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文檔簡介
1、醫(yī)學功能學科實驗教案實驗一 實驗緒論【目的要求】1掌握功能學實驗的性質(zhì)、目的和要求。2了解根據(jù)實驗的性質(zhì)選擇合適的實驗動物與操作方法。3了解機能學學實驗設計的原則和方法。【內(nèi)容與項目】多媒體電教片【教學方法】教師講授【教學時數(shù)】2學時。實驗二 胃腸道平滑肌收縮【目的要求】 1學習哺乳類動物離體器官實驗方法。2觀察哺乳動物離體消化道平滑肌的一般特性。3觀察與掌握不同藥物對消化道平滑肌的作用。【內(nèi)容與項目】1十二指腸處取長34cm的腸管,在器官浴槽內(nèi)一端用蛙心夾固定,另一端用小鉤鉤住,通過絲線連于張力換能器上。2觀察腸管的緊張性(基線的高度)、收縮幅度和蠕動頻率等指標。3待空腸平滑肌張力穩(wěn)定后,在
2、器官浴槽內(nèi)加入1:10,000腎上腺素12滴,觀察和記錄離體空腸平滑肌的變化。4洗滌標本3次,每15分鐘一次。5待空腸平滑肌張力恢復到基線水平后,加入1:10,000乙酰膽堿 12滴,觀察和記錄20分鐘離體腸段平滑肌的變化。6待空腸平滑肌張力穩(wěn)定后,再次加入阿托品和1:10,000乙酰膽堿各 12滴,觀察和記錄其對腸段平滑肌的影響。7. 將器官浴槽內(nèi)的溫水換成室溫的水,臺氏液換成室溫臺氏液,停止供氧。觀察和記錄此時腸 段平滑肌的影響。【教學方法】離體器官實驗、學生操作、實驗報告?!窘虒W時數(shù)】3學時。實驗三 運動神經(jīng)興奮與骨骼肌收縮【目的要求】1利用蟾蜍的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本,分析與記錄神經(jīng)干復
3、合動作電位和肌肉單收縮和復合收縮產(chǎn)生的機制。2分析復合動作電位的幅值與刺激強度的關(guān)系,以及測量復合動作電位的潛伏期、時程和幅值。3熟悉蟾蜍的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本制作?!緝?nèi)容與項目】1記錄神經(jīng)干復合動作電位。2測量最大刺激時的復合動作電位的潛伏期、時程和幅值。3把記錄電極與刺激電極的位置交換,在相同刺激條件下,比較兩者的曲線。4將5%普魯卡因浸泡過棉球置于刺激和引導記錄電極間,記錄動作電位值變化。5在兩記錄電極間,用金屬鑷子夾毀神經(jīng),記錄單相復合動作電位。6逐漸增大刺激強度,直到復合動作電位不隨刺激強度而變化。7測量復合動作電位的潛伏期1;測量復合動作電位的潛伏期2。8神經(jīng)干復合動作電位和骨骼肌
4、單收縮與刺激強度的關(guān)系。9測量神經(jīng)干復合動作電位以及腓腸肌單收縮的潛伏期、時程和幅值。比較神經(jīng)干復合動作電位和腓腸肌單收縮的潛伏期、時程和幅度的差異。10記錄骨骼肌的收縮期復合和舒張期復合的曲線(雙次刺激標本)。11記錄骨骼肌的不完全強直收縮和完全強直收縮的曲線(多次刺激標本)。12. 測量神經(jīng)纖維的相對不應期和絕對不應期。【教學方法】動物實驗、學生操作、實驗報告。【教學時數(shù)】5學時。實驗四 人體多功能生理指標檢測與測定【目的要求】1掌握心音、血壓和心電圖的成因和特點,掌握肺通氣量和人體腱反射的測定方法。2熟悉心音聽診的部位和方法,熟悉心電圖描記以及血壓測量的原理與方法。3了解心電圖各波的意義
5、。【內(nèi)容與項目】1人體心電圖的描記原理。2心音的聽診部位及意義。3動脈血壓間接測定法的原理和方法。4肺通氣量的測定及意義。5人體腱反射的測定及意義?!窘虒W方法】課堂講授、學生操作、課堂討論與總結(jié)【教學時數(shù)】4學時實驗五 血壓調(diào)節(jié)與心血管藥物作用分析【目的要求】1掌握哺乳類動物急性實驗的常規(guī)操作,動脈血壓和中心靜脈壓的直接測量法。2掌握某些重要的生理性神經(jīng)、體液因素對心血管活動的影響。3. 熟悉動物失血對心血管活動的影響。4. 了解PowerLab 8S記錄儀的工作原理及使用注意事項?!緝?nèi)容與項目】1觀察并同時記錄正常動脈血壓、心電圖、心率和(及減壓神經(jīng)放電活動)。2觀察記錄夾閉和放松頸總動脈、
6、靜脈注射去甲腎上腺素和硝普鈉對動脈血壓、心率和減壓神經(jīng)放電活動的影響。3對減壓神經(jīng)進行刺激,觀察和記錄刺激前后各動脈壓和心率的變化。4結(jié)扎左側(cè)兔耳的交感神經(jīng)和在靠中樞端(脊髓胸段)剪斷交感神經(jīng),比較兩耳血管網(wǎng)情況。用連續(xù)電刺激對左側(cè)交感神經(jīng)的外周端進行刺激,再比較兩耳血管網(wǎng)的擴張充血情況。5結(jié)扎左側(cè)迷走神經(jīng),靠近中樞端剪斷,用刺激保護電極刺激迷走神經(jīng)的外周端(近心端),觀 察和記錄刺激前后血壓、心率和心電圖波形變化。再結(jié)扎右側(cè)迷走神經(jīng),靠近中樞端剪斷,用刺激保護電極刺激迷走神經(jīng)的外周端(近心端),察和記錄刺激上述指標變化;由耳緣靜脈注射0.1%阿托品0.2ml/kg, 再刺激迷走神經(jīng)外周端,觀
7、察和記錄血壓、心率和心電圖波型變化。6由耳緣靜脈分別注射1:100,00腎上腺素1ml/kg、1:100,00異丙基腎上腺素1ml再觀察和記錄。7由耳緣靜脈分別注射2.5%妥拉唑啉0.3ml/kg、0.1普柰洛爾0.3ml/kg后,停藥2分鐘后再給1:100,00腎上腺素1ml/kg或1:100,00去甲腎上腺素1ml/kg,分別觀察a、b受體激動劑和拮抗劑對心血管活動的影響和記錄。8動脈放血40ml,觀察動脈血壓、心率和減壓神經(jīng)活動的變化?!窘虒W方法】動物實驗、學生操作、課堂討論、實驗報告?!窘虒W時數(shù)】5學時。實驗六 動物一側(cè)迷路破壞的效應與人體前庭功能觀察【目的要求】1掌握側(cè)迷路功能定位及
8、其對軀體運動的支配特點。2熟悉豚鼠一側(cè)迷路破壞時對調(diào)節(jié)動物姿勢中的重要作用。3了解觀察和記錄動物實驗結(jié)果的方法。4人體前庭功能分析?!緝?nèi)容與項目】1麻醉豚鼠的一側(cè)迷路:使動物側(cè)臥,用滴管向內(nèi)耳道深處滴入氯仿0.5ml。2麻醉后觀察動物眼球震顫、自由活動。3人體前庭檢查?!窘虒W方法】動物實驗、學生操作、實驗報告?!窘虒W時數(shù)】3學時。實驗七 實驗性酸堿平衡紊亂與急救【目的要求】1掌握機體酸堿平衡調(diào)控機制與血氣分析。2掌握實驗性酸堿平衡紊亂的動物模型復制的方法和原理。3熟悉動物在酸堿平衡紊亂時機體的功能變化和血氣指標改變。4了解糾正酸堿平衡紊亂的治療方法?!緝?nèi)容與項目】1觀察和記錄生理狀態(tài)下,酸堿平
9、衡的呼吸、血壓和血氣指標。2通過給動物注入2.5%乳酸溶液20-30ml/kg復制代謝性酸中毒,觀察和記錄呼吸、血壓和血氣指標的變化。用堿性藥物糾正酸中毒。3通過給動物注入NaHCO3復制代謝性堿中毒,觀察和記錄呼吸、血壓和血氣指標的變化。用酸性藥物糾正堿中毒。4通過動物的不完全窒息制造呼吸性酸中毒,觀察和記錄呼吸、血壓和血氣指標的變化?!窘虒W方法】動物實驗、學生操作、課堂討論、實驗報告。【教學時數(shù)】4學時。實驗八 缺氧實驗【目的要求】1掌握不同缺氧類型主要的發(fā)病原因和機制。2觀察不同類型缺氧時呼吸、皮膚粘膜顏色、活動以及氧分壓的改變。3了解機體功能、代謝特點與缺氧對機體影響的關(guān)系?!緝?nèi)容與項
10、目】1年齡因素對缺氧耐受性的影響。2低張性缺氧實驗。3一氧化碳中毒。4亞硝酸鈉中毒。5氰化鉀中毒。6. 藥物對耗氧量的影響1)甲鼠腹腔注射0.9%NaCL0.03ml/g;2) 乙鼠腹腔注射0.025%氯丙嗪0.03ml/g;3) 丙鼠腹腔注射0.1%普萘洛爾0.03ml/g;4) 丁鼠皮下注射0.05%鹽酸異丙腎上腺素0.04ml/g?!窘虒W方法】動物實驗、學生操作、課堂討論、實驗報告。【教學時數(shù)】4學時。實驗九 血細胞滲透脆性與家兔DIC造病【目的要求】1觀察不同濃度的溶液對紅細胞穩(wěn)定性影響,掌握滲透的作用與意義。2通過DIC動物模型的復制,掌握DIC的病因及發(fā)病機制。3熟悉急性DIC各期
11、血液凝固性的變化,及其這些變化的原因及其病理意義。4了解DIC的診斷標準,熟悉常用的實驗室檢查指標及其意義。【內(nèi)容與項目】1正常對照的各項指標的血標本的制備和檢測。2血細胞滲透脆性實驗:采集的抗凝血依次加入12支試管內(nèi),各1滴血,觀察各管的顏色變化和顯微鏡下觀察RBC形態(tài)變化,比較其差別。3DIC的造?。海?)經(jīng)耳緣靜脈注入兔腦勻漿,注射過程中發(fā)現(xiàn)動物突然掙扎、呼吸急促,應立即停止推注并及時采血。(2)采集血樣:在全量兔腦勻漿注射完畢后的立即和注射后30或45min時各采血樣一次。(3)血凝檢測:血小板計數(shù),白陶土部分凝血活酶時間(KPTT)、凝血酶原時間(PT),凝血酶時間(TT)、血漿魚精
12、蛋白副凝試驗(3P試驗)和纖維蛋白原含量的測定?!窘虒W方法】動物實驗、學生操作、課堂討論、實驗報告?!窘虒W時數(shù)】4學時。實驗十 呼吸運動調(diào)節(jié)與實驗性急性呼吸衰竭【目的要求】1掌握家兔正常呼吸運動、肺通氣變化和血氣變化的觀察和測定方法。2掌握多因素(氣道狹窄、增大無效腔,缺氧,吸入高濃度CO2)對呼吸運動曲線變化的機制。3熟悉氣胸形成后,對呼吸運動與肺通氣的變化的影響。4了解肺水腫和急性呼吸衰竭模型的復制方法,呼吸中樞藥物應用的原則和血氣變化測定?!緝?nèi)容與項目】1觀察并記錄一段正常時呼吸、血壓曲線和血氣分析。2氣道狹窄;吸入氮氣、高濃度CO2,觀察和記錄刺激前后各通道的波形變化和黏膜顏色。3氣道
13、延長,觀察和記錄刺激前后各通道的波形變化。4從耳緣靜脈快速注射3%乳酸1ml,觀察和記錄刺激前后各通道的波形變化, 用堿性藥物糾正酸中毒。5通過給動物注入NaHCO3復制代謝性堿中毒,觀察和記錄呼吸、血壓和血氣指標的變化。用酸性藥物糾正堿中毒6開放性氣胸、張力性氣胸,觀察和記錄各通道的波形變化、血氣分析和黏膜顏色改變。7靜脈快速注入大量生理鹽水(油酸/葡萄糖),之后將腎上腺素緩慢靜脈推注復制實驗性肺水腫。觀察和記錄各通道的波形變化、血氣分析和黏膜顏色改變。呼吸衰竭出現(xiàn)后,靜脈內(nèi)注射呼吸中樞興奮藥,觀察和記錄各通道的波形變化、血氣分析和黏膜顏色改變?!窘虒W方法】動物實驗、學生操作、課堂討論、實驗
14、報告。【教學時數(shù)】5學時。實驗十一 生理與藥物因素對尿液生成的影響【目的要求】1掌握生理性影響尿生成的各種因素,并分析其作用機制。2掌握非生理性因素對動脈血壓和尿生成量的影響。3熟悉輸尿管插管和尿比重、尿液成分分析的方法?!緝?nèi)容與項目】1觀察并同時記錄正常動脈血壓,每分鐘的尿液流量和尿比重。2耳緣靜脈迅速注射37的生理鹽水20ml,記錄尿流量和尿比重的變化。 3耳緣靜脈注射1:10,000去甲腎上腺素0.10.2ml,記錄尿流量的變化。4耳緣靜脈注射葡萄糖,進行尿糖定性試驗和尿比重測定。5靜脈注射酚紅溶液,記錄從開始注射酚紅到尿中排出酚紅所需要的時間。6靜脈注射垂體后葉素24單位。觀察和記錄動
15、脈血壓和每分鐘尿流量的變化。7耳緣靜脈注射速尿5ml/kg,記錄注射速尿前后的血壓和尿流量變化。8結(jié)扎左側(cè)迷走神經(jīng),靠近中樞端剪斷,用刺激保護電極刺激迷走神經(jīng)的外周端,觀察和記錄動脈血壓和每分鐘尿流量的變化。9耳緣靜脈注射慶大霉素4.5ml/kg(4500U/kg),記錄注射慶大霉素前后的血壓和尿流量變化,特別注意肌張力和呼吸等表現(xiàn)。10從動脈插管的側(cè)管放出20ml的血液,觀察和記錄動脈血壓和每分鐘尿流量的變化?!窘虒W方法】動物實驗、學生操作、課堂討論、實驗報告?!窘虒W時數(shù)】5學時。實驗十二 消化道運動功能的擴展性自主設計實驗【目的要求】1通過學生自主進行擴展性實驗設計并進行實踐操作,以掌握實
16、驗設計的基本原則,培養(yǎng)和提高獨立思考,分析解決問題的能力。 2設計實驗,在整體或離體組織分析辣椒素等食物或植物藥物成份對胃腸運動功能的影響及其機制3在實驗過程中,觀察消化道動力的各種變化,分析和掌握其發(fā)生的主要原因和機制?!緝?nèi)容與項目】1立題:以實驗小組為單位,集體醞釀、討論確立實驗實施方案。2復制消化道動力實驗模型。3按實驗設計方案完成實驗操作步驟和指標觀察。4對實驗中出現(xiàn)的各種觀察指標變化進行分析,探討其變化的發(fā)生機制?!窘虒W方法】擴展性動物實驗操作、多媒體匯報實驗結(jié)果與分析、答辯、實驗報告。【教學時數(shù)】10學時。實驗十三 潑尼松龍和阿司匹林的辨別及藥效測定【目的要求】1 掌握疼痛和抗炎藥
17、效的測定。2 熟悉甾體類和非甾體類抗炎藥物的鑒別。3 了解實驗設計的基本原理及統(tǒng)計方法?!緝?nèi)容與項目】1光電致痛法:確定用藥前的基礎痛閾值。腹腔注射潑尼松龍注射液、阿司匹林、等容量生理鹽水,觀察用藥前后痛閾的變化。2鼠耳腫脹致炎法:將小鼠腹腔注射潑尼松龍注射液、阿司匹林、等容量生理鹽水后,復制炎性水腫,觀察用藥前后腫脹度變化?!緦嶒瀯游铩啃“资螅w重1822 g?!舅幤放c器材】0.125%潑尼松龍注射液、1.5%阿司匹林、生理鹽水、巴豆油(內(nèi)含2%巴豆油、20%無水乙醇、5%蒸餾水和73%乙醚)、苦味酸。剪刀、鑷子、注射器1 ml×3、5號針頭×3、鼠瓶×2、測痛
18、儀、9 mm打孔器、天平。【實驗步驟】1給藥方法:0.125%潑尼松龍注射液0.1 ml/10g、1.5%阿司匹林0.1 ml/10g、等容量生理鹽水均腹腔注射。2光電致痛法:將小鼠置入鼠瓶內(nèi),拉出尾巴,塞緊瓶蓋,將鼠尾平放入光輻射熱測痛儀溝槽中,待鼠安靜不動后,按下測痛儀開關(guān),光照鼠尾下1/3處,記錄從光照開始到甩尾的時間作為痛閾值。每只小鼠測痛閾2次(間隔12min),取其均值作為用藥前的基礎痛閾值。挑選痛閾值在520秒的小鼠,腹腔注射藥物或生理鹽水,15分鐘后用同樣方式光照2次,取其平均值,觀察用藥前后痛閾的變化。正常痛閾 <5秒或 >20秒者,剔除不用。用藥后痛閾 >
19、30秒者,以30秒計算。3鼠耳腫脹致炎法:將小鼠腹腔注射藥物或生理鹽水,1h后各小鼠左側(cè)耳殼前后兩面均勻涂抹巴豆油合劑致炎0.03 ml/只,另側(cè)耳作對照,記錄時間。1h后,將小鼠脫頸致死,沿耳廓基線剪下兩耳,用打孔器于同一部位分別各打一個耳片并稱重。將致炎一側(cè)耳片重量減去對照一側(cè)耳片重量即為腫脹度,觀察用藥前后腫脹度變化。涂致炎劑的部位與取下的耳片相吻合。打孔器應鋒利。【教學方法】動物實驗、學生操作、繪圖計算、課堂討論、實驗報告?!窘虒W時數(shù)】4學時。實驗十四 有機磷酸酯類中毒、解救及膽堿酯酶活性測定【目的要求】1掌握動物有機磷酸酯類的中毒癥狀及阿托品和解磷定的解救作用。2從整體水平和分子水平
20、掌握內(nèi)源性神經(jīng)遞質(zhì)-乙酰膽堿對M膽堿受體的作用。3熟悉膽堿酯酶活力的測定方法以及酶活力的表示方法。4了解實驗動物在中毒前后及用不同藥解救膽堿酯酶活力的變化規(guī)律?!緝?nèi)容與項目】1家兔正常呼吸、瞳孔、吐液分泌、尿糞排泄、肌震顫、血壓等生理體征觀察與記錄,血樣集與膽堿酯酶活力測定。2復制動物有機磷酸酯類的中毒模型,觀察與記錄中毒的癥狀與體征。3之后,立即靜脈注射阿托品和碘解磷定,觀察并記錄中毒癥狀有何變化。4血液標本采集。5膽堿酯酶活力測定。【教學方法】動物實驗、學生操作、課堂討論、實驗報告?!窘虒W時數(shù)】4學時。實驗十五 藥代動力學參數(shù)測定【目的要求】 1觀察與掌握藥物對膽堿M受體激動作用和競爭性拮
21、抗作用。2. 理解受體的親和力、內(nèi)在活性概念以及受體動力學參數(shù)Kd、pD2、Emax及pA2的計算和意義?!緝?nèi)容與項目】1在器官浴槽內(nèi)懸掛離體空腸段,并與張力換能器相連。給離體空腸段施加預張力1g。2離體空腸段在器官浴槽內(nèi)孵育30分鐘。期間每隔15分鐘洗滌一次,連續(xù)3次。2待空腸平滑肌張力穩(wěn)定后,在器官浴槽內(nèi)依次從低濃度到高濃度加入卡巴膽堿(10-6、10-5、10-4、10-3、10-2 mol/L),觀察和記錄離體空腸平滑肌的變化。3洗滌標本3次,每15分鐘一次。4待空腸平滑肌張力恢復到基線水平后,加入終濃度為3´10-7 mol/L的阿托品,觀察和記錄20分鐘離體空腸平滑肌的變
22、化。5待空腸平滑肌張力穩(wěn)定后,再次從低濃度到高濃度依次加入卡巴膽堿,觀察和記錄其對空腸平滑肌的影響。6. 比較在加入阿托品前和后空腸平滑肌對卡巴膽堿的反應?!窘虒W方法】離體器官實驗、學生操作、實驗報告。【教學時數(shù)】4學時。實驗十六 生理與病理狀態(tài)的半數(shù)致死量測定(LD50)【目的要求】1掌握藥物半數(shù)致死量(LD50)的測定原理及基本實驗設計。2掌握半數(shù)致死量測定的基本方法。3了解創(chuàng)新藥臨床前藥理、毒理研究的基本要求?!緝?nèi)容與項目】LD50的測定(簡化機率單位法)1半數(shù)致死量的概念和意義。2動物的分組方法:取小白鼠20只,稱重,隨機分為2個不同狀態(tài)組,每組10只。3其中1組動物分別注射腎上腺素為病理狀態(tài)組。4再將每組動物隨機分為5個劑量組,每組2只。5各組分別腹腔注射不同劑量的1%鹽酸普魯卡因溶液,觀察并記錄給藥后動物反應(中毒癥狀、外觀、行為、呼吸、腺體分泌、大小便等情況)
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