭花，如果要保持母本的優(yōu)良性狀，并盡快大規(guī)模繁殖，最適合的繁殖方式是（ ）A分裂生殖 B有性生殖 C孢子生殖 D組織培養(yǎng)10胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞通過(guò)組織培養(yǎng)，能發(fā)育成新的植株。下列有關(guān)的敘述中，不正確

31、的是 A說(shuō)明高度分化的植物細(xì)胞具有全能性 B植物細(xì)胞的全能性得以表達(dá)要離開(kāi)母體C新植株的形成是細(xì)胞分裂和分化的結(jié)果 D高度分化的動(dòng)物細(xì)胞也具有全能答案：15 CDBCC 610 CACDD（七）、作業(yè)延伸：書(shū)面作業(yè)：（1）教材P36練習(xí)：（2）用文字和箭頭書(shū)面整理該課題的操作步驟（細(xì)節(jié)）、無(wú)菌操作的內(nèi)容及措施。課余作業(yè)：1、為什么運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)能把植物離體器官、組織或細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株？2、植物組織培養(yǎng)與花藥培養(yǎng)技術(shù)有何相同點(diǎn)與不同點(diǎn)？六、板書(shū)設(shè)計(jì)：專(zhuān)題3課題1菊花的組織培養(yǎng) 外植體的消毒細(xì)胞的全能性脫分化愈傷組織再分化材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、無(wú)菌條件、環(huán)境條件配制MS固體培養(yǎng)基新

32、個(gè)體接種培養(yǎng)移栽栽培菊花的組織培養(yǎng)基本原理基本過(guò)程影響因素操作流程組織培養(yǎng)概念結(jié)果分析與評(píng)價(jià)課題延伸七、教學(xué)反思：本課案需要兩個(gè)課時(shí)完成理論學(xué)習(xí)。本教案首次用于教學(xué)，同步上課4個(gè)層次的班級(jí)，研究四次：上課研究、改進(jìn)再上課再研究、改進(jìn)再上課。課后我對(duì)各種班上課的整個(gè)教學(xué)過(guò)程作了反思，歸納以下幾點(diǎn)：成功點(diǎn)：借助網(wǎng)絡(luò)功能，使用多媒體PPT及視頻輔助，使得教學(xué)更加接近實(shí)驗(yàn)，便于理解。圍繞知識(shí)結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)系列問(wèn)題啟發(fā)引導(dǎo)、學(xué)生自主學(xué)習(xí)。得課堂者得天下，教師引導(dǎo)學(xué)生分析解決問(wèn)題，總結(jié)歸納規(guī)律，動(dòng)手畫(huà)各種過(guò)程圖。認(rèn)真負(fù)責(zé)一絲不茍地備好課、嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)的教學(xué)設(shè)計(jì)是老師上好課的的第一要素。用好本課題的興趣和動(dòng)力是學(xué)生

33、成功的又一關(guān)鍵：本課題的興趣來(lái)自科學(xué)家的觀察與實(shí)驗(yàn)（科學(xué)發(fā)現(xiàn)就在我們的身邊），動(dòng)力來(lái)自好奇（永遠(yuǎn)保持對(duì)身邊事物的探索欲）。用好教學(xué)資源（教研組教師聽(tīng)課研究；各班學(xué)生學(xué)習(xí)反饋）是不斷提高教學(xué)水平的關(guān)鍵：上課研究、改進(jìn)再上課再研究、改進(jìn)再上課總結(jié)、提升創(chuàng)新點(diǎn)：引導(dǎo)學(xué)生探索細(xì)胞全能性表達(dá)的條件，并總結(jié)整理。引導(dǎo)學(xué)生歸納總結(jié)組織培養(yǎng)過(guò)程中的無(wú)菌操作技術(shù)內(nèi)容及措施。引導(dǎo)學(xué)生歸納總結(jié)影響組織培養(yǎng)的因素。關(guān)注組織應(yīng)用：快速繁殖、培育脫毒作物、制作人工種子、培育作物新品種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等等。始終圍繞“知識(shí)結(jié)構(gòu)”提出問(wèn)題和解決解決；始終以學(xué)生原有知識(shí)為生長(zhǎng)點(diǎn)，一步步深入學(xué)習(xí)、創(chuàng)新、拓展。改進(jìn)點(diǎn)：學(xué)習(xí)完成

34、之時(shí)就是學(xué)生引學(xué)案填寫(xiě)完成之時(shí)，提升學(xué)生書(shū)面整理能力。該課題實(shí)驗(yàn)復(fù)雜、無(wú)菌操作嚴(yán)格、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，在理論學(xué)習(xí)時(shí)，學(xué)生就感到了壓力，需要加強(qiáng)學(xué)生吃苦耐勞、持之以恒、堅(jiān)忍不拔的科學(xué)獻(xiàn)身精神的教育。八、教師個(gè)人簡(jiǎn)介姓名：王仕昭學(xué)校：四川省攀枝花市第三高級(jí)中學(xué)校郵編：617000通迅地址：四川省攀枝花市第三高級(jí)中學(xué)校電子郵箱：345960063九、資源附件：課件。【人教版】高中生物專(zhuān)題1課后習(xí)題答案專(zhuān)題1課題1果酒和果醋的制作實(shí)驗(yàn)案例制作葡萄酒和葡萄醋建議將實(shí)驗(yàn)安排在秋季的9月或10月進(jìn)行。在這段時(shí)間內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，有如下優(yōu)點(diǎn)：（1）正值收獲季節(jié)，葡萄的價(jià)格便宜，品種多樣；（2）此時(shí)葡萄上的酵母菌數(shù)量多且生

35、活力強(qiáng)，發(fā)酵釀酒的效果好；（3）溫度適宜，發(fā)酵現(xiàn)象非常明顯。實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。1.對(duì)發(fā)酵瓶、紗布、榨汁機(jī)、盛葡萄汁的器皿等實(shí)驗(yàn)用具進(jìn)行清洗并消毒。先用溫水反復(fù)沖洗幾次,再用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精擦拭消毒，晾干待用。2.取葡萄500g，去除枝梗和腐爛的子粒。3.用清水沖洗葡萄12遍除去污物，注意不要反復(fù)多次沖洗。4.用榨汁機(jī)榨取葡萄汁后，將其裝入發(fā)酵瓶中（裝置參見(jiàn)教材圖1-4b），或?qū)⑵咸汛虺蓾{后，用潔凈的紗布過(guò)濾至發(fā)酵瓶中，蓋好瓶蓋。如果沒(méi)有合適的發(fā)酵裝置，可以用500mL的塑料瓶替代，但注入的果汁量不要超過(guò)塑料瓶總體積的2/3。5.將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度下發(fā)酵。6.由于發(fā)酵旺盛期CO2

36、的產(chǎn)量非常大，因此需要及時(shí)排氣，防止發(fā)酵瓶爆裂。如果使用簡(jiǎn)易的發(fā)酵裝置，如瓶子（最好選用塑料瓶），每天要擰松瓶蓋24次，進(jìn)行排氣。7.10d以后，可以開(kāi)始進(jìn)行取樣檢驗(yàn)工作。例如，可以檢驗(yàn)酒味、酒精的含量、進(jìn)行酵母菌的鏡檢等工作。8.當(dāng)果酒制成以后，可以在發(fā)酵液中加入醋酸菌或醋曲，然后將裝置轉(zhuǎn)移至3035的條件下發(fā)酵，適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。如果找不到醋酸菌菌種或醋曲，可嘗試自然接種，但效果不是很好。如果沒(méi)有充氣裝置，可以將瓶蓋打開(kāi)，在瓶口蓋上紗布，以減少空氣中塵土等的污染。課題成果評(píng)價(jià)（一）果酒的制作是否成功發(fā)酵后取樣，通過(guò)嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定。此外，還可用顯微鏡觀察酵母菌，并用重鉻酸鉀檢驗(yàn)酒精

37、的存在。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想，請(qǐng)學(xué)生分析失敗原因，然后重新制作。（二）果醋的制作是否成功首先通過(guò)觀察菌膜的形成、嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定，再通過(guò)檢測(cè)和比較醋酸發(fā)酵前后的pH作進(jìn)一步的鑒定。此外，還可以通過(guò)在顯微鏡下觀察發(fā)酵液中是否有醋酸菌，并統(tǒng)計(jì)其數(shù)量作進(jìn)一步鑒定。答案和提示（一）旁欄思考題1.你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？答：應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。2.你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？提示：需要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮。例如，榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。3.制葡萄酒時(shí)，為

38、什么要將溫度控制在1825？制葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度控制在3035？答：溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。20左右最適合酵母菌繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長(zhǎng)溫度為3035，因此要將溫度控制在3035。4.制葡萄醋時(shí)，為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣？答：醋酸菌是好氧菌，在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧的參與，因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。（二）資料發(fā)酵裝置的設(shè)計(jì)討論題請(qǐng)分析此裝置中的充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接？結(jié)合果酒、果醋的制作原理，你認(rèn)為應(yīng)該如何使用這個(gè)發(fā)酵裝置？答：充氣口是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的

39、；排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出CO2的；出料口是用來(lái)取樣的。排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是防止空氣中微生物的污染，其作用類(lèi)似巴斯德的鵝頸瓶。使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接氣泵，輸入氧氣。（三）練習(xí)2.提示：大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)需要進(jìn)行更為全面周詳?shù)目紤]，如原料的來(lái)源與選擇、菌種的培育與選擇、發(fā)酵的設(shè)備、發(fā)酵條件的自動(dòng)化控制，以及如何嚴(yán)格控制雜菌污染；等等。此外，無(wú)論是葡萄酒或葡萄醋，實(shí)驗(yàn)時(shí)所檢測(cè)的發(fā)酵液，并非商品意義上的產(chǎn)品。在實(shí)際生產(chǎn)中還需沉淀過(guò)濾、滅菌裝瓶等獲得成品酒或醋。葡萄酒還需在一定設(shè)施和條件下（如橡木桶和地窖）進(jìn)行后續(xù)發(fā)酵，以獲得特定的風(fēng)味和色

40、澤。3.提示：需考慮廠房、設(shè)備投資、原材料采購(gòu)、工人人數(shù)及工資、產(chǎn)品種類(lèi)、生產(chǎn)周期、銷(xiāo)售渠道、利潤(rùn)等問(wèn)題。課題2腐乳的制作實(shí)驗(yàn)案例制作腐乳實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。1.將豆腐切成75px75px25px的若干塊。所用豆腐的含水量為70左右，水分過(guò)多則腐乳不易成形。水分測(cè)定方法如下。精確稱(chēng)取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品510g(精確到0.02mg)，置于已知重量的蒸發(fā)皿中，均勻攤平后，在100105電熱干燥箱內(nèi)干燥4h，取出后置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱(chēng)重，然后再烘30min，直至所稱(chēng)重量不變?yōu)橹?。樣品水分含量?）計(jì)算公式如下。(烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量2.將豆腐塊平

41、放在鋪有干粽葉的盤(pán)內(nèi)，粽葉可以提供菌種，并能起到保溫的作用。每塊豆腐等距離排放，周?chē)粲幸欢ǖ目障?。豆腐上面再鋪上干凈的粽葉。氣候干燥時(shí)，將平盤(pán)用保鮮膜包裹，但不要封嚴(yán)，以免濕度太高，不利于毛霉的生長(zhǎng)。3.將平盤(pán)放入溫度保持在1518的地方。毛霉逐漸生長(zhǎng)，大約5d后豆腐表面叢生著直立菌絲。4.當(dāng)毛霉生長(zhǎng)旺盛，并呈淡黃色時(shí)，去除包裹平盤(pán)的保鮮膜以及鋪在上面的粽葉，使豆腐塊的熱量和水分能夠迅速散失，同時(shí)散去霉味。這一過(guò)程一般持續(xù)36h以上。5.當(dāng)豆腐涼透后，將豆腐間連接在一起的菌絲拉斷，并整齊排列在容器內(nèi)，準(zhǔn)備腌制。6.長(zhǎng)滿(mǎn)毛霉的豆腐塊（以下稱(chēng)毛坯）與鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為51。將培養(yǎng)毛坯時(shí)靠近平盤(pán)沒(méi)長(zhǎng)

42、直立菌絲的一面統(tǒng)一朝向玻璃瓶邊，將毛坯分層盤(pán)立擺放在容器中。分層加鹽，并隨層加高而增加鹽量，在瓶口表面鋪鹽厚些，以防止雜菌從瓶口進(jìn)入。約腌制8d。7.將黃酒、米酒和糖，按口味不同而配以各種香辛料（如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等）混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在12左右為宜注。注酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長(zhǎng)短有很大關(guān)系。酒精含量越高，對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長(zhǎng)；酒精含量過(guò)低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。8.將廣口玻璃瓶刷干凈后，用高壓鍋在100蒸汽滅菌30min。將腐乳咸坯擺入瓶中，加入鹵湯和輔料后，將瓶口用酒精燈加熱滅菌

43、，用膠條密封。在常溫情況下，一般六個(gè)月可以成熟。課題成果評(píng)價(jià)（一）是否完成腐乳的制作學(xué)生是否完成腐乳的制作依據(jù)是：能夠合理地選擇實(shí)驗(yàn)材料與用具；前期發(fā)酵后豆腐的表面長(zhǎng)有菌絲，后期發(fā)酵制作基本沒(méi)有雜菌的污染。（二）腐乳質(zhì)量的評(píng)價(jià)制作成功的腐乳應(yīng)該具有以下特點(diǎn)：色澤基本一致、味道鮮美、咸淡適口、無(wú)異味、塊形整齊、厚薄均勻、質(zhì)地細(xì)膩、無(wú)雜質(zhì)。（三）能否總結(jié)不同條件對(duì)腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響。學(xué)生能從鹽、酒的用量、發(fā)酵的溫度、發(fā)酵時(shí)間的長(zhǎng)短，以及香辛料等因素中的某一因素來(lái)說(shuō)明其對(duì)腐乳風(fēng)味或質(zhì)量的影響。答案和提示（一）旁欄思考題1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí)，解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事？答：豆腐上生長(zhǎng)的白毛是

44、毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。2.王致和為什么要撒許多鹽，將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)？答：鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。3.我們平常吃的豆腐，哪種適合用來(lái)做腐乳？答：含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳，不易成形。4.吃腐乳時(shí)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢？它對(duì)人體有害嗎？它的作用是什么？答：“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲（匍匐菌絲），它能形成腐乳的“體”，使腐乳成形?！捌ぁ睂?duì)人體無(wú)害。（二）練習(xí)1.答：越接近瓶口，雜菌污染的可能性越大，因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量，在接近瓶口的表面，鹽要鋪厚一些，以

45、有效防止雜菌污染。課題3制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量課題成果評(píng)價(jià)（一）泡菜腌制的質(zhì)量如何可以根據(jù)泡菜的色澤和風(fēng)味進(jìn)行初步的評(píng)定，還可以在顯微鏡下觀察乳酸菌形態(tài)，比較不同時(shí)期泡菜壇中乳酸菌的含量。（二）亞硝酸鹽含量的測(cè)定配制的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液與樣品液顯色后，目測(cè)比色效果如何，是否與標(biāo)準(zhǔn)液的濃度相吻合。如果不吻合，還應(yīng)在已知濃度范圍內(nèi)，改變濃度梯度，進(jìn)一步配制標(biāo)準(zhǔn)使用液。（三）是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行過(guò)程中，應(yīng)及時(shí)對(duì)泡菜中亞硝酸鹽含量進(jìn)行鑒定，比較不同時(shí)期亞硝酸鹽含量的變化及其對(duì)泡菜質(zhì)量的影響。答案和提示（一）旁欄思考題1.為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶？答：酸奶的制作依靠的

46、是乳酸菌的發(fā)酵作用?？股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L(zhǎng)，因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。2.為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜，不吃存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、變質(zhì)的蔬菜？答：有些蔬菜，如小白菜和蘿卜等，含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過(guò)久發(fā)生變質(zhì)（發(fā)黃、腐爛）或者煮熟后存放太久時(shí)，蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽，危害人體健康。3.為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜？你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的？答：形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物，泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富，其表面氧氣含量也很豐富，適合酵母菌繁殖。（二）練習(xí)2.答：果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵，果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇?/p>

47、酸的代謝，腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類(lèi)，泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)都巧妙地利用了天然菌種，都為特定的菌種提供了良好的生存條件，最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分，而是成分復(fù)雜的混合物。專(zhuān)題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課題成果評(píng)價(jià)（一）培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12d后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。（二）接種操作是否符合無(wú)菌要求如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn)，則說(shuō)明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說(shuō)明接種過(guò)程中，無(wú)菌操作還未達(dá)到要求，

48、需要分析原因，再次練習(xí)。（三）是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同，及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn)，并能觀察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。答案和提示（一）旁欄思考題1.無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？答：無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。2.請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。（二）倒平板操作的討論1.

49、培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4.在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間

50、的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。（三）平板劃線操作的討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，

51、殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。（四）涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？提示：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周?chē)?；等等。（五）練?xí)1.提示：可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來(lái)思考。例如，微生物的生長(zhǎng)需要水、空氣、適

52、宜的溫度，食品保存可以通過(guò)保持干燥、真空的條件，以及冷藏等方法來(lái)阻止微生物的生長(zhǎng)。2.提示：可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納。例如，這三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營(yíng)養(yǎng)，但無(wú)土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無(wú)菌的條件，而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件。3.提示：這是一道開(kāi)放性的問(wèn)題，答案并不惟一，重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與，從不同的角度思考問(wèn)題。例如，正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的，微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門(mén)獨(dú)立的學(xué)科；巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn)，而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)案例土壤中某樣品細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。1.土壤取樣從肥沃、濕潤(rùn)的土壤中取樣。先鏟去表層土3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。2.制備培養(yǎng)基準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為對(duì)照，用來(lái)判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。由于初次實(shí)驗(yàn)，對(duì)于稀釋的范圍沒(méi)有把握，因此選擇了一個(gè)較為寬泛的范圍：稀釋倍數(shù)為103107。每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基，1個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，因此共需要