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1、課題課題2月季的花藥培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)及專題及專題3習(xí)題訓(xùn)練習(xí)題訓(xùn)練一、花粉發(fā)育與花藥離體培養(yǎng)一、花粉發(fā)育與花藥離體培養(yǎng) 1被子植物的花粉發(fā)育被子植物的花粉發(fā)育 (1)花粉:由花粉:由 經(jīng)經(jīng)過(guò)過(guò) 分裂形成的分裂形成的 的生殖的生殖細(xì)胞。細(xì)胞?;ǚ勰讣?xì)胞花粉母細(xì)胞減數(shù)減數(shù)單倍體單倍體(2)花粉發(fā)育過(guò)程及特點(diǎn):小孢子四分體時(shí)期小孢子四分體時(shí)期單核靠邊期單核靠邊期原生質(zhì)原生質(zhì)花粉管細(xì)胞核花粉管細(xì)胞核營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞生殖細(xì)胞核生殖細(xì)胞核2個(gè)精子個(gè)精子 2產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 (1)過(guò)程圖示過(guò)程圖示 (2)形成原因:主要取決于培養(yǎng)基中形成原因:主要取決于培養(yǎng)基中

2、的種類及其的種類及其_。 激素激素濃度配比濃度配比3影響花粉培養(yǎng)的因素影響花粉培養(yǎng)的因素 (1)主要因素主要因素 材料的選擇材料的選擇 a不同植物的誘導(dǎo)成功率不同植物的誘導(dǎo)成功率很不相同很不相同。 b就同一種植物來(lái)說(shuō),花期早期時(shí)的花藥就同一種植物來(lái)說(shuō),花期早期時(shí)的花藥 比比 的更容易產(chǎn)生花粉植株。的更容易產(chǎn)生花粉植株。 c一般來(lái)說(shuō),在單核期,細(xì)胞核一般來(lái)說(shuō),在單核期,細(xì)胞核 的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高。的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高。 培養(yǎng)基的組成:培養(yǎng)基的培養(yǎng)基的組成:培養(yǎng)基的 對(duì)對(duì)花藥培養(yǎng)也有影響?;ㄋ幣囵B(yǎng)也有影響。 (2)其他因素:親本植株的其他因素:親本植株的 ,材料,材料的的 、接種密度

3、等。、接種密度等。后期后期由中央移向由中央移向細(xì)胞一側(cè)細(xì)胞一側(cè)成分及比例成分及比例生長(zhǎng)條件生長(zhǎng)條件低溫預(yù)處理低溫預(yù)處理二、花藥培養(yǎng)的操作二、花藥培養(yǎng)的操作鏡檢鏡檢醋酸洋紅法醋酸洋紅法焙花青焙花青-鉻礬法鉻礬法酒精酒精花絲花絲25分化培養(yǎng)基分化培養(yǎng)基倍性變化倍性變化 2.花粉植株出現(xiàn)染色體組數(shù)目變化的原因分花粉植株出現(xiàn)染色體組數(shù)目變化的原因分析析 在花藥培養(yǎng)過(guò)程中,尤其是通過(guò)愈傷組織形在花藥培養(yǎng)過(guò)程中,尤其是通過(guò)愈傷組織形成的花粉植株,常常會(huì)出現(xiàn)染色體組數(shù)目的成的花粉植株,常常會(huì)出現(xiàn)染色體組數(shù)目的變化,其原因有以下幾個(gè)方面:變化,其原因有以下幾個(gè)方面: (1) 的融合。的融合。 (2)接種花粉過(guò)

4、程中混有接種花粉過(guò)程中混有 細(xì)胞。細(xì)胞。 (3)在材料的低溫預(yù)處理時(shí)低溫抑制了在材料的低溫預(yù)處理時(shí)低溫抑制了 的形成。的形成。 (4)在在 時(shí),生殖細(xì)胞核和花粉管細(xì)時(shí),生殖細(xì)胞核和花粉管細(xì)胞核并沒(méi)有形成兩個(gè)細(xì)胞,而是兩個(gè)核發(fā)生胞核并沒(méi)有形成兩個(gè)細(xì)胞,而是兩個(gè)核發(fā)生了融合。了融合?;ǚ奂?xì)胞花粉細(xì)胞小孢子母小孢子母紡錘體紡錘體雙核期雙核期育種工作者常采用花藥培養(yǎng)的方法,使花粉育種工作者常采用花藥培養(yǎng)的方法,使花粉粒發(fā)育為單倍體植株。下面是采用水稻的粒發(fā)育為單倍體植株。下面是采用水稻的花藥進(jìn)行培養(yǎng)的流程圖:花藥進(jìn)行培養(yǎng)的流程圖:選取水稻花藥選取水稻花藥對(duì)花藥消毒對(duì)花藥消毒接種和培養(yǎng)接種和培養(yǎng)植物體。

5、請(qǐng)回答下列問(wèn)題。植物體。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)選取的水稻花藥應(yīng)為選取的水稻花藥應(yīng)為_期,如期,如果此時(shí)細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè),花藥果此時(shí)細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè),花藥培養(yǎng)成功率最高。培養(yǎng)成功率最高。 (2)通過(guò)花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩通過(guò)花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑:一種是花粉通過(guò)種途徑:一種是花粉通過(guò)_階段階段發(fā)育為植株;另一種是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先發(fā)育為植株;另一種是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成形成_,再將其誘導(dǎo)分化成植株。,再將其誘導(dǎo)分化成植株。單核單核愈傷組織愈傷組織胚狀體胚狀體(3)試管苗形成過(guò)程中,必須從培養(yǎng)基中獲試管苗形成過(guò)程中,必須從培養(yǎng)基中獲得得_和小分子有機(jī)物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)

6、物和小分子有機(jī)物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂和生長(zhǎng),培養(yǎng)質(zhì)。要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂和生長(zhǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)有基中應(yīng)有_和和 兩類兩類植物激素。植物激素。(4)若接種過(guò)花藥的培養(yǎng)基被污染,則可能若接種過(guò)花藥的培養(yǎng)基被污染,則可能的原因有哪些?的原因有哪些?(至少寫出兩條至少寫出兩條)無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基滅菌不徹底;培養(yǎng)基滅菌不徹底;花蕾消毒不徹底;花蕾消毒不徹底;接種時(shí)操作不規(guī)范等接種時(shí)操作不規(guī)范等生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 (5)確定花粉發(fā)育時(shí)期的方法有_。(6)花粉植株的特點(diǎn)是 。圖示整個(gè)過(guò)程被稱為_ 。(7)有些被子植物(染色體數(shù)為2n)的花粉是三核型的,即含有1個(gè)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和2個(gè)精子。那么

7、被子植物花粉發(fā)育過(guò)程中小孢子母細(xì)胞、小孢子、花粉粒的染色體數(shù)分別為_、_、_。(8)若花粉植株的基因型為Ab,那么親本的基因型可能是_、_、_、_。醋酸洋紅法、焙花青醋酸洋紅法、焙花青鉻礬法鉻礬法植株矮小、高度不育植株矮小、高度不育花藥的離體培養(yǎng)花藥的離體培養(yǎng)2nAABb3nnAaBbAabbAAbb (2011年高考江蘇卷年高考江蘇卷)下列有關(guān)植下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是() A愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞薄壁細(xì)胞 B二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株后得到穩(wěn)定遺

8、傳的植株 C用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子別包裝可制成人工種子 D植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量植物耐鹽突變體可通過(guò)添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得D (2014年高考四川卷年高考四川卷)有機(jī)農(nóng)藥苯磺有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。隆是一種除草劑,長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過(guò)程如圖甲、乙所示。(1)(1)微生物生長(zhǎng)繁殖所

9、需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、有碳源、水、 四類,四類,該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是作為唯一碳源,其原因是_。 (2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成_ 保存?zhèn)溆?。保存?zhèn)溆谩?蓪⒅荒芾么颂荚吹木N篩選出來(lái)??蓪⒅荒芾么颂荚吹木N篩選出來(lái)。氮源和無(wú)機(jī)鹽氮源和無(wú)機(jī)鹽母液母液(3)純化菌株時(shí),通常使用的劃線工具純化菌株時(shí),通常使用的劃線

10、工具是是_。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第地長(zhǎng)滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落,其他劃線上有菌落。一條線上無(wú)菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有:造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有:接種環(huán)接種環(huán)接種環(huán)灼燒后未冷卻;接種環(huán)灼燒后未冷卻;劃線未從第一區(qū)域末端開始劃線未從第一區(qū)域末端開始(4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制,將該菌種的為探究苯磺隆的降解機(jī)制,將該菌種的培養(yǎng)液過(guò)濾離心,取上清液做圖乙所示培養(yǎng)液過(guò)濾離心,取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是_,該實(shí)

11、驗(yàn)設(shè)計(jì)是否,該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理?為什么?合理?為什么?_。降解苯磺隆的蛋白質(zhì)降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理,缺少空白對(duì)照不合理,缺少空白對(duì)照(將蛋白酶溶液改為等量的蒸餾水)(將蛋白酶溶液改為等量的蒸餾水)目的菌株能分泌目的菌株能分泌 (2012年高考山東卷節(jié)選年高考山東卷節(jié)選)辣椒素辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如下圖。如下圖。 (1)圖中圖中和和分別表示辣椒組織培養(yǎng)分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的中細(xì)胞的_和和_過(guò)程。過(guò)程。(2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是凝

12、固劑是_。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值和細(xì)胞分裂素用量的比值_(填填“高高”或或“低低”)時(shí),有利于芽的分時(shí),有利于芽的分化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí),應(yīng)采取的化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí),應(yīng)采取的滅菌方法是滅菌方法是_ 。脫分化脫分化再分化再分化瓊脂瓊脂低低高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌(3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是分?jǐn)?shù)是_。用酶解法將愈傷。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí),常用的酶是組織分離成單細(xì)胞時(shí),常用的酶是_和纖維素酶。和纖維素酶。(4)外植體在接種到培養(yǎng)基之前,必)外植體在接種到培養(yǎng)基之前,必須進(jìn)行須進(jìn)行_處理,整個(gè)組織培處理,整

13、個(gè)組織培養(yǎng)過(guò)程需養(yǎng)過(guò)程需_操作,并控制好操作,并控制好各個(gè)時(shí)期的培養(yǎng)條件各個(gè)時(shí)期的培養(yǎng)條件。70%果膠酶果膠酶無(wú)菌無(wú)菌消毒消毒(5)再分化時(shí),除必要的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和激素再分化時(shí),除必要的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和激素調(diào)節(jié)外,還必須給予光照,原因是調(diào)節(jié)外,還必須給予光照,原因是_。(6)從高度分化的外植體組織繁殖出大量從高度分化的外植體組織繁殖出大量辣椒植株,充分證明了植物細(xì)胞具有辣椒植株,充分證明了植物細(xì)胞具有_ 。(7)植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是:植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是:葉綠素的形成需要光照葉綠素的形成需要光照全能性全能性取材少,培養(yǎng)周期短,繁殖率高,取材少,培養(yǎng)周期短,繁殖率高,且便于自動(dòng)化管理且便于自動(dòng)化管理 22

14、材料一微繁殖技術(shù)又稱快速繁殖技材料一微繁殖技術(shù)又稱快速繁殖技術(shù),就是將植物體的一部分組織小塊進(jìn)行術(shù),就是將植物體的一部分組織小塊進(jìn)行培養(yǎng),并誘導(dǎo)分化成大量的小植株,從而培養(yǎng),并誘導(dǎo)分化成大量的小植株,從而達(dá)到快速無(wú)性繁殖的目的。達(dá)到快速無(wú)性繁殖的目的。20 m2的培養(yǎng)的培養(yǎng)室內(nèi)最多可容納室內(nèi)最多可容納100萬(wàn)株試管苗。萬(wàn)株試管苗。 材料二植物病毒嚴(yán)重地影響著農(nóng)業(yè)生產(chǎn),材料二植物病毒嚴(yán)重地影響著農(nóng)業(yè)生產(chǎn),對(duì)于無(wú)性繁殖的植株來(lái)說(shuō),一旦感染上病對(duì)于無(wú)性繁殖的植株來(lái)說(shuō),一旦感染上病毒就會(huì)代代相傳,日趨嚴(yán)重。但在莖尖分毒就會(huì)代代相傳,日趨嚴(yán)重。但在莖尖分生組織中,細(xì)胞繁殖十分迅速,病毒還來(lái)生組織中,細(xì)胞

15、繁殖十分迅速,病毒還來(lái)不及侵入,因此就成為植物體相對(duì)無(wú)病毒不及侵入,因此就成為植物體相對(duì)無(wú)病毒的特殊區(qū)域。的特殊區(qū)域。 閱讀上述材料請(qǐng)回答:閱讀上述材料請(qǐng)回答:(1)利用微繁殖技術(shù)繁殖植物的方法稱為利用微繁殖技術(shù)繁殖植物的方法稱為_ 。(2)若要進(jìn)行蘭花無(wú)病毒植株的培育,首先若要進(jìn)行蘭花無(wú)病毒植株的培育,首先要選擇外植體,選擇對(duì)象為蘭花的要選擇外植體,選擇對(duì)象為蘭花的_ 。(3)對(duì)外植體進(jìn)行消毒用對(duì)外植體進(jìn)行消毒用 、 消毒劑。消毒時(shí)間消毒劑。消毒時(shí)間分別為分別為_、_以保證外植體以保證外植體的活性。若消毒時(shí)間太短消毒不徹底;的活性。若消毒時(shí)間太短消毒不徹底;若消毒時(shí)間過(guò)長(zhǎng),容易使外植體受損傷

16、,若消毒時(shí)間過(guò)長(zhǎng),容易使外植體受損傷,克服外植體培養(yǎng)過(guò)程中的克服外植體培養(yǎng)過(guò)程中的_是實(shí)是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。植物的組織培養(yǎng)植物的組織培養(yǎng)莖尖分生組織莖尖分生組織體積分?jǐn)?shù)體積分?jǐn)?shù)70%的酒精的酒精質(zhì)量分?jǐn)?shù)質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的氯化汞的氯化汞67 s12 min污染問(wèn)題污染問(wèn)題(4)超凈工作臺(tái)是植物組織培養(yǎng)重要的設(shè)備,超凈工作臺(tái)是植物組織培養(yǎng)重要的設(shè)備,在使用前可以用在使用前可以用_進(jìn)行消毒,接進(jìn)行消毒,接種前還要用種前還要用 _ 擦拭工作臺(tái)。擦拭工作臺(tái)。(5)探索愈傷組織誘導(dǎo)和分化的條件需要做探索愈傷組織誘導(dǎo)和分化的條件需要做大量的工作。實(shí)踐表明在大量的工作。實(shí)踐表明在MS培養(yǎng)基上添培養(yǎng)基上添加激素的加激素的_、_、_、 等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。另等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。另外,不同的植物對(duì)各種環(huán)境條件的要求外,不同的植物對(duì)各種環(huán)境條件的要求往往不同,除上述因素外,往往不同,除上述因素外,_、_、_等也影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。等也影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。種類種類濃度濃度使用的先后順序使用的先后順序用量比例用量比例pH 溫度溫度光照光照70%的酒精的酒精 紫外線紫外線(6)離體的組織和細(xì)胞,對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等離體的組織和細(xì)胞,對(duì)營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對(duì)特殊,需要配制適宜條件的要求相對(duì)特殊,需要配制適宜的培養(yǎng)基。

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