植物組織培養(yǎng)期末復習題

1、植物組織培養(yǎng)期末復習題一、填空題（每空0.5分）1. 植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)對象分為_組織培養(yǎng)_、_器官培養(yǎng)_、_胚胎培養(yǎng)_、_細胞培養(yǎng)_、_原生質體培養(yǎng)_等幾種類型.2. 在分離原生質體的酶溶液內，需要加入一定量的 Cacl2·2H2O 和葡聚糖硫酸鉀_其作用是保持原生質體膜的穩(wěn)定，避免破裂.3. 1902年德國植物生理學家Haberlandt第一次提出植物_細胞具有全能性_的理論概念；1943年White提出植物細胞“_全能性_”學說，并出版了植物組織培養(yǎng)手冊，從而使植物組織培養(yǎng)成為一門新興的學科。4. 用烘箱迅速干燥洗凈后的玻璃器皿時溫度可以設在_80_的溫度范圍內，而若用它高溫干

2、燥滅菌則需在_150_的溫度下1-3小時；烘干植物材料的溫度是_60_.5. 細胞全能性是指植物的每個細胞都具有該植物的_全部遺傳信息_和_形成完整植株的潛在_的能力。6. 1962年，Murashige和Skoog為培養(yǎng)煙草花葉細胞設計了_MS_培養(yǎng)基，其特點是_無機鹽_濃度較高，且為較穩(wěn)定的_。7. 7.6-BA / NAA的高低決定了外植體的發(fā)育方向，比值低時促進_根_的生長，這時_脫分化_ 占主導地位；比值高促進 _芽_ 的生長，這時_分化 占主導地位.9. 組織培養(yǎng)的特點是：_無菌_、_人工控制_、_離體_.10. 1962年印度Guha等人成功地培養(yǎng)毛葉曼陀羅花藥獲得_單倍體植株_

3、，這促進了花藥和花粉培養(yǎng)的研究。11. 在組織培養(yǎng)中，不耐熱的物質用_過濾_法滅菌，而培養(yǎng)基常用_濕熱滅菌_法滅菌.13. 在組織培養(yǎng)中，非洲菊是靠_從生芽 的方式進行繁殖的，而蝴蝶蘭是以_原球莖_ 的方式進行快繁的。15. 在通過微莖尖培養(yǎng)脫毒時，外植體的大小應以成苗率和脫毒率綜合確定，一般以_0.3-0.5_mm、帶_1-2_個葉原基為好。16. 原生質體的分離有_機械法_和_酶解法_兩種方法.17. 進行植物組織培養(yǎng)最基本的前提條件是_離體 _ 。18. 植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)過程中是否需要光，可分為_適光_ 培養(yǎng)和_嗜光 培養(yǎng)。20. 組織培養(yǎng)中有三大不易解決的問題，它們分別是_黃化（污染

4、）、_褐化_、_玻璃化。21. White培養(yǎng)基_無機鹽_濃度低，適合生根培養(yǎng)。22. 在無毒苗的組織培養(yǎng)中，外植體的大小與其成活率成_正比_，而與脫毒效果成_反比_。23. 一個已停止分裂的成熟細胞轉變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象稱為"_脫分化_"。25. 莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為_普通莖尖_ 培養(yǎng)和_莖尖分生組織_培養(yǎng)兩種類型。27. 愈傷組織的形態(tài)發(fā)生有_器官發(fā)生_和_體細胞胚發(fā)生_兩種情況。28. 植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)的方式分為_液體_ 培養(yǎng)和_固體_培養(yǎng)。29. 1960年，英國學者Cocking用_真菌纖維素酶酶解_分離原生質體成功，從而創(chuàng)

5、新原生質體的培養(yǎng)技術。30. 大多數(shù)植物組織培養(yǎng)的適宜溫度范圍是_23-25_，培養(yǎng)基的PH值是_5.8_.32. 在組織培養(yǎng)中，ZT和GA必須用_過濾 _法滅菌，而接種室空間采用_紫外線照射_或_甲醛熏蒸_法滅菌.33. 不同的滅菌劑其滅菌的機理一般不一樣，次氯酸鈣和次氯酸鈉都是利用分解產(chǎn)生_cl離子（ClO-）_來殺菌的；升汞是靠_汞離子_來達到滅菌目的。34. 幼胚培養(yǎng)時，其發(fā)育過程有_早熟萌發(fā)_、_胚性發(fā)育_、_形成愈傷_三種方式。35. 植物的胚胎培養(yǎng)，包括_胚胎_培養(yǎng)、幼胚 培養(yǎng)、_胚乳_培養(yǎng)、 胚珠_培養(yǎng)以及子房的培養(yǎng).38. 一個已停止分裂的成熟細胞轉變?yōu)開分生_狀態(tài)，并形成_

6、愈傷組織_的現(xiàn)象稱為"脫分化".39. 由胚乳培養(yǎng)可以獲得_單_倍體植株，經(jīng)秋水仙素處理可以獲得_二_倍體植株.40. 去除植物病毒的主要方法是_理化法_和_組培法_兩種方法，當把二者結合起來脫毒效果最好. 41. 花藥培養(yǎng)是_器官_培養(yǎng)，花粉培養(yǎng)屬于_細胞_培養(yǎng)，但二者的培養(yǎng)目的一樣，都是要誘導花粉細胞發(fā)育成單倍體細胞，最后發(fā)育成_單倍體植株_.43. 原生質體的融合可實現(xiàn)_體細胞_的雜交，其融合的方式分為_自然融合_和_人工誘導_兩類.二、不定選擇題（每小題2分）1. 培養(yǎng)室里的濕度一般保持在_C_.A 3040%；B 5060%；C 7080%；D 8090%2. 下

7、列不屬于生長素類的是_AD_。A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影響培養(yǎng)基凝固程度因素有_ABD_.A 瓊脂的質量好壞；B 高壓滅菌的時間；C 高壓滅菌的溫度；D 培養(yǎng)基的PH4. .活性炭在組織培養(yǎng)中的作用有_ABC_。A吸附有毒物質；B減少褐變，防止玻璃化；C創(chuàng)造黑暗環(huán)境，增加培養(yǎng)基的通透性，利于根的生長；D增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分；5. 下列具有細胞全能性的細胞是：_ABCD_。A 成熟的老細胞；B 幼嫩的組織細胞；C 愈傷組織細胞 D 番茄的受精合子6.第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是_B_：. AMorel；B Haberland；CSchleiden；DWh

8、ite7.下列培養(yǎng)基中_C_無機鹽的濃度最低。A MS培養(yǎng)基；B B5培養(yǎng)基；C White培養(yǎng)基；N6培養(yǎng)基8.高溫易被破壞分解的植物激素是_AbD_。A IAA； B GA； C NAA； D Zt9.從單個細胞或一塊外植體形成典型的愈傷組織，大致經(jīng)歷_ACD三個時期。A 誘導期；B 潛伏期；C 分化期；D 分裂期10.下列不屬于活性炭在組織培養(yǎng)中作用的是_D_.A吸附有毒物質；B減少褐變，防止玻璃化；C創(chuàng)造黑暗環(huán)境，增加培養(yǎng)基的通透性，利于根的生長；D增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分；11. 下列不屬于細胞分裂素的植物激素是_B_。A 6-BA；B NAA；C Zt；D Kt12.植物組織培養(yǎng)的特點是

9、_ABC_。A培養(yǎng)條件可人為控制；B生長周期短，繁殖率高；C管理方便；D產(chǎn)量大14.下列不屬于大量元素的鹽是_C_。A NH4NO3； B KNO3； C ZnSO4.7H2O； D MgSO4.7H2O15.下面屬于處于愈傷組織分裂期的特征是_ABCD_。A 細胞分裂加快 B 正在分裂的細胞體積小，內無液泡C 細胞的核和核仁增至最大D 細胞中的RNA含量減少，16.在原生質體的培養(yǎng)中，滲透穩(wěn)定劑的作用是： A A 穩(wěn)定原生質體的形態(tài)而不使其被破壞 B 支持作用 C 提供營養(yǎng) D 調節(jié)PH值17.能打破種子休眠，促進種子、塊莖、鱗莖等提前萌發(fā)的激素是： ABA GA；B IAA；C NAA；D

10、 Zt3.下列實驗中可能獲得單倍體植株的是_BCD_。A 小麥的莖尖培養(yǎng)；B番茄花藥培養(yǎng)；C玉米胚乳培養(yǎng)；D玉米花粉培養(yǎng)18.在組培條件下，花粉的發(fā)育大致有下列幾種途徑：cdA營養(yǎng)細胞發(fā)育途徑 B生殖細胞發(fā)育途徑C營養(yǎng)細胞和生殖細胞同時發(fā)育途徑 D花粉的均等分裂19.同一植株下列_B_部位病毒的含量最低.A 葉片細胞；B 莖尖生長點細胞；C 莖節(jié)細胞；D 根尖生長點細胞20. 第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是_B_：. A Morel；B Haberland；C Schleiden；D White21.脫落酸（ABA）需要用_C_法滅菌。A 灼燒滅菌；B 干熱滅菌；C 過濾滅菌

11、；D高壓濕熱滅菌；23. 下列實驗中可能獲得三倍體植株的是_C_.A 小麥的莖尖培養(yǎng)；B番茄花藥培養(yǎng)；C玉米胚乳培養(yǎng)；D玉米花粉培養(yǎng)24.原生質體純化步驟大致有如下幾步：將收集到的濾液離心，轉速以將原生質體沉淀而碎片等仍懸浮在上清液中為準，一般以500rmin離心15min。用吸管謹慎地吸去上清液。將離心下來的原生質體重新懸浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次離心，去上清液，如此重復三次。將原生質體混合液經(jīng)篩孔大小為40100um的濾網(wǎng)過濾，以除去未消化的細胞團塊和篩管、導管等雜質，收集濾液。用培養(yǎng)基清洗一次，最后用培養(yǎng)基將原生質調到一定密度進行培養(yǎng)。一般原生質體的培養(yǎng)密度為10

12、4106ml。正確的操作步驟是： C A B C D25. 下列不屬于生長素類的植物激素是_A_D_.A Kt B IAA C NAA D ABA26.玉米素（ZT）需要用_C_法滅菌.A 灼燒滅菌 B 干熱滅菌 C 過濾滅菌 D 高壓濕熱滅菌三、判斷題（對的畫“”；錯題畫“×”，并改正。每小題2分）1. 一個已分化的細胞若要表現(xiàn)其全能性，首先要經(jīng)歷脫分化過程。 2. 由胚乳培養(yǎng)獲得的三倍體植株，也一定要進行染色體倍數(shù)的檢查. 3. 一般來說，光照強度較強，幼苗容易徒長，而光照強度較弱幼苗生長的粗壯。×4. 經(jīng)過花藥培養(yǎng)所獲得的植株都是單倍體。×5. 2，4D可用

13、01molL的HCl助溶，再加蒸餾水定容. ×6. 環(huán)境的相對濕度可以影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，一般要求80-90的相對濕度。7. 幼年細胞和組織比成年細胞和組織誘導愈傷組織容易. 8. 一般的說，PH值高于6.5時，培養(yǎng)基全變硬；低于5時，瓊脂不能很好地凝固。9. 在配制6-BA母液時，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸餾水定容。10. 未成熟胚較小、較嫩、顏色淺，不易培養(yǎng)；成熟胚較大、較硬、顏色較深，易培養(yǎng). 11. 花器脫分化比莖葉容易；幼嫩的組織比成熟的老組織脫分化難。 ×12. 通過子房的培養(yǎng)，即可能得到單倍體植株，又可能得到二倍體植株. 13. 在配制NAA母

14、液時，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸餾水定容。 ×15. 環(huán)境的相對濕度過低會使培養(yǎng)基喪失大量水分，濕度過高時，易引起棉塞長霉，造成污染。 16. White培養(yǎng)基無機鹽濃度低，適合生根培養(yǎng)。17. 由性細胞發(fā)育而成的胚叫做胚狀體，而由體細胞發(fā)育而成的胚叫做合子胚. ×18. 2，4-D可用01molL的NaOH或KOH助溶，而后加無菌水定容。 20. 二倍體細胞比單倍體細胞容易誘導愈傷組織. ×21. 在MS的培養(yǎng)基成分中，MgSO4.7H2O屬于微量元素. ×22. 未成熟胚較小、較嫩、顏色淺，易培養(yǎng)；成熟胚較大、較硬、顏色較深，不易培養(yǎng).

15、 ×23. 固體培養(yǎng)基可加進活性炭來增加通氣度，以利于發(fā)根。×24. 蘭花可以通過芽叢分離的組培途徑快繁，非洲菊通過原球莖增殖的途徑快繁. ×25. 用于外植體、手、超凈臺等的表面消毒酒精濃度越大，消毒效果越好. ×四、名詞解釋1. 植物組織培養(yǎng)：是指在無菌和人工控制的環(huán)境條件下，利用適當?shù)呐囵B(yǎng)基，對離體的植物器官、組織、細胞及原生質體進行培養(yǎng)，使其再生細胞或完整植株的技術。2. 細胞全能性：指每一個植物細胞都攜帶有該植物的全部遺傳信息，在適當條件下可表達出該細胞的所有遺傳信息，分化出植物有機體所有不同類型的細胞，形成不同類型的器官甚至胚狀體，直至形成完

16、整植株的潛在能力。3. 脫分化：是指離體培養(yǎng)條件下生長的細胞、組織或器官經(jīng)過細胞分裂或不分裂逐漸失去原來的結構和功能而恢復分生狀態(tài)，形成無組織結構的細胞團或愈傷組織或成為未分化細胞特性的細胞的過程。4. 母液：在配制培養(yǎng)基之前，為了使用方便、簡化操作、用量準確，減少每次配藥稱量各種化學成分所花費的時間和誤差，常常將配制培養(yǎng)基所需無機大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物、激素成分分別配制成比需要量大若干倍的濃縮母液5. 馴化：指外來植物通過改變其遺傳性狀以適應新環(huán)境的過程6. 外植體：把由活植物體上切取下來以進行培養(yǎng)的那部分組織或器官叫做外植體7. 愈傷組織培養(yǎng)：將一個細胞、一塊組織或一個器官的細胞

17、，通過去分化形成愈傷組織，并在體外培養(yǎng)使之再分化成植株的技術。8. 單細胞培養(yǎng).: 亦稱游離細胞培養(yǎng)（free cell culfure）。是指酵母菌、細菌等單細胞生物的培養(yǎng)，或取多細胞生物體上的一個細胞的無菌培養(yǎng)。9. 滅菌：是指用物理或化學的方法殺滅全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之達到無菌保障水平。10. 玻璃化現(xiàn)象：指試管苗的一種生長失調癥狀，當植物材料進行離體繁殖時，有些培養(yǎng)物的嫩莖、葉片往往會出現(xiàn)半透明狀和水漬狀，這種現(xiàn)象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化苗。11. 無病毒苗：指不含該種植物主要危害病毒的苗木。12. 胚狀體：離體培養(yǎng)條件下，沒有經(jīng)過受精過程，但是經(jīng)過了胚胎發(fā)

18、育過程所形成的胚狀類似物，此現(xiàn)象無論在體細胞培養(yǎng)還是生殖細胞培養(yǎng)中均可以看到，因而統(tǒng)稱為體細胞胚或胚狀體。在離體植物細胞、組織或器官培養(yǎng)過程中，由一個或一些體細胞，經(jīng)過胚胎發(fā)生和發(fā)育過程，形成與合子胚相類似的結構13. 細胞全能性：指植物的每一個細胞都攜帶有一完整的基因組，并具有發(fā)育成完整植株的潛在能力。14. 指示植物：指示植物與被指示對象之間在全部分布區(qū)內保持聯(lián)系的稱為普遍指示植物；只在分布區(qū)的一定地區(qū)內保持聯(lián)系的則稱為地方指示植物。15. 消毒：消毒 是指殺死病原微生物、但不一定能殺死細菌芽孢的方法。通常用化學的方法來達到消毒的作用。16. 植物生長物質：是指一些在低濃度下能調節(jié)植物生長

19、發(fā)育的微量有機物。植物生長物質包括五大類被公認的植物激素和其他內源植物生長調節(jié)物質。17. 單倍體：只含有配子體染色體組數(shù)的植株。18. 無菌操作：用于防止微生物進入人體組織或其它無菌范圍的操作技術稱為無菌操作19. 脫分化：離體培養(yǎng)條件下生長的器官、組織、細胞，經(jīng)過細胞分裂或不分裂而恢復分生狀態(tài)，形成無組織結構的細胞團或愈傷組織或成為未分化細胞特性的細胞過程。21. 花粉胚：花粉胚就是用花粉經(jīng)過人工的組織培養(yǎng)而形成的幼胚，發(fā)育成的植株就只有正常胚一半的染色體組，所以由花粉胚發(fā)育成的植株不會產(chǎn)生種子。22. 褐變：飼料在加工過程中或長期貯存于濕熱環(huán)境下，其所含的氨基化合物如蛋白質、氨基酸及醛、

20、酮等與還原糖相遇，經(jīng)過一系列反應生成褐色聚合物的現(xiàn)象稱為褐變反應，簡稱褐變。24. 指示植物法： 25. 再分化：離體培養(yǎng)的植物細胞和組織可以脫分化狀態(tài)重新進行分化，形成另一種或幾種類型的細胞、器官、組織、甚至完整植株。26平板培養(yǎng)：亦稱平面培養(yǎng)。將瓊脂或明膠等凝膠狀固體培養(yǎng)基制成平面狀，然后在此平面上培養(yǎng)微生物或多細胞生物的細胞、組織或器官，這種培養(yǎng)稱為平板培養(yǎng)27次生代謝產(chǎn)物：植物中一大類并排植物生長發(fā)育所需的小分子化合物，其產(chǎn)生和分布通常有種屬、器官組織和生長發(fā)育期的特異性。次生產(chǎn)物在植物中的合成與分解過程稱為此生代謝。28人工種子：又稱合成種子，指植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的胚狀體或不定芽，被

21、包裹在含有養(yǎng)分和保護功能的人工胚乳和人工種皮中，從而形成能發(fā)芽出苗的顆粒狀。五、簡答題 186273889721. 植物組織培養(yǎng)有哪些特點?答：植物組織培養(yǎng)的主要特點是采用微生物學的實驗手段來操作植物離體的器官、組織和細胞。特點：培養(yǎng)條件可人為控制 植物生長周期短，繁殖系數(shù)高 管理方便，不受季節(jié)環(huán)境條件影響，有利于工廠化生產(chǎn)和自動化控制。2. 培養(yǎng)基一般包括哪些基本成分?其作用是什么?如何配制?答：培養(yǎng)基的構成要素通?？煞譃椋核?、無機鹽類、有機營養(yǎng)成分、植物生長調節(jié)物質、天然物質、Ph、凝固劑等。水分是一切生物生命活動的物質基礎，是很多生物化學反應的原料和代謝產(chǎn)物。無機鹽類是構成植物細胞中核

22、酸、蛋白質以及生物膜系統(tǒng)等必不可少的營養(yǎng)元素。有機營養(yǎng)成分為植物生命活動提供必不可少的碳源、氮源、能源等物質。植物生長調節(jié)劑可以促進植物組織的脫分化和形成愈傷組織，還可以誘導不定芽、不定胚的形成。天然有機添加劑通常富含有機營養(yǎng)成分或生理活性物質。pH過高時，培養(yǎng)基會變硬；pH過低時，則影響培養(yǎng)基的凝固。凝固劑是在配制固體培養(yǎng)基時使用，使培養(yǎng)基凝固。其他添加物是有時為了減少外植體的褐變，需要向培養(yǎng)基中加入一些防止褐化的物質。3. 簡述愈傷組織細胞分化。4. 原生質體融合有哪幾種主要方法?答：植物原生質體最大特性是去掉細胞壁的裸細胞無論來源如何都具有彼此融合的能力 1.自發(fā)融合 2.誘發(fā)融合：a，

23、NaNO?處理 b，高PH值高濃度鈣離子處理 c，聚乙二醇（PEG）處理 d，電融合 3.化學融合5. 組織培養(yǎng)中，pH值起什么作用?如果pH值過高或過低會有什么后果?6. 植物組織培養(yǎng)技術主要包括哪些環(huán)節(jié)?各環(huán)節(jié)的主要工作內容是什么?答：（1）培養(yǎng)基配置技術：包括培養(yǎng)基的選擇、母液配制、培養(yǎng)基配制、培養(yǎng)基滅菌。（2）培養(yǎng)材料制備滅菌技術：供體植物材料選擇、外植體的選擇和處理。（3）無菌接種技術：包括接種室的消毒、工作人員用工作服、口罩等的消毒、超凈工作臺的清潔與殺菌、操作工具的滅菌。（4）培養(yǎng)技術：主要是培養(yǎng)條件的控制，包括溫度、光照、濕度等各種物理環(huán)境條件及培養(yǎng)基組成、PH、滲透壓等各種化

24、學環(huán)境條件。7. 培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿和植物材料通常怎樣滅菌?答：1）培養(yǎng)基一般采用濕熱滅菌，如果培養(yǎng)基中的有些成分高溫易分解，則可采用過濾滅菌。（2）培養(yǎng)器皿可采用濕熱滅菌或干熱滅菌。（3）植物材料一般采用藥劑浸泡滅菌，具體操作如下：A）外植體的預處理，對植物組織進行修整，去掉不需要的部分，并將外植體用流水沖洗干凈。B）用70%的酒精浸潤材料30s 左右。C）用滅菌劑浸泡滅菌，滅菌時不時攪動，使植物材料與滅菌劑有良好的接觸，若滅菌過程中加入數(shù)滴吐溫，則滅菌效果更好。D）植物材料用無菌水沖洗3-5 次，以除去滅菌劑。8. 由胚乳培養(yǎng)獲得的植株，是否一定要進行染色體倍數(shù)的檢查?為什么? 9. 花藥培

25、養(yǎng)產(chǎn)生的植株染色體倍性如何?其產(chǎn)生的原因是什么?10.為什么對脫毒處理后產(chǎn)生的植株必須進行病毒鑒定?為什么已通過病毒(特定病毒)鑒定的無病毒苗還須重復鑒定?11.使用植物生長物質應注意些什么?12.為什么幼胚比成熟胚培養(yǎng)要求的培養(yǎng)基成分復雜? 13. 胚胎培養(yǎng)技術在育種工作中有哪些應用?14. 試比較花藥培養(yǎng)與花粉培養(yǎng)的異同。15. 簡述酶法分離原生質體的步驟.答：葉片表面消毒去除表皮，將葉片切成小塊葉碎片放入含有酶和滲透壓穩(wěn)定劑的溶液中搖床保溫培養(yǎng)原生質體沉到培養(yǎng)皿底部除去酶溶液將原生質體移入CPW清洗離心清洗基質兩次重懸浮于培養(yǎng)基16. 影響馬鈴薯莖尖培養(yǎng)脫毒的因素有哪些? 17簡述人工種子生產(chǎn)步驟？答：選取目標植物 從適合的外植體上誘導愈傷組織將愈傷組織轉移到液體培養(yǎng)基愈傷組織在液體培養(yǎng)基中增生擴大 愈傷組織轉移至無激素培養(yǎng)基 產(chǎn)生體細胞胚 包裹人工種皮煉苗溫室（大棚）播種 獲得目標植物1