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1、會計(jì)學(xué)1蘇教教學(xué)江蘇地區(qū)生物學(xué)科選修微生物蘇教教學(xué)江蘇地區(qū)生物學(xué)科選修微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)蘇教的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)蘇教第2頁/共26頁練習(xí)生長因子生長因子第3頁/共26頁(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)防止外來雜菌的入侵防止外來雜菌的入侵第4頁/共26頁a. 灼燒滅菌微生物的接種工具微生物的接種工具 (接接種環(huán)、接種針種環(huán)、接種針)或其或其他金屬用具直接在他金屬用具直接在火焰的充分燃燒層火焰的充分燃燒層灼燒灼燒注意適用范圍注意適用范圍第5頁/共26頁b. 干熱滅菌 160170 ;12h能耐高溫的需要保持能耐高溫的需要保持干燥的物品干燥的物品( 玻璃器玻璃器皿皿)c. 高壓蒸汽滅菌 100kPa 1
2、21 15-30min通常用于培養(yǎng)基的滅通常用于培養(yǎng)基的滅菌菌第6頁/共26頁第7頁/共26頁練習(xí)第8頁/共26頁第9頁/共26頁倒平板第10頁/共26頁提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度度下降到剛剛不燙手時,就可以進(jìn)行倒平板了。下降到剛剛不燙手時,就可以進(jìn)行倒平板了。答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好濕度
3、也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。第11頁/共26頁1、平板劃線法第12頁/共26頁答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)
4、束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。染環(huán)境和感染操作者。答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次答:劃線
5、后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加加而逐步減少,最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。而逐步減少,最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。第13頁/共26頁第14頁/共26頁提示:應(yīng)從操作的各個細(xì)節(jié)保證提示:應(yīng)從操作的各個細(xì)節(jié)保證“無菌無菌”。例如,酒精燈。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。第15頁/共26頁返回菌落: 單個或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基
6、上大量繁殖時,就會形成一個肉眼可見的,具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體,叫做菌落。 不同的細(xì)菌的菌落特征不同 菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。第16頁/共26頁蛋白蛋白質(zhì)質(zhì) 脂肪酸脂肪酸返回不同微生物所利用的碳源不同不同微生物所利用的碳源不同a. 異養(yǎng)型微生物的碳源為異養(yǎng)型微生物的碳源為b. 自養(yǎng)型微生物的碳源為自養(yǎng)型微生物的碳源為碳酸鹽碳酸鹽碳酸氫鹽碳酸氫鹽二氧化碳二氧化碳糖類(主要)糖類(主要)含碳有機(jī)物(有機(jī)碳)含碳有機(jī)物(有機(jī)碳)含碳無機(jī)物(無機(jī)碳)含碳無機(jī)物(無機(jī)碳)第17頁/共26頁蛋白蛋白胨胨牛肉膏牛肉膏尿素尿素返回固氮微生物所利用的氮源是固氮微生物所利用的氮源是氮?dú)獾獨(dú)獍睔獍睔庀跛猁}硝酸
7、鹽氨鹽氨鹽氮?dú)獾獨(dú)獾?8頁/共26頁A.CA.CB.C.第19頁/共26頁消毒消毒滅菌滅菌條件條件溫和溫和強(qiáng)烈強(qiáng)烈作用作用范圍范圍物體表面或內(nèi)部一部物體表面或內(nèi)部一部分分,不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子物體內(nèi)外所有微生物物體內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子包括芽孢和孢子無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。滅菌 滅菌 消毒營養(yǎng)成分不被破壞營養(yǎng)成分不被破壞第20頁/共26頁可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能可保證粘附在稱量紙上的牛肉膏也能溶于水中溶于水中,減少誤差減少誤差作為凝固劑作為凝固劑第21頁/共26頁在滅菌時能避免水蒸汽凝結(jié)時浸濕棉塞在滅菌時能避免水蒸汽凝結(jié)時浸濕棉塞,在在取出培養(yǎng)基錐形瓶時也起到隔絕空氣中取出培養(yǎng)基錐形瓶時也起到隔絕空氣中雜菌污染的作用雜菌污染的作用不能不能,因?yàn)榕囵B(yǎng)皿要保持干燥因?yàn)榕囵B(yǎng)皿要保持干燥,應(yīng)該用干熱滅菌應(yīng)該用干熱滅菌.第22頁/共26頁DCD第23頁/共26頁,止.牛肉膏、蛋白胨、水、無機(jī)鹽
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