D葡聚糖的檢驗與臨床PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計學(xué)1D葡聚糖的檢驗與臨床葡聚糖的檢驗與臨床2AIDS插管等侵襲性插管等侵襲性治療治療腫瘤和免疫腫瘤和免疫抑制治療抑制治療骨髓和實體骨髓和實體器官移植器官移植廣譜抗生素廣譜抗生素治療治療 侵襲性真菌感染率上升侵襲性真菌感染率上升第1頁/共57頁3 第2頁/共57頁4感染之前定殖感染之前定殖第3頁/共57頁5第4頁/共57頁6傳統(tǒng)的方法傳統(tǒng)的方法第5頁/共57頁7第6頁/共57頁8第7頁/共57頁9第8頁/共57頁10第9頁/共57頁11第10頁/共57頁12Clinical Infectious Diseases 2008; 46Clinical Infectious Diseases 20

2、08; 46第11頁/共57頁13第12頁/共57頁14b1,6葡聚糖 磷脂雙分子層幾丁質(zhì)麥角固醇b1,3葡聚糖合成酶mannoproteins1,3真菌細(xì)胞膜、壁結(jié)構(gòu)真菌細(xì)胞膜、壁結(jié)構(gòu)羊毛固醇羊毛固醇C C1414去甲基化酶去甲基化酶1414位還原和位還原和7 78 8位異構(gòu)酶位異構(gòu)酶角鯊烯環(huán)氧化酶角鯊烯環(huán)氧化酶第13頁/共57頁15第14頁/共57頁16第15頁/共57頁17第16頁/共57頁18第17頁/共57頁19第18頁/共57頁20第19頁/共57頁21第20頁/共57頁22Figure 1-10 Noncompetitive sandwich method of immunoas

3、say第21頁/共57頁23例例 1Carmen Pazos, Jose Ponton, etc. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY,Jan.2005n結(jié)論：結(jié)論： BG和和GM聯(lián)合檢測有助于臨床鑒定血液病患者是否合并真菌感染聯(lián)合檢測有助于臨床鑒定血液病患者是否合并真菌感染, 并將并將單一試驗假陽性給診療帶來的影響降低到最小單一試驗假陽性給診療帶來的影響降低到最小 .1,3-D-葡聚糖與循環(huán)半乳甘露聚糖的檢測比較：葡聚糖與循環(huán)半乳甘露聚糖的檢測比較： 用于治療和監(jiān)測中性粒細(xì)胞減少性成人曲霉菌病用于治療和監(jiān)測中性粒細(xì)胞減少性成人曲霉菌病 第22頁/共57頁24(a

4、) 侵襲性曲霉菌病合并急性髓樣白血病患者侵襲性曲霉菌病合并急性髓樣白血病患者給予兩性霉素給予兩性霉素B和卡泊芬凈用藥和卡泊芬凈用藥 治療過程中治療過程中BG和和GM變化情況變化情況第23頁/共57頁25(b) 侵襲性曲霉病合并慢性淋巴細(xì)胞白血病患者侵襲性曲霉病合并慢性淋巴細(xì)胞白血病患者 未使用兩性霉素未使用兩性霉素B治療治療 BG ()和和GM ( )變化情況變化情況第24頁/共57頁26(c) 多發(fā)性骨髓瘤患者多發(fā)性骨髓瘤患者(非侵襲性曲霉病非侵襲性曲霉病) BG結(jié)果假陽性結(jié)果假陽性BG ()和和GM ( )第25頁/共57頁27(d) Hodgkins 淋巴瘤淋巴瘤 (非侵襲性曲霉病非侵襲

5、性曲霉病)患者患者 GM結(jié)果假陽性結(jié)果假陽性 BG ()和和GM ( )第26頁/共57頁28(e) 急性髓樣白血病患者急性髓樣白血病患者(非侵襲性曲霉病非侵襲性曲霉病)白色念珠菌和光滑念珠菌白色念珠菌和光滑念珠菌 培養(yǎng)陽性培養(yǎng)陽性 BG和和GM結(jié)果假陰性結(jié)果假陰性 BG ()和和GM ( )第27頁/共57頁29(f) 慢性淋巴細(xì)胞白血病患者慢性淋巴細(xì)胞白血病患者(非侵襲性曲霉病非侵襲性曲霉病)白色念珠菌白色念珠菌 培養(yǎng)陽性培養(yǎng)陽性 BG和和GM結(jié)果陰性結(jié)果陰性 BG ()和和GM ( )第28頁/共57頁30例例 2P.Brian Smith, Daniel K.Benjamin,Jr,

6、etc. CLINICALAND VACCINE IMMUNOLOGY,July2007n結(jié)論結(jié)論研究數(shù)據(jù)顯示研究數(shù)據(jù)顯示, 健康兒童的健康兒童的1,3-D-葡聚糖水平高于健康成人葡聚糖水平高于健康成人 .該指標(biāo)用于兒童感染性疾病的診斷應(yīng)慎重該指標(biāo)用于兒童感染性疾病的診斷應(yīng)慎重, 1,3-D-葡聚糖在兒童葡聚糖在兒童群體的正常值區(qū)間有待進一步研究群體的正常值區(qū)間有待進一步研究 .兒童兒童1,3-D-葡聚糖水平研究葡聚糖水平研究第29頁/共57頁31第30頁/共57頁32 收集患者收集患者82例例 侵襲性真菌感染組侵襲性真菌感染組 22例例 其他真菌感染組其他真菌感染組 鐮刀菌鐮刀菌/接合菌接合

7、菌/絲孢菌感染絲孢菌感染 17 例例 念珠菌感染念珠菌感染 23例例 對照組對照組(血液腫瘤患者非真菌感染血液腫瘤患者非真菌感染) 20例例 414份血清標(biāo)本檢測份血清標(biāo)本檢測GM 409份血清標(biāo)本檢測份血清標(biāo)本檢測BG 侵襲性曲霉菌病患者在留取血清標(biāo)本前已接受抗真菌藥物侵襲性曲霉菌病患者在留取血清標(biāo)本前已接受抗真菌藥物治療治療 (包括聚烯類、氮雜茂類、棘球白素類等包括聚烯類、氮雜茂類、棘球白素類等)R.Y.Hachem, D.P.Kontoyiannis, etc. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY,Jan.2009n結(jié)論結(jié)論 對于血液腫瘤患者合并侵襲性真菌感

8、染的診斷對于血液腫瘤患者合并侵襲性真菌感染的診斷, BG的的敏感度優(yōu)于敏感度優(yōu)于GM .例例 3第31頁/共57頁33第32頁/共57頁34例例 41,3-D-葡聚糖和抗白色念珠菌細(xì)胞壁抗原的葡聚糖和抗白色念珠菌細(xì)胞壁抗原的IgG亞型亞型抗體用于系統(tǒng)性念珠菌感染診療抗體用于系統(tǒng)性念珠菌感染診療系統(tǒng)性念珠菌病患者 IgG亞型體液水平升高 抗細(xì)胞壁碎片抗細(xì)胞壁碎片IgG1抗體抗體(IgG1-CW) 抗磷酸肽甘露聚糖片段抗磷酸肽甘露聚糖片段IgG2抗體抗體(IgG2-PPM)系統(tǒng)性念珠菌病患者 IgG1-CW/ IgG2-PPM比值升高n結(jié)論結(jié)論1,3-D-1,3-D-葡聚糖以及葡聚糖以及IgG1-

9、CWIgG1-CW、IgG2-PPMIgG2-PPM可用于早期診斷系統(tǒng)性可用于早期診斷系統(tǒng)性 念珠菌病念珠菌病 . .1,3-D-1,3-D-葡聚糖與葡聚糖與IgGIgG亞型相結(jié)合檢測可提高陽性預(yù)測值，有效指導(dǎo)亞型相結(jié)合檢測可提高陽性預(yù)測值，有效指導(dǎo) 早期抗真菌藥物治療早期抗真菌藥物治療 . .N.Kondori, L.Edebo,etc. CLINICAL AND DIAGNOSTIC LABORATORY IMMUNOLOGY,Mar.2004第33頁/共57頁35念珠菌感染患者念珠菌感染患者14例例 1,3-D-葡聚糖結(jié)果陽性葡聚糖結(jié)果陽性系統(tǒng)性念珠菌病患者系統(tǒng)性念珠菌病患者14例例1,

10、3-D-葡聚糖檢測結(jié)果均大葡聚糖檢測結(jié)果均大于于20 pg/ml第34頁/共57頁36血漿血漿1,3-D1,3-D葡聚糖檢測對血液病患者侵襲性真菌感染的診斷價值葡聚糖檢測對血液病患者侵襲性真菌感染的診斷價值本研究收集疑為IFI的血液病患者血漿標(biāo)本162例,其中化療后患者85例,造血干細(xì)胞移植后患者77例。按照歐洲癌癥研究治療組織及真菌研究組(EORTC/MSG)診斷標(biāo)準(zhǔn),所有病例中有確定診斷2例,臨床診斷18例,擬診75例,排除診斷67例。結(jié)果表明:以20 ng/m l為診斷界值,G試驗的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值(PPV)和陰性預(yù)測值(NPV)分別為75%、91%、72.4%和92.4%。在

11、75例擬診病例中,其中有51例G試驗陽性,且對廣譜抗生素?zé)o效而經(jīng)過抗真菌治療有效,經(jīng)過臨床回顧性分析符合IFI,表明G試驗使IFI診斷率提高31.4%。例例 5劉芳劉芳,吳彤吳彤,等等. 中國實驗血液學(xué)雜志中國實驗血液學(xué)雜志Journal of Experimental Hematology 2009第35頁/共57頁37G試驗對試驗對IF I診斷率的影響診斷率的影響在所有162例患者中,若無G試驗作為診斷標(biāo)準(zhǔn),僅20例患者達到確診+臨床診斷真菌感染標(biāo)準(zhǔn),占總病例數(shù)12.3%。若將G試驗陽性作為微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn),則有71例達確診+臨床診斷標(biāo)準(zhǔn),占總病例數(shù)的43.8%。在75例擬診病例中,其中51例

12、真菌培養(yǎng)陰性而G試驗陽性的患者,均對廣譜抗生素?zé)o效而經(jīng)過抗真菌治療病情好轉(zhuǎn),經(jīng)過臨床回顧性分析符合IFI,故G試驗使IFI診斷率提高了31.4%。第36頁/共57頁38血漿血漿1,3-D1,3-D葡聚糖對深部真菌感染診斷的研究葡聚糖對深部真菌感染診斷的研究例例 6趙勇趙勇,王紅王紅,等等. 中國真菌學(xué)雜志中國真菌學(xué)雜志2007年年8月第月第2卷第卷第4期期該研究共留取用于檢測血漿葡聚糖的標(biāo)本182份,其中來自確診病例和高度疑似病例(真陽性)共18份,其余為可能感染病例(18份)和無深部真菌感染病例(146份,真陰性)。統(tǒng)計學(xué)結(jié)果提示血漿葡聚糖水平對深部真菌統(tǒng)計學(xué)結(jié)果提示血漿葡聚糖水平對深部真菌

13、感染診斷的準(zhǔn)確性優(yōu)于單純依靠各種標(biāo)本真感染診斷的準(zhǔn)確性優(yōu)于單純依靠各種標(biāo)本真菌培養(yǎng)或真菌涂片是否陽性對深部真菌感染菌培養(yǎng)或真菌涂片是否陽性對深部真菌感染的判斷。的判斷。AUC95%置信區(qū)間置信區(qū)間葡聚糖葡聚糖0.8870.795-0.979真菌培養(yǎng)真菌培養(yǎng)0.8400.744-0.936真菌涂片真菌涂片0.8330.738-0.927用于診斷深部真菌感染各指標(biāo)用于診斷深部真菌感染各指標(biāo)ROC曲線下面積曲線下面積第37頁/共57頁39血清血清1,3-D-葡聚糖檢測在念珠菌菌血癥診斷中的價值葡聚糖檢測在念珠菌菌血癥診斷中的價值例例 7對2007年1月至2009年4月的25例念珠菌菌血癥患者、60例

14、細(xì)菌菌血癥患者、25例念珠菌口咽定植者、20例健康體檢者的血清1,3-D-葡聚糖含量進行比較分析。念珠菌菌血癥組的血清1,3-D-葡聚糖含量為115.242.3 ng/L,明顯高于其他各組,其他各組間的血清1,3-D-葡聚糖含量無顯著差異。結(jié)論結(jié)論:血清血清1,3-D-葡聚糖的檢測是診斷念珠菌菌血癥的有效指標(biāo)。葡聚糖的檢測是診斷念珠菌菌血癥的有效指標(biāo)。四組間比較四組間比較:F=119.493,P0.105;念珠菌菌血癥組與細(xì)菌菌血癥組、念珠菌口咽定植組、健康體檢組的兩兩比較念珠菌菌血癥組與細(xì)菌菌血癥組、念珠菌口咽定植組、健康體檢組的兩兩比較: P值均值均0.05.劉英其劉英其. 中國衛(wèi)生檢驗雜

15、志中國衛(wèi)生檢驗雜志2009年年9月第月第19卷第卷第9期期第38頁/共57頁40血漿血漿1,3-D-葡聚糖與抗深部白色念珠菌感染藥物療效關(guān)系的實驗研究葡聚糖與抗深部白色念珠菌感染藥物療效關(guān)系的實驗研究例例 8李世榮李世榮,王紅王紅,等等. 臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志2007年第年第6卷第卷第6期期本文采用110只小鼠隨機分成3組,空白對照組、模型組、氟康唑組,建立深部白色念珠菌感染的動物模型。定量檢測血漿中1,3-D-葡聚糖的含量,雙腎組織勻漿液培養(yǎng)計數(shù)菌落數(shù)。用于探討深部真菌感染小鼠血漿1,3-D-葡聚糖水平與抗真菌藥物療效的關(guān)系。各處理組不同時間點血漿各處理組不同時間點血漿1,3

16、-D-葡聚糖的比較葡聚糖的比較組別組別治療前治療前治療第治療第1天天治療第治療第3天天治療第治療第5天天模型組模型組4791.474415.995397.004640.993537.984259.212355.313663.52氟康唑組氟康唑組3978.093500.152976.153953.12662.601665.5417.8715.03對照組對照組8.956.06治療前模型組血漿治療前模型組血漿(13)-D-葡聚糖水平明顯高于空白對照組葡聚糖水平明顯高于空白對照組,說明血漿說明血漿1,3-D-葡聚糖水平異常升高可以反映深部真菌感染的存在。葡聚糖水平異常升高可以反映深部真菌感染的存在。氟

17、康唑組血漿氟康唑組血漿1,3-D-葡聚糖水平隨著治療逐漸減低葡聚糖水平隨著治療逐漸減低,從治療第從治療第5天開始與模型組相比天開始與模型組相比,血漿血漿1,3-D-葡聚糖水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義葡聚糖水平差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),說明血漿說明血漿(13)-D-葡聚糖水平與氟康唑的治療呈量效關(guān)系。葡聚糖水平與氟康唑的治療呈量效關(guān)系。第39頁/共57頁41大鼠感染大鼠感染曲霉菌后曲霉菌后1,3-D-葡聚糖水平變化葡聚糖水平變化該研究目的在于建立患侵襲性肺曲霉菌病動物模型, 監(jiān)測其血清1,3-D-葡聚糖濃度變化, 評價抗真菌感染療效 .n結(jié)論結(jié)論1,3-D-葡聚糖可用于早期檢測侵襲性肺曲霉菌病

18、和評價抗真菌藥物療效葡聚糖可用于早期檢測侵襲性肺曲霉菌病和評價抗真菌藥物療效Nathan P.Wiederhold, Laura K.Najvar, etc. ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY,Mar.2008例例 9大鼠感染曲霉菌后第三天大鼠感染曲霉菌后第三天1,3-D-葡聚糖水平明顯升高葡聚糖水平明顯升高, 49.2pg/ml 609pg/ml第40頁/共57頁42卡氏肺孢子蟲肺炎血清學(xué)標(biāo)志物卡氏肺孢子蟲肺炎血清學(xué)標(biāo)志物卡氏肺孢子蟲肺炎(Pneumocystis pneumonia, PCP) 當(dāng)宿主防御機能受損時易引起疾病,最常見的是血液系統(tǒng)惡性

19、疾病, 淋巴增生性疾病,腫瘤化療和艾滋病等引起的細(xì)胞免疫缺乏 .PCP因沒有特異性診斷指標(biāo)和明顯臨床癥狀較難治療, 通常多藥物聯(lián)合治療, 常引發(fā)多器官感染 .該研究收集患者57例 標(biāo)本支氣管肺泡灌洗液BAL 檢測項目： 乳酸脫氫酶乳酸脫氫酶 LDH (LDH (肺部感染炎癥指標(biāo)肺部感染炎癥指標(biāo)) ) 1,3-D- 1,3-D-葡聚糖葡聚糖 BG (BG (真菌感染標(biāo)志物真菌感染標(biāo)志物) ) KL-6 ( KL-6 (間質(zhì)性肺炎標(biāo)志物間質(zhì)性肺炎標(biāo)志物) )n結(jié)論結(jié)論1,3-D-葡聚糖為診斷葡聚糖為診斷PCP的最佳指標(biāo)的最佳指標(biāo).LDH與氧分壓相結(jié)合適用于反映肺部組織損害程度與氧分壓相結(jié)合適用于反

20、映肺部組織損害程度.對于嚴(yán)重呼吸衰竭患者對于嚴(yán)重呼吸衰竭患者, BAL的的 1,3-D-葡聚糖水平能準(zhǔn)確反映患者病情葡聚糖水平能準(zhǔn)確反映患者病情 .Sadatomo Tasaka, Naoki Hasegawa, etc.Chest2007例例 10第41頁/共57頁43PCP組與非組與非PCP組組 LDH / BG / KL-6 水平比較水平比較第42頁/共57頁44第43頁/共57頁45第44頁/共57頁46各項目各項目ROC曲線下面積為：曲線下面積為： BG 0.935 KL-6 0.730 LDH 0.7041,3-D-葡聚糖的葡聚糖的ROC曲線下曲線下面積明顯高于其他兩個指標(biāo)面積明顯

21、高于其他兩個指標(biāo) (p 0.01)提示提示1,3-D-葡聚糖為診斷卡氏肺孢子蟲肺炎葡聚糖為診斷卡氏肺孢子蟲肺炎(PCP)的最佳指標(biāo)的最佳指標(biāo)BGBG、LDHLDH和和 KL-6 ROCKL-6 ROC曲曲線線第45頁/共57頁471,3-D-葡聚糖和白色念珠菌芽管抗體葡聚糖和白色念珠菌芽管抗體用于診斷和治療成人中性粒細(xì)胞減少性念珠菌病用于診斷和治療成人中性粒細(xì)胞減少性念珠菌病檢測白念珠菌芽管抗體(CAGT)在系統(tǒng)性白念珠菌感染診斷中具有一定的診斷意義n結(jié)論結(jié)論BG和和CAGT聯(lián)合檢測利于血液病患者合并真菌感染的檢測聯(lián)合檢測利于血液病患者合并真菌感染的檢測兩試驗相結(jié)合可降低單一試驗的假陽性率兩試

22、驗相結(jié)合可降低單一試驗的假陽性率Carmen Pazos,Mara-Dolores Moragues, etc. Rev Iberoam Micol 2006例例 11第46頁/共57頁48不同患者不同患者BG()and 抗抗CAGT()抗體動態(tài)變化情況抗體動態(tài)變化情況(a) 侵襲性念珠菌病患者合并急性髓樣白血病侵襲性念珠菌病患者合并急性髓樣白血病 使用兩性霉素使用兩性霉素B 治療后治療后BG和和CAGT變化情況變化情況第47頁/共57頁49(b) 疑似侵襲性念珠菌病患者合并慢性淋巴細(xì)胞白血病疑似侵襲性念珠菌病患者合并慢性淋巴細(xì)胞白血病未使用兩性霉素未使用兩性霉素B治療治療 BG和和CAGT滴

23、度變化情況滴度變化情況BG()and 抗抗CAGT()第48頁/共57頁50(c) 多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)性骨髓瘤(非念珠菌感染非念珠菌感染)患者患者BG結(jié)果假陽性結(jié)果假陽性 BG()and 抗抗CAGT()第49頁/共57頁51(d) 非非Hodgkins 淋巴瘤淋巴瘤(非念珠菌感染非念珠菌感染)患者患者 CAGT結(jié)果假陽性結(jié)果假陽性 BG()and 抗抗CAGT()第50頁/共57頁52天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院 病例病例1患者患者A，女性，女性，82歲。歲。病史：病史：2009年年8月月31日外傷后，面部、左上肢疼痛、伴大小便失禁日外傷后，面部、左上肢疼痛、伴大小便失禁5天入院，于干部保健