




版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、白色念珠菌污染 革蘭氏染色陽性 中間長(zhǎng)梭型的是正在分裂的念珠菌 生命經(jīng)緯網(wǎng)友布蘭卡的觀點(diǎn)為:我個(gè)人感覺,操作之前酒精擦手消毒非常重要,因?yàn)榄h(huán)境再差,無菌臺(tái)里一般是沒問題的,但是,污染往往在這里操作時(shí)發(fā)生,因此,個(gè)人手的衛(wèi)生非常重要,白色念珠菌是人體霉菌感染的常見霉菌種類(盡管我們有時(shí)感覺不到,但它就在你我的身邊甚至身上存在著),我認(rèn)為絕大多數(shù)污染是我們自己帶進(jìn)去的
2、,因此,如果環(huán)境不是太差,那就找找自身的原因。生命經(jīng)緯網(wǎng)友dsh1205的觀點(diǎn)為:滅菌水,是否有必要我也不太肯定。其實(shí)這一點(diǎn)是很容易辦到的,有總比沒有好。多注意一些可能的因素,對(duì)細(xì)胞總是有力的。被污染總是很麻煩的,細(xì)胞長(zhǎng)得不好不說,還影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。我認(rèn)為有兩個(gè)環(huán)節(jié)很重要,操作臺(tái)及溫相。我們操作前、后都要紫外殺菌30min,而且保持操作臺(tái)通風(fēng)設(shè)施正常。我們的溫相好像從來沒有用酒精擦過,更沒用紫外照射。我們開溫相時(shí),先清潔劑洗手,在酒精擦手,范圍與手術(shù)洗手差不多,時(shí)間一般在幾秒內(nèi)。另外,我自己將瓶放回相中時(shí),還對(duì)瓶體進(jìn)行酒精擦洗。當(dāng)然還有給細(xì)胞換液也要注意了,吸管盡量不要深入瓶?jī)?nèi),要深入瓶?jī)?nèi)的最好
3、先在酒精燈上燒一燒等等。HepG2細(xì)胞,熒光染色檢測(cè)支原體 支原體污染檢測(cè) 在上面的支原體檢測(cè)圖片里沒大片的針狀點(diǎn),但不敢肯定個(gè)別細(xì)胞核外的小點(diǎn)是不是支原體,可是要有也不應(yīng)該就這么幾個(gè)???(細(xì)胞一共培養(yǎng)了40小時(shí))生命經(jīng)緯網(wǎng)友bianmin8024認(rèn)為:這么大面積的污染,你可以看看是不是做這批細(xì)胞時(shí)操作上出了問題,要不然就是培養(yǎng)基的問題。其實(shí)我覺得在每次試驗(yàn)前,最好簡(jiǎn)略寫一下操作步驟做到心中有數(shù)。這樣可以避免實(shí)驗(yàn)中的忙亂。既然現(xiàn)在已經(jīng)污染了,就全部更換你的
4、器皿。培養(yǎng)箱的水沒有必要用無菌水,但最起碼要是蒸餾水。 以上圖片細(xì)胞系念珠菌污染處理辦法:扔掉,善后辦法,養(yǎng)成良好的無菌操作的習(xí)慣
5、,拿70酒精擦手,擦超凈臺(tái),擦培養(yǎng)瓶,擦培養(yǎng)基瓶,各種瓶子的口多拿火焰燒灼。就不再會(huì)發(fā)生細(xì)菌污染。支原體污染電鏡照片(X30k),煎蛋狀和其他形狀 支原體污染電鏡照片(X30k)
6、支原體污染電鏡照片(X12k) 支原體污染電鏡照片(X12k) 支原體污染電鏡照片(X12k)
7、160; &
8、#160; 你的培養(yǎng)液應(yīng)該一兩天內(nèi)很快變混濁剛開始小蟲桿狀成串,不怎么動(dòng),多了以后就不成串了,移動(dòng)迅速,是這樣嗎?如果是,細(xì)菌培養(yǎng)液是被洋蔥佰克霍爾德菌污染了。洋蔥佰克霍爾德菌(Burkholderiacepacia)原屬假單胞菌屬,是植物病原菌,因引起洋蔥患病而得名,是醫(yī)院感染病原菌之一。洋蔥伯克霍爾德菌是一種廣泛存在于土壤及水中,與醫(yī)院感染密切相關(guān)的革蘭陰性桿菌,尤其為免疫缺陷及肺囊性纖維化患者易感染細(xì)菌之一。它可以在無糖的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。在醫(yī)院環(huán)境中常可污染自來水、體溫表、噴霧器、靜脈導(dǎo)管、導(dǎo)尿管、靜脈輸液管等,造成院內(nèi)傳播,導(dǎo)致多種醫(yī)院感染,如敗血癥、心內(nèi)膜炎、肺炎
9、、傷口感染、深部膿腫和眼結(jié)膜炎等,尤其采用導(dǎo)管植入進(jìn)行治療者,更容易引起感染。洋蔥伯克霍爾德菌對(duì)多種抗菌藥具有天然的耐藥性。耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重,治療可選擇復(fù)方磺胺甲懶唑、哌拉西林,三唑巴坦、哌拉西林和頭孢他啶等抗菌藥物。參考文獻(xiàn):洋蔥伯克霍爾德菌86株的分布與耐藥性 尤榮開,等 中國(guó)抗感染化療雜志 2003年2月28日第3卷第1期生命經(jīng)緯網(wǎng)友wangyz認(rèn)為:看到上面很多戰(zhàn)友細(xì)胞都被霉菌污染了,而很多是由于培養(yǎng)箱污染的原故,我想說的是其實(shí)這種污染是很容易避免的,我養(yǎng)細(xì)胞近一年了,養(yǎng)過很多種細(xì)胞,還從來沒發(fā)生過類似的情況,培養(yǎng)箱的水如上面有位戰(zhàn)友所講,加疊氮鈉使其濃度到千分之零點(diǎn)二的(有劇毒,配置是小
10、心勿沾到皮膚上)就可以防腐了,我們?cè)诘谝皇褂门囵B(yǎng)箱或萬一被污染的情況下通常的做法是在常規(guī)的用千分之一新潔爾滅和75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,加入消毒過的水(普通的雙蒸水高壓即可,疊氮鈉可先配成1%貯存濃度,用不著消毒因?yàn)槲⑸锸遣荒艹苫畹模?,在往培養(yǎng)箱中加水前放細(xì)胞室開紫外燈照20-30分鐘,此時(shí)每500毫升的水加1毫升的貯存濃度疊氮鈉,混勻,到入培養(yǎng)箱中即可。上面的過程我想很多人是這么做的,應(yīng)該沒問題,至少你首次不會(huì)帶入污染,我想提醒的是在每次從培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞到顯微鏡下觀察前,一定要打開細(xì)胞室的紫外燈照20-30分鐘(手伸進(jìn)培養(yǎng)箱前當(dāng)然要用酒精棉球搽拭,不過一般都能做到),觀察完將細(xì)胞放入培養(yǎng)
11、箱前用酒精棉球搽拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶后再放入。我經(jīng)??吹接行┤耸且蝗ゼ?xì)胞室先從培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞觀察,再做決定,如果需要處理則再開始打開細(xì)胞室的紫外等消毒。這樣做是省事但極易帶入細(xì)菌、霉菌等造成污染,因?yàn)槟阋路希呐履愦┘?xì)胞室的工作服但沒照過)以及細(xì)胞間的環(huán)境中就有細(xì)菌、霉菌等微生物,當(dāng)打開培養(yǎng)時(shí)空氣一流通這些微生物就有可能進(jìn)入,而培養(yǎng)箱內(nèi)的環(huán)境又極適合微生物的生長(zhǎng)。所以我說寧可麻煩一點(diǎn),但也值得!實(shí)驗(yàn)只要不因失誤重做哪怕準(zhǔn)備時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)做起來都算快的。支原體污染 傳說中的黑焦蟲,長(zhǎng)得暴快。24小時(shí)就滿視野都是了。用PBS洗洗,細(xì)胞竟
12、然還活著。下面是20倍鏡下得視野。 垂體瘤原代培養(yǎng)真菌污染 生命經(jīng)緯網(wǎng)友
13、爐灰渣認(rèn)為:污染是細(xì)胞培養(yǎng)中一個(gè)大敵,一旦污染,前功盡棄!但對(duì)新手來說,又滿頭霧水!來說說我的經(jīng)驗(yàn),決定要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),首先一定要有強(qiáng)烈的無菌意識(shí)!操作中要求自己遵守嚴(yán)格的操作規(guī)程,不要怕麻煩,越細(xì)心越好,越“羅嗦”越好!我發(fā)現(xiàn)在提取需要組織時(shí),往往頭會(huì)距離組織很近,所以帶口罩很重要!還要換無菌衣(紫外照過的白大褂)另外,每次開始實(shí)驗(yàn)前,先用紫外照無菌臺(tái)和實(shí)驗(yàn)室20分,用酒精擦手,臺(tái)面,不消毒的器械(如移液槍,冰塊等);實(shí)驗(yàn)中,如允許,盡量多過火,開起或蓋蓋都靠近火焰或在無菌臺(tái)深處進(jìn)行;使用無菌臺(tái)后,再用酒精擦全臺(tái)面,紫外照20分!還有,做到絕對(duì)無菌,那不可能!但我們可以做到最大限度的減少含菌
14、量!使用完的東西盡快移出無菌臺(tái)!另外無菌臺(tái)上的器械,試劑擺放,也盡量遵循一定的順序!依污染可能程度依次向外擺。包裝腺病毒所培養(yǎng)的293細(xì)胞出現(xiàn)污染,拿到醫(yī)院檢測(cè)中心檢測(cè)證實(shí)為格蘭氏陽性桿菌。經(jīng)過摸排,認(rèn)定罪魁禍?zhǔn)资寝D(zhuǎn)染試劑盒已遭污染。
15、60; HSC-T6真菌污染 真菌污染,樹枝狀的。高倍鏡 真菌污染,樹枝狀的
16、; 真菌污染:(倒置) 油鏡下桿菌的污染,圖片經(jīng)瑞氏染色
17、160; 霉菌污染
18、160; 白色念球菌特征:似乎無處不在,而且頑固的很。長(zhǎng)的暴快(12h就能讓細(xì)胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細(xì)胞上,高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。 生命經(jīng)緯網(wǎng)友belindafly認(rèn)為:我們實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的條件比較差,因此細(xì)胞培養(yǎng)箱很少像大家說的那樣經(jīng)常用酒精擦拭和更換水盤,但是平時(shí)細(xì)胞卻極少發(fā)生污染,我們的經(jīng)驗(yàn)是在關(guān)鍵的操作上要特別小心,例如1.滴管不要接觸瓶口,吸取廢液及加入新鮮培養(yǎng)基時(shí)都要注意不要滴在瓶口上等等。2.凡是接觸瓶口后都要用酒精燈燒燒。3.初學(xué)者一般可以用培養(yǎng)瓶養(yǎng)細(xì)胞,個(gè)人認(rèn)為瓶污染的機(jī)率要比皿小。4.注意配制完全培養(yǎng)基時(shí)不要發(fā)生污染,在使用前一定要做無菌培養(yǎng),因?yàn)橐话銘?yīng)用污染后的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞后,很快就會(huì)發(fā)生特別嚴(yán)重的污染。5.操作時(shí)一定按照實(shí)驗(yàn)室的要求,切忌粗心大意。細(xì)胞細(xì)菌污染高倍鏡圖片(1000倍),瑞氏染色
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 高考數(shù)學(xué)(人教A版文科)一輪復(fù)習(xí)考點(diǎn)規(guī)范練53
- 2017-2018學(xué)年物理人教版必修2講義第5章曲線運(yùn)動(dòng)第5節(jié)
- 論技工院校計(jì)算機(jī)應(yīng)用課程的開放式教學(xué)
- 精神病強(qiáng)制醫(yī)療程序的救濟(jì)機(jī)制研究
- 小兒不同病理分型闌尾炎臨床特點(diǎn)研究
- 養(yǎng)陰益氣活血法減少糖尿病GK大鼠血糖波動(dòng)的機(jī)制探索
- DB11T-鋼筋套筒灌漿連接技術(shù)規(guī)程編制說明
- 買賣房合同范例
- 三方租賃合同范例
- 鄉(xiāng)村涵洞施工合同范例
- 條件概率與全概率公式高二下學(xué)期數(shù)學(xué)人教A版(2019)選擇性必修第三冊(cè)
- (正式版)JBT 10437-2024 電線電纜用可交聯(lián)聚乙烯絕緣料
- 法律知識(shí)圖譜構(gòu)建及應(yīng)用
- 八卦的基本介紹及其科學(xué)內(nèi)涵
- 內(nèi)科護(hù)理學(xué)慢性腎衰竭
- (建筑制圖)課程綜合自測(cè)題3(試卷和答案)
- 公司商業(yè)模式策劃案關(guān)鍵合作伙伴
- 虛擬現(xiàn)實(shí)技術(shù)在工業(yè)設(shè)計(jì)中的應(yīng)用課件
- 學(xué)術(shù)誠(chéng)信與學(xué)術(shù)規(guī)范
- 急診科的急性心肌炎處理
- 郵政分銷述職報(bào)告
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論