代寫內(nèi)科論文復(fù)方黃酮膠囊的大鼠長期毒性實驗研究

1、代寫內(nèi)科論文復(fù)方黃酮膠囊的大鼠長期毒性實驗研究    【摘要】  目的觀察復(fù)方黃酮膠囊對大鼠長期毒性實驗的影響。方法復(fù)方黃酮膠囊20.75，4.15 mg/kg（為臨床日劑量的50倍和10倍）給大鼠連續(xù)灌服13周，停藥2周，分別測量大鼠體重，計算臟器系數(shù)，測定血液學(xué)和血液生化學(xué)指標，并作組織病理學(xué)檢查。結(jié)果復(fù)方黃酮膠囊高、低劑量組大鼠的外觀體征、行為活動、體重，臟器系數(shù)，血液學(xué)和血液生化學(xué)指標，與空白對照組比較，均無明顯差異；病理檢查未見與藥物毒性相關(guān)的明顯病變，停藥后也未見藥物延遲性毒性反應(yīng)。結(jié)論復(fù)方黃酮膠囊長期用藥對大鼠無明顯毒性，推論臨床

2、擬用劑量應(yīng)是安全的?！娟P(guān)鍵詞】  復(fù)方黃酮膠囊 大鼠 長期毒性試驗Abstract：ObjectiveTo observe the effects of Compound Flavone capsules on the rat chronic toxicity test.Methods 60 rats were randomly divided into 3 groups, each group was given Compound Flavone capsules intragastrically in dose of 20.75, 4.15 mg/kg (50 and 10 ti

3、mes of clinic dose) for 13 weeks. Half of the animals were killed immediately after the last dose, and another half of rats were observed for 2 weeks after medicine withdraw. Parameters examined included general condition, body weight, food intake, blood cell, blood biochemistry, organ index, and hi

4、stopathological exmination.ResultsThe outer appearance and behavior, weights, organ coefficient, the indexes of haematology and biochemistry in rats had no significant difference by comparing with control group.The pathological examination did not discover significant pathological changes related to

5、 drug toxicity and the delayed toxicity reaction after drug administration. ConclusionCompound Flavone capsules have no significant toxicity for long-term administration on rats. It infers that the drawing up doses in clinic will be safe.Key words：Compound Flavone capsules;  Rat;  Long-ter

6、m toxicity    復(fù)方黃酮膠囊主要是由銀杏葉提取物和山楂葉提取物等按一定的制劑工藝制成的復(fù)方中藥新制劑，具有活血化淤等功效，主要用于治療心腦血管疾病，效果良好。槲皮素為復(fù)方黃酮膠囊中的主要有效成分，具有保護心肌缺血缺氧、抗氧化、清除自由基、抗血小板聚集等作用1,2。為了進一步確保臨床用藥的安全性，本文對其進行了大鼠長期毒性實驗?，F(xiàn)報道如下。1  材料1.1  藥物復(fù)方黃酮膠囊，含槲皮素 3.32 mg/粒,批號050508，由廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院制劑室提供。使用時加蒸餾水配制成不同藥物濃度供實驗應(yīng)用。1.2  動物Wist

7、ar種大鼠，體重100135 g，由廣西醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供，合格證：SCXK桂2003-0003。動物按性別分籠飼養(yǎng)于有空調(diào)的實驗動物室內(nèi)，室溫（22±1）,相對濕度（60±5）。自由飲水和喂標準顆粒飼料。1.3  儀器7170A型日立生化自動分析儀，日本東亞公司；NIHON KOHDEN 血細胞分析儀（日本產(chǎn)）（MEK-6318K）。2  方法3,4    選取68周齡大鼠60只，體重(120±15) g，雌雄各半，隨機分成3組，每組20只。 每組大鼠分籠飼養(yǎng)，每籠5只。設(shè)空白對照組，復(fù)方黃酮膠囊高劑量（2

8、0.75 mg/kg）和低劑量(4.15 mg/kg)組。給藥各組分別以臨床人日劑量的 50倍、10倍劑量的復(fù)方黃酮膠囊對大鼠灌胃給藥，空白對照組給予等體積蒸餾水，1次/d，給藥體積為1.0 ml/100 g體重,連續(xù)13周。每日觀察記錄大鼠一般狀況如進食，行為活動，糞便等。稱體重，1次/周，并及時調(diào)整用藥劑量。末次給藥24 h后，每組選取10只大鼠（雌雄各半），腹腔注射10%水合氯醛麻醉，從腹主動脈采血，采集的血樣于血細胞分析儀上檢測紅細胞(RBC)、白細胞 (WBC)、血紅蛋白(HGB)、血小板(PLT)、淋巴細胞系(LY)、單核細胞系(MO)、凝血時間（CT）等血液學(xué)指標。另外取血分離血

9、清，于生化自動分析儀上測定血清中的總膽紅素（T-Bil）、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)、總膽固醇(T-Cho)、葡萄糖(GLU)等生化學(xué)指標。并對主要臟器進行全面尸檢，取心、肝、脾、 肺、腎、腎上腺、胸腺等臟器稱重，計算臟器系數(shù)。然后對上述主要臟器及胃、小腸、子宮、卵巢、睪丸、腦等臟器用10%甲醛固定，進行常規(guī)病理學(xué)檢查。各組余下大鼠停藥觀察2周后，同法處理，并檢測上述指標。所得結(jié)果作統(tǒng)計學(xué)處理，用t檢驗比較組間差異顯著性。3  結(jié)果3.1  對動物一般情況的影響 在

10、給藥期間，復(fù)方黃酮膠囊各劑量組及空白對照組大鼠的外觀體征、行為活動、進食量及糞便等狀況正常，動物無一死亡。停藥觀察2周后，亦無明顯變化。3.2  對動物體重的影響連續(xù)用藥13周和停藥2周，復(fù)方黃酮膠囊高、低劑量組大鼠體重正常增長，與空白對照組比較，體重變化無明顯差異。結(jié)果見表1。3.3  對動物臟器系數(shù)的影響給大鼠連續(xù)用藥13周和停藥2周后，復(fù)方黃酮膠囊高、低劑量組和空白對照組大鼠的心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺等主要臟器系數(shù)比較，無明顯差異（P0.05），表明給大鼠長期灌服復(fù)方黃酮膠囊，對大鼠主要臟器重量無明顯影響。結(jié)果見表23。3.4  對大鼠血液學(xué)指標的影

11、響給大鼠連續(xù)用藥13周，復(fù)方黃酮膠囊高、低劑量組和空白對照組大鼠血液的白細胞 (WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、血小板(PLT)、淋巴細胞系(LY)、單核細胞系(MO)、凝血時間（CT）等指標，與空白對照組比較, 除了高劑量組PLT值有所升高，低劑量組HGB值有所降低外，其他各劑量組的各項指標與空白對照組比較，均無顯著性差異。停藥14 d測定結(jié)果，除了高劑量組PLT值有所降低(其測定值在正常范圍內(nèi))，其他各劑量組的各項指標與空白對照組比較，均無顯著性差異。結(jié)果見表45。表1  復(fù)方黃酮膠囊對大鼠體重增長的影響（略）各劑量組與空白對照組比較均為P0.05表2 

12、 復(fù)方黃酮膠囊用藥13周后對大鼠主要臟器系數(shù)的影響（略）各劑量組與空白對照組比較均為P0.05；n=10表3  復(fù)方黃酮膠囊停藥2周后對大鼠主要臟器系數(shù)的影響（略）各劑量組與空白對照組比較均為P0.05；n=10表4  復(fù)方黃酮膠囊用藥13周后對大鼠血液學(xué)指標的影響（略）各劑量組與空白對照組比較，*P0.05;n=10表5  復(fù)方黃酮膠囊停藥2周后對大鼠血液學(xué)指標的影響（略）與空白對照組比較，*P0.01；n=103.5  對大鼠血液生化學(xué)指標的影響給大鼠連續(xù)用藥13周，測定復(fù)方黃酮膠囊高、低劑量組和空白對照組大鼠在末次給藥2 4小時后的血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(

13、AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、尿素氮（BUN）、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、葡萄糖(GLU) 、總膽紅素（T-BiL）、肌酐（Crea）、總膽固醇（T-Cho）的結(jié)果，高劑量組的BUN和TB值有所降低，但均在正常范圍內(nèi)，無實際意義，其余各劑量組的各項指標與對照組比較，均無顯著性差異。停藥14 d的測定結(jié)果，各劑量組的各項指標與對照組比較，均無顯著性差異。結(jié)果見表67。表6  復(fù)方黃酮膠囊用藥13周后對大鼠血液生化學(xué)指標的影響（略）與空白對照組比較，*P0.05，*P0.01；n=10表7  復(fù)方黃酮膠囊停藥2周后對大鼠血液生化學(xué)指標的影響（略）

14、與空白對照組比較，P0.05；n=103.6  病理學(xué)檢查給大鼠連續(xù)用藥13周和停藥2周后，分別處死動物，剖取各組大鼠的心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺等臟器，首先進行肉眼尸檢，主要臟器外形、體積、色澤均屬正常，無充血、腫脹、壞死等異?，F(xiàn)象。然后，各臟器用10%甲醛溶液固定48 h后，按常規(guī)方法做病理切片，光鏡下檢查。結(jié)果表明，復(fù)方黃酮膠囊高、低劑量組大鼠的心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、腦、睪丸、卵巢、子宮等臟器進行全面肉眼尸檢，用藥組和對照組均未見異常。病理組織學(xué)檢查，大鼠心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、腦、睪丸、卵巢、子宮、胃、小腸等臟器組織形態(tài)學(xué)均為正常，與空白對照組比較

15、，未明顯見到由于藥物毒性引起的病理改變。因此，證明給大鼠長期灌胃復(fù)方黃酮膠囊對動物器官組織無影響。4  討論    有文獻報道，給狗每天靜注銀杏葉黃酮28 mg·kg-1，其血常規(guī)和肝功能均未見異常。銀杏葉黃酮對兔、豚鼠、大鼠、小鼠等動物的亞急性實驗表明,其對心、肝、脾、腎、動脈等器官組織的影響均未見形態(tài)學(xué)改變5。    張杰等6研究發(fā)現(xiàn)，用銀杏葉茶喂養(yǎng)大鼠30 d，其對致突變實驗中各個檢測指標均未發(fā)現(xiàn)有特異的改變，銀杏葉上述試驗的結(jié)果均為陰性，說明較長時間飲用銀杏葉茶較為安全。   

16、 張政民等7實驗證實，山楂葉提取物即使在高劑量組（5 mg/皿）亦未表現(xiàn)出致突變性，這表明山楂葉提取物具有一定的使用安全性。    上述文獻報道表明，復(fù)方黃酮膠囊中的主要有效成分銀杏葉提取物和山楂葉提取物的毒性均較低。    本實驗結(jié)果表明，復(fù)方黃酮膠囊以20.75和4.15 mg/kg體重，相當(dāng)于人臨床日劑量( 0.42 mg/kg)的50和10倍劑量，連續(xù)給大鼠灌胃給藥13周及停藥2周，與空白對照組比較，動物的一般狀況、體重、主要臟器系數(shù)無明顯差異；血液學(xué)指標、血液生化學(xué)指標檢查，各劑量組的大多數(shù)檢測項目與空白對照組比較，雖有個別檢測指標有一定差異，但其測定值仍在正常值范圍內(nèi)，故無實際意義。主要臟器的病理檢查表明，組織形態(tài)學(xué)正常，未見與藥物毒性相關(guān)的明顯病變；停藥2周后也未見藥物延遲性毒性反應(yīng)。表明復(fù)方黃酮膠囊毒性很小，臨床擬用劑量應(yīng)是安全的?！緟⒖嘉墨I】  1 林 蓉，劉俊田.槲皮素對缺氧缺糖誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞損傷的保護作用J.中國藥理學(xué)通報，2003，19（4）：475.2 王艷芳，王新華，朱宇同.槲皮素藥理作用研究進展J.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2003，15（2）：171.3 中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局.中藥新藥研究指南S.大鼠的長期毒性試驗，