實(shí)驗(yàn)三酶的基本性質(zhì)

1、1實(shí)驗(yàn)三 酶的基本性質(zhì)（P85）2n酶的定義：酶的定義： 是生物細(xì)胞產(chǎn)生的、以蛋白質(zhì)為主要成分的是生物細(xì)胞產(chǎn)生的、以蛋白質(zhì)為主要成分的生物催化劑。生物體內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)基本上都是在生物催化劑。生物體內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)基本上都是在酶催化下進(jìn)行的。酶催化下進(jìn)行的。n酶的特點(diǎn)：酶的特點(diǎn)： 酶具有高效性、專(zhuān)一性、活性可調(diào)節(jié)控制等酶具有高效性、專(zhuān)一性、活性可調(diào)節(jié)控制等特性特性 。n溫度、溫度、pHpH值、激活劑、抑制劑可影響酶的活性。值、激活劑、抑制劑可影響酶的活性。3一、目的一、目的n通過(guò)檢驗(yàn)不同溫度下唾液淀粉酶的活性，了解溫通過(guò)檢驗(yàn)不同溫度下唾液淀粉酶的活性，了解溫度對(duì)酶活性的影響，明確最適溫度的概念；度對(duì)酶

2、活性的影響，明確最適溫度的概念；n了解了解pHpH值對(duì)酶活力的影響，學(xué)習(xí)測(cè)定最適值對(duì)酶活力的影響，學(xué)習(xí)測(cè)定最適pHpH值的值的方法；方法；n了解激活劑、抑制劑對(duì)酶活性的影響，學(xué)習(xí)檢定了解激活劑、抑制劑對(duì)酶活性的影響，學(xué)習(xí)檢定激活劑和抑制劑影響酶反應(yīng)的方法和原理。激活劑和抑制劑影響酶反應(yīng)的方法和原理。4二、原理二、原理n酶的催化作用受溫度的影響很大酶的催化作用受溫度的影響很大n提高溫度可以增加酶促反應(yīng)的速提高溫度可以增加酶促反應(yīng)的速度。通常溫度每升高度。通常溫度每升高1010攝氏度，攝氏度，反應(yīng)速度加快一倍左右，最后反反應(yīng)速度加快一倍左右，最后反應(yīng)速度達(dá)到最大值。應(yīng)速度達(dá)到最大值。n酶是一種蛋白

3、質(zhì)，溫度過(guò)高可引酶是一種蛋白質(zhì)，溫度過(guò)高可引起蛋白質(zhì)變性，導(dǎo)致酶的失活。起蛋白質(zhì)變性，導(dǎo)致酶的失活。因此，反應(yīng)速度達(dá)到最大值以后，因此，反應(yīng)速度達(dá)到最大值以后，隨著溫度升高，反應(yīng)速度反而逐隨著溫度升高，反應(yīng)速度反而逐漸下降，以至完全停止反應(yīng)。漸下降，以至完全停止反應(yīng)。n反應(yīng)速度達(dá)到最大值時(shí)的溫度稱(chēng)反應(yīng)速度達(dá)到最大值時(shí)的溫度稱(chēng)為某種酶作用的最適溫度。為某種酶作用的最適溫度。高于高于或低于最適溫度時(shí)，反應(yīng)速度逐或低于最適溫度時(shí)，反應(yīng)速度逐漸降低。漸降低。102030405060708090020406080100Tem perature OCRelative Activity (%)最適溫度最適溫

4、度（一）溫度對(duì)酶活性的影響（一）溫度對(duì)酶活性的影響5二、原理二、原理n酶的活性受環(huán)境酶的活性受環(huán)境pHpH的影響極為顯著。的影響極為顯著。n通常各種酶只有在一定的通常各種酶只有在一定的pHpH范圍內(nèi)才表現(xiàn)它的活性。范圍內(nèi)才表現(xiàn)它的活性。一種酶一種酶表現(xiàn)其活性最高時(shí)的表現(xiàn)其活性最高時(shí)的pHpH值，稱(chēng)為該酶的最適值，稱(chēng)為該酶的最適pHpH。低于或高于低于或高于最適最適pHpH時(shí)，酶的活性逐漸降低。時(shí)，酶的活性逐漸降低。n不同酶的最適不同酶的最適pHpH值不同，例如，胃蛋白酶的最適值不同，例如，胃蛋白酶的最適pHpH為為1.5-1.5-2.52.5，胰蛋白酶的最適，胰蛋白酶的最適pHpH為為8 8等

5、。等。 （二）（二）pHpH對(duì)酶活性的影響對(duì)酶活性的影響6n酶的活性常受某些物質(zhì)的影響。酶的活性常受某些物質(zhì)的影響。n有些物質(zhì)能使酶的活性增加，稱(chēng)為酶的激活劑；有些物質(zhì)能使酶的活性增加，稱(chēng)為酶的激活劑；n有些物質(zhì)能使酶的活性降低，稱(chēng)為酶的抑制劑。有些物質(zhì)能使酶的活性降低，稱(chēng)為酶的抑制劑。例如，例如，氯化鈉氯化鈉為唾液淀粉酶的激活劑，為唾液淀粉酶的激活劑，硫酸銅硫酸銅為其抑為其抑制劑。制劑。n很少量的激活劑或抑制劑就會(huì)影響酶的活性，而且常具有很少量的激活劑或抑制劑就會(huì)影響酶的活性，而且常具有特異性。特異性。n激活劑和抑制劑不是絕對(duì)的，有些物質(zhì)在低濃度時(shí)為某種激活劑和抑制劑不是絕對(duì)的，有些物質(zhì)在低

6、濃度時(shí)為某種酶的激活劑，而在高濃度時(shí)則為該酶的抑制劑。酶的激活劑，而在高濃度時(shí)則為該酶的抑制劑。例如，氯化鈉達(dá)到例如，氯化鈉達(dá)到1/31/3飽和度時(shí)就可抑制唾液淀粉酶的飽和度時(shí)就可抑制唾液淀粉酶的活性?；钚?。 二、原理二、原理（三）酶的激活和抑制（三）酶的激活和抑制7二、原理二、原理 本實(shí)驗(yàn)分別在不同溫度、不同本實(shí)驗(yàn)分別在不同溫度、不同pHpH值及不同物質(zhì)作用的值及不同物質(zhì)作用的條件下使淀粉酶作用于其底物條件下使淀粉酶作用于其底物淀粉，并用碘液檢查酶淀粉，并用碘液檢查酶促淀粉水解程度來(lái)說(shuō)明各條件與酶活力之間的關(guān)系。促淀粉水解程度來(lái)說(shuō)明各條件與酶活力之間的關(guān)系。淀粉淀粉糊精糊精麥芽糖麥芽糖淀粉酶

7、淀粉酶淀粉酶淀粉酶大大小小中中碘碘液液碘碘液液碘碘液液碘碘液液碘碘液液藍(lán)色藍(lán)色藍(lán)紫色藍(lán)紫色暗褐色暗褐色紅色紅色碘色碘色8三、儀器和試劑三、儀器和試劑n儀器儀器移液管、吸耳球、試管、試管架、恒溫水浴鍋、膠頭滴管、白瓷反應(yīng)盤(pán)n試劑試劑1%淀粉溶液（含0.3%NaCl），0.1%淀粉溶液，唾液淀粉酶液，pH7.0、8.0、5.0的磷酸緩沖液（PB），碘液，1%NaCl，1%CuSO4，蒸餾水（dH2O）9四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法n（一）溫度對(duì)酶活性的影響（一）溫度對(duì)酶活性的影響操作項(xiàng)目操作項(xiàng)目管號(hào)管號(hào)1 12 23 3唾液淀粉酶液（唾液淀粉酶液（mLmL）1 11 11 1酶液處理酶液處理5min5

8、min003737100100pH7.0pH7.0緩沖液（緩沖液（mLmL）2 22 22 21%1%淀粉液（含淀粉液（含0.3%NaCl0.3%NaCl）（）（mLmL）1 11 11 1反應(yīng)反應(yīng)10min10min003737100100冷卻冷卻3min3min流動(dòng)水冷卻流動(dòng)水冷卻碘液（滴）碘液（滴）1 11 11 110四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法n（二）（二）pHpH值對(duì)酶活性的影響值對(duì)酶活性的影響操作項(xiàng)目操作項(xiàng)目管號(hào)管號(hào)1 12 23 3pH5.0pH5.0緩沖液（緩沖液（mLmL）3 3/ / /pH7.0pH7.0緩沖液（緩沖液（mLmL）/ /3 3/ /pH8.0pH8.0緩沖液

9、（緩沖液（mLmL）/ / /3 31%1%淀粉液（含淀粉液（含0.3%NaCl0.3%NaCl）（）（mLmL）1 11 11 1淀粉酶液（淀粉酶液（mLmL）1 11 11 1保溫保溫將各管混勻?qū)⒏鞴芑靹?7 37 水浴中保溫水浴中保溫檢查淀粉水解程度檢查淀粉水解程度保溫保溫2min2min后，從后，從2 2號(hào)試管中取出號(hào)試管中取出1 1滴溶液置于白磁盤(pán)上，用碘液檢滴溶液置于白磁盤(pán)上，用碘液檢查淀粉的水解程度查淀粉的水解程度碘液（滴）碘液（滴）1 11 11 111四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法n（三）酶的激活和抑制（三）酶的激活和抑制操作項(xiàng)目操作項(xiàng)目管號(hào)管號(hào)1 12 23 31%NaCl1%NaCl（mLmL）1 1/ / /1%CuSO1%CuSO4 4（mLmL）/ /1 1/ /蒸餾水（蒸餾水（mLmL）/ / /1 1淀粉酶液（淀粉酶液（mLmL）1 11 11 10.1%0.1%淀粉液（淀粉液（mLmL）3 33 33 3保溫保溫將各管混勻?qū)⒏鞴芑靹?7 37 水浴中保溫水浴中保溫檢查淀粉水解程度檢查淀粉水解程度保溫保溫1min1min后，從后，從1 1號(hào)試管中取出號(hào)試管中取出1 1滴溶液置于白磁盤(pán)上，用碘液檢滴溶液置于白磁盤(pán)上，用碘液檢查淀粉的水解程度查淀粉的水解程度碘液（滴）碘液（滴）2 22 22 212五、結(jié)果與分析五、結(jié)果與分析n