棒狀桿菌屬課稿

1、棒狀桿菌屬 CorynebacteriumCorynebacterium革蘭陽(yáng)性，一端或兩端膨大呈棒狀，無(wú)莢膜、無(wú)鞭毛，不產(chǎn)生芽胞多為條件致病菌致病菌：白喉棒狀桿菌形態(tài) G+，菌體細(xì)長(zhǎng)微彎，一端或兩端膨大、有異染顆粒，常排列呈V、L形培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求較高 BAP：有狹窄溶血環(huán) 亞蹄酸鉀血瓊脂平板：分3型，黑色菌落 呂氏血清斜面：灰白色、不透明、有光澤的S型菌落，異染顆粒明顯。呂氏血清斜面100g/L葡萄糖肉湯（滅菌，pH7.4）1份小牛血清（或兔、羊、馬血清）3份用無(wú)菌操作法將上述成份混合于滅菌三角燒瓶。無(wú)菌分裝于15mm150mm滅菌試管，每管35ml，將試管斜置于血清凝固

2、器內(nèi)，間歇滅菌3天，。第1天徐徐加熱85，維持30min，使血清凝固，置3溫箱過(guò)夜；第2天和第3天再用8590滅菌30min，取出后置4備用。用于白喉棒狀桿菌培養(yǎng)，觀察異染顆粒。生化反應(yīng) 氧化酶 葡萄糖、麥芽糖 硝酸鹽還原分型 亞蹄酸鉀血瓊脂平板劃分菌落形態(tài)為重型、中間型和輕型，據(jù)K抗原劃分血清型： 重型：13個(gè)血清型 中間型：4個(gè)血清型 輕型：40個(gè)血清型抵抗力 對(duì)濕熱抵抗力弱 抗寒冷和干燥 對(duì)青霉素、氯霉素、紅霉素敏感致病物質(zhì) 白喉外毒素：棒狀桿菌噬菌體帶有編碼外毒素的tox基因, 在溶原階段基因整合到染色體上即可產(chǎn)生 A A亞單位和B B亞單位 B B亞單位有結(jié)合和轉(zhuǎn)位功能 A A亞單位

3、上有1 1個(gè)催化區(qū) 作用靶：心肌和神經(jīng)細(xì)胞作用機(jī)制A A亞單位可使細(xì)胞延伸因子-2-2（EF-2EF-2）滅活，影響蛋白質(zhì)的合成。作用特點(diǎn) 毒性作用大，1分子能殺一個(gè)細(xì)胞 多種細(xì)胞，特別心肌、神經(jīng)細(xì)胞均有毒素受體 腫瘤細(xì)胞對(duì)此毒素特別敏感，用于靶向治療所致疾病：白喉-急性呼吸道傳染病 傳染源：患者及帶菌者 傳播途徑：飛沫或污染 臨床表現(xiàn) 細(xì)菌-上呼吸道粘膜， 生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生毒素, 細(xì)菌與毒素共同作用引起局部癥狀： 炎癥，壞死，纖維蛋白滲出 假膜窒息 毒素入血引起全身中毒癥狀 外周神經(jīng)炎：膈肌麻痹-呼吸困難 聲帶麻痹-聲音嘶啞 軟頜麻痹-吞咽困難 心肌-心肌炎 感染后機(jī)體可獲得牢固的免疫力標(biāo)本直

4、接涂片染色鏡檢（革蘭染色、異染顆粒染色）呂氏血清斜面，35培養(yǎng)1218h亞碲酸鉀血瓊脂平板35培養(yǎng)2448h血瓊脂平板35培養(yǎng)1218h觀察菌落特點(diǎn)呂氏血清斜面涂片染色鏡檢生化反應(yīng)毒力試驗(yàn)白喉?xiàng)U菌的檢測(cè)程序涂片染色鏡檢（革蘭染色、異染顆粒染色）微生物學(xué)檢查法 標(biāo)本：咽拭子 直接涂片鏡檢形態(tài)，異染顆粒， 分離培養(yǎng)BAPBAP、呂氏血清斜面，亞碲酸鉀平板 毒力鑒定動(dòng)物試驗(yàn)，ElekElek平板毒力實(shí)驗(yàn)Elek Test沉淀線(陽(yáng)性)含100U/ml白喉抗毒素濾紙片白喉?xiàng)U菌菌苔ElekElek平板試驗(yàn)20%血清肉湯瓊脂37培養(yǎng)2448h錫克試驗(yàn)(Schick test)(Schick test)：測(cè)

5、定對(duì)白喉的免疫力皮膚試驗(yàn) 原理：毒素抗毒素中和反應(yīng) 方法：注射毒素（毒性、蛋白質(zhì)） 試驗(yàn) 加熱破壞的毒素（無(wú)毒、蛋白質(zhì)） 對(duì)照 結(jié)果：48小時(shí)觀察結(jié)果， 有紅腫 陽(yáng)性反應(yīng) 無(wú)免疫力 無(wú)紅腫 陰性反應(yīng) 有免疫力 應(yīng)用：檢查機(jī)體對(duì)白喉的免疫力 預(yù)防接種前的篩選與接種后效果觀察 流行病學(xué)調(diào)查Schick testSchick test結(jié)果分析 試驗(yàn)側(cè) 對(duì)照側(cè)本質(zhì)陰性反應(yīng)有免疫力陽(yáng)性反應(yīng)2448h無(wú)免疫力47d達(dá)峰假陽(yáng)性反應(yīng) 618h紅腫 同前有免疫力，超敏反應(yīng) 12d消退混合反應(yīng)618h紅腫 618h紅腫 無(wú)免疫力，超敏反應(yīng) 47d達(dá)峰 34d反應(yīng)消退防治原則- -與破傷風(fēng)類似 預(yù)防 人工主動(dòng)免疫：

6、注射白喉類毒素（白百破三聯(lián)疫苗） 人工被動(dòng)免疫：注射白喉抗毒素 藥物預(yù)防：如注射青霉素或口服紅霉素 治療 白喉抗毒素-皮膚試驗(yàn)、早期使用 抗生素第二節(jié) 其他棒狀桿菌 大多不產(chǎn)生外毒素 很少有異染顆粒 大多正常寄生于人體，為條件致病菌 本章要點(diǎn) 概念：異染顆粒、 Elek毒力平板試驗(yàn)、錫克試驗(yàn)(Schick test) 白喉棒狀桿菌的所致疾病與致病機(jī)理、微生物學(xué)診斷方法與判斷依據(jù)思考題 Elek毒力平板試驗(yàn)為哪幾種實(shí)驗(yàn)方法的疊加？類似的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)還有哪些？這些實(shí)驗(yàn)方案的巧妙之處在那里？培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求較高 BAP：有狹窄溶血環(huán) 亞蹄酸鉀血瓊脂平板：分3型，黑色菌落 呂氏血清斜面：灰白色、不透明、有光澤的S型菌落，異染顆粒明顯。生化反應(yīng) 氧化酶 葡萄糖、麥芽糖 硝酸鹽還原標(biāo)本直接涂片染色鏡檢（革蘭染色、異染顆粒染色）呂氏血清