高等環(huán)境化學(xué)有機(jī)物定量

1、 概念：概念： QSAR是用數(shù)學(xué)模型描述物質(zhì)的分子是用數(shù)學(xué)模型描述物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)與生物活性之間關(guān)系的方法。結(jié)構(gòu)與生物活性之間關(guān)系的方法。 基本思想：基本思想： 化合物的分子結(jié)構(gòu)包含了決定其理化化合物的分子結(jié)構(gòu)包含了決定其理化性質(zhì)的信息，而化合物的理化性質(zhì)決性質(zhì)的信息，而化合物的理化性質(zhì)決定的其生物活性。因此，分子結(jié)構(gòu)與定的其生物活性。因此，分子結(jié)構(gòu)與活性相關(guān)?；钚韵嚓P(guān)。 Y = f(x1, x2, , xn)有機(jī)物的定量結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系有機(jī)物的定量結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系(QSAR)(Quantitative Structure Activity Relationship) QSAR的發(fā)展的發(fā)展1868

2、Crum-Brown提出其基本思想；提出其基本思想；1935 Hammett提出計(jì)算取代苯甲酸解離常數(shù)的經(jīng)驗(yàn)方程，提出計(jì)算取代苯甲酸解離常數(shù)的經(jīng)驗(yàn)方程，Taft改進(jìn)后形成計(jì)算酯類化合物水解反應(yīng)速率常數(shù)經(jīng)驗(yàn)方程；改進(jìn)后形成計(jì)算酯類化合物水解反應(yīng)速率常數(shù)經(jīng)驗(yàn)方程；1962年年Hansch首次將生理活性參數(shù)引入分析模型，隨后首次將生理活性參數(shù)引入分析模型，隨后Hansch- Fujita，F(xiàn)ree-Wilson等相繼作出的大量改進(jìn)在藥學(xué)等領(lǐng)等相繼作出的大量改進(jìn)在藥學(xué)等領(lǐng)域產(chǎn)生巨大影響，標(biāo)志著域產(chǎn)生巨大影響，標(biāo)志著QSAR時(shí)代的開始時(shí)代的開始(2D時(shí)代時(shí)代)；1979-1980年，年，Crippen、

3、Hopfinger相繼提出相繼提出“距離幾何學(xué)的距離幾何學(xué)的3D- QSAR”和和“分子形狀分析法分子形狀分析法”；特別是；特別是1988年年Cramer等提等提出的出的“比較分子力場(chǎng)法比較分子力場(chǎng)法”(Comfa)在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用，在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用，QSAR研究進(jìn)入研究進(jìn)入3D時(shí)代；時(shí)代；1990至今，隨著計(jì)算機(jī)的普遍應(yīng)用，眾多生物大分子三維結(jié)構(gòu)至今，隨著計(jì)算機(jī)的普遍應(yīng)用，眾多生物大分子三維結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確測(cè)定，的準(zhǔn)確測(cè)定，QSAR的研究更加豐富多彩，在藥學(xué)、環(huán)境毒理的研究更加豐富多彩，在藥學(xué)、環(huán)境毒理等領(lǐng)域的應(yīng)用更加廣泛。等領(lǐng)域的應(yīng)用更加廣泛。 Hansch 分析法分析法 Hansch認(rèn)為同

4、一骨架衍生物，其生物活性取決于取代基認(rèn)為同一骨架衍生物，其生物活性取決于取代基疏水疏水性、電性和立體效應(yīng)。性、電性和立體效應(yīng)。疏水性參數(shù)疏水性參數(shù)( ) 單一取代基時(shí)：?jiǎn)我蝗〈鶗r(shí)： = lgPx lgPH i個(gè)取代基時(shí)：個(gè)取代基時(shí)： = lgPi lgPH電性參數(shù)電性參數(shù)( 或或 *) 芳香族化合物用芳香族化合物用Hammett參數(shù)：參數(shù)： = lgKx - lgKH KH:苯甲酸電離常數(shù)，苯甲酸電離常數(shù)， Kx:苯甲酸環(huán)上苯甲酸環(huán)上H被被X取代后電離常數(shù)取代后電離常數(shù) 脂肪族化合物用脂肪族化合物用Taft參數(shù)：參數(shù)： * = (1/2.48)lg(k/k0)B - lg(k/k0)A (k

5、/k0)B、(k/k0)A:分別為堿性、酸性條件下乙酸酯分別為堿性、酸性條件下乙酸酯(被取代后被取代后(X-CH2COOC2H5)水解速率常數(shù)之比。水解速率常數(shù)之比。Taft參數(shù)的根據(jù)參數(shù)的根據(jù)RCOROH2+OHRCOROH-O酯酸催化水解過渡態(tài)酯酸催化水解過渡態(tài)酯堿催化水解過渡態(tài)酯堿催化水解過渡態(tài)水解機(jī)理表明：在酸解時(shí)，水解機(jī)理表明：在酸解時(shí)，R上取代基對(duì)速率上取代基對(duì)速率k的影響主要的影響主要取決于空間立體效應(yīng)，電子效應(yīng)很小取決于空間立體效應(yīng)，電子效應(yīng)很小(極性基團(tuán)的影響遠(yuǎn)不極性基團(tuán)的影響遠(yuǎn)不如堿解時(shí)大如堿解時(shí)大)；堿解時(shí)空間、電子效應(yīng)同時(shí)存在，且酸、堿；堿解時(shí)空間、電子效應(yīng)同時(shí)存在，且

6、酸、堿水解過渡態(tài)空間位阻效應(yīng)僅是兩個(gè)小水解過渡態(tài)空間位阻效應(yīng)僅是兩個(gè)小H原子的差別，故堿解原子的差別，故堿解減去酸解結(jié)果可近似看做是取代基極性減去酸解結(jié)果可近似看做是取代基極性(電性或誘導(dǎo)效應(yīng)電性或誘導(dǎo)效應(yīng))對(duì)對(duì)水解的影響。水解的影響。酯酰質(zhì)子化水解機(jī)理酯酰質(zhì)子化水解機(jī)理親核加成消除水解機(jī)理親核加成消除水解機(jī)理立體參數(shù)立體參數(shù)(Es或或R) 由于酯酸解時(shí)其空間位阻比極性誘導(dǎo)電效應(yīng)的影響大得多，故由于酯酸解時(shí)其空間位阻比極性誘導(dǎo)電效應(yīng)的影響大得多，故Taft脂肪族化合物的立體參數(shù)脂肪族化合物的立體參數(shù)Es： Es = lg(k/k0)A 立體參數(shù)摩爾折射度立體參數(shù)摩爾折射度R表示：表示： R =

7、 (n2- 1)M / (n2+1) Hansch方程方程 在最適藥物疏水常數(shù)時(shí)在最適藥物疏水常數(shù)時(shí)(及藥物生物體內(nèi)傳輸無(wú)疏水性障礙）及藥物生物體內(nèi)傳輸無(wú)疏水性障礙）可從理論上推導(dǎo)活性可從理論上推導(dǎo)活性(1/c) 與參數(shù)的關(guān)系，與參數(shù)的關(guān)系，Hansch方程方程(可參可參考藥學(xué)專著考藥學(xué)專著): lg(1/c) = -a(lgP)2 + blgP + c +dEs + e 為拋物線關(guān)系為拋物線關(guān)系 一般地：一般地： lg(1/c) = blgP + c +dEs + e 為線性關(guān)系。為線性關(guān)系。Hammett 與與Taft方程方程電離、水解速率常數(shù)的估算電離、水解速率常數(shù)的估算 Hammett

8、研究研究苯系苯系衍生物反應(yīng)活性時(shí)發(fā)現(xiàn)，苯環(huán)間位與對(duì)位衍生物反應(yīng)活性時(shí)發(fā)現(xiàn)，苯環(huán)間位與對(duì)位取代基對(duì)苯環(huán)側(cè)鏈反應(yīng)中心的電子效應(yīng)有如下規(guī)律：取代基對(duì)苯環(huán)側(cè)鏈反應(yīng)中心的電子效應(yīng)有如下規(guī)律： lg(k/k0) = 或：或：lgk = + lgk0X，間或?qū)ξ蝗〈鶊F(tuán)，間或?qū)ξ蝗〈鶊F(tuán)，Y為側(cè)鏈反應(yīng)中心；為側(cè)鏈反應(yīng)中心；k0，k，分別為母體及含取代基，分別為母體及含取代基X的反應(yīng)速率的反應(yīng)速率(電離平衡電離平衡)常數(shù)；常數(shù)； ：取代基常數(shù)：取代基常數(shù)(Hammett參數(shù)參數(shù))，與，與X性質(zhì)、位置、數(shù)量有關(guān)；性質(zhì)、位置、數(shù)量有關(guān)； ：反應(yīng)常數(shù)或反應(yīng)敏感系數(shù)，僅與反應(yīng)類型和條件有關(guān)：反應(yīng)常數(shù)或反應(yīng)敏感系數(shù)，僅

9、與反應(yīng)類型和條件有關(guān)(規(guī)規(guī)定定25C時(shí)苯甲酸水溶液電離反應(yīng)基準(zhǔn)時(shí)苯甲酸水溶液電離反應(yīng)基準(zhǔn) =1）。Hammett方程方程XY對(duì)鄰位取代苯衍生物及脂肪族有機(jī)酯水解，對(duì)鄰位取代苯衍生物及脂肪族有機(jī)酯水解，Taft考慮引考慮引入空間效應(yīng)的影響，改進(jìn)入空間效應(yīng)的影響，改進(jìn)Hammett方程后得到方程后得到Taft方程：方程：lg(k/k0) = * * + Es *, ：分別為反應(yīng)對(duì)極性效應(yīng)及空間效應(yīng)的敏感系數(shù)，：分別為反應(yīng)對(duì)極性效應(yīng)及空間效應(yīng)的敏感系數(shù)，25C時(shí)酯類反應(yīng)時(shí)酯類反應(yīng) = 1，其它符號(hào)意義同前。其中脂肪族，其它符號(hào)意義同前。其中脂肪族 * 的計(jì)算以乙酸甲酯為母體。的計(jì)算以乙酸甲酯為母體。

10、Taft方程方程 Hammett方程僅適用于苯環(huán)間位與對(duì)位取代基誘導(dǎo)及共軛效方程僅適用于苯環(huán)間位與對(duì)位取代基誘導(dǎo)及共軛效應(yīng)的影響，當(dāng)基團(tuán)處于反應(yīng)中心鄰位或?qū)μ兼湉澢^大的脂肪應(yīng)的影響，當(dāng)基團(tuán)處于反應(yīng)中心鄰位或?qū)μ兼湉澢^大的脂肪族有機(jī)物時(shí)，空間立體效應(yīng)增大，族有機(jī)物時(shí)，空間立體效應(yīng)增大，Hammett 方程不再適用。方程不再適用。對(duì)脂肪族有機(jī)酸電離：對(duì)脂肪族有機(jī)酸電離：lg(K/K0) = * *舉例舉例1、估算對(duì)特丁基苯甲酸的離解常數(shù)、估算對(duì)特丁基苯甲酸的離解常數(shù)解：苯甲酸：解：苯甲酸：Ka = 6.26 10-5， = 1 查取代基常數(shù)表查取代基常數(shù)表 ：對(duì)特丁基：對(duì)特丁基C(CH3)的的

11、 = -0.197， 由由Hammett方程：方程：lg(K/K0) = 得：得： K= 6.26 10-5 10-0.197 = 3.98 10-5（與實(shí)測(cè)相符）（與實(shí)測(cè)相符）2、估算、估算4-甲基甲基-3,5-二硝基苯甲酸的離解常數(shù)二硝基苯甲酸的離解常數(shù)解：苯甲酸：解：苯甲酸：Ka = 6.26 10-5， = 1 查取代基常數(shù)表查取代基常數(shù)表 ： 4-甲基甲基 = -0.170， 3,5-二硝基二硝基 = 1.395 加和加和 T = 1.225 由由Hammett方程：方程：lg(K/K0) = 得：得： K= 6.26 10-5 101.225 = 1.05 10-3（實(shí)測(cè)（實(shí)測(cè)1.

12、07 10-3）3、估算異戊酸的離解常數(shù)、估算異戊酸的離解常數(shù)解：選取母體解：選取母體RCH2COOH： * = 1.75， pKa = 4.76 取代基取代基-C3H7常數(shù)：常數(shù)： * = 0.13 Taft方程（電離）方程（電離） lg(K/K0) = * * ， 即：即： pK = pKa * * = 4.76 (0.13) 1.75 = 4.99 (實(shí)測(cè)實(shí)測(cè)4.79）4、用、用Hammett相關(guān)估算硝基苯甲酸乙酯水解的相關(guān)估算硝基苯甲酸乙酯水解的kH，并計(jì)算，并計(jì)算pH = 6時(shí)的水解半衰期時(shí)的水解半衰期(只考慮酸催化只考慮酸催化)。( (25時(shí)苯甲酸乙酯時(shí)苯甲酸乙酯酸水解速率常數(shù)為酸

13、水解速率常數(shù)為110-7mol-1Ls-1, = 0.11， = 0.788，假，假定中性及堿性條件下水解常數(shù)均為定中性及堿性條件下水解常數(shù)均為0） 解：解：（1）Hammett方程式：方程式：lg(KNO3/KH) = NO3， 則：則： lgKNO3 = lgKH + NO3 = -7 + 0.788 0.11 = -0.690 KNO3= 1.2 10-7 mol-1L.s-1 （2）有機(jī)物準(zhǔn)一級(jí)水解速率常數(shù)）有機(jī)物準(zhǔn)一級(jí)水解速率常數(shù)KR公式：公式： KR = KAH+ + KN + KBKW/H+ 由已知條件：由已知條件： KR = KAH+ = 1.2 10-7 10-6 = 1.2

14、 10-13(s-1) t1/2 = 0.693/KR = 0.693/1.2 10-13 = 5.8 1012 (s) = 1.8 105 (a) 1975，Randic提出，提出，Kie&Hall發(fā)展。發(fā)展?；舅枷耄夯舅枷耄夯衔锓肿又性拥姆N類、數(shù)量，連接方式，價(jià)鍵種類及空間化合物分子中原子的種類、數(shù)量，連接方式，價(jià)鍵種類及空間結(jié)構(gòu)信息構(gòu)成了分子的基本特征，將這些信息數(shù)字化并與分子結(jié)構(gòu)信息構(gòu)成了分子的基本特征，將這些信息數(shù)字化并與分子的性質(zhì)或生物活性相關(guān)聯(lián)，即分子連接性指數(shù)法的性質(zhì)或生物活性相關(guān)聯(lián)，即分子連接性指數(shù)法(Molecular Connectivity Indice

15、s)。研究的理論基礎(chǔ)：拓?fù)鋵W(xué)研究的理論基礎(chǔ)：拓?fù)鋵W(xué)(Topology)分子連接性指數(shù)法分子連接性指數(shù)法(MCI)簡(jiǎn)單分子連接性指數(shù)簡(jiǎn)單分子連接性指數(shù)CH3CHCH3CHCH3CH2CH3路徑路徑(path)簇簇(cluster)2,3-二甲基戊烷二甲基戊烷隱氫圖隱氫圖分子碎片分子碎片零階頂點(diǎn)零階頂點(diǎn)0X一階路徑一階路徑1Xp二階路徑二階路徑2Xp三階路徑三階路徑3Xp三階簇三階簇3Xc四階路徑四階路徑/簇簇4Xpc五階環(huán)五階環(huán)5Xr六階環(huán)六階環(huán)6Xr分子碎片圖分子碎片圖隱氫圖隱氫圖非氫原子的連接特征值非氫原子的連接特征值點(diǎn)價(jià)點(diǎn)價(jià)( )： = h ：非氫原子按：非氫原子按 鍵結(jié)合所提供的電子數(shù)；

16、鍵結(jié)合所提供的電子數(shù)； h：非氫原子上結(jié)合的氫原子數(shù)。：非氫原子上結(jié)合的氫原子數(shù)。 因此，非氫原子點(diǎn)價(jià)因此，非氫原子點(diǎn)價(jià) 的實(shí)質(zhì)是與該原子相鄰的非氫原子的實(shí)質(zhì)是與該原子相鄰的非氫原子數(shù)或形成的非氫數(shù)或形成的非氫 鍵數(shù)鍵數(shù) 。簡(jiǎn)單分子連接性指數(shù)簡(jiǎn)單分子連接性指數(shù)：t = p, c時(shí)：時(shí)：k = m+1t = r 時(shí)：時(shí)： k = mmXt = ( 1 2 k)i-1/21nk：原子數(shù)目，：原子數(shù)目，m：指數(shù)階數(shù)，：指數(shù)階數(shù)， i：子圖數(shù)目，：子圖數(shù)目，t: 連接類型連接類型簡(jiǎn)單分子連接性指數(shù)體現(xiàn)非氫原子的簡(jiǎn)單分子連接性指數(shù)體現(xiàn)非氫原子的 鍵結(jié)合狀態(tài)，可反映飽鍵結(jié)合狀態(tài)，可反映飽和烴有機(jī)物的結(jié)合狀

17、態(tài)。和烴有機(jī)物的結(jié)合狀態(tài)。例例：計(jì)算異戊烷分子的：計(jì)算異戊烷分子的0X、 1Xp、 2Xp、 4Xpc111320X = i-1/2 = 3 1-0.5 + 3-0.5 + 2-0.5 = 3 + 0.577 + 0.707 = 4.284111323321Xp = ( i j )-1/2 = (1 3)-0.5 +(1 3)-0.5 +(3 2)-0.5 +(1 2)-0.5 = 2.2692Xp = ( i j l )-1/2 = (1 3 1)-0.5 +(1 3 2)-0.5 +(1 3 2)-0.5 +(3 2 1)-0.5 = 1.8011131321321324Xpc = ( 1

18、 2 3 4 5 )-1/2 = (1 1 3 2 1)-0.5 = 2.44911132價(jià)價(jià)鍵鍵連接性指數(shù)連接性指數(shù)：考慮非飽和鍵及雜原子的作用計(jì)算非氫原子的特征值考慮非飽和鍵及雜原子的作用計(jì)算非氫原子的特征值價(jià)點(diǎn)價(jià)價(jià)點(diǎn)價(jià) ： v = (Zv h) /(Z Zv 1) Z：非氫原子核外電子總數(shù)，：非氫原子核外電子總數(shù)， Zv：非氫原子最外層價(jià)電子數(shù)。：非氫原子最外層價(jià)電子數(shù)。 CCCC2332例例：計(jì)算丁二烯的計(jì)算丁二烯的1X，1Xv。CCCC1221價(jià)點(diǎn)價(jià)價(jià)點(diǎn)價(jià)點(diǎn)價(jià)點(diǎn)價(jià)1Xp = ( i j )-1/2 = 2 (1 2)-0.5 +(2 2)-0.5 = 1.9141Xv = ( i j

19、 )-1/2 = (2 3)-0.5 +(3 3)-0.5 +(3 2)-0.5 = 1.149特別地當(dāng)有機(jī)物無(wú)雜原子時(shí)，可簡(jiǎn)化為：特別地當(dāng)有機(jī)物無(wú)雜原子時(shí)，可簡(jiǎn)化為： v = (Zv h) ，其實(shí)質(zhì)，其實(shí)質(zhì)是形成非氫鍵的總數(shù)是形成非氫鍵的總數(shù)( + )例例：計(jì)算乙酸乙酯的：計(jì)算乙酸乙酯的1Xv。16246OO1Xv = ( i j )-1/2 = (1 4)-0.5 +(6 4)-0.5 +(4 6)-0.5 +(6 2)-0.5 +(2 1)-0.5 = 1.904作業(yè)：計(jì)算作業(yè)：計(jì)算2-氯乙酰苯胺的氯乙酰苯胺的1X，1Xv。 (1X：5.198，1Xv: 3.598)ClNO1QSAR應(yīng)

20、用舉例應(yīng)用舉例溶解度估算溶解度估算官能團(tuán)法官能團(tuán)法Klopman G (1992)估算：估算：lgS = C0 + niGi S:溶解度溶解度(g/g)，C0:常數(shù)，常數(shù)，ni:官能團(tuán)個(gè)數(shù)，官能團(tuán)個(gè)數(shù)， Gi：官能團(tuán)對(duì)溶解度貢獻(xiàn)系數(shù)。：官能團(tuán)對(duì)溶解度貢獻(xiàn)系數(shù)。例例：根據(jù)分子官能團(tuán)法估算五氯苯的溶解度：根據(jù)分子官能團(tuán)法估算五氯苯的溶解度S。 C0: 3.5650; =C : 0.4944; =CH : 0.3690; Cl: 0.6318）解：解：lgS = C0 + niG =3.5650 + 5 ( 0.4944) + 1 ( 0.3690) + 5 ( 6318) = 2.435 S =

21、3.67 10-3 (g/g) = 1.46 10-5 mol/L 實(shí)測(cè)五氯苯的溶解度為實(shí)測(cè)五氯苯的溶解度為3.32 10-5 mol/L 。ClClClClClKow估算估算分子片法分子片法Klopman G (1991)估算：估算：lgKOW = 0.703 + biBi + cjCj bi：i分子片數(shù)目，分子片數(shù)目，Bi：i分子片貢獻(xiàn)率，分子片貢獻(xiàn)率，cj: 需修正的需修正的j分子片數(shù)分子片數(shù) 目目, Cj：需修正的：需修正的j分子片貢獻(xiàn)率。分子片貢獻(xiàn)率。例：例：根據(jù)分子片法估算根據(jù)分子片法估算2,6-二異丁基苯酚二異丁基苯酚(C4H9)2C6H3OH的的KOW。 (CH3 : 0.66

22、1; CH2 : 0.415; CH: 0.104; =CrH: 0.380; =Cr: 0.129; OH: 0.135)解：解：查表該分子無(wú)需修正分子片項(xiàng)，查表該分子無(wú)需修正分子片項(xiàng)， lgKOW = 0.703 + biBi = 0.703 + 4 0.661 + 2 0.415 + 2 0.104 + 3 0.380 + 3 0.129 + 1 0.135 = 4.64 KOW = 4.36 104，實(shí)測(cè)實(shí)測(cè)KOW = 2.29 104OHCH3CHCH2CH2CHCH3CH3CH3Kow估算估算分子連接性指數(shù)法分子連接性指數(shù)法Doucette & Andren (1988)估

23、算：估算：lgKOW = 0.0853 + 1.2721Xv 0.0499(1Xv)2例：例：根據(jù)根據(jù)Doucette & Andren分子連接指數(shù)法估算甲苯分子連接指數(shù)法估算甲苯Kow。解：解：1Xv = ( i j )-1/2 = 4 (3 3) 0.5 + 2(4 3) 0.5 + (4 1) 0.5 = 2.41 lgKow = 0.0853 + 1.2721Xv 0.0499(1Xv)2 = 0.0853 + 1.272 2.41 0.0499 2.412 =2.69 Kow = 4.90 102，實(shí)測(cè)實(shí)測(cè)KOW = 4.47 1021433333高等化學(xué)復(fù)習(xí)題高等化學(xué)復(fù)習(xí)題

24、 一、簡(jiǎn)答一、簡(jiǎn)答1、試述、試述Hansch分析的含義。分析的含義。2、試述分子連接性指數(shù)法的含義。、試述分子連接性指數(shù)法的含義。3、說明簡(jiǎn)單分子連接性指數(shù)與價(jià)鍵連接性指數(shù)所反映的分子結(jié)構(gòu)信息。、說明簡(jiǎn)單分子連接性指數(shù)與價(jià)鍵連接性指數(shù)所反映的分子結(jié)構(gòu)信息。4、試說明氯乙烯、試說明氯乙烯(VCM)致癌機(jī)理及生理代謝解毒轉(zhuǎn)化途徑。致癌機(jī)理及生理代謝解毒轉(zhuǎn)化途徑。5、試說明氮芥致癌機(jī)理。、試說明氮芥致癌機(jī)理。6、試說明苯并、試說明苯并(a)芘致癌機(jī)理。芘致癌機(jī)理。7、試說明二甲基亞硝胺致癌機(jī)理。、試說明二甲基亞硝胺致癌機(jī)理。8、簡(jiǎn)述致癌的一般機(jī)制及發(fā)展階段。、簡(jiǎn)述致癌的一般機(jī)制及發(fā)展階段。9、復(fù)合污染的毒物聯(lián)合作用類型有哪些？舉一例說明如何判斷聯(lián)合作用的類別？、復(fù)合污染的毒物聯(lián)合作用類型有哪些？舉一例說明如何判斷聯(lián)合作用的類別？10、以苯并、以苯并(a)蒽為例分別說明蒽為例分別說明K區(qū)理論、灣區(qū)理論、雙區(qū)理論。區(qū)理論、灣區(qū)理論、雙區(qū)理論。11、簡(jiǎn)述微生物修復(fù)的環(huán)境條件。、簡(jiǎn)述微生物修復(fù)的環(huán)境條件。12、說明強(qiáng)化微生物修復(fù)的手段，列舉幾種強(qiáng)化微生物原位修復(fù)的技術(shù)。、說明強(qiáng)化微生物修復(fù)的手段，列舉幾種強(qiáng)化微生物原位修復(fù)的技術(shù)