培養(yǎng)基模擬灌裝試驗管理規(guī)

1、公司培養(yǎng)基模擬灌裝試驗管理規(guī)定制定部門質(zhì)量保證部制定人：年月日審核人副總經(jīng)理：年月日副總經(jīng)理：年月日副總經(jīng)理：年月日副總經(jīng)理：年月日1主題內(nèi)容與適用范圍本文件規(guī)定了培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的程序和要求。本文件適用于培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的管理。2引用標(biāo)準(zhǔn)藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范2010年修訂3術(shù)語培養(yǎng)基模擬灌裝試驗（以下簡稱試驗）：英文名稱MFTMediaFillTest的英文縮寫,是用一種模擬替代物質(zhì)來模擬整個無菌生產(chǎn)過程，在所得的模擬產(chǎn)品中加注培養(yǎng)基，再對所得的全部培養(yǎng)基樣品進(jìn)行無菌培養(yǎng)。培養(yǎng)基模擬試驗是無菌生產(chǎn)工藝的驗證手段，是任何非最終無菌藥品生產(chǎn)必須進(jìn)行的一項驗證。最差條件：導(dǎo)致工藝及產(chǎn)品失敗的概

2、率高于正常工藝的條件或狀態(tài)，即標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程范圍以內(nèi)工藝的上限和下限。但這類最差條件不一定必然導(dǎo)致產(chǎn)品或工藝的不合格。4職責(zé)4.1 生產(chǎn)部門負(fù)責(zé)試驗方案的制定、組織實施、試驗報告的撰寫、偏差的報告等。4.2 質(zhì)監(jiān)中心負(fù)責(zé)試驗培養(yǎng)基的促生長試驗、灌裝物的培養(yǎng)等。4.3 質(zhì)量保證部負(fù)責(zé)試驗過程的監(jiān)督管理。5管理規(guī)定5.1 試驗?zāi)康模阂?guī)范公司培養(yǎng)基模擬灌裝試驗，評估無菌原料藥和無菌制劑的生產(chǎn)工藝，為所生產(chǎn)產(chǎn)品無菌性的可信限度達(dá)到可接受的合格標(biāo)準(zhǔn)提供證據(jù)，證明其具有生產(chǎn)無菌原料藥和無菌制劑的能力并具有可重現(xiàn)性，符合現(xiàn)行GM嚶求和相關(guān)技術(shù)指南要求。5.2 試驗要求5.2.1 試驗頻次培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的首

3、次驗證，每班次應(yīng)當(dāng)連續(xù)進(jìn)行3次合格試驗。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗按照生產(chǎn)工藝每班次半年進(jìn)行1次，每次至少一批。單一規(guī)格品種再驗證周期為半年，正常生產(chǎn)的多規(guī)格品種每一規(guī)格再驗證周期為一年。每位無菌操作人員每年至少參加一次成功的培養(yǎng)基模擬灌裝試驗?？諝鈨艋到y(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)當(dāng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。5.2.2 試驗批量及容器的數(shù)量、裝量培養(yǎng)基灌裝批量及容器的數(shù)量、裝量應(yīng)當(dāng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)當(dāng)至少等于產(chǎn)品的批量。無菌原料藥容器數(shù)量不少于被模擬產(chǎn)品的實際包裝量，模擬物裝量盡量接近實際值，不超過容器體積的70%培養(yǎng)基裝量應(yīng)能滿足微生物的生長；粉針

4、制劑灌裝數(shù)量每種規(guī)格不少于5000支。培養(yǎng)基裝量不小于容器體積的10%模擬物不少于10mg/1ml培養(yǎng)基，具體加量根據(jù)溶解性試驗確定。灌裝體積的多少，應(yīng)充分考慮容器倒轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)時，培養(yǎng)基能充分地接觸到容器和密封件的內(nèi)表面，不能達(dá)到此要求時應(yīng)適當(dāng)增加灌裝體積。5.2.3 試驗染菌率的可接受度培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標(biāo)是零污染，發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。應(yīng)當(dāng)遵循以下要求：（一）灌裝數(shù)量少于5000時，不得檢出污染品。（二）灌裝數(shù)量在5000至10000時：1 .有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；2 .有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。（三）灌裝數(shù)量超過10000時：1 .有1支污染，需調(diào)

5、查；2 .有2支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。5.3 試驗準(zhǔn)備5.3.1 試驗開始前，除工藝驗證、本驗證外的其它驗證已完成且驗證合格。需完成的驗證主要有：a廠房設(shè)施、設(shè)備、空調(diào)系統(tǒng)、水系統(tǒng)需經(jīng)過確認(rèn)和驗證；b滅菌設(shè)備、除菌過濾器、直接接觸無菌藥品的設(shè)備、容器、管道、人員及無菌服的除菌滅菌效果經(jīng)過驗證；c清潔方法、檢驗方法等經(jīng)過驗證。5.3.2 試驗開始前，應(yīng)確保環(huán)境已消毒、設(shè)備已清潔并滅菌，設(shè)施、設(shè)備、空調(diào)凈化系統(tǒng)已經(jīng)在預(yù)期的狀態(tài)中受控運行。需建立的程序及無菌準(zhǔn)備至少包括：a人流、物流、設(shè)備使用要求和參數(shù)的確定，無菌室消毒和維護(hù)的要求；b粒子和微生物監(jiān)控的要求和頻率：包括懸浮粒子、沉降菌、浮游菌

6、、廠房、設(shè)備表面、人員潔凈服外表面擦拭菌的采樣點、采樣頻次；c直接接觸無菌藥品的內(nèi)包材滅菌：鋁桶、塑料袋、西林瓶、膠塞等；裝載容器、用品及用具滅菌；無菌物料檢測儀器、物品滅菌；蠕動泵、管道輸送滅菌等。5.3.3 試驗開始前，明確對人員的要求，至少應(yīng)包括：a參與試驗的相關(guān)人員應(yīng)進(jìn)行培訓(xùn)，培訓(xùn)內(nèi)容根據(jù)實際需要確定：更衣和無菌操作知識培訓(xùn)；取樣和無菌檢驗知識培訓(xùn)；生產(chǎn)、檢驗、計量、設(shè)備等操作規(guī)程培訓(xùn)；相關(guān)設(shè)備檢修人員的無菌設(shè)備維修知識培訓(xùn)等；b應(yīng)把所有參與試驗的操作者和主管人的姓名、員工參與次數(shù)以及相關(guān)事項記錄在批生產(chǎn)記錄里，包括進(jìn)出次數(shù)等。操作者的操作任務(wù)應(yīng)與正常灌裝實施期間的任務(wù)相同。c試驗期間

7、所有進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)域的人員(包含執(zhí)行環(huán)境監(jiān)控人員在內(nèi))都必須正確著裝。d試驗的員工數(shù)量不得小于正常生產(chǎn)條件下該區(qū)域允許的最大員工數(shù)量。5.3.4 培養(yǎng)基和模擬培養(yǎng)物5.3.4.1 培養(yǎng)基的準(zhǔn)備：胰蛋白酶酪陳大豆培養(yǎng)基(TSEBoa培養(yǎng)基的消毒：過濾滅菌(0.2umfilter)或蒸汽滅菌；b培養(yǎng)基的測試：促生長性能測試合格、無菌性測試合格；滅菌后的培養(yǎng)基在百級層流下用西林瓶進(jìn)行取樣分裝，共分裝30支：促生長性能試驗：取10支分裝好培養(yǎng)基的西林瓶接種枯草桿菌，接種量100CFU接種后蓋塞、封口，在3035c培養(yǎng)7天；另取10支接種白色念珠菌，接種量100CFU接種后蓋塞、封口，在2328c培養(yǎng)7天；

8、7天內(nèi)至少50%t述接種的西林瓶中出現(xiàn)明顯的所接種微生物的生長。無菌性試驗：取10支分裝好培養(yǎng)基的西林瓶分別加5ml符合無菌要求的水，蓋塞、封口后先在2328c培養(yǎng)7天，然后在3035c培養(yǎng)7天，應(yīng)無任何微生物生長。5.3.4.2 模擬替代物的準(zhǔn)備：惰性粉末a惰性粉末的選擇選材要求：無活性、易滅菌、易溶解、對培養(yǎng)基促進(jìn)生長作用無副作用，易灌裝，流動性要好；種類：聚乙二醇系列(PEG6000,PEG8000),甘露醇，乳糖，碳酸鈉等；b惰性粉末滅菌：伽馬輻照滅菌(鉆60輻照滅菌，用量1525kGy)或干熱滅菌；c惰性粉末測試：無菌性測試合格、無抑菌性測試合格，進(jìn)行溶解性試驗。無菌性試驗：用無菌操

9、作方式取樣，并按藥典規(guī)定的無菌檢驗法檢驗其無菌性。無抑菌性試驗：將惰性粉末按無菌操作方式分別取樣，用無菌蒸儲水制備成混懸液，加入培養(yǎng)基形成濃度分別為1.0%、2.5%、5.0%、10%(W/V)的樣品液，將不同濃度的各種樣品液分裝于4個試管中，在其中2支試管內(nèi)接種100CFUB枯草桿菌，在另2支試管內(nèi)接種V100CFU勺白色念珠菌，對照品為空白培養(yǎng)基接種相同的枯草桿菌和白色念珠菌，全部樣品、對照品在相適應(yīng)的溫度下培養(yǎng)7天。7天內(nèi)所有樣品、對照品試管內(nèi)均應(yīng)有明顯的微生物生長。可證明所使用惰性粉末對枯草桿菌和白色念珠菌均無抑制作用。溶解性試驗：惰性粉末在一定濃度時，在輕微的攪拌下應(yīng)能溶解于溫度與培

10、養(yǎng)溫度相當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中，若不能溶解則應(yīng)在略低于該濃度下重新試驗。一般使用濃度為5.0%10%5.3.5 試驗工藝范圍及步驟根據(jù)無菌產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝，畫出工藝流程圖，選擇恰當(dāng)?shù)脑囼灧秶?。通常情況下，無菌原料藥的無菌工藝模擬以物料溶解開始進(jìn)行模擬，主要模擬溶解、過濾、結(jié)晶、過濾、洗滌、干燥、無菌物料的轉(zhuǎn)移（必要時）、粉碎（顆粒）、微粉（必要時）、分裝、密封（軋蓋或熱合，根據(jù)工藝定）。粉針制劑主要模擬西林瓶、膠塞的洗滌、滅菌、分裝、加塞、壓蓋等工藝步驟。在無菌模擬過程中，可能需要對實際操作進(jìn)行一些變更，這些變更應(yīng)基于風(fēng)險分析的原則，相對于正常的操作，這些變更不應(yīng)對模擬的結(jié)果造成影響。方案的變更參見變更管

11、理程序。5.3.6 最差條件設(shè)計5.3.6.1 模擬正常生產(chǎn)最差條件a灌裝運行速度：最低灌裝速度或？的最低灌裝速度；b手工灌裝；c最長時間的確認(rèn)：培養(yǎng)基的灌裝時間一般要大于等于最長的生產(chǎn)時間；延長完成滅菌至開始過程模擬的時間；灌裝的設(shè)備，儲罐，滅菌后原料，膠塞等儲存的最長時間；使用最長時間間隔的容量、設(shè)備、取樣工具；d模擬日常班次輪換，暫停/休息和更衣過程：2班或3班的變化，中午/晚飯的休息時間，進(jìn)出的更衣等；模擬員工最疲備時的操作；對無菌人員連續(xù)工作強度進(jìn)行模擬；e設(shè)備的安裝和連接：培養(yǎng)基灌裝時設(shè)備的安裝和連接應(yīng)和日常時設(shè)備的安裝連接一致；f更換氣體。5.3.6.2 模擬常規(guī)干預(yù)操作：裝量的

12、核對、裝量的調(diào)節(jié)、物料的添加（橡塞，粉子等）；瓶子堵塞，橡塞堵塞，粉子堵塞等的操作；5.3.6.3 模擬非常規(guī)干預(yù)操作：斷電、設(shè)備維修等情況；更換灌裝頭，更換或調(diào)節(jié)劑量盤，修理傳送帶等；5.3.6.4 驗證設(shè)計時，應(yīng)綜合考慮生產(chǎn)線可能造成污染的各種因素，盡量模擬這些可能的情況，盡可能模擬生產(chǎn)時的無菌操作；在無菌工藝模擬試驗中，每一次干擾都要記錄在批生產(chǎn)記錄里，指明干擾時間。5.4 試驗程序5.4.1 試驗方案根據(jù)確定的工藝范圍及步驟，在分裝模擬替代物后、密封或加塞前灌裝培養(yǎng)基，形成培養(yǎng)基模擬灌裝試驗方案。方案經(jīng)審核批準(zhǔn)后由生產(chǎn)單位組織實施。過程中如實記錄各步驟及產(chǎn)生的偏差，并形成培養(yǎng)基模擬灌裝

13、試驗批生產(chǎn)記錄。5.4.2 取樣在方案中應(yīng)明確規(guī)定無菌模擬灌裝試驗實施過程中的取樣方法及取樣量；在包裝后，應(yīng)由取樣人員根據(jù)實際取樣原則按無菌操作方式模擬取樣，并進(jìn)行同條件培養(yǎng)。5.4.3 培養(yǎng)基灌裝產(chǎn)品的培養(yǎng)和測試5.4.3.1 所有密閉性完整的容器都應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)并檢查。5.4.3.2 培養(yǎng)條件：第一階段：2328C,7天培養(yǎng)；第二階段：3035C,7天培養(yǎng)；培養(yǎng)箱要進(jìn)行溫度分布的驗證；5.4.3.3 培養(yǎng)基的檢查：a嚴(yán)格控制丟棄任何已經(jīng)灌裝的培養(yǎng)基，任何丟棄都應(yīng)有充分的理由并做好記錄。例如，在灌裝過程中正常產(chǎn)品的灌裝量控制精度需要很高，但培養(yǎng)基灌裝時，只要符合最低灌裝量，而不應(yīng)該丟棄。但如果是

14、膠塞上位不正確的培養(yǎng)基，由于密閉系統(tǒng)不完整，必須進(jìn)行丟棄。b一般在第三，七和十四大進(jìn)行檢查，檢查人員應(yīng)進(jìn)行專門的培訓(xùn)；c檢查的要求：明亮的燈光、慢慢地旋轉(zhuǎn)、陽性容器必須主管進(jìn)行復(fù)核；5.4.4 灌裝試驗后培養(yǎng)基生長試驗：a必須在產(chǎn)品培養(yǎng)結(jié)束（14天）后進(jìn)行；b測試所用的菌為：常規(guī)菌（藥典要求）：枯草芽抱桿菌、白色念珠球菌；非常規(guī)菌:生產(chǎn)現(xiàn)場中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)的菌、對該產(chǎn)品比較敏感的標(biāo)準(zhǔn)菌；c接種的濃度：小于100CFU/瓶。5.4.5 失敗調(diào)查工藝模擬試驗中如果出現(xiàn)陽性結(jié)果，應(yīng)對其開展調(diào)查，確定失敗的最可能的原因。必須對調(diào)查進(jìn)行記錄，至少包括對以下內(nèi)容的檢查：5.4.6 結(jié)果：沉降菌、浮游菌、懸浮粒子

15、監(jiān)測數(shù)據(jù)；表面擦拭菌監(jiān)控數(shù)據(jù)；b過濾前后完整性測試數(shù)據(jù)；使用的設(shè)備、物品、組件的滅菌數(shù)據(jù)及儲存條件；c評估人員是否遵循操作規(guī)程和檢驗操作規(guī)程（如：若培養(yǎng)基灌裝被視頻記錄下來了，檢查視頻）；若全部按規(guī)定操作，評估現(xiàn)有工藝及操作規(guī)程是否適用；調(diào)查結(jié)果和糾正措施應(yīng)以報告的形式記錄在文件中，報告經(jīng)過審核批準(zhǔn)后，重新開展模擬灌裝試驗。5.4.7 再驗證要求出現(xiàn)下列情況之一時，應(yīng)至少進(jìn)行一次再驗證：a設(shè)備、人員、工藝等發(fā)生重大變更時；b產(chǎn)品出現(xiàn)無菌檢測失敗或無菌原因的投訴，但未查清具體原因時；c無菌生產(chǎn)設(shè)備出現(xiàn)3個月以下停產(chǎn)時；d連續(xù)生產(chǎn)半年時。5.4.8 無菌模擬試驗后的清潔無菌模擬操作結(jié)束后，應(yīng)進(jìn)行清潔，以避免培養(yǎng)基或模擬物的存在對下步生產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)量的影響，清潔方法應(yīng)進(jìn)行驗證。5.5 試驗報告5.5.1 報告中應(yīng)包含的記錄a生產(chǎn)記錄：清潔記錄、消毒記錄、滅菌記錄、灌裝記錄、目檢記錄等；b驗證記錄：整個驗證過程應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)地記錄，包括灌裝的開始和結(jié)束時間、任何的過程模擬、任何的異常情況；c實驗記錄：培養(yǎng)基消毒滅菌記錄、環(huán)控記錄、樣品定期檢查記錄、人員培訓(xùn)記錄、促進(jìn)生長記錄；5.5.2 報告相關(guān)要求培養(yǎng)基模擬灌裝試驗完成后，