體外診斷試劑分析性能評(píng)價(jià)準(zhǔn)確度-回收試驗(yàn)指導(dǎo)原則

1、體外診斷試劑分析性能評(píng)估（準(zhǔn)確度-回收實(shí)驗(yàn)）指導(dǎo)原則一、前言準(zhǔn)確度評(píng)估資料是評(píng)價(jià)擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，也是產(chǎn)品注冊(cè)所需的重要申報(bào)資料之一。定量檢測(cè)方法的回收實(shí)驗(yàn)是評(píng)估準(zhǔn)確度的方法之一，用于評(píng)估定量檢測(cè)方法準(zhǔn)確測(cè)定待測(cè)分析物的能力，結(jié)果用回收率表示。本指導(dǎo)原則基于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）的有關(guān)要求，參考有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)采用回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行準(zhǔn)確度評(píng)估的實(shí)驗(yàn)方法和數(shù)據(jù)處理方法進(jìn)行了原則性要求。其目的是為生產(chǎn)企業(yè)采用回收實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行準(zhǔn)確度評(píng)估并準(zhǔn)備準(zhǔn)確度評(píng)估資料提供原則性指導(dǎo)，也為注冊(cè)管理部門審核該部分分析性能評(píng)估資料提供技術(shù)參考。由于體外診斷試劑產(chǎn)品發(fā)展速度快、專業(yè)跨度大

2、，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局將根據(jù)體外診斷試劑發(fā)展的需要，適時(shí)對(duì)本指導(dǎo)原則進(jìn)行修訂。二、適用范圍本指導(dǎo)原則適用于首次申請(qǐng)注冊(cè)、申請(qǐng)?jiān)S可事項(xiàng)變更的用于定量檢測(cè)的體外診斷產(chǎn)品。因體外診斷產(chǎn)品評(píng)價(jià)是將儀器、試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品等作為一個(gè)系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)價(jià)，因此回收實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)采用系統(tǒng)的概念進(jìn)行描述。如特殊產(chǎn)品不適用于本指導(dǎo)原則，可進(jìn)行詳細(xì)說明并采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)。三、基本要求（一）回收實(shí)驗(yàn)的基本要求1 .操作者應(yīng)熟悉待評(píng)價(jià)系統(tǒng)的操作。2 .編寫系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，其中包括校準(zhǔn)程序和室內(nèi)質(zhì)控程序，采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持系統(tǒng)處于正常狀°3 .待評(píng)價(jià)系統(tǒng)的處理進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)該對(duì)待評(píng)價(jià)系統(tǒng)

3、進(jìn)行初步評(píng)價(jià)，并且對(duì)待評(píng)價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行精密度及線性評(píng)價(jià)（參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)）只有在以上評(píng)價(jià)完成并且符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求后，才可進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)。（二）回收實(shí)驗(yàn)的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理方法1 .實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求和制備方法（1）選擇合適濃度的常規(guī)檢測(cè)樣本，分為體積相同的3-4份。（2）在其中2-3份樣本中加入不同濃度相同體積的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液制備待回收分析樣本，加入體積小于原體積的10%制成2-3個(gè)不同加入濃度的待回收分析樣本，計(jì)算加入的待測(cè)物的濃度。(3)在另一份樣本中加入同樣體積的無待測(cè)物的溶劑,制成基礎(chǔ)樣本。2 .實(shí)驗(yàn)過程用待評(píng)價(jià)系統(tǒng)對(duì)待回收分析樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測(cè)定，通常對(duì)樣本進(jìn)行3次重復(fù)測(cè)定，計(jì)算均值，取其均值進(jìn)行

4、下述計(jì)算。3 .數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告(1)加入濃度n=標(biāo)準(zhǔn)液濃度nX標(biāo)準(zhǔn)液加入體積/(樣本體積+標(biāo)準(zhǔn)液體積)(2)計(jì)算回收率:回收率nX100%測(cè)定符回收分析樣本濃度均值口-測(cè)定基礎(chǔ)樣本濃度均值加入濃度口(3)計(jì)算平均回收率：I0收率1+回收卷+-+回收率J._.平均回收率=J：.'-(4)計(jì)算每個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值:每個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值=回收率n平均回收如差值超過±10%應(yīng)查找原因并糾正，重新進(jìn)行評(píng)估(5)計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=|100%-平均回收率|(6)結(jié)果評(píng)估：結(jié)果至少應(yīng)滿足相關(guān)國(guó)際及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)滿足臨床需求。4,范例一一某法測(cè)定血清葡

5、萄糖回收率(1)樣本制備：基礎(chǔ)樣本血清：血清1ml(葡萄糖濃度5.5mmol/L)+蒸播水0.1ml;基礎(chǔ)樣本濃度=5.5/(1+0.1)=5mmol/L回收樣本1:血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液(濃度22mmol/L);回收樣本2:血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液(濃度55mmol/L);(2)計(jì)算加入濃度：加入濃度1=22X0.1/(0.1+1.0)=2mmol/L加入濃度2=55X0.1/(0.1+1.0)=5mmol/L(3)采用待評(píng)價(jià)系統(tǒng)，按照從低到高的濃度順序，每個(gè)樣本測(cè)定3次，取平均值，填入表1表1測(cè)定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率基礎(chǔ)樣本5

6、.00分析樣本17.062.002.06103分析樣本29.955.004.9599回收濃度1=7.06-5=2.06mmol/L回收濃度2=9.95-5=4.95mmol/L回收率i=L!£Wx100%=103%2回收率2=-X100%=99%103+99(4)計(jì)算平均回收率：平均回收率=I=2101%(5)計(jì)算每個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值：分析樣本1:103%101%=2%分析樣本2:99%101%=2%兩個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值小于土10%,(6)計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=|100%-101%|=1%(7)結(jié)果評(píng)估：1%,TE”5%(CLIA88),該方2法的回

7、收實(shí)驗(yàn)(準(zhǔn)確度)可接受。四、其它應(yīng)注意的問題：(一)加入體積：加入的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10蛆內(nèi)，如果高濃度的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液不易得到，加入體積亦不得超過原樣本體積的20%加入的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液體積量不應(yīng)影響樣本基質(zhì)；并且保證在加樣過程中的取樣準(zhǔn)確度。(二)加入的溶劑應(yīng)不影響對(duì)待測(cè)物的測(cè)定。（三）加入待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液的濃度：保證總濃度在系統(tǒng)分析測(cè)量范圍內(nèi)，盡量使加入標(biāo)準(zhǔn)液后樣本中的被測(cè)物濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)決定水平。（四）待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液濃度：因?yàn)榇郎y(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液溶液加入體積不到10%為保證得到不同濃度的待回收分析樣本，標(biāo)準(zhǔn)液的濃度應(yīng)該足夠高。五、名詞解釋（一）待評(píng)價(jià)系統(tǒng)：擬進(jìn)行性能評(píng)估的產(chǎn)品。（二）待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液：待測(cè)物與相應(yīng)的溶劑混合后制備