高考生物二輪復習配套專題微生物分離培養(yǎng)及在傳統(tǒng)發(fā)酵技術中的應用

1、專題21晨背關鍵語句導練感悟高考熱點透析高考考點一考點二拾遺自主補給沖刺直擊高考考點三請根據當地教學實際和高考要求選用請根據當地教學實際和高考要求選用纖維素分解菌纖維素分解菌纖維素酶纖維素酶 8三種常用的滅菌方法有：三種常用的滅菌方法有：灼燒滅菌，如接種環(huán)、接灼燒滅菌，如接種環(huán)、接種針；種針；干熱滅菌，如玻璃器皿和金屬用具等；干熱滅菌，如玻璃器皿和金屬用具等；高壓蒸汽高壓蒸汽滅菌，如培養(yǎng)基等。滅菌，如培養(yǎng)基等。 9土壤中分解尿素的細菌的分離與計數過程：土壤取樣土壤中分解尿素的細菌的分離與計數過程：土壤取樣樣品的稀釋樣品的稀釋將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的

2、培養(yǎng)基上上篩選能生長的微生物菌落。篩選能生長的微生物菌落。1(2012北京高考北京高考)高中生物學實驗中，在接種時不進行嚴高中生物學實驗中，在接種時不進行嚴格格無菌操作對實驗結果影響最大的一項是無菌操作對實驗結果影響最大的一項是 ()A將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C將轉基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上將轉基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上D將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上命題立意命題立意本題主要考查幾種常見生物學實驗的無菌操本題主要考查幾種常見生物學實驗的

3、無菌操作要求。作要求。知識依托知識依托無菌操作對實驗結果影響大小決定于雜無菌操作對實驗結果影響大小決定于雜菌對實驗結果的影響。菌對實驗結果的影響。植物組織培養(yǎng)成功的關鍵在植物組織培養(yǎng)成功的關鍵在于無菌操作，否則將導致實驗失敗。于無菌操作，否則將導致實驗失敗。解析解析選選 A項，將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中進行項，將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中進行釀酒時，在缺氧、酸性環(huán)境下其他雜菌不能生長，故不嚴格滅釀酒時，在缺氧、酸性環(huán)境下其他雜菌不能生長，故不嚴格滅菌對其影響不大；菌對其影響不大；B項，腐乳制作中將毛霉菌液接種在切成小項，腐乳制作中將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上，毛霉生長繁殖快且抗

4、雜菌能力強，故不嚴格滅塊的鮮豆腐上，毛霉生長繁殖快且抗雜菌能力強，故不嚴格滅菌對實驗結果影響不大；菌對實驗結果影響不大；C項，進行植物組織培養(yǎng)時，植物材項，進行植物組織培養(yǎng)時，植物材料體積小、抗性差，而微生物繁殖快、生長迅速、會爭奪培養(yǎng)料體積小、抗性差，而微生物繁殖快、生長迅速、會爭奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)，產生的代謝廢物還會毒害培養(yǎng)材料，故培養(yǎng)材料基中的營養(yǎng)，產生的代謝廢物還會毒害培養(yǎng)材料，故培養(yǎng)材料一旦被微生物一旦被微生物(如細菌如細菌)污染，將嚴重影響實驗結果；污染，將嚴重影響實驗結果；D項，選擇項，選擇培養(yǎng)基中已經加入了某種化學物質，以抑制不需要的微生物生培養(yǎng)基中已經加入了某種化學物質，以抑制

5、不需要的微生物生長，促進所需要的微生物生長，另外土壤浸出液本身也含有一長，促進所需要的微生物生長，另外土壤浸出液本身也含有一定量的微生物，因此將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上定量的微生物，因此將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上時不進行嚴格的無菌操作，對實驗結果影響不大。時不進行嚴格的無菌操作，對實驗結果影響不大。C2(2012江蘇高考江蘇高考)下列關于制作果酒、果醋和腐乳的敘述，下列關于制作果酒、果醋和腐乳的敘述，合理的是合理的是(多選多選) ()A在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長在果酒發(fā)酵后期擰開瓶蓋的間隔時間可延長B條件適宜時醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸條件適宜時醋酸菌可將

6、葡萄汁中的糖分解成醋酸C果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會逐漸減小果酒發(fā)酵過程中發(fā)酵液密度會逐漸減小D將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加大將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加大 用鹽量用鹽量命題立意命題立意本題主要考查果酒、果醋和腐乳制作的知識。本題主要考查果酒、果醋和腐乳制作的知識。知識依托知識依托傳統(tǒng)發(fā)酵技術操作中，要提供適合所用微生傳統(tǒng)發(fā)酵技術操作中，要提供適合所用微生物生長發(fā)育的適宜條件，同時嚴格進行無菌操作，抑制其物生長發(fā)育的適宜條件，同時嚴格進行無菌操作，抑制其他雜菌生長。他雜菌生長。實驗操作過程中減少不安全因素的發(fā)生。實驗操作過程中減少不安全因素的發(fā)生。解析解析選選

7、 果酒發(fā)酵后期，因營養(yǎng)物質的消耗、果酒發(fā)酵后期，因營養(yǎng)物質的消耗、pH改改變等原因，酵母菌呼吸產生變等原因，酵母菌呼吸產生CO2的量變少，所以可延長擰松瓶的量變少，所以可延長擰松瓶蓋的間隔時間，蓋的間隔時間，A項正確；當氧氣、糖源充足時，醋酸菌可將項正確；當氧氣、糖源充足時，醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成醋酸，葡萄汁中的糖分解成醋酸，B項正確；果酒發(fā)酵過程中不斷消項正確；果酒發(fā)酵過程中不斷消耗葡萄糖產生酒精，導致發(fā)酵液的密度逐漸減小，耗葡萄糖產生酒精，導致發(fā)酵液的密度逐漸減小，C項正確。項正確。制作腐乳時，對長滿毛霉的豆腐加鹽腌制時，需逐層加鹽，制作腐乳時，對長滿毛霉的豆腐加鹽腌制時，需逐層加鹽

8、，并隨層數加高而增加用鹽量，在近瓶口表面要鋪得厚一些，并隨層數加高而增加用鹽量，在近瓶口表面要鋪得厚一些，D項錯誤。項錯誤。ABC3(2012浙江自選模塊浙江自選模塊)幽門螺桿菌幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內采集樣本并制成菌液化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內采集樣本并制成菌液后，進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下：后，進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下：請回答：請回答：(1)在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有含有_，它能以尿素作為氮源；若有，它能以尿素作為氮源；若有Hp

9、，則菌，則菌落周圍會出現(xiàn)落周圍會出現(xiàn)_色環(huán)帶。色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是_滅菌。滅菌。A高壓蒸汽高壓蒸汽 B紫外燈照射紫外燈照射 C70%酒精浸泡酒精浸泡 D過濾過濾(3)步驟步驟X表示表示_。在無菌條件下操作時，先將菌液。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液稀釋，然后將菌液_到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的到培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得目的是為了獲得_菌落。菌落。(4)在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在_中。若不中。若不倒置培養(yǎng)，將導致倒置培養(yǎng)，將導致_。(5)臨床上用臨床上用14C呼氣試驗檢測人體

10、是否感染呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理，其基本原理是是Hp能將能將14C標記的標記的_分解為分解為NH3和和14CO2。命題立意命題立意本題考查微生物的分離與培養(yǎng)的知識。本題考查微生物的分離與培養(yǎng)的知識。知識依托知識依托微生物分離是根據微生物的營養(yǎng)需求及生長微生物分離是根據微生物的營養(yǎng)需求及生長條件，人為控制這些條件，適合目的微生物生長、抑制其他條件，人為控制這些條件，適合目的微生物生長、抑制其他微生物生長的方法。微生物生長的方法。微生物培養(yǎng)操作過程中要嚴格無菌操微生物培養(yǎng)操作過程中要嚴格無菌操作。作。運用特定的染色或化學試劑與微生物代謝產物的特定運用特定的染色或化學試劑與微生物代謝

11、產物的特定反應，檢驗或檢測目的微生物。反應，檢驗或檢測目的微生物。解析解析(1)幽門螺桿菌幽門螺桿菌(Hp)含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿含有脲酶，能以尿素為氮源，在加入尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)Hp，由于尿素經脲酶的降解可產，由于尿素經脲酶的降解可產生堿性的生堿性的NH3，NH3能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌能使培養(yǎng)基中的酚紅由紅黃色變成紅色，故菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶。落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會分解，對尿素溶液進由于尿素加熱會分解，對尿素溶液進行滅菌最好用行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。玻璃砂漏斗過濾。(3)微生物的分離和培養(yǎng)步驟

12、是：微生物的分離和培養(yǎng)步驟是：配制培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基滅菌、倒平板滅菌、倒平板接種接種培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種培養(yǎng)。為獲得單菌落，接種操作前應先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。操作前應先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上即可。(4)微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培微生物培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，則無法形成單菌落。養(yǎng)，則無法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將幽門螺桿菌能將14C標記的尿素分解為標記的尿素分解為NH3和和14CO2，故臨床上常用，故臨床上常用14C呼氣試驗檢測人體內幽門螺桿菌的呼氣試驗檢測人體內幽門螺桿菌的存在。存在

13、。答案答案(1)脲酶紅脲酶紅(2)D(3)接種涂布單接種涂布單(4)恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落無法形成單菌落(5)尿素尿素 1從考查內容上看，主要考查微生物的純化培養(yǎng)操作與從考查內容上看，主要考查微生物的純化培養(yǎng)操作與應用、傳統(tǒng)發(fā)酵技術。應用、傳統(tǒng)發(fā)酵技術。 2從考查角度上看，聯(lián)系生產生活實際考查微生物的計從考查角度上看，聯(lián)系生產生活實際考查微生物的計數、分離和純化培養(yǎng)；結合發(fā)酵食品制作過程考查傳統(tǒng)發(fā)酵技數、分離和純化培養(yǎng)；結合發(fā)酵食品制作過程考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術原理及基本操作。術原理及基本操作。 3從命題趨勢上看，預計從命題趨勢上看，預計2013年高考命題仍以對微生物年高考命題仍以對微生

14、物培養(yǎng)與應用考查為熱點，主要是和生產生活實際相聯(lián)系或與實培養(yǎng)與應用考查為熱點，主要是和生產生活實際相聯(lián)系或與實驗結合對實驗原理、實驗操作進行綜合命題考查。驗結合對實驗原理、實驗操作進行綜合命題考查。 例例1(2012青島調研青島調研)在農田土壤的表層自生固氮菌較多，在農田土壤的表層自生固氮菌較多，用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可將自生固氮菌與其他細菌分開，對培養(yǎng)基的要求是固氮菌與其他細菌分開，對培養(yǎng)基的要求是() 加抗生素加抗生素不加抗生素不加抗生素加氮素加氮素不加氮素不加氮素加葡萄糖加葡萄糖不加葡萄糖不加葡萄糖37恒溫箱中

15、培養(yǎng)恒溫箱中培養(yǎng)2830溫度下培養(yǎng)溫度下培養(yǎng) AB C D微生物的營養(yǎng)微生物的營養(yǎng) 解析解析細菌對抗生素敏感，故培養(yǎng)基中應不加抗生素；細菌對抗生素敏感，故培養(yǎng)基中應不加抗生素；自生固氮菌有固氮功能，故培養(yǎng)基中不需要加氮素；自生固自生固氮菌有固氮功能，故培養(yǎng)基中不需要加氮素；自生固氮菌是異養(yǎng)的，應該加葡萄糖，其生長繁殖的適宜溫度是氮菌是異養(yǎng)的，應該加葡萄糖，其生長繁殖的適宜溫度是2830。 答案答案C 1微生物的營養(yǎng)微生物的營養(yǎng) (1)微生物生長所需五大營養(yǎng)素即碳源、氮源、生長因子、微生物生長所需五大營養(yǎng)素即碳源、氮源、生長因子、水和無機鹽。水和無機鹽。 (2)微生物最常用的碳源是糖類，尤其是葡

16、萄糖；最常用微生物最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖；最常用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。的氮源是銨鹽、硝酸鹽。 (3)對異養(yǎng)微生物來說，含對異養(yǎng)微生物來說，含C、H、O、N的有機物既是碳的有機物既是碳源、又是氮源。源、又是氮源。2培養(yǎng)基的類型及作用培養(yǎng)基的類型及作用劃分標劃分標準準培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途物理性物理性質質液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產工業(yè)生產半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運動、分類、鑒定觀察微生物的運動、分類、鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計數、保微生物分離、鑒定、活菌計數、保藏菌種藏菌種化學成化學成分

17、分天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基含化學成分不明確的天含化學成分不明確的天然物質然物質工業(yè)生產工業(yè)生產合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確培養(yǎng)基成分明確(用化學用化學成分已知的化學物質配成分已知的化學物質配成成)分類、鑒別分類、鑒別用途用途選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基允許特定種類的微生物允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止生長，同時抑制或阻止其他微生物生長其他微生物生長培養(yǎng)、分離出特定微生物，如培養(yǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物，如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)

18、基根據微生物的代謝特點，根據微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品示劑或化學藥品鑒別不同種類的微生物，如用伊鑒別不同種類的微生物，如用伊紅紅美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌品中是否有大腸桿菌(若有，菌落若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤呈深紫色，并帶有金屬光澤)1下表為某培養(yǎng)基的配方，有關敘述正確的是下表為某培養(yǎng)基的配方，有關敘述正確的是()成分成分牛肉牛肉膏膏葡萄葡萄糖糖K2HPO4伊伊紅紅美藍美藍青霉青霉素素瓊瓊脂脂蒸餾蒸餾水水含量含量10 g10 g2 g0.4 g0.065 g1萬萬單位單位適適量量1 000 mL

19、A能在此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的能在此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的 基因基因B此培養(yǎng)液是天然鑒別培養(yǎng)基此培養(yǎng)液是天然鑒別培養(yǎng)基C此培養(yǎng)基可以用來檢測自來水中細菌含量是否符合飲用此培養(yǎng)基可以用來檢測自來水中細菌含量是否符合飲用 水標準水標準D此培養(yǎng)基可以用于選育轉基因大腸桿菌菌種的基因工程此培養(yǎng)基可以用于選育轉基因大腸桿菌菌種的基因工程 的操作過程中的操作過程中解析：解析：選選 此表表示鑒定大腸桿菌的合成培養(yǎng)基；能在此表表示鑒定大腸桿菌的合成培養(yǎng)基；能在此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，其抗性基因位于質粒上。此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，其抗性基因位于質粒上。D2判斷選擇培養(yǎng)

20、基是否起到了選擇作用需要設置的對照是判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設置的對照是( )A未接種的選擇培養(yǎng)基未接種的選擇培養(yǎng)基B未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D接種了的選擇培養(yǎng)基接種了的選擇培養(yǎng)基解析：解析：選選 將菌液稀釋相同的倍數后接種，在牛肉膏蛋將菌液稀釋相同的倍數后接種，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上的白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數目應明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數目，因此應以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循數目，因此應以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照。對照遵循的原則是單一變量原則，所以應與選

21、擇培養(yǎng)基一樣接種、的原則是單一變量原則，所以應與選擇培養(yǎng)基一樣接種、培養(yǎng)。培養(yǎng)。C 例例2 請回答下列有關微生物的一些問題。請回答下列有關微生物的一些問題。 (1)微生物的分布：微生物主要分布在富含微生物的分布：微生物主要分布在富含_的土的土壤表層；不同微生物對壤表層；不同微生物對pH的要求不同，細菌常生活在酸堿度的要求不同，細菌常生活在酸堿度_的潮濕土壤中。的潮濕土壤中。 (2)微生物的消毒和滅菌：在菊花組織培養(yǎng)中，對外植體微生物的消毒和滅菌：在菊花組織培養(yǎng)中，對外植體常用酒精和常用酒精和_進行消毒。在微生物培養(yǎng)中，對培養(yǎng)基進行消毒。在微生物培養(yǎng)中，對培養(yǎng)基常用常用_方法進行滅菌。靜止空氣中

22、的細菌可用紫外線方法進行滅菌。靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質變性，還能殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質變性，還能_。如果要檢測滅菌是否徹底，可以采用的方法是：如果要檢測滅菌是否徹底，可以采用的方法是：_。微生物培養(yǎng)的基本技術微生物培養(yǎng)的基本技術 (3)微生物的應用：在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，運用吸附微生物的應用：在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，運用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌發(fā)酵產生酒精，請寫出該過程的化學在葡萄皮上的野生酵母菌發(fā)酵產生酒精，請寫出該過程的化學反應式：反應式：_。在果醋制作時，運用醋。在果醋制作時，運用醋酸菌在酸菌在_和糖源充足時，將糖分解成醋酸。和糖源充足時，

23、將糖分解成醋酸。 (4)微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是_和和_。 (5)微生物的計數：根據培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數目和稀釋倍微生物的計數：根據培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數目和稀釋倍數計算得出細菌數目往往比實際的數目低，原因是數計算得出細菌數目往往比實際的數目低，原因是_。 (6)微生物的鑒定：為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿微生物的鑒定：為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的素為唯一氮源的_(填填“選擇選擇”或或“鑒別鑒別”)培養(yǎng)基中加入培養(yǎng)基中加入_指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變_

24、色。色。 解析解析 (1)微生物主要分布在有機質豐富的土壤表層，微生物主要分布在有機質豐富的土壤表層，細菌常生活在酸堿度接近中性的潮濕土壤中。細菌常生活在酸堿度接近中性的潮濕土壤中。(2)植物組織培植物組織培養(yǎng)時，對外植體常用酒精和氯化汞消毒，對培養(yǎng)基常用高壓養(yǎng)時，對外植體常用酒精和氯化汞消毒，對培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌；紫外線能使蛋白質變性，還能損傷蒸汽滅菌法滅菌；紫外線能使蛋白質變性，還能損傷DNA的的結構；可通過在適宜的溫度下放置滅菌過的培養(yǎng)基看其是否結構；可通過在適宜的溫度下放置滅菌過的培養(yǎng)基看其是否有菌落產生來確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底。有菌落產生來確定培養(yǎng)基滅菌是否徹底。(3)醋酸

25、菌為需氧型醋酸菌為需氧型生物。生物。(4)最常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布最常用的微生物接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板法。(5)因一個菌落可由多個連在一起的細菌形成，所以因一個菌落可由多個連在一起的細菌形成，所以計算得出的細菌數一般低于實際數目。計算得出的細菌數一般低于實際數目。(6)用選擇培養(yǎng)基篩選用選擇培養(yǎng)基篩選目的菌，加入酚紅指示劑檢測尿素分解菌，若存在尿素分解目的菌，加入酚紅指示劑檢測尿素分解菌，若存在尿素分解菌，指示劑變紅色。菌，指示劑變紅色。1微生物培養(yǎng)技術中的消毒和滅菌微生物培養(yǎng)技術中的消毒和滅菌消毒消毒滅菌滅菌區(qū)區(qū)別別使用使用手段手段較為溫和的物理或化學

26、較為溫和的物理或化學方法方法強烈的理化因素強烈的理化因素結果結果殺死表面或內部的部分殺死表面或內部的部分微生物微生物(不包括芽孢和孢不包括芽孢和孢子子)殺死包括芽孢和孢子在殺死包括芽孢和孢子在內的所有微生物內的所有微生物常用常用方法方法煮沸消毒法、化學藥劑煮沸消毒法、化學藥劑消毒法、巴氏消毒法、消毒法、巴氏消毒法、紫外線消毒法等紫外線消毒法等灼燒滅菌法、干熱滅菌灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法等法、高壓蒸汽滅菌法等聯(lián)系聯(lián)系都借助理化性質，營造微生物難以生存的不良都借助理化性質，營造微生物難以生存的不良環(huán)境；環(huán)境；作用實質都是通過使蛋白質變性來抑制作用實質都是通過使蛋白質變性來抑制微生物生

27、命活動或殺死微生物微生物生命活動或殺死微生物 2微生物純化培養(yǎng)的接種方法微生物純化培養(yǎng)的接種方法 (1)平板劃線操作：平板劃線操作： 平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。 平板劃線操作的注意事項：平板劃線操作的注意事項： a每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌。每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌。 b灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。太高殺死菌種。 c劃線時最后一區(qū)域不要與第

28、一區(qū)域相連。劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。 d劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。 (3)稀釋涂布平板法：先將菌液進行一系列梯度稀釋后稀釋涂布平板法：先將菌液進行一系列梯度稀釋后涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散到培養(yǎng)基的表面，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。將被分散到培養(yǎng)基的表面，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。如下圖：如下圖：3某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌數量，并從中篩某學者欲研究被石油污染過的土壤中細菌數量，并從中篩選出能分解石油的細菌。下列操作

29、錯誤的是選出能分解石油的細菌。下列操作錯誤的是()A利用平板劃線法對細菌進行計數利用平板劃線法對細菌進行計數B以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選C采用稀釋涂布平板法分離菌種采用稀釋涂布平板法分離菌種D稱取和稀釋土壤時應在火焰旁稱取和稀釋土壤時應在火焰旁解析：解析：選選 平板劃線法能對細菌分離純化，但不能對細菌平板劃線法能對細菌分離純化，但不能對細菌進行計數，而稀釋涂布平板法可以分離菌種并進行計數。進行計數，而稀釋涂布平板法可以分離菌種并進行計數。A4下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請回答相關問題：下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請回答相關問題： (1)圖甲是利

30、用圖甲是利用_法進行微生物接種，圖乙是利用法進行微生物接種，圖乙是利用_法進行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具法進行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是分別是_和和_；對這兩種接種工具進行滅菌；對這兩種接種工具進行滅菌和消毒的方法依次是和消毒的方法依次是_和酒精消毒。和酒精消毒。(2)接種操作為什么一定要在火焰附近進行？接種操作為什么一定要在火焰附近進行？_。(3)下圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接下圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是種方法是_(填填“圖甲圖甲”或或“圖乙圖乙”)。解析：解析：圖甲和圖乙分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法，這圖甲和圖乙分

31、別是平板劃線法和稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。由于在酒精燈火焰附近存在著無菌區(qū)域，因此接種常在火焰附近進行。精燈火焰附近存在著無菌區(qū)域，因此接種常在火焰附近進行。在微生物培養(yǎng)過程中會產生水，對微生物的生長造成影響，在微生物培養(yǎng)過程中會產生水，對微生物的生長造成影響，故需要倒置培養(yǎng)。故需要倒置培養(yǎng)。答案：答案：(1)平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒滅菌滅菌(2)火焰附近存在著無菌區(qū)域火焰附近存在著無菌區(qū)域(3)圖乙圖乙 例例3 (2012海南高考海南高考)回答下列關于腐乳制

32、作的問題：回答下列關于腐乳制作的問題： (1)腐乳是豆腐經微生物發(fā)酵后制成的食品。多種微生物腐乳是豆腐經微生物發(fā)酵后制成的食品。多種微生物參與了該發(fā)酵過程，其中起主要作用的微生物是參與了該發(fā)酵過程，其中起主要作用的微生物是_，其產生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解為其產生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解為_和和_；其產生的其產生的_能將豆腐中的脂肪水解為能將豆腐中的脂肪水解為_和和_。 (2)發(fā)酵完成后需加鹽腌制，加鹽還可以抑制發(fā)酵完成后需加鹽腌制，加鹽還可以抑制_生長。生長。 (3)腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配置而成的鹵腐乳制作的后期可加入由酒和多種香辛料配置而成的鹵湯。鹵湯除具有一定

33、的防腐作用外，還能使腐乳具有獨特的湯。鹵湯除具有一定的防腐作用外，還能使腐乳具有獨特的_。傳統(tǒng)發(fā)酵技術傳統(tǒng)發(fā)酵技術 解析解析(1)腐乳制作發(fā)酵過程中起作用的微生物有多種，腐乳制作發(fā)酵過程中起作用的微生物有多種，如青霉、酵母菌、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。如青霉、酵母菌、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉產生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解成多肽和氨基酸，毛霉產生的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質水解成多肽和氨基酸，產生的脂肪酶能夠將豆腐中的脂肪水解為甘油和脂肪酸。產生的脂肪酶能夠將豆腐中的脂肪水解為甘油和脂肪酸。 (2)發(fā)酵過程中加鹽腌制，不僅可以調制風味，而且能夠抑發(fā)酵過程中加鹽腌制

34、，不僅可以調制風味，而且能夠抑制雜菌等其他微生物的生長。制雜菌等其他微生物的生長。 (3)腐乳制作后期加入鹵湯，鹵湯不僅可以防腐，還可以使腐乳制作后期加入鹵湯，鹵湯不僅可以防腐，還可以使腐乳具有獨特的風味腐乳具有獨特的風味(或香味或香味)。 答案答案(1)毛霉毛霉(多多)肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸 (2)微生物微生物 (3)風味風味微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術中的應用微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術中的應用項目項目內容內容果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作腐乳制作腐乳制作制作泡菜并檢測亞硝酸制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量鹽含量原料選擇原料選擇新鮮、無爛籽粒葡萄新鮮、無爛籽粒葡萄(或或蘋果蘋果)豆腐

35、豆腐大白菜、花椰菜等新鮮大白菜、花椰菜等新鮮干凈的蔬菜干凈的蔬菜實驗流程實驗流程挑選葡萄挑選葡萄沖洗沖洗榨汁榨汁 酒精發(fā)酵酒精發(fā)酵 果酒醋酸發(fā)酵果酒醋酸發(fā)酵 果醋果醋豆腐上長出毛霉豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹽腌制加鹵湯加鹵湯裝瓶裝瓶密封腌制密封腌制制泡菜：選材制泡菜：選材配制鹽配制鹽水水裝壇裝壇發(fā)酵發(fā)酵成品成品測亞硝酸鹽含量：配制測亞硝酸鹽含量：配制溶液溶液制備標準顯色液制備標準顯色液制備樣品處理液制備樣品處理液比比色色操作注意操作注意事項事項材料選擇與處理材料選擇與處理防防止發(fā)酵液污染，控制好止發(fā)酵液污染，控制好發(fā)酵條件發(fā)酵條件材料用量材料用量防止雜菌污染防止雜菌污染控制溫度及酒精控制溫度及酒

36、精含量含量泡菜壇的選擇泡菜壇的選擇腌制條件腌制條件(無氧無氧)測定亞硝酸鹽含量的測定亞硝酸鹽含量的操作操作共同點共同點都是天然的發(fā)酵，利用了微生物新陳代謝過程中代謝產物的作用或直都是天然的發(fā)酵，利用了微生物新陳代謝過程中代謝產物的作用或直接獲取代謝產物接獲取代謝產物5小李嘗試制作果酒，他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中小李嘗試制作果酒，他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進行實驗進行實驗(如右圖如右圖)，恰當的做法是，恰當的做法是()A加入適量的醋酸菌加入適量的醋酸菌B一直打開閥一直打開閥b通氣通氣C一直關緊閥一直關緊閥a，偶爾打開閥，偶爾打開閥b幾秒鐘幾秒鐘D把發(fā)酵裝置放到把發(fā)酵裝置放到4冰箱中進

37、行實驗冰箱中進行實驗解析：解析：選選 在該發(fā)酵裝置中有發(fā)酵底物在該發(fā)酵裝置中有發(fā)酵底物(葡萄糖葡萄糖)，但沒有，但沒有發(fā)酵生物發(fā)酵生物(酵母菌酵母菌)，故應在裝置中放入適量的酵母菌。將閥，故應在裝置中放入適量的酵母菌。將閥a一直關緊是為了防止氧氣進入發(fā)酵裝置；偶爾打開閥一直關緊是為了防止氧氣進入發(fā)酵裝置；偶爾打開閥b幾秒幾秒鐘，是為了排出發(fā)酵產生的過多二氧化碳。如果一直打開閥鐘，是為了排出發(fā)酵產生的過多二氧化碳。如果一直打開閥b通氣，則可使氧氣進入發(fā)酵裝置而影響發(fā)酵。酵母菌發(fā)酵通氣，則可使氧氣進入發(fā)酵裝置而影響發(fā)酵。酵母菌發(fā)酵需要的最適溫度在需要的最適溫度在1825，4時溫度太低，將影響發(fā)時溫

38、度太低，將影響發(fā)酵的速率。酵的速率。C6下列與果酒、果醋和腐乳制作相關的敘述，正確的是下列與果酒、果醋和腐乳制作相關的敘述，正確的是()A腐乳制作所需要的適宜溫度最高腐乳制作所需要的適宜溫度最高B果醋發(fā)酵包括無氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵果醋發(fā)酵包括無氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵C使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D使用的菌種都具有細胞壁、核糖體、使用的菌種都具有細胞壁、核糖體、DNA 和和 RNA解析：解析：選選 果醋制作所需要的適宜溫度最高，為果醋制作所需要的適宜溫度最高，為3035；果醋制作所用的菌種果醋制作所用的菌種(醋酸菌醋酸菌)為好氧細菌，只進行有氧呼吸；為好氧細

39、菌，只進行有氧呼吸；腐乳制作所用的菌種主要是毛霉；酵母菌、醋酸菌、毛霉等腐乳制作所用的菌種主要是毛霉；酵母菌、醋酸菌、毛霉等菌種都具有細胞壁，都既有菌種都具有細胞壁，都既有DNA又有又有RNA，細胞中都有核，細胞中都有核糖體。糖體。D一、微生物的營養(yǎng)一、微生物的營養(yǎng)營養(yǎng)要素營養(yǎng)要素來源來源功能功能碳碳源源無機無機碳源碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳無機物等含碳無機物構成細胞和合成構成細胞和合成一些代謝產物一些代謝產物有些既是碳源又有些既是碳源又是異養(yǎng)微生物的能是異養(yǎng)微生物的能源源有機有機碳源碳源糖、脂肪、蛋白質、有糖、脂肪、蛋白質、有機酸、石油、花生粉餅機酸、石油、花生粉餅等等氮氮源

40、源無機無機氮源氮源NH3、銨鹽、硝酸鹽、銨鹽、硝酸鹽、N2等等合成蛋白質、核酸合成蛋白質、核酸及含氮的代謝產物及含氮的代謝產物有機有機氮源氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸等尿素、氨基酸等營養(yǎng)要素營養(yǎng)要素來源來源功能功能生長因子生長因子(特特殊營養(yǎng)物質殊營養(yǎng)物質)維生素、維生素、氨基酸、氨基酸、堿基堿基酶和核酸的組成成分酶和核酸的組成成分參與代謝過程中的酶促反應參與代謝過程中的酶促反應水和無機鹽水和無機鹽外界攝入外界攝入水不僅是優(yōu)良溶劑而且可維持水不僅是優(yōu)良溶劑而且可維持生物大分子的穩(wěn)定；無機鹽是生物大分子的穩(wěn)定；無機鹽是細胞內的成分和調節(jié)物質等細胞內的成分和調節(jié)物質

41、等纖維素分解菌纖維素分解菌 即：可根據是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。即：可根據是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。 (2)流程：土壤取樣流程：土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)梯度稀釋梯度稀釋涂布平板涂布平板挑選菌落。挑選菌落。3鑒定方法鑒定方法 鑒定分解尿素鑒定分解尿素的細菌的細菌含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基含酚紅指示劑的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基細菌細菌指示劑變紅，則該菌能分解尿素指示劑變紅，則該菌能分解尿素鑒定纖維素分鑒定纖維素分解菌解菌 4計數方法計數方法 (1)顯微鏡直接計數法：顯微鏡直接計數法： 利用特定細菌計數板或血球計數板，在顯微鏡下計數一利用特定細菌計數板或血球計數板，在顯微鏡下

42、計數一定容積樣品中的細菌數量。該方法不能區(qū)分細菌的死活。定容積樣品中的細菌數量。該方法不能區(qū)分細菌的死活。 (2)間接計數法間接計數法(活菌計數法活菌計數法)：常用稀釋涂布平板法。：常用稀釋涂布平板法。 稀釋涂布平板法的理論依據是：當樣品的稀釋度足夠高稀釋涂布平板法的理論依據是：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落即代表一個活菌。為了保證時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落即代表一個活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在結果準確，一般選擇菌落數在30300的平板進行計數，每個的平板進行計數，每個稀釋倍數涂布稀釋倍數涂布3個平板進行計數，取平均值。個平板進行計數，取平均值。點擊下列圖片進入

43、“沖刺直擊高考”請根據當地教學實際和高考要求選用請根據當地教學實際和高考要求選用解析解析選選 A項，將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中進行項，將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中進行釀酒時，在缺氧、酸性環(huán)境下其他雜菌不能生長，故不嚴格滅釀酒時，在缺氧、酸性環(huán)境下其他雜菌不能生長，故不嚴格滅菌對其影響不大；菌對其影響不大；B項，腐乳制作中將毛霉菌液接種在切成小項，腐乳制作中將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上，毛霉生長繁殖快且抗雜菌能力強，故不嚴格滅塊的鮮豆腐上，毛霉生長繁殖快且抗雜菌能力強，故不嚴格滅菌對實驗結果影響不大；菌對實驗結果影響不大；C項，進行植物組織培養(yǎng)時，植物材項，進行植物組織培養(yǎng)時，植物材料體積小、抗性差，而微生物繁殖快、生長迅速、會爭奪培養(yǎng)料體積小、抗性差，而微生物繁殖快、生長迅速、會爭奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)，產生的代謝廢物還會毒害培養(yǎng)材料，故培養(yǎng)材料基中的營養(yǎng)，產生的代謝廢物還會毒害培養(yǎng)材料，故培養(yǎng)材料一旦被微生物一旦被微生物(如細菌如細菌)污染，將嚴重影響實驗結果；污染，將嚴重影響實驗結果；D項，選擇項，選擇培養(yǎng)基中已經加入了某種化學物質，以抑制不需要的微生物生培養(yǎng)基中已經加入了某種化學物質，以抑制不需要的微生物生長，促進所需要的微生物生長，另外土壤浸出液本身也含有一長，促進所需要的微生物生長