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文檔簡介

1、F分析外周血細(xì)胞的儀器分析外周血細(xì)胞的儀器 分析對(duì)象以外周血中成熟細(xì)胞(紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板)為主F不同發(fā)展水平的產(chǎn)品不同發(fā)展水平的產(chǎn)品 白細(xì)胞二分類白細(xì)胞二分類 三分類三分類 五分類。五分類。 模塊式自動(dòng)化。模塊式自動(dòng)化。u五分類五分類+推推/染片機(jī)染片機(jī)+讀片機(jī)讀片機(jī)單機(jī)自動(dòng)化:篩選單機(jī)自動(dòng)化:篩選F五分類儀器的發(fā)展概要五分類儀器的發(fā)展概要 u完善對(duì)成熟細(xì)胞分析的方法學(xué)完善對(duì)成熟細(xì)胞分析的方法學(xué) EO/BA、血小、血小板板u檢測(cè)幼稚細(xì)胞檢測(cè)幼稚細(xì)胞 第一代:第一代:EO、BA分析分析 第二代:第二代:RETIC分析(全自動(dòng)、分類)分析(全自動(dòng)、分類) 第三代:其他幼稚細(xì)胞分析(第三代:其

2、他幼稚細(xì)胞分析(NRBC、幼稚、幼稚 白細(xì)胞);血小板雙方法白細(xì)胞);血小板雙方法 網(wǎng)絡(luò)功能、擴(kuò)展功能網(wǎng)絡(luò)功能、擴(kuò)展功能q網(wǎng)絡(luò)時(shí)代的產(chǎn)品:多媒體功能、數(shù)據(jù)處理、遠(yuǎn)程診斷、在線質(zhì)控q處理速度快,篩選能力強(qiáng)q解決第二代五分類所不能解決的問題q血小板準(zhǔn)確性q幼稚細(xì)胞檢測(cè)q有核紅細(xì)胞檢測(cè)F方法學(xué)方法學(xué) 物理(激光、射頻、電阻)物理(激光、射頻、電阻) 細(xì)胞化學(xué)(細(xì)胞染色)細(xì)胞化學(xué)(細(xì)胞染色) 物理物理-分子生物學(xué)技術(shù)(核酸熒光染色)分子生物學(xué)技術(shù)(核酸熒光染色)F第三代物理光源:半導(dǎo)體激光第三代物理光源:半導(dǎo)體激光 壽命長:壽命長:7 - 10年年 體積小體積小 對(duì)穩(wěn)壓要求低對(duì)穩(wěn)壓要求低 更為經(jīng)濟(jì)更為

3、經(jīng)濟(jì)半導(dǎo)體激光的流式細(xì)胞術(shù)半導(dǎo)體激光的流式細(xì)胞術(shù) 側(cè)向熒光側(cè)向熒光(RNA/DNA含量)含量) 激光激光(波長(波長633nm) 側(cè)向散射側(cè)向散射(細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),如(細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),如核的大小)核的大?。┣跋蛏⑸涔馇跋蛏⑸涔?(細(xì)胞大?。?xì)胞大?。〧核酸染料核酸染料Polymethine(多次甲基)的作(多次甲基)的作用:用: IG:準(zhǔn)確的未成熟粒細(xì)胞:準(zhǔn)確的未成熟粒細(xì)胞 OTHER:異常淋巴、原粒細(xì)胞:異常淋巴、原粒細(xì)胞 更準(zhǔn)確的更準(zhǔn)確的WBC分類結(jié)果分類結(jié)果FIG-不成熟粒細(xì)不成熟粒細(xì)胞。胞。F可精確計(jì)數(shù)不成可精確計(jì)數(shù)不成熟粒細(xì)胞。熟粒細(xì)胞。Aty LymphBlastImmature G

4、ranBlastRFDCRBC ghostHPCHPC應(yīng)用于應(yīng)用于PBSCT與與CD-34, CFU有良好的相關(guān)性有良好的相關(guān)性分析時(shí)間僅分析時(shí)間僅40秒,不需前處理秒,不需前處理 PLT ClumpIMIIMI檢測(cè)通道檢測(cè)通道單獨(dú)通道和試劑 幼稚細(xì)胞檢測(cè)幼稚細(xì)胞檢測(cè)專用檢測(cè)通道和專用試劑專用檢測(cè)通道和專用試劑HPC 用于末梢血干細(xì)胞移植用于末梢血干細(xì)胞移植Immature GranBlastRFDCRBC ghostHPCn和和CD-34+細(xì)胞良好的相關(guān)性細(xì)胞良好的相關(guān)性,n無需任何前處理,只需無需任何前處理,只需40秒檢測(cè)時(shí)間秒檢測(cè)時(shí)間n即得知捕獲末梢血干細(xì)胞即得知捕獲末梢血干細(xì)胞 的最佳

5、時(shí)間的最佳時(shí)間PLT Clump IG 精確測(cè)定未成熟粒細(xì)胞精確測(cè)定未成熟粒細(xì)胞 Fluorescence(RNA): Polymethine & oxazine染料染料Forward Scatter(Volume)MFRHFRLFRPLTRBC-ORETWBCIRF全自動(dòng)全自動(dòng)RET檢測(cè)檢測(cè)DNA、RNA染色染色 IRF 用于檢測(cè)紅細(xì)胞生成用于檢測(cè)紅細(xì)胞生成前向散射光前向散射光 (體積體積)MFRHFRLFRPLT-ORBC-ORETWBCIRFn未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞比率未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞比率n有效預(yù)測(cè)下列情況的參數(shù)有效預(yù)測(cè)下列情況的參數(shù)骨髓抑制骨髓抑制 紅細(xì)胞生成的恢復(fù)期紅細(xì)胞生成的恢復(fù)期(Im

6、mature Reticulicyte Fraction)FNRBC-有核紅細(xì)胞單有核紅細(xì)胞單獨(dú)檢測(cè)計(jì)數(shù)。獨(dú)檢測(cè)計(jì)數(shù)。F可得到更準(zhǔn)確的白細(xì)可得到更準(zhǔn)確的白細(xì)胞分類與計(jì)數(shù)結(jié)果。胞分類與計(jì)數(shù)結(jié)果。F自動(dòng)扣除自動(dòng)扣除NRBC,得,得到準(zhǔn)確的到準(zhǔn)確的WBC。FNR Dye核酸染色:核酸染色: Polymethine染料染料NRBC散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖WBC區(qū)域區(qū)域NRBC區(qū)域區(qū)域紅細(xì)胞碎片紅細(xì)胞碎片一般血液分析儀:一般血液分析儀:只能通過體積大小提只能通過體積大小提供供NRBC 的提示的提示W(wǎng)BC直方圖下限直方圖下限上翹上翹散點(diǎn)圖體積區(qū)域散點(diǎn)圖體積區(qū)域NRBC常常被誤算為常常被誤算為淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞復(fù)檢工作量

7、大復(fù)檢工作量大NRBC檢測(cè)檢測(cè)NRBC散點(diǎn)圖散點(diǎn)圖兩步處理,兩步處理,NRBC和和WBC分界明晰分界明晰1、NR Lyse溶血素對(duì)細(xì)胞作用溶血素對(duì)細(xì)胞作用:qWBC細(xì)胞膜打孔,使活的和死亡細(xì)胞膜打孔,使活的和死亡WBC染色程度相同染色程度相同qNRBC裸核,體積與小淋巴可以區(qū)別裸核,體積與小淋巴可以區(qū)別qRBC無無DNA、RNA2、NR Dye核酸染色:核酸染色: Polymethine染料染料RBC碎片碎片NRBCWBCflfsNRBC檢測(cè)檢測(cè)專用檢測(cè)通道和專用試劑專用檢測(cè)通道和專用試劑F單獨(dú)計(jì)數(shù)單獨(dú)計(jì)數(shù)有核紅細(xì)有核紅細(xì)胞,白細(xì)胞,白細(xì)胞結(jié)果更胞結(jié)果更準(zhǔn)確。準(zhǔn)確。一般血液分析儀新型五分類RB

8、C/PLT通道:通道:鞘流電阻法鞘流電阻法q優(yōu)點(diǎn):優(yōu)點(diǎn): 電阻抗每次檢測(cè)顆粒數(shù)多,達(dá)電阻抗每次檢測(cè)顆粒數(shù)多,達(dá)20-25萬個(gè)細(xì)胞,而萬個(gè)細(xì)胞,而RET通道內(nèi)激光法每次只能檢測(cè)通道內(nèi)激光法每次只能檢測(cè)6萬個(gè)細(xì)胞,其中萬個(gè)細(xì)胞,其中PLT僅僅3000個(gè)個(gè)電阻抗法的電阻抗法的PLT數(shù)目的準(zhǔn)確性與重復(fù)性比較好數(shù)目的準(zhǔn)確性與重復(fù)性比較好q缺點(diǎn):缺點(diǎn):異常標(biāo)本中的小異常標(biāo)本中的小RBC、WBC碎片容易混作碎片容易混作PLT計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)特殊病例(如化療)容易錯(cuò)誤判斷出血傾向特殊病例(如化療)容易錯(cuò)誤判斷出血傾向激光形態(tài)檢測(cè)激光形態(tài)檢測(cè)PLT更準(zhǔn)確的更準(zhǔn)確的PLT檢測(cè)結(jié)果檢測(cè)結(jié)果兩種方法檢測(cè)兩種方法檢測(cè)PLTRE

9、T/PLT-O通道通道:激光形態(tài)檢測(cè)激光形態(tài)檢測(cè)q優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)激光法對(duì)激光法對(duì)PLT的形態(tài)鑒別能力強(qiáng)的形態(tài)鑒別能力強(qiáng)異常標(biāo)本中的小異常標(biāo)本中的小RBC、WBC碎片、或碎片、或PLT數(shù)目較少數(shù)目較少時(shí),激光法能更準(zhǔn)確地將時(shí),激光法能更準(zhǔn)確地將PLT鑒別出來鑒別出來q缺點(diǎn)缺點(diǎn)檢測(cè)顆粒數(shù)少,重復(fù)性不如電阻抗法檢測(cè)顆粒數(shù)少,重復(fù)性不如電阻抗法試劑消耗成本較電阻抗法高試劑消耗成本較電阻抗法高 激光形態(tài)檢測(cè)激光形態(tài)檢測(cè)PLT更準(zhǔn)確的更準(zhǔn)確的PLT檢測(cè)結(jié)果檢測(cè)結(jié)果兩種方法檢測(cè)兩種方法檢測(cè)PLTPLT-I報(bào)告報(bào)告PLT-O 用于明顯的病理性標(biāo)本用于明顯的病理性標(biāo)本正常正常存在存在RBC碎片,異常直方圖碎片,異常直方圖等等等等低可信度低可信度?PLT-OPLT-I/O 散射圖散射圖 直方圖直方圖( (直流阻抗法直流阻抗法)散射圖散射圖(光學(xué)法光學(xué)法)激光形態(tài)檢測(cè)激光形態(tài)檢測(cè)PLT更寬的線性范圍更寬的線性范圍0-10

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