吩噻嗪類抗精神病藥物的分析

1、第十一章第十一章吩噻嗪類抗精神病藥物的分析吩噻嗪類抗精神病藥物的分析The analysis of Phenothiazine antipsychotics 藥物分析藥物分析學(xué)教研室學(xué)教研室1 1 本本 章章 內(nèi)內(nèi) 容容 2 23 34 4基本結(jié)構(gòu)與性質(zhì)基本結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 鑒鑒 別別 有關(guān)物質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)檢查 含量測(cè)定含量測(cè)定 p掌握：結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和分析測(cè)定方法p熟悉：鑒別試驗(yàn)及有關(guān)物質(zhì)檢查的方法p了解：性狀、臨床特性及其體內(nèi)藥物分析 教學(xué)目的與要求教學(xué)目的與要求各種幻覺(jué)妄想為主的患者稱為精神分裂癥各種幻覺(jué)妄想為主的患者稱為精神分裂癥I型型情感淡漠、思維貧乏為主的患者稱為精神分裂癥情感淡漠、思維貧乏

2、為主的患者稱為精神分裂癥II型型 腦內(nèi)多巴胺神經(jīng)腦內(nèi)多巴胺神經(jīng)系統(tǒng)的功能亢進(jìn)系統(tǒng)的功能亢進(jìn) 吩噻嗪類藥物吩噻嗪類藥物吩噻嗪類藥物的作用機(jī)制吩噻嗪類藥物的作用機(jī)制 吩噻嗪類藥物為吩噻嗪類藥物為苯并噻嗪苯并噻嗪的衍生物，的衍生物，分子結(jié)構(gòu)中均含有分子結(jié)構(gòu)中均含有硫氮雜蒽硫氮雜蒽母核。母核。R: -H、-Cl、-CF3、-COCH3、-SCH2CH3R: 具有具有23碳鏈的二甲碳鏈的二甲或二乙胺基，或含氮雜環(huán)或二乙胺基，或含氮雜環(huán)如哌嗪和哌啶的衍生物如哌嗪和哌啶的衍生物SNR12R345678910吩噻嗪類藥物的基本結(jié)構(gòu)吩噻嗪類藥物的基本結(jié)構(gòu) P292 典型藥物分子結(jié)構(gòu)典型藥物分子結(jié)構(gòu) 鹽酸異丙嗪鹽

3、酸異丙嗪Promethazine Hydrochloride鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪Chlorpromazine Hydrochloride奮乃靜奮乃靜Perphenazine鹽酸氟奮乃靜鹽酸氟奮乃靜Fluphenazine Hydrochloride癸氟奮乃靜癸氟奮乃靜Fluphenazine Decanoate鹽酸三氟拉嗪鹽酸三氟拉嗪Trifluoperazine Hydrochloride鹽酸硫利達(dá)嗪鹽酸硫利達(dá)嗪Thioridazine Hydrochloride鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪Chlorpromazine Hydrochloride 1. 硫氮雜蒽母核硫氮雜蒽母核 （1）含）含S、N的

4、三環(huán)共軛的大的三環(huán)共軛的大 體系，體系，S、N與苯環(huán)形成與苯環(huán)形成p- 共軛共軛具有紫外吸收光具有紫外吸收光譜特征譜特征 SNR12R345678910 （2）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為-2價(jià)，具有價(jià)，具有還原性，易氧化呈色還原性，易氧化呈色 （3）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子有兩對(duì)孤對(duì)）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子有兩對(duì)孤對(duì)電子，易與金屬離子絡(luò)合呈色電子，易與金屬離子絡(luò)合呈色 SNR12R3456789102. 取代基取代基 R：脂烴胺基、哌嗪基，具堿性：脂烴胺基、哌嗪基，具堿性 R ：鹵素：鹵素 XXC一定方法破壞SNR12R3456789101. 弱堿性弱堿性主要理化性質(zhì)主要理化性質(zhì)SNR1

5、2R345678910NRNHHNNH堿性較強(qiáng)堿性較強(qiáng)弱堿性極弱弱堿性極弱 脂肪烴氨基、哌嗪及哌啶等衍生物所含氮原脂肪烴氨基、哌嗪及哌啶等衍生物所含氮原子堿性較強(qiáng)，可用于鑒別和含量測(cè)定。子堿性較強(qiáng)，可用于鑒別和含量測(cè)定。2.易氧化性易氧化性 NSRRONSRROOSNR12R345678910 易被易被H2SO4、HNO3、H2O2、FeCl3氧化氧化 藥物藥物硫酸硫酸硝酸硝酸過(guò)氧化氫過(guò)氧化氫鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪顯紅色，漸變?yōu)榈S色顯紅色，漸變?yōu)榈S色鹽酸異丙嗪鹽酸異丙嗪顯櫻桃紅色，放顯櫻桃紅色，放置后顏色漸變深置后顏色漸變深生成紅色沉淀，加熱即溶解，溶生成紅色沉淀，加熱即溶解，溶液由紅色轉(zhuǎn)變

6、為橙黃色液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色奮乃靜奮乃靜顯深紅色，放置顯深紅色，放置后紅色漸褪去后紅色漸褪去鹽酸氟奮乃靜鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色，溫?zé)犸@淡紅色，溫?zé)岷笞兂杉t褐色后變成紅褐色鹽酸三氟拉嗪鹽酸三氟拉嗪生成微帶紅色的白色沉淀；放置生成微帶紅色的白色沉淀；放置后，紅色變深，加熱后變黃色后，紅色變深，加熱后變黃色鹽酸硫利達(dá)嗪鹽酸硫利達(dá)嗪顯藍(lán)色顯藍(lán)色3.與金屬離子配合呈色與金屬離子配合呈色 可與鈀離子配合生成有色化合物，可用于鑒可與鈀離子配合生成有色化合物，可用于鑒別和含量測(cè)定。氧化產(chǎn)物亞砜和砜無(wú)此反應(yīng)別和含量測(cè)定。氧化產(chǎn)物亞砜和砜無(wú)此反應(yīng) SNR12R345678910機(jī)理機(jī)理pH2PdCl2RRNS2Cl

7、-SSPd2+4.紫外光吸收特性紫外光吸收特性 硫氮雜蒽母核為硫氮雜蒽母核為共軛體系共軛體系，紫外區(qū)三個(gè)吸收峰值，紫外區(qū)三個(gè)吸收峰值，約約205nm、254nm、300nm，最強(qiáng)多在最強(qiáng)多在254nm附近附近 藥物藥物溶劑溶劑C (g/ml) max (nm) A百分吸百分吸收系數(shù)收系數(shù)鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪鹽酸鹽酸 (91000)52540.46915306鹽酸異丙嗪鹽酸異丙嗪鹽酸鹽酸 (0.1mol/L)6249883937奮乃靜奮乃靜無(wú)水乙醇無(wú)水乙醇72580.65鹽酸氟奮乃靜鹽酸氟奮乃靜鹽酸鹽酸 (91000)10255553593鹽酸三氟拉嗪鹽酸三氟拉嗪鹽酸鹽酸 (120)102566

8、30鹽酸硫利達(dá)嗪鹽酸硫利達(dá)嗪乙醇乙醇8264與與3152位上的取代基位上的取代基(R)不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移 其結(jié)構(gòu)中其結(jié)構(gòu)中-2 價(jià)的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜有價(jià)的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜有四個(gè)吸收峰四個(gè)吸收峰 CCDABC化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法 光譜法光譜法 色譜法色譜法 其他方法其他方法 一般選用一般選用24種不同原理的分析方法組成一組鑒別試驗(yàn)種不同原理的分析方法組成一組鑒別試驗(yàn)鹽酸異丙嗪片鹽酸異丙嗪片 （ ChP2015）氧化顯色反應(yīng)氧化顯色反應(yīng) 氯化物的鑒別反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng) 薄層色譜法薄層色譜法(TLC)或高效液相色譜法或高效液相色譜法(HPL

9、C) 提取后紅外分光光度法提取后紅外分光光度法(IR)鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪 （ USP32-NF27） 紅外分光光度法紅外分光光度法(IR) 薄層色譜法薄層色譜法(TLC) 氯化物的鑒別反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng) 奮乃靜奮乃靜 （ EP7） 熔點(diǎn)測(cè)定熔點(diǎn)測(cè)定 紅外分光光度法紅外分光光度法(IR) 鹽酸硫利達(dá)嗪鹽酸硫利達(dá)嗪（ JP15） 氧化顯色反應(yīng)氧化顯色反應(yīng) 紅外分光光度法紅外分光光度法(IR) 氯化物的鑒別反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng) 一、化學(xué)鑒別法一、化學(xué)鑒別法SNR12R345678910 弱堿性弱堿性 易氧化性易氧化性 與金屬離子配合呈色與金屬離子配合呈色生物堿沉淀生物堿沉淀劑反應(yīng)劑反應(yīng) 氧化顯色

10、氧化顯色反應(yīng)反應(yīng)與鈀離子配合呈色與鈀離子配合呈色反應(yīng)反應(yīng)鹵素取代基鹵素取代基吩噻嗪類藥物的鹽酸鹽吩噻嗪類藥物的鹽酸鹽含鹵素取代基的反應(yīng)含鹵素取代基的反應(yīng) 氯化物的鑒別反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng) 【示例示例11-1 】鹽酸氯丙嗪鑒別鹽酸氯丙嗪鑒別 （JP15 ） 化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法1.與生物堿沉淀劑反應(yīng)與生物堿沉淀劑反應(yīng) 0.1g/20ml 稀鹽酸稀鹽酸3滴滴三硝基苯酚三硝基苯酚10ml 靜置靜置5小時(shí)小時(shí)生成沉淀生成沉淀 測(cè)定熔點(diǎn)測(cè)定熔點(diǎn)175179濾過(guò)濾過(guò), 洗滌洗滌 丙酮重結(jié)晶丙酮重結(jié)晶105干燥干燥1小時(shí)小時(shí)鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪片片鑒別？鑒別？ 三硝基苯酚沉淀三硝基苯酚沉淀再用丙酮重結(jié)晶再用

11、丙酮重結(jié)晶 測(cè)定熔點(diǎn)測(cè)定熔點(diǎn)2. 氧化顯色反應(yīng)氧化顯色反應(yīng)HNO3 FeCl3 H2SO4 H2O2 SNR12R345678910常用氧化劑常用氧化劑 化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法常見(jiàn)顯色常見(jiàn)顯色藥物藥物硫酸硫酸硝酸硝酸過(guò)氧化氫過(guò)氧化氫鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪顯紅色，漸變?yōu)榈S色顯紅色，漸變?yōu)榈S色鹽酸異丙嗪鹽酸異丙嗪顯櫻桃紅色，放顯櫻桃紅色，放置后顏色漸變深置后顏色漸變深生成紅色沉淀，加熱即溶解，溶生成紅色沉淀，加熱即溶解，溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色奮乃靜奮乃靜顯深紅色，放置顯深紅色，放置后紅色漸褪去后紅色漸褪去鹽酸氟奮乃靜鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色，溫?zé)犸@淡紅色，溫?zé)岷笞兂杉t褐色后變成紅褐

12、色鹽酸三氟拉嗪鹽酸三氟拉嗪生成微帶紅色的白色沉淀；放置生成微帶紅色的白色沉淀；放置后，紅色變深，加熱后變黃色后，紅色變深，加熱后變黃色鹽酸硫利達(dá)嗪鹽酸硫利達(dá)嗪顯藍(lán)色顯藍(lán)色化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法鹽酸異丙嗪鹽酸異丙嗪（2）取本品約）取本品約 0.1g，加水，加水3ml 溶解后，加硝溶解后，加硝酸酸 1ml，即生成，即生成紅色沉淀紅色沉淀；加熱，沉淀即溶解，；加熱，沉淀即溶解，溶液由溶液由紅色紅色轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色橙黃色。（1）取本品約）取本品約 5mg，加硫酸，加硫酸5ml 溶解后，溶溶解后，溶液顯液顯櫻桃紅色櫻桃紅色；放置后，；放置后，色漸變深。色漸變深。化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪示

13、例示例11-3 取本品約取本品約 10mg，加水，加水1ml溶解后，溶解后，加硝酸加硝酸5滴即滴即顯紅色顯紅色，漸變?yōu)?，漸變?yōu)榈S色淡黃色?；瘜W(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪片片鑒別？鑒別？ 示例示例11-4 示例示例11-5 11-6 JP15 三氯化鐵三氯化鐵 紅色紅色 3.與鈀離子配合顯色與鈀離子配合顯色 【示例示例11-7 】癸氟奮乃靜的鑒別癸氟奮乃靜的鑒別 ChP（2015） 取本品約取本品約 50mg，加甲醇，加甲醇2ml 溶解后，加溶解后，加 0.1% 氯化氯化鈀溶液鈀溶液 3ml，即有沉淀生成，并，即有沉淀生成，并顯紅色顯紅色，再加過(guò)量的氯化，再加過(guò)量的氯化鈀溶液，顏色變

14、深。鈀溶液，顏色變深。NSRRSNRRPd2+NSRR+PdCl22Cl化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法4.4.含鹵素取代基的反應(yīng)含鹵素取代基的反應(yīng)NSClCH2NNCH2CH2OH奮乃靜奮乃靜 綠綠色色化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法銅網(wǎng)銅網(wǎng) P297 (紅色) (無(wú)色) （如氟奮乃靜等含氟有機(jī)藥物）（如氟奮乃靜等含氟有機(jī)藥物） 4.含鹵素取代基的反應(yīng)含鹵素取代基的反應(yīng)鹽酸癸氟奮乃靜注射液鹽酸癸氟奮乃靜注射液 （ ChP2015） 加茜素鋯加茜素鋯碳酸鈉及碳酸鉀各約碳酸鈉及碳酸鉀各約100mg100mg600灰化灰化 20mg加鹽酸酸化、過(guò)濾加鹽酸酸化、過(guò)濾 加熱、蒸干加熱、蒸干化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法氟化物氟化物 酸

15、性茜素鋯試液酸性茜素鋯試液 ZrF62- (黃色) 茜素磺酸鈉茜素磺酸鈉 5.氯化物的鑒別反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng)鑒別反應(yīng)鑒別反應(yīng) 與與AgNO3的沉淀反應(yīng)的沉淀反應(yīng) 與與MnO2等氧化劑的氧化還原反應(yīng)等氧化劑的氧化還原反應(yīng) 化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法AgNO3沉淀反應(yīng)鑒別：由于硫氮雜蒽母核具有還原沉淀反應(yīng)鑒別：由于硫氮雜蒽母核具有還原性，稀性，稀HNO3的加入使該類藥物發(fā)生氧化顯色反應(yīng)。的加入使該類藥物發(fā)生氧化顯色反應(yīng)?？稍诠┰嚻啡芤褐锌稍诠┰嚻啡芤褐屑影痹囈菏钩蓧A性，吩噻嗪類藥加氨試液使成堿性，吩噻嗪類藥物析出，物析出，濾除沉淀，濾除沉淀，取濾液進(jìn)行試驗(yàn)。取濾液進(jìn)行試驗(yàn)。 MnO2等氧化劑的氧化還原

16、反應(yīng)進(jìn)行鑒別：等氧化劑的氧化還原反應(yīng)進(jìn)行鑒別： 注意：注意：硫氮雜蒽母核和氯離子均被氧化硫氮雜蒽母核和氯離子均被氧化鑒別方法：鑒別方法：具有揮發(fā)性的氧化產(chǎn)物氯氣使具有揮發(fā)性的氧化產(chǎn)物氯氣使 用水濕潤(rùn)用水濕潤(rùn)的的碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色碘化鉀淀粉試紙顯藍(lán)色鑒別反應(yīng)鑒別反應(yīng) 與與AgNO3的沉淀反應(yīng)的沉淀反應(yīng) 與與MnO2等氧化劑的氧化還原反應(yīng)等氧化劑的氧化還原反應(yīng) 化學(xué)鑒別法化學(xué)鑒別法5.氯化物的鑒別反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng)化學(xué)法小結(jié)化學(xué)法小結(jié) （一）（一）與生物堿沉淀劑反應(yīng)與生物堿沉淀劑反應(yīng): :與生物堿沉淀劑形成與生物堿沉淀劑形成衍生物，測(cè)定熔點(diǎn)衍生物，測(cè)定熔點(diǎn)SNR12R345678910（二）（

17、二）氧化顯色反應(yīng)氧化顯色反應(yīng)：S原子為原子為-2價(jià)，具有還原性價(jià)，具有還原性（三）（三）與鈀離子配合呈色與鈀離子配合呈色：Pd2+與與S配合配合（四）（四）含鹵素取代基的反應(yīng)含鹵素取代基的反應(yīng): 焰色反應(yīng)；顯色反應(yīng)焰色反應(yīng)；顯色反應(yīng)（五）（五）氯化物的鑒別反應(yīng)氯化物的鑒別反應(yīng)： AgNO3沉淀反應(yīng)；沉淀反應(yīng)；MnO2氧化還原反應(yīng)氧化還原反應(yīng)1. 紫外分光光度法紫外分光光度法 母核在母核在205 nm、254 nm和和300 nm三個(gè)波長(zhǎng)處附三個(gè)波長(zhǎng)處附近有最大吸收，近有最大吸收，最強(qiáng)峰多在最強(qiáng)峰多在 250265nm 2位上的取代基位上的取代基(R)不同，會(huì)引起吸收峰發(fā)生位移不同，會(huì)引起吸收峰

18、發(fā)生位移其結(jié)構(gòu)中其結(jié)構(gòu)中-2 價(jià)的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜?jī)r(jià)的硫，易氧化，氧化產(chǎn)物砜及亞砜產(chǎn)生四個(gè)吸收峰產(chǎn)生四個(gè)吸收峰二、光譜法二、光譜法 ChP2010收載的吩噻嗪類原料藥均采用紅外分收載的吩噻嗪類原料藥均采用紅外分光光度法光光度法(IR)鑒別，制劑提取后鑒別，制劑提取后IR鑒別。鑒別。光譜法光譜法2. 紅外分光光度法紅外分光光度法 鹽酸氯丙嗪鹽酸氯丙嗪鹽酸異丙嗪鹽酸異丙嗪 光譜法光譜法三、色譜法三、色譜法主要用于吩噻嗪類藥物及其制劑的鑒別主要用于吩噻嗪類藥物及其制劑的鑒別方法：方法：對(duì)照品法對(duì)照品法 要求供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的要求供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的顏色顏色和和位置位置與對(duì)照品溶液的

19、主斑點(diǎn)相同。與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)相同。TLC法法 主要用于吩噻嗪類藥物及其制劑的鑒別主要用于吩噻嗪類藥物及其制劑的鑒別 HPLC法法 方法：對(duì)照品法方法：對(duì)照品法要求在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試要求在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品峰的品峰的tR與對(duì)照品峰的與對(duì)照品峰的tR一致。一致。吩噻嗪類藥物還可以通過(guò)熔點(diǎn)測(cè)定進(jìn)行鑒別吩噻嗪類藥物還可以通過(guò)熔點(diǎn)測(cè)定進(jìn)行鑒別 【示例示例11-22】 EP7奮乃靜鑒別法：照毛細(xì)管法測(cè)定，奮乃靜鑒別法：照毛細(xì)管法測(cè)定，本品的熔點(diǎn)為本品的熔點(diǎn)為96100。 四、其他方法四、其他方法 CCDABC有哪些有關(guān)物質(zhì)？有哪些有關(guān)物質(zhì)？ NH2COOHN2ClCOO

20、HClCOOHNaNO2, HClCu2Cl2ClH2NCOOHNHClNHClSNSNHClSNCH2CH2CH2N(CH3)2重氮化Cu脫羧Fe縮合環(huán)合S, I2SN分離異構(gòu)體C6H5Cl, CClCH2CH2CH2N(CH3)2, NaOH縮合SNCH2CH2CH2N(CH3)2HClHCl, C2H5OH成鹽3-氯二苯胺（）2-氯-10H-吩噻嗪（）ClClClClHH合合成成路路線線殘留的中間產(chǎn)物殘留的中間產(chǎn)物 HNCl3-氯二苯胺 (I)SHNCl2-氯-10H-吩噻嗪 (II)3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N-甲基-1-丙胺 ()SNCH2CH2CH2NHCH3ClN

21、-3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)丙基-N,N,N-三甲基-1,3-丙二胺 ()SNCH2CH2CH2NCH3CH2CH2CH2N(CH3)2Cl有哪些有關(guān)物質(zhì)？有哪些有關(guān)物質(zhì)？ 貯藏過(guò)程中產(chǎn)生的有關(guān)物質(zhì)貯藏過(guò)程中產(chǎn)生的有關(guān)物質(zhì) 3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺S-氧化物（）SNCH2CH2CH2N(CH3)2OCl3-(2-氯-10H-吩噻嗪-10-基)-N,N-二甲基-1-丙胺N-氧化物（）SNCH2CH2CH2N(CH3)2ClO有哪些有關(guān)物質(zhì)？有哪些有關(guān)物質(zhì)？ 有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì): : 一、一、殘留的中間產(chǎn)物殘留的中間產(chǎn)物 二、貯藏過(guò)程中產(chǎn)生的有

22、關(guān)物質(zhì)二、貯藏過(guò)程中產(chǎn)生的有關(guān)物質(zhì) 如何檢查這些有關(guān)物質(zhì)？如何檢查這些有關(guān)物質(zhì)？ 測(cè)定方法測(cè)定方法 樣品液樣品液10.1%-1.0% 溶液溶液 樣品液樣品液20.01%-0.1% 溶液溶液 有關(guān)物質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)檢查 高低濃度對(duì)照法高低濃度對(duì)照法薄層色譜（薄層色譜（TLC） 高效液相色譜（高效液相色譜（HPLC） （一）TLC薄層色譜很直觀，薄層色譜很直觀，定性定量用途寬。定性定量用途寬。定性根據(jù)比移值，定性根據(jù)比移值，半定量法靠斑點(diǎn)。半定量法靠斑點(diǎn)。樣1樣2TLC判斷判斷: 控制雜質(zhì)斑點(diǎn)個(gè)數(shù)，控制雜質(zhì)斑點(diǎn)個(gè)數(shù)， 控制雜質(zhì)種類控制雜質(zhì)種類 樣樣1雜質(zhì)斑點(diǎn)強(qiáng)度不得雜質(zhì)斑點(diǎn)強(qiáng)度不得 超過(guò)樣超過(guò)樣2主

23、斑點(diǎn)主斑點(diǎn)10l 10l 硅膠硅膠G G板板 供試液：供試液： 對(duì)照液：對(duì)照液：TLCTLC試驗(yàn)：試驗(yàn)： 5mg/ml 5mg/ml 25g/ml25g/ml 展開(kāi)后晾干展開(kāi)后晾干 空氣中干空氣中干 燥燥20min 20min 紫外燈下檢視紫外燈下檢視 判定雜判定雜 質(zhì)斑點(diǎn)質(zhì)斑點(diǎn) USP32-NF27檢查法檢查法 特點(diǎn)：特點(diǎn)： （1 1）簡(jiǎn)便易行，不需特殊的儀器；）簡(jiǎn)便易行，不需特殊的儀器； （2 2）只能控制單個(gè)雜質(zhì)的限量。）只能控制單個(gè)雜質(zhì)的限量。 （二）（二）HPLC法法 1. 峰面積歸一化法峰面積歸一化法2. 不加校正因子的主成分自身對(duì)照法不加校正因子的主成分自身對(duì)照法3. 加校正因子

24、的主成分自身對(duì)照法（有對(duì)照品）加校正因子的主成分自身對(duì)照法（有對(duì)照品） 4. 內(nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定雜質(zhì)的含量?jī)?nèi)標(biāo)法加校正因子測(cè)定雜質(zhì)的含量(有對(duì)照品有對(duì)照品) 5. 外標(biāo)法外標(biāo)法(有對(duì)照品有對(duì)照品)（二）（二）HPLC法法 （高低濃度對(duì)比法）（高低濃度對(duì)比法）ttAA供試品供試品 對(duì)照液對(duì)照液 判定方法：判定方法：v 規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目v 規(guī)定雜質(zhì)峰面積規(guī)定雜質(zhì)峰面積特點(diǎn)：特點(diǎn)： （1 1）需特殊儀器；）需特殊儀器； （2 2）可以控制雜質(zhì)總量。）可以控制雜質(zhì)總量。 Waters Waters 液相色譜儀液相色譜儀2690 2690 島津液相色譜儀島津液相色譜儀LC-10A LC-1

25、0A 供試液：供試液： 0.4mg/mL0.4mg/mL 對(duì)照液：對(duì)照液：0.002mg/mL0.002mg/mL ChP2015檢查法檢查法 雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量? ? 單個(gè)不大于，總和不單個(gè)不大于，總和不超過(guò)超過(guò)2倍倍 %5 . 0%1004 . 01002. 0單個(gè)L%1%1004 . 02002. 0總和LChP2015檢查法檢查法 CCDABC吩噻嗪類藥物吩噻嗪類藥物含量測(cè)定含量測(cè)定？ 酸堿滴定酸堿滴定分光光度法分光光度法HPLC HPLC-MS 一、酸堿滴定法一、酸堿滴定法1. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 進(jìn)行非水酸堿滴定的原因：進(jìn)行非水酸堿滴定的原因：許多弱酸、弱堿不能直接在水溶液

26、中滴定許多弱酸、弱堿不能直接在水溶液中滴定(CK HBr H2SO4 HCl HNO3冰醋酸是強(qiáng)酸的區(qū)分溶劑。強(qiáng)酸在冰醋酸中的總強(qiáng)冰醋酸是強(qiáng)酸的區(qū)分溶劑。強(qiáng)酸在冰醋酸中的總強(qiáng)度的順序?yàn)椋憾鹊捻樞驗(yàn)椋?? HBr HCl HNO3 HClO4 H2SO4酸性溶劑是弱堿的均化性溶劑，是強(qiáng)酸的區(qū)分性溶劑酸性溶劑是弱堿的均化性溶劑，是強(qiáng)酸的區(qū)分性溶劑 堿性溶劑是弱酸的均化性溶劑，是強(qiáng)堿的區(qū)分性溶劑堿性溶劑是弱酸的均化性溶劑，是強(qiáng)堿的區(qū)分性溶劑 + +HClO4滴定滴定 空白試驗(yàn)空白試驗(yàn)校正校正終點(diǎn)指示終點(diǎn)指示 10ml30mll8pKb10 冰醋酸作溶劑冰醋酸作溶劑l10pKb12 冰醋酸冰醋酸+醋酐

27、醋酐lpKb12 醋酐醋酐弱堿的滴定弱堿的滴定有機(jī)堿及其有機(jī)堿及其鹽類供試品鹽類供試品冰醋酸冰醋酸 結(jié)果結(jié)果 電位指示終點(diǎn)法電位指示終點(diǎn)法 SNR12R345678910HAc體積隨溫度變化較大，且還具有揮發(fā)性，測(cè)定樣體積隨溫度變化較大，且還具有揮發(fā)性，測(cè)定樣品與標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)溫度不同，應(yīng)對(duì)濃度進(jìn)行校正品與標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)溫度不同，應(yīng)對(duì)濃度進(jìn)行校正。)(0011. 010101ttNN如果：如果： t1-t0 10 C或貯存時(shí)間超過(guò)或貯存時(shí)間超過(guò)30天天則在臨用前必須重新標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。則在臨用前必須重新標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度。標(biāo)準(zhǔn)溶液的穩(wěn)定性標(biāo)準(zhǔn)溶液的穩(wěn)定性等當(dāng)點(diǎn)等當(dāng)點(diǎn) H+ + Cl- +

28、NaOH NaCl + H2OBH+ +Cl- + NaOH B + H2O + NaCl 突躍體積突躍體積V1V2 滴定體積滴定體積 VV2V1 乙醇乙醇-水溶液中，采用水溶液中，采用NaOH滴定；在反應(yīng)體系滴定；在反應(yīng)體系加入適量鹽酸，采用電位滴定法指示終點(diǎn)加入適量鹽酸，采用電位滴定法指示終點(diǎn)一、酸堿滴定法一、酸堿滴定法2. 乙醇乙醇-水溶液中的氫氧化鈉滴定法水溶液中的氫氧化鈉滴定法 1.直接分光光度法直接分光光度法(原料藥原料藥) 2.提取后分光光度法提取后分光光度法(制劑制劑)3.提取后雙波長(zhǎng)分光光度法提取后雙波長(zhǎng)分光光度法(去除氧化物干擾去除氧化物干擾) 4.二階導(dǎo)數(shù)分光光度法二階導(dǎo)

29、數(shù)分光光度法(自學(xué)自學(xué))5.鈀離子比色法鈀離子比色法 二、分光光度法二、分光光度法 3.提取后雙波長(zhǎng)分光光度法提取后雙波長(zhǎng)分光光度法 提取后分光光度法能夠除去一些干擾物提取后分光光度法能夠除去一些干擾物質(zhì)，但卻質(zhì)，但卻不能不能除去吩噻嗪類藥物的除去吩噻嗪類藥物的氧化物氧化物。提取時(shí)，氧化物隨游離堿進(jìn)入有機(jī)相；測(cè)定提取時(shí)，氧化物隨游離堿進(jìn)入有機(jī)相；測(cè)定時(shí)，因結(jié)構(gòu)相近，時(shí)，因結(jié)構(gòu)相近，氧化物氧化物在吩噻嗪類藥物的在吩噻嗪類藥物的測(cè)定波長(zhǎng)處產(chǎn)生吸收測(cè)定波長(zhǎng)處產(chǎn)生吸收，干擾測(cè)定。，干擾測(cè)定。 121122121212121%1%1cm()1cm()()()()=(EE) a ba bababaaaab

30、baAAAAAAAAAC lC lAAAC 即，即，吸收度差值（吸收度差值（ A）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無(wú)關(guān)，干擾組分的干擾被消除。而與干擾組分無(wú)關(guān)，干擾組分的干擾被消除。 定量依據(jù)：樣品在二波長(zhǎng)下吸收度差值定量依據(jù)：樣品在二波長(zhǎng)下吸收度差值（ A） 【示例示例11-37】 鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定（鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定（ USP32-NF27） 式中：式中：C(mg/ml)為對(duì)照品溶液的濃度；為對(duì)照品溶液的濃度； V(ml)為所取供試品的體積；為所取供試品的體積； 括號(hào)內(nèi)的公式分別為供試品溶液括號(hào)內(nèi)的公式分別為供試品溶液(U)和對(duì)照品溶液和對(duì)照

31、品溶液(S)在下標(biāo)所示波長(zhǎng)處的吸光度差。在下標(biāo)所示波長(zhǎng)處的吸光度差。測(cè)定波長(zhǎng)測(cè)定波長(zhǎng)：254nm（最大吸收波長(zhǎng)）（最大吸收波長(zhǎng)）277nm（等吸收波長(zhǎng)）（等吸收波長(zhǎng)） 空白對(duì)照液空白對(duì)照液：0.1mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液 計(jì)算公式計(jì)算公式：25427725427712.5 () /()USC AAV AA 吩噻嗪類藥物在吩噻嗪類藥物在pH 20.1的緩沖溶液中，與的緩沖溶液中，與鈀離子鈀離子(Pd2+)形成紅色配合物，在形成紅色配合物，在500nm波長(zhǎng)附波長(zhǎng)附近具有最大吸收近具有最大吸收 由于由于鈀離子僅與未被氧化的硫元素配合顯色鈀離子僅與未被氧化的硫元素配合顯色，消除了消除了藥物中藥物中氧

32、化物氧化物對(duì)測(cè)定的對(duì)測(cè)定的干擾干擾。 比色液的濃度：比色液的濃度：50 250 g/mL 顯色穩(wěn)定性：顯色穩(wěn)定性：10分鐘后可穩(wěn)定約分鐘后可穩(wěn)定約2小時(shí)小時(shí) 5. 鈀離子比色法鈀離子比色法【示例示例11-38】鹽酸異丙嗪注射液鹽酸異丙嗪注射液USP32-NF276.25mg 加加飽和飽和氯化鉀溶液氯化鉀溶液氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液堿化堿化甲醇甲醇正庚烷正庚烷提取提取3次次 470nm處測(cè)定處測(cè)定吸收度吸收度 合并提取液合并提取液鹽酸酸化鹽酸酸化提取提取3次次 合并提取液合并提取液并定容至并定容至50ml標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品溶液各品溶液各2ml +PdCl2顯色顯色ODS 三、高效液相色譜

33、法三、高效液相色譜法1. 反相高效液相色譜法反相高效液相色譜法 方法特點(diǎn)：方法特點(diǎn)： ODSODS內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法+ +校正因子校正因子 甲醇甲醇- -水；乙腈水；乙腈- -水水 紫外紫外 三乙胺溶液三乙胺溶液- -甲醇甲醇- -乙腈乙腈 u色譜柱：色譜柱：u流動(dòng)相：流動(dòng)相：u檢測(cè)器：檢測(cè)器：u定量法：定量法：SNR12R3456789102. 離子對(duì)高效液相色譜法離子對(duì)高效液相色譜法 SNR12R345678910極性強(qiáng)極性強(qiáng) 反相反相ODS柱保留弱柱保留弱 影響離子對(duì)形成的條件影響離子對(duì)形成的條件反離子的性質(zhì)與濃度反離子的性質(zhì)與濃度流動(dòng)相的組成流動(dòng)相的組成流動(dòng)相流動(dòng)相pH離子強(qiáng)度離子強(qiáng)度常用的

34、離子對(duì)試劑：常用的離子對(duì)試劑：烷基磺酸鹽陰離子對(duì)試劑，如烷基磺酸鹽陰離子對(duì)試劑，如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷磺酸鈉等。戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷磺酸鈉等。 影響條件：影響條件：流動(dòng)相一般呈酸性，以利于生物堿的離解流動(dòng)相一般呈酸性，以利于生物堿的離解離子對(duì)試劑的離子對(duì)試劑的非極性部分越大非極性部分越大，形成的離子對(duì)分配系數(shù)，形成的離子對(duì)分配系數(shù)越大，保留時(shí)間越長(zhǎng)（十二烷基磺酸鈉庚烷磺酸鈉戊越大，保留時(shí)間越長(zhǎng)（十二烷基磺酸鈉庚烷磺酸鈉戊烷磺酸鈉）烷磺酸鈉）SNR12R345678910四、液相色譜四、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) 液相色譜液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)集質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)集HPLC

35、的高分離效能的高分離效能和和MS的高專屬性及高靈敏度于一體，已經(jīng)成為目的高專屬性及高靈敏度于一體，已經(jīng)成為目前測(cè)定復(fù)雜生物樣本中微量藥物的首選方法，同時(shí)前測(cè)定復(fù)雜生物樣本中微量藥物的首選方法，同時(shí)也是進(jìn)行藥物及有關(guān)物質(zhì)定性分析的常用方法。也是進(jìn)行藥物及有關(guān)物質(zhì)定性分析的常用方法?；颈疽笄髴?yīng)用應(yīng)用：本類藥物的鑒別試驗(yàn)：本類藥物的鑒別試驗(yàn) 酸堿滴定法含量測(cè)定酸堿滴定法含量測(cè)定 離子對(duì)高效液相色譜法離子對(duì)高效液相色譜法 描述描述：本類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)：本類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 本章小結(jié)本章小結(jié) 1. 有氧化產(chǎn)物存在時(shí)，吩噻嗪類藥物的鑒別方法為A. 非水溶液滴定法B. 紫外分光光度法C. 熒光分光光度法D. 鈀離子比色法E. pH指示劑吸收度比值法