慶大霉素生產(chǎn)工藝

1、硫酸慶大霉素生產(chǎn)工藝流程班級(jí) 08 藥劑 姓名汪駿學(xué)號(hào) 08314028培養(yǎng) 48小時(shí)左右，培養(yǎng)24小時(shí)左右，硫酸慶大霉素工業(yè)發(fā)酵的總流程圖孢子懸浮液的制備流程及工藝要求設(shè)備：蒸汽滅菌柜雙人凈化工作臺(tái)操作步驟1. 分裝純化水至三角瓶，每瓶裝150mL 左右。2. 組裝接種瓶及接種皮管，組裝嚴(yán)密，包扎結(jié)實(shí)。3. 以上器材及接種用具滅菌，125 ± 1 C， 60min 。4. 在緩沖間穿好無(wú)菌衣，戴上無(wú)菌口罩，進(jìn)入潔凈室，符合人流物流進(jìn)出程序。5. 用酒精棉球擦拭超凈臺(tái)面雙手，先擦臺(tái)面，后擦手。6. 開(kāi)啟超凈臺(tái)通風(fēng)，觀察風(fēng)速是否正常，將接種瓶、皮管、無(wú)菌水、接種鏟及斜面擺在潔凈臺(tái)上。7

2、. 將滅菌純化水倒入茄子瓶中，一瓶純化水倒兩只茄子瓶。8. 用接種鏟將孢子刮下制成孢子懸浮液，用力適度，勿刮出培養(yǎng)基碎屑。9. 打開(kāi)接種瓶瓶口，將孢子懸浮液全部倒入接種瓶10. 制備完畢關(guān)閉潔凈臺(tái)，出潔凈室，符合人流、物流進(jìn)出程序。物料指標(biāo)物料編物投產(chǎn)數(shù)號(hào)料名稱量06010純150-2013化水0ml-子4 支斜面孢子一級(jí)種子發(fā)酵培養(yǎng)實(shí)際培養(yǎng)參數(shù)控制培養(yǎng)參數(shù)控制養(yǎng)時(shí)間溫壓 氣壓力氣流量拌時(shí)間8 小時(shí)7 度 .06MPa .1MPa 0m*3/h左右鏡檢鏡檢步驟1. 取樣 打開(kāi)蒸汽閥先滅菌，然后關(guān)蒸汽閥，打開(kāi)取樣閥取樣。取樣完畢后關(guān)閥，再次打開(kāi)蒸汽閥滅菌，關(guān)閉。2. 用載玻片沾取一薄層發(fā)酵液，加

3、熱以使發(fā)酵液固定在載玻片上，然后滴加美蘭溶液進(jìn)行染色，在顯微鏡下觀察目的菌的菌絲形態(tài)。3. 配制酚紅肉湯培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基中加入發(fā)酵液在恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)。一定條件下觀察培養(yǎng)基顏色的變化來(lái)判斷是否染菌。4. 另取樣用粘度計(jì)測(cè)粘度。一級(jí)種子鏡檢1. 正常標(biāo)準(zhǔn)菌絲形態(tài)：實(shí)團(tuán)， 網(wǎng)團(tuán)， 邊散， 伸展， 原生質(zhì)充足。無(wú)菌度 : 正常，即無(wú)雜菌污染。3. 實(shí)例 批號(hào) 21011097一級(jí)種子鏡檢生長(zhǎng)指標(biāo)生菌菌長(zhǎng)時(shí)間絲形態(tài)絲數(shù)量菌情況量少常量常 量2小2h網(wǎng)、分支短3網(wǎng)0h團(tuán)、實(shí)團(tuán)3網(wǎng)8h團(tuán)、較伸展較多常4實(shí)量6h團(tuán)、邊散多常5實(shí)量1h團(tuán)、伸展多常二級(jí)種子的培養(yǎng)進(jìn)料狀況表 4 二級(jí)種子培養(yǎng)進(jìn)料狀況物物料量投產(chǎn)

4、單位生批料編號(hào)料名稱0淀1衛(wèi)0101009粉50Kg輝玉蘭公609014司0玉4自0101006米粉0 Kg制9070010豆1自0101007餅粉00 Kg制9070090蛋2滑0101003白胨5 Kg云東升公906013司0硫4中0101002酸銨Kg石化岳陽(yáng)906004公司0硝0交0101004酸鉀.4 Kg城晉盛公903002司0輕2焦0101001質(zhì)碳酸鈣5 Kg作蘭冠耀905003公司0氯3上0103272化鈷0 g海先金公90309司0泡0開(kāi)0101016敵.6L封樹(shù)脂廠9050130飲3601007用水.2t二級(jí)種子鏡檢1. 正常標(biāo)準(zhǔn)菌絲形態(tài)：網(wǎng)團(tuán)， 邊散， 伸展， 連片、

5、原生質(zhì)充足。無(wú)菌度 : 正常，即無(wú)雜菌污染。2. 實(shí)例 批號(hào) 21011097表 5 二級(jí)種子鏡檢生產(chǎn)指標(biāo)長(zhǎng)時(shí)間生絲形態(tài)菌菌雜絲數(shù)量菌情況4散量正h多常8大量正h網(wǎng)片、伸展多常1大量正2h網(wǎng)片、伸展多常1大量正6h網(wǎng)片、伸展多常實(shí)際培養(yǎng)參數(shù)控制表 6 二級(jí)培養(yǎng)參數(shù)控制指標(biāo)空養(yǎng)時(shí)間溫壓氣壓力氣流量拌時(shí)間4 小時(shí)7度.03MPa.7MPa70m*3/h1-左右三級(jí)種子發(fā)酵進(jìn)料狀況表 7 三級(jí)種子培養(yǎng)進(jìn)料狀況料編號(hào)物料名稱物料量投產(chǎn)單位生批 號(hào)0淀5衛(wèi)0101009粉50Kg輝玉蘭公609004司0玉1自0101006米粉20Kg制9070010豆3自0101007餅粉60Kg制9070090蛋6滑

6、0101003白胨0Kg云東升公906013司0硫1中0101002酸銨0Kg石化岳陽(yáng)906004公司0硝1交0101004酸鉀Kg城晉盛公903002司0輕7焦0101001質(zhì)碳酸鈣5Kg作蘭冠耀905003公司0氯1上0103272化鈷20 g海先金公90309司0淀1北0102034粉酶50g京東升公904003司0泡3開(kāi)0101016敵L封樹(shù)脂廠905013三級(jí)種子鏡檢1. 正常標(biāo)準(zhǔn)菌絲形態(tài)：散網(wǎng)、伸展，連片、量多。無(wú)菌度 : 正常，即無(wú)雜菌污染。2. 實(shí)例 批號(hào) 301/327表 9 三級(jí)種子鏡檢生產(chǎn)指標(biāo)生菌菌雜長(zhǎng)時(shí)間絲形態(tài)絲數(shù)量3散h網(wǎng)、連片、伸多展7大h片散網(wǎng)、伸展多1大1h片散

7、網(wǎng)、伸展多1大5h片散網(wǎng)、伸展多菌情況正常正常正常正常提煉車間生產(chǎn)概況和流程提煉組的任務(wù)是將慶大霉素從來(lái)自發(fā)酵車間的發(fā)酵液中提煉出來(lái)，同時(shí)也負(fù)責(zé)本車間低單位稀氨洗脫液和成鹽炭脫車間活性炭濾餅中慶大霉素的提取，并最終得到含慶大霉素的洗脫液，送入濃縮崗位濃縮。慶大霉素與其他物質(zhì)的分離采用陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，這是基于慶大霉素的弱堿性實(shí)現(xiàn)的。用濃氨解析，陰離子交換脫色。發(fā)酵液提煉車間流程圖酸化、中和加樹(shù)脂吸附分離漂洗發(fā)酵液酸化罐樹(shù)脂分離器漂洗柱陽(yáng)離子交飽和樹(shù)脂收集含部分慶大霉素的洗脫液回收、氨撈（再吸附）4.5%-5.3%濃氨洗脫pH8.5-9疏松0.08-0.12M稀氨洗1:20VVM-1:40VVM稀

8、酸洗解析除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)調(diào)節(jié)pH值至堿性再生樹(shù)脂旋光效價(jià)旋光效價(jià) 200-1000u/mL3000-4000L純化水沖洗0.05M鹽酸、0.02M氯化銨除氯離子除鈣離子、鎂離子除氯離子需要時(shí)壓回酸化罐旁的樹(shù)脂計(jì)量低單位洗脫液貯罐加入濃氨水作陽(yáng)離子交換柱洗脫9500-12000L>1000u/mL高單位洗脫液經(jīng)陽(yáng)串陰管道進(jìn)入陰離子交換柱脫色流速 1： 100-150VVM 脫色酸洗、堿中和陰離子交換樹(shù)脂再洗脫液貯罐送入濃縮車提煉車間流程簡(jiǎn)介酸化、中和操作方法1. 備好酸化用鹽酸、中和用10mol/LNaOH ，壓備用樹(shù)脂入計(jì)量槽；2. 接發(fā)酵液20 噸左右入酸化罐，緩緩加入鹽酸（約1.5 噸

9、） ，調(diào) pH1.4-3.0 ，加入泡敵消沫，計(jì)量體積。該過(guò)程目 的在于裂解菌絲體，釋放其中的慶大霉素，以提高收率。3. 加適量飲用水稀釋（20% 左右） ，用10mol/LNaOH 中和 pH6.4-6.8 ；4. 按 6.5 萬(wàn) u/mL（50 噸、 45 噸罐 ）或 6 萬(wàn) u/mL （ 30 噸、 65 噸罐）計(jì)量加入732 陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。30min 后復(fù)測(cè) pH ，控制在6.4-6.8 。交換吸附5-8h 。取樣送化驗(yàn)組測(cè)生物效價(jià)。慶大霉素的洗滌操作方法1. 配制 0.5 mol/L HCl 與 0.2 mol/LNH4Cl 混合液， 0.08-0.12mol/L 的稀氨。2. 每

10、柱裝飽和樹(shù)脂1100-1500L ， 用飲用水及空氣疏松樹(shù)脂并用飲用水趕走氣泡。3. 通入稀酸洗滌液至無(wú)鈣、鎂離子， 完成后用飲用水沖洗至無(wú)Cl- ， 再用 0.08 0.12mol/L稀氨水洗至pH 8.5 9.0 。慶大霉素的洗脫和脫色 操作方法：1. 配制 4.5-5.3% 的濃氨。2. 用純化水疏松并沖洗樹(shù)脂中氮根。3. 用 4.5%-5.3% 濃氨水解吸至洗脫液旋光效價(jià) 控制在 1000 u/mL 。4. 第 2 罐透光度低于70% 時(shí)，用 2mol/L HCl和 2mol/L NaOH 對(duì) 711 脫色樹(shù)脂進(jìn)行再生，使其可以循環(huán)使用。注意洗脫收率在98 以上。5. 樹(shù)脂吸率的計(jì)算公

11、式：樹(shù)脂吸率（% ）樹(shù)脂投量 /總回收樹(shù)脂 洗脫收率= 洗脫總億發(fā)酵總億慶大霉素的洗脫和脫色操作方法：1. 配制 4.5-5.3% 的濃氨。2. 用純化水疏松并沖洗樹(shù)脂中氮根。3. 用 4.5%-5.3% 濃氨水解吸至洗脫液旋光效價(jià) 控制在 1000 u/mL 。4. 第 2 罐透光度低于70% 時(shí)，用 2mol/L HCl和 2mol/L NaOH 對(duì) 711 脫色樹(shù)脂進(jìn)行再生，使其可以循環(huán)使用。注意洗脫收率在98 以上。5. 樹(shù)脂吸率的計(jì)算公式：樹(shù)脂吸率（% ）樹(shù)脂投量 /總回收樹(shù)脂 洗脫收率= 洗脫總億發(fā)酵總億慶大霉素的成鹽碳脫成鹽配置人員穿好防護(hù)用品，先抽入總體積2/3 的純化水，在夾層冷卻下再緩慢抽入1/3 的濃硫酸，攪拌均勻，冷0.5 小時(shí)以上。上批裝塔的濃縮液與本批濃縮液混合后壓入成鹽炭脫罐。在不斷攪拌及夾層通冷卻水冷卻下緩慢加入6mol/L