第十九章臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗

1、微生物學(xué)檢驗微生物學(xué)檢驗國家衛(wèi)生和計劃生育委員會規(guī)劃教材國家衛(wèi)生和計劃生育委員會規(guī)劃教材 微生物學(xué)檢驗微生物學(xué)檢驗微生物學(xué)檢驗微生物學(xué)檢驗國家衛(wèi)生和計劃生育委員會規(guī)劃教材國家衛(wèi)生和計劃生育委員會規(guī)劃教材 第十九章臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗 返回總目錄本 章 內(nèi) 容第一節(jié) 概述 1第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗2學(xué)習(xí)目標(biāo)：學(xué)習(xí)目標(biāo)：掌握臨床常見標(biāo)本的采集、送檢和處理的原則掌握臨床常見標(biāo)本的采集、送檢和處理的原則臨床常見標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗程序、檢驗方法及結(jié)果報告臨床常見標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗程序、檢驗方法及結(jié)果報告 熟悉熟悉TATTAT、危急值在臨床實際工作中的應(yīng)用、危急值在臨床實際工作中的應(yīng)用臨床標(biāo)本常見病

2、原菌的檢驗方法及鑒定要點臨床標(biāo)本常見病原菌的檢驗方法及鑒定要點了解臨床標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗的臨床意義了解臨床標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗的臨床意義臨床標(biāo)本中正常菌群的分布及常見致病菌臨床標(biāo)本中正常菌群的分布及常見致病菌本章重點：本章重點： 病毒標(biāo)本采集和運送原則病毒標(biāo)本采集和運送原則病毒學(xué)診斷及鑒定常用方法病毒學(xué)診斷及鑒定常用方法病毒培養(yǎng)的基本操作病毒培養(yǎng)的基本操作學(xué)習(xí)目標(biāo)及重點 第一節(jié) 概述一、臨床標(biāo)本的采集、送檢與處理原則 （一）臨床標(biāo)本的采集 1.核對檢驗單信息 信息完整、無誤 2.選擇適當(dāng)?shù)娜萜?3.早期采集 使用抗菌藥物前使用抗菌藥物前 4.無菌采集 嚴(yán)格無菌操作技術(shù)嚴(yán)格無菌操作技術(shù)第一節(jié) 概述 5.選

3、擇采集部位和方法第一節(jié) 概述 6.充足的標(biāo)本量 足量、適量足量、適量 7.標(biāo)記標(biāo)本 8.歸放標(biāo)本 符合生物安全防護(hù)要求符合生物安全防護(hù)要求第一節(jié) 概述（二）臨床標(biāo)本的保存和送檢 立即送檢，否則應(yīng)放入運送培養(yǎng)基或保存液中運送 1.普通細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本 室溫：1小時，4：24小時，運送培養(yǎng)基：48小時 2.苛養(yǎng)菌培養(yǎng)標(biāo)本 保溫、保濕送檢，“床頭接種”第一節(jié) 概述3.厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本 防干燥，避免接觸空氣。4.安全運送 注意安全防護(hù) 高致病性傳染病標(biāo)本，按生物安全有關(guān)規(guī)定包裝，由專人運送第一節(jié) 概述（三）臨床標(biāo)本的處理 核對標(biāo)本與申請單信息常見標(biāo)本處理方式 組織：無菌粉碎研磨后，加生理鹽水制成懸液，接種

4、體液：3000r/mim離心10分鐘后，接種。 棉拭子：置運送培養(yǎng)基送檢，避免污染。 糞便：挑取帶膿、血及黏液部分接種。 痰液：檢查標(biāo)本是否有血液、膿液、顆粒、干酪樣物等 血液：采集后立即增菌培養(yǎng) 厭氧菌培養(yǎng)：檢查標(biāo)本、運送方式是否適合厭氧培養(yǎng)，立即接種 第一節(jié) 概述二、培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法的選擇 1.培養(yǎng)基 選擇恰當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基或組合第一節(jié) 概述電熱恒溫培養(yǎng)箱電熱恒溫培養(yǎng)箱二氧化碳培養(yǎng)箱二氧化碳培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)箱2.常用培養(yǎng)方法 需氧培養(yǎng)、二氧化碳培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)需氧培養(yǎng)、二氧化碳培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)第一節(jié) 概述三、細(xì)菌學(xué)檢驗的基本流程（一）細(xì)菌學(xué)檢驗的基本程序 第一節(jié) 概述（二）細(xì)菌學(xué)檢驗鑒定步驟

5、 1.標(biāo)本性狀觀察 顏色、是否粘稠、是否渾濁、是否膿性、是否帶血等性狀 第一節(jié) 概述革蘭染色抗酸染色墨汁染色 2.涂片檢查 不染色標(biāo)本檢查 ：檢查細(xì)菌的動力 染色標(biāo)本檢查第一節(jié) 概述 3.細(xì)菌的分離培養(yǎng) 目的：得到單個純菌落 甄別污染菌方法 觀察菌落是否在劃線上 觀察菌落是否與直接涂片染色結(jié)果相符 觀察菌落是否符合擬培養(yǎng)細(xì)菌的生長特點 注意培養(yǎng)時間第一節(jié) 概述4.細(xì)菌的鑒定 選擇細(xì)菌檢驗鑒定方法的原則選擇有鑒定價值的試驗：兩種細(xì)菌出現(xiàn)不同的結(jié)果選擇有鑒定價值的試驗：兩種細(xì)菌出現(xiàn)不同的結(jié)果選擇快速、簡易的試驗：如觸酶、氧化酶選擇快速、簡易的試驗：如觸酶、氧化酶 綜合考慮試驗的敏感性和特異性綜合考

6、慮試驗的敏感性和特異性 第一節(jié) 概述5.細(xì)菌對抗菌藥物敏感性試驗 紙片擴(kuò)散法紙片擴(kuò)散法 肉湯稀釋法肉湯稀釋法 自動化儀器法自動化儀器法 E-testE-test法等。法等。第一節(jié) 概述返回本章內(nèi)容四、細(xì)菌學(xué)檢驗報告原則 標(biāo)本周轉(zhuǎn)時間（TAT）：從標(biāo)本采集起到臨床醫(yī)生收到檢驗結(jié)果的時間 危急值：指危及到患者生命健康安全的檢驗結(jié)果 檢驗報告原則 初報告 預(yù)報告 最終報告 報告抗菌藥物敏感性試驗結(jié)果第一節(jié) 概述一、血液及骨髓標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（一）標(biāo)本的采集 1.皮膚消毒 嚴(yán)格執(zhí)行三步法 2.采血部位： 肘靜脈 肘動脈或股動脈采血 嬰幼兒采頸靜脈血 第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗3.采集方法 嚴(yán)格無

7、菌操作 4.采血量 比例：1:10 成人810ml/瓶 兒童15ml/瓶 嬰兒12ml/瓶 骨髓12ml/瓶 第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗疾病24小時內(nèi)24小時后菌血癥、敗血癥23份細(xì)菌性心內(nèi)膜炎3份（12小時）2份不明原因發(fā)熱23份2份5.采血時間和頻度6.標(biāo)本的運送和保存 立即送檢，室溫保存，切勿冷藏第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（二）微生物學(xué)檢驗 1.常見病原菌 第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗2. 檢驗程序第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗培養(yǎng)基性狀改變疑似病原菌均勻混濁，指示劑變色革蘭陰性桿菌微混濁，有綠色變化肺炎鏈球菌有菌膜，均勻混濁有綠色熒光銅綠假單胞菌上層澄清，下層有沉淀鏈

8、球菌細(xì)胞層自上而下的溶血溶血性鏈球菌混濁、有膠凍狀凝固現(xiàn)象葡萄球菌灰白色菌膜、培養(yǎng)基清晰枯草芽孢桿菌或類白喉棒狀桿菌3.檢驗方法 （1）普通細(xì)菌的培養(yǎng)與鑒定 增菌培養(yǎng)：培養(yǎng)陽性指證及疑似菌列表培養(yǎng)陽性指證及疑似菌列表第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗陽性培養(yǎng)瓶直接藥敏試驗分離培養(yǎng)涂片染色鏡檢細(xì)菌鑒定藥敏試驗報告報告報告 陽性培養(yǎng)瓶處理 陰性培養(yǎng)瓶處理 于1218小時、第3天和第7天至少做3次盲傳，7天無細(xì)菌生長報告陰性第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（2）特殊細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定 腦膜炎奈瑟菌血液血液骨髓骨髓胰胨肉湯或胰胨肉湯或?qū)I(yè)培養(yǎng)瓶專業(yè)培養(yǎng)瓶巧克力培養(yǎng)基巧克力培養(yǎng)基（35, 510C02）鑒定：

9、葡萄糖、麥芽鑒定：葡萄糖、麥芽糖發(fā)酵陽性糖發(fā)酵陽性藥敏：藥敏：CLSI標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)腦膜炎奈瑟菌菌落腦膜炎奈瑟菌菌落第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（2）特殊細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定 草綠色鏈球菌血液血液骨髓骨髓血瓊脂平板血瓊脂平板（35, 510C02、需氧和厭氧環(huán)境）需氧和厭氧環(huán)境）胰酶解酪蛋白胰酶解酪蛋白大豆肉湯培養(yǎng)瓶大豆肉湯培養(yǎng)瓶鑒定鑒定藥敏試驗藥敏試驗草綠色鏈球菌草綠色鏈球菌菌落7天培養(yǎng)無細(xì)菌生長，培養(yǎng)至第4周，仍無細(xì)菌生長則報告“經(jīng)4周培養(yǎng)無草綠色鏈球菌生長”第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗血液血液骨髓骨髓葡萄糖膽汁葡萄糖膽汁或膽鹽肉湯或膽鹽肉湯MACMAC、SSSS3535培養(yǎng)培養(yǎng)鑒定鑒定;KI

10、A;KIA、生化反應(yīng)、生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗等血清學(xué)試驗等藥敏試驗藥敏試驗血液血液骨髓骨髓肝浸液肉湯肝浸液肉湯肝浸液平板或血平板肝浸液平板或血平板（35,35, 5 51010C02C02）涂片、生化鑒定涂片、生化鑒定血清學(xué)試驗血清學(xué)試驗 傷寒沙門菌及其他沙門菌 布魯菌 培養(yǎng)培養(yǎng)4 4周無細(xì)菌生長，報告周無細(xì)菌生長，報告“經(jīng)經(jīng)4 4周培養(yǎng)無細(xì)菌生長周培養(yǎng)無細(xì)菌生長”第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗標(biāo)本牛心腦浸液或肝浸液血平板或巧克力平板35、厭氧培養(yǎng)生化鑒定 厭氧菌 真菌： 真菌增菌肉湯增菌沙保弱培養(yǎng)基（25或37）菌落特征生化鑒定、報告 L型細(xì)菌 高滲液體培養(yǎng)基血瓊脂平板和L型細(xì)菌培養(yǎng)基典型“

11、油煎蛋”菌落返祖、鑒定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗4.結(jié)果報告采取分級和限時報告制度 初報告：將鏡檢結(jié)果電話通知主管醫(yī)生 預(yù)報告：68小時內(nèi)報告直接藥物敏感結(jié)果 最終報告：報告細(xì)菌種屬、藥敏試驗、結(jié)果評價及建議 陰性報告第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（三）臨床意義 排除雜菌污染，從血液和骨髓標(biāo)本中檢出任何細(xì)菌都具排除雜菌污染，從血液和骨髓標(biāo)本中檢出任何細(xì)菌都具有臨床意義有臨床意義 葡萄球菌是血液感染最常見的細(xì)菌葡萄球菌是血液感染最常見的細(xì)菌 草綠色鏈球菌是亞急性心內(nèi)膜炎的主要致病菌草綠色鏈球菌是亞急性心內(nèi)膜炎的主要致病菌 尿路、膽道、胃腸道炎癥粘膜損傷引起的敗血癥以大腸尿路、膽道、胃腸道

12、炎癥粘膜損傷引起的敗血癥以大腸埃希菌多見埃希菌多見 產(chǎn)單核李斯特菌主要引起新生兒敗血癥產(chǎn)單核李斯特菌主要引起新生兒敗血癥第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗互動討論 草綠色鏈球菌屬人體正常菌群，試分析從血液和痰液標(biāo)本中分離出草綠色鏈球菌各有何臨床意義？第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗二、腦脊液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（一）標(biāo)本的采集1.采集部位 腰椎穿刺法 2.采集量 35ml 3.標(biāo)本的運送和保存 15分鐘內(nèi)送檢，最遲不能超過1小時。疑似苛養(yǎng)菌感染時，應(yīng)保溫送檢第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（二）微生物學(xué)檢驗 1.常見病原菌第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗2.檢驗程序第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗肺

13、炎鏈球菌肺炎鏈球菌腦膜炎奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌3.檢驗方法（1）涂片檢查 革蘭染色 第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗 抗酸染色 墨汁負(fù)染色 新型隱球菌結(jié)核桿菌第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（2）分離培養(yǎng)與鑒定 普通細(xì)菌 標(biāo)本標(biāo)本血瓊脂平板和巧克力平板（血瓊脂平板和巧克力平板（3535，COCO2 2環(huán)境）環(huán)境）可疑菌落可疑菌落形態(tài)、生化試驗及血清學(xué)試驗、藥敏試驗形態(tài)、生化試驗及血清學(xué)試驗、藥敏試驗 結(jié)核分枝桿菌 標(biāo)本標(biāo)本羅羅- -琴培養(yǎng)基或米氏琴培養(yǎng)基或米氏7H-107H-10培養(yǎng)基培養(yǎng)基3535溫箱孵溫箱孵育育可疑菌落可疑菌落鑒定鑒定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗 真

14、菌 標(biāo)本標(biāo)本血平板或沙保弱培養(yǎng)基血平板或沙保弱培養(yǎng)基2525及及3737孵育孵育可疑菌落可疑菌落形態(tài)、鏡檢及生化反應(yīng)等鑒定。形態(tài)、鏡檢及生化反應(yīng)等鑒定。 厭氧菌 標(biāo)本標(biāo)本血平板、厭氧血瓊脂平板和硫乙醇酸鈉肉湯血平板、厭氧血瓊脂平板和硫乙醇酸鈉肉湯3535需氧、厭氧培養(yǎng)需氧、厭氧培養(yǎng)可疑菌落可疑菌落染色鏡檢及生化鑒染色鏡檢及生化鑒定、藥敏試驗定、藥敏試驗第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗4.結(jié)果報告 初報告：報告標(biāo)本直接涂片結(jié)果：報告標(biāo)本直接涂片結(jié)果 預(yù)報告：報告標(biāo)本直接藥敏試驗結(jié)果：報告標(biāo)本直接藥敏試驗結(jié)果 最終報告：報告細(xì)菌種屬、藥敏試驗、結(jié)果評價及建：報告細(xì)菌種屬、藥敏試驗、結(jié)果評價及建議議

15、 陰性報告陰性報告第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（三）臨床意義 腦膜炎奈瑟菌引起細(xì)菌性腦膜炎腦膜炎奈瑟菌引起細(xì)菌性腦膜炎 結(jié)核分枝桿菌引起的結(jié)核性腦膜炎結(jié)核分枝桿菌引起的結(jié)核性腦膜炎 真菌性腦膜炎最常見的病原體是新型隱球菌，白假絲酵真菌性腦膜炎最常見的病原體是新型隱球菌，白假絲酵母菌、球孢子菌好發(fā)于免疫功能低下和惡性疾病患者母菌、球孢子菌好發(fā)于免疫功能低下和惡性疾病患者第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗三、尿液（泌尿生殖道）標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（一）標(biāo)本的采集 1.中段尿采集法 2.導(dǎo)尿法 3.膀胱穿刺采集法 4.集尿法 5.標(biāo)本的運送和保存 立即送檢、及時接種 室溫不超過2小時，4不超過8小時

16、淋病奈瑟菌感染尿液標(biāo)本不能冷藏第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（二）微生物學(xué)檢驗1.常見病原菌第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗2.檢驗程序第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗3.檢驗方法（1）涂片檢查 普通細(xì)菌檢查：取沉淀涂片、染色、鏡檢：取沉淀涂片、染色、鏡檢 淋病奈瑟菌檢查第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗 念珠菌檢查 結(jié)核分枝桿菌檢查：應(yīng)與恥垢分枝桿菌相鑒別：應(yīng)與恥垢分枝桿菌相鑒別 鉤端螺旋體檢查：暗視野顯微鏡下，發(fā)現(xiàn)一串細(xì)密亮珠、兩：暗視野顯微鏡下，發(fā)現(xiàn)一串細(xì)密亮珠、兩端呈鉤狀且沿縱軸旋轉(zhuǎn)運動的螺旋體時，報告找到螺旋體端呈鉤狀且沿縱軸旋轉(zhuǎn)運動的螺旋體時，報告找到螺旋體第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)

17、菌學(xué)檢驗）接種尿量（菌落數(shù)ml （2）尿液細(xì)菌計數(shù) 計算：cfu/ml=菌落數(shù)稀釋倍數(shù) 或cfu/ml= 意義 革蘭陽性球菌大于104cfu/ml,革蘭陰性桿菌大于105cfu/ml，應(yīng)考慮為泌尿系統(tǒng)感染）接種尿量（菌落數(shù)ml第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗淋球菌菌落淋球菌菌落（3）分離培養(yǎng)與鑒定 普通細(xì)菌培養(yǎng)：沉淀物：沉淀物血平板和麥康凱平板血平板和麥康凱平板3535培養(yǎng)培養(yǎng)菌落觀察菌落觀察染色鏡檢、生化反應(yīng)、抗菌藥物染色鏡檢、生化反應(yīng)、抗菌藥物敏感試驗敏感試驗 淋病奈瑟菌培養(yǎng)：標(biāo)本：標(biāo)本TMTM或或MTMMTM平板平板 3535、 5 51010COCO2 2環(huán)境環(huán)境疑似菌落疑似菌落涂片鏡

18、檢、生化反應(yīng)鑒定涂片鏡檢、生化反應(yīng)鑒定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗4.結(jié)果報告 初級報告：標(biāo)本涂片染色鏡檢結(jié)果，如：標(biāo)本涂片染色鏡檢結(jié)果，如“找到革蘭找到革蘭陰性雙球菌，存在于細(xì)胞內(nèi)（外），形似淋病奈瑟菌陰性雙球菌，存在于細(xì)胞內(nèi)（外），形似淋病奈瑟菌” 最終報告：報告細(xì)菌種屬、菌落計數(shù)、藥物敏感性：報告細(xì)菌種屬、菌落計數(shù)、藥物敏感性試驗、結(jié)果評價及建議試驗、結(jié)果評價及建議 陰性報告：4848小時無細(xì)菌生長者，報告小時無細(xì)菌生長者，報告“4848小時培小時培養(yǎng)無細(xì)菌生長養(yǎng)無細(xì)菌生長”第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（三）臨床意義 尿液中細(xì)菌數(shù)少于尿液中細(xì)菌數(shù)少于10104 4cfucfuml

19、ml或或10104 410105 5cfu/mlcfu/ml之間，之間，反復(fù)多次反復(fù)多次查出同一細(xì)菌時，一般也認(rèn)為是病原菌。查出同一細(xì)菌時，一般也認(rèn)為是病原菌。 同份尿液中檢出三種或以上不同微生物，應(yīng)認(rèn)為標(biāo)本采同份尿液中檢出三種或以上不同微生物，應(yīng)認(rèn)為標(biāo)本采集或處理不當(dāng)被污染。集或處理不當(dāng)被污染。 尿液細(xì)菌學(xué)檢查結(jié)果，應(yīng)結(jié)合臨床考慮綜合尿液細(xì)菌學(xué)檢查結(jié)果，應(yīng)結(jié)合臨床考慮綜合第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗直腸肛拭子直腸肛拭子四、糞便標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（一）標(biāo)本的采集1.自然排便法 膿血、黏液糞便23克2.直腸拭子法 成人45厘米 幼兒23厘米3.標(biāo)本的運送和保存 卡-布（Cary-Blair）運

20、送培養(yǎng)基第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（二）微生物學(xué)檢驗 1.常見病原菌第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗2.檢驗程序第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗3.檢驗方法（1）涂片檢查 霍亂弧菌檢查：動力檢查：動力及制動試驗動力檢查：動力及制動試驗染色鏡檢：革蘭染色，發(fā)現(xiàn)魚群狀排列的革蘭陰性弧菌，染色鏡檢：革蘭染色，發(fā)現(xiàn)魚群狀排列的革蘭陰性弧菌，可做出初步報告可做出初步報告 酵母樣菌檢查第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗葡萄球菌葡萄球菌艱難梭菌艱難梭菌彎曲菌彎曲菌（1）涂片檢查 葡萄球菌、艱難梭菌、彎曲菌檢查 糞便中優(yōu)勢菌檢查：推定主要優(yōu)勢菌并及時報告結(jié)果第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗沙門菌沙門菌志賀

21、菌志賀菌（2）分離培養(yǎng)與鑒定 沙門菌及志賀菌培養(yǎng)糞便或直腸拭子糞便或直腸拭子SSSS平板、麥康凱平板、平板、麥康凱平板、GNGN增菌液增菌液3535、需氧培養(yǎng)需氧培養(yǎng)可疑菌落可疑菌落生化試驗、血清學(xué)反應(yīng)鑒定生化試驗、血清學(xué)反應(yīng)鑒定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗 五種致病性大腸埃希菌 ETEC-ETEC-腸產(chǎn)毒大腸埃希菌腸產(chǎn)毒大腸埃希菌 EPEC- EPEC-腸致病大腸埃希菌腸致病大腸埃希菌 EIEC- EIEC-腸侵襲大腸埃希菌腸侵襲大腸埃希菌 EHEC- EHEC-腸出血大腸埃希菌腸出血大腸埃希菌 EaggEC EaggEC腸凝聚性大腸埃希菌腸凝聚性大腸埃希菌（2）分離培養(yǎng)與鑒定 致病性大

22、腸埃希菌培養(yǎng)膿血或糊狀糞便膿血或糊狀糞便麥康凱麥康凱/ /伊紅美藍(lán)伊紅美藍(lán)/ /中國藍(lán)平板中國藍(lán)平板3535、需氧培養(yǎng)需氧培養(yǎng)可疑菌落可疑菌落生化反應(yīng)、多價血清凝集試驗鑒定生化反應(yīng)、多價血清凝集試驗鑒定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗 霍亂弧菌培養(yǎng)米泔水樣糞便米泔水樣糞便堿性蛋白胨水增菌堿性蛋白胨水增菌堿堿性瓊脂平板或性瓊脂平板或TCBSTCBS平板平板3535需氧培養(yǎng)需氧培養(yǎng) 可疑菌落可疑菌落形態(tài)檢查、動力及制動試形態(tài)檢查、動力及制動試驗、血清學(xué)試驗鑒定驗、血清學(xué)試驗鑒定 副溶血性弧菌培養(yǎng)糞便、可疑食物、嘔吐物糞便、可疑食物、嘔吐物3.5%NaCl3.5%NaCl蛋蛋白胨水增菌白胨水增菌SS

23、SS平板、平板、TCBSTCBS平板平板3535需氧培養(yǎng)需氧培養(yǎng)可疑菌落可疑菌落生化試驗及耐鹽生化試驗及耐鹽試驗鑒定試驗鑒定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗 金黃色葡萄球菌培養(yǎng) 糞便、肛拭子、可疑食物糞便、肛拭子、可疑食物甘露醇高甘露醇高鹽瓊脂平板、血瓊脂平板鹽瓊脂平板、血瓊脂平板3535需氧培需氧培養(yǎng)養(yǎng)可疑菌落可疑菌落革蘭染色、凝固酶、革蘭染色、凝固酶、DNADNA酶及甘露醇發(fā)酵鑒定酶及甘露醇發(fā)酵鑒定 小腸結(jié)腸耶爾森菌培養(yǎng) 標(biāo)本標(biāo)本 NYENYE、1/15M1/15M磷酸鹽増菌液磷酸鹽増菌液4 4 、25253030、3535、需氧環(huán)境、需氧環(huán)境可疑菌落可疑菌落生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗鑒定生化反

24、應(yīng)、血清學(xué)試驗鑒定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗小腸結(jié)腸炎耶爾森菌小腸結(jié)腸炎耶爾森菌 空腸彎曲菌培養(yǎng)標(biāo)本標(biāo)本Camp-BAPCamp-BAP、SkirrowSkirrow或或ButzlerButzler血瓊脂血瓊脂4343、微需氧環(huán)、微需氧環(huán)境境有色半透明菌落有色半透明菌落動力、生化試驗鑒定。動力、生化試驗鑒定。 艱難梭菌培養(yǎng)標(biāo)本標(biāo)本CCFACCFA平板平板3535、厭氧環(huán)境、厭氧環(huán)境可疑菌落可疑菌落生化鑒定、毒生化鑒定、毒素試驗素試驗第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗 真菌培養(yǎng)標(biāo)本標(biāo)本沙保弱瓊脂平板、血瓊脂平板沙保弱瓊脂平板、血瓊脂平板2525及及3737培養(yǎng)培養(yǎng)可疑菌落可疑菌落鏡檢、芽管及

25、厚膜孢子試驗等鑒定鏡檢、芽管及厚膜孢子試驗等鑒定4.結(jié)果報告 初級報告：鏡檢典型陽性結(jié)果，報告臨床。初級報告：鏡檢典型陽性結(jié)果，報告臨床。 最終報告：報告細(xì)菌種屬、藥敏試驗、結(jié)果評價及建最終報告：報告細(xì)菌種屬、藥敏試驗、結(jié)果評價及建議；檢出霍亂弧菌應(yīng)立即向當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制中心報告議；檢出霍亂弧菌應(yīng)立即向當(dāng)?shù)丶膊☆A(yù)防控制中心報告 陰性報告：根據(jù)分離目的菌而定陰性報告：根據(jù)分離目的菌而定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（三）臨床意義 能引起腸道感染的常見致病菌有沙門菌、志賀菌、霍亂能引起腸道感染的常見致病菌有沙門菌、志賀菌、霍亂弧菌及致病性大腸埃希菌等。弧菌及致病性大腸埃希菌等。 能引起食物中毒的

26、常見致病菌有沙門菌、副溶血弧菌、能引起食物中毒的常見致病菌有沙門菌、副溶血弧菌、致病性大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、肉毒梭菌、蠟樣芽致病性大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、肉毒梭菌、蠟樣芽胞桿菌等胞桿菌等 幽門螺桿菌是引起胃炎、消化性潰瘍主要致病菌，胃癌幽門螺桿菌是引起胃炎、消化性潰瘍主要致病菌，胃癌的危險因子的危險因子第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗互動討論 正常人糞便中含有大量細(xì)正常人糞便中含有大量細(xì)菌，而能引起腸道感染的細(xì)菌菌，而能引起腸道感染的細(xì)菌種類較多，致病菌和正常菌往種類較多，致病菌和正常菌往往共存生長。試分析如何快速往共存生長。試分析如何快速準(zhǔn)確的檢出致病菌？準(zhǔn)確的檢出致病菌？ 第二節(jié)

27、 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗五、痰液（呼吸道）標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（一）標(biāo)本的采集 1.自然咳痰法晨痰最佳，深部痰晨痰最佳，深部痰2.小兒取痰法3.特殊器械采集法4.標(biāo)本的運送和保存立即送檢，室溫不超過立即送檢，室溫不超過2 2小時小時第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（二）微生物學(xué)檢驗 1.常見病原菌 第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗2.檢驗程序第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗白細(xì)胞數(shù)(LP)上皮細(xì)胞數(shù)(LP)細(xì)菌培養(yǎng)25個10個合格10個25個不合格3.檢驗方法 （1）涂片檢查目的:確定標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng)確定標(biāo)本是否適合做細(xì)菌培養(yǎng)為選用培養(yǎng)基提供參考為選用培養(yǎng)基提供參考適合細(xì)菌培養(yǎng)的痰液鏡檢標(biāo)

28、準(zhǔn)第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（1）涂片檢查 普通細(xì)菌檢查：涂片行革蘭染色鏡檢，根據(jù)染色性、形態(tài)及排列初步報告 結(jié)核桿菌檢查：制成厚涂片，抗酸染色鏡檢 放線菌及諾卡菌檢查硫磺樣顆粒涂片硫磺樣顆粒涂片衣氏放線菌衣氏放線菌第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗痰培養(yǎng)前的處理痰液的洗凈痰液的洗凈痰液的均質(zhì)化痰液的均質(zhì)化 普通細(xì)菌培養(yǎng) 嗜肺軍團(tuán)菌培養(yǎng)標(biāo)本標(biāo)本血瓊脂、巧克力瓊脂和血瓊脂、巧克力瓊脂和BCYEBCYE瓊脂平板瓊脂平板3535，5 51010COCO2 2環(huán)境環(huán)境根據(jù)培養(yǎng)時間、菌落特點等鑒定根據(jù)培養(yǎng)時間、菌落特點等鑒定（2）細(xì)菌的培養(yǎng)與鑒定第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗異染顆粒異染顆粒 白喉

29、棒狀桿菌培養(yǎng)標(biāo)本標(biāo)本呂氏血清斜面、血瓊脂平板和亞碲酸鉀瓊脂平板呂氏血清斜面、血瓊脂平板和亞碲酸鉀瓊脂平板3535、需氧環(huán)境、需氧環(huán)境典型菌落典型菌落形態(tài)、生化試驗、毒力試形態(tài)、生化試驗、毒力試驗驗第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗百日咳鮑特菌在百日咳鮑特菌在CCBA培養(yǎng)基菌落培養(yǎng)基菌落 鮑特菌培養(yǎng) 標(biāo)本標(biāo)本鮑鮑- -金培養(yǎng)基金培養(yǎng)基3535、需氧環(huán)境、需氧環(huán)境可疑菌落可疑菌落涂片鏡檢、涂片鏡檢、生化及血清學(xué)試驗等鑒定生化及血清學(xué)試驗等鑒定4.結(jié)果報告 初級報告：典型陽性結(jié)果，立即向臨床報告初級報告：典型陽性結(jié)果，立即向臨床報告 最終報告：報告細(xì)菌種屬、藥敏試驗、各細(xì)菌所占比例、結(jié)果最終報告：報告細(xì)菌種屬、藥敏試驗、各細(xì)菌所占比例、結(jié)果評價及建議評價及建議 陰性報告：報告陰性報告：報告“正常菌群正常菌群”或或“生長細(xì)菌的種類、數(shù)量生長細(xì)菌的種類、數(shù)量”第二節(jié) 臨床常見標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗（三）臨床意義 上呼吸道感染