高中生物選修一復(fù)習(xí)

1、一、果酒制作一、果酒制作1 1、酵母菌：真菌、出芽生殖、兼性厭氧、酵母菌：真菌、出芽生殖、兼性厭氧、2020度度3 3、流程：選果、流程：選果沖洗沖洗榨汁榨汁發(fā)酵發(fā)酵酒精酒精2 2、原理：、原理：C6H12O62C2H5OH+2CO2+2ATPC6H12O62C2H5OH+2CO2+2ATP4 4、檢驗(yàn)：酸性條件酒精遇重鉻酸鉀呈灰綠色、檢驗(yàn)：酸性條件酒精遇重鉻酸鉀呈灰綠色例：有釀制葡萄酒的兩個(gè)簡(jiǎn)易裝置，請(qǐng)分析答復(fù)例：有釀制葡萄酒的兩個(gè)簡(jiǎn)易裝置，請(qǐng)分析答復(fù)1果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌在有氧無氧果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌在有氧無氧條件下都能生存，所以，它屬于條件下都能生存，所以，它屬于_微

2、生物。微生物。2在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，酵母菌的來源在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，酵母菌的來源是是 。3制作果酒，需將溫度嚴(yán)格控制在制作果酒，需將溫度嚴(yán)格控制在_。制。制作果酒后制果醋，應(yīng)將溫度控制在作果酒后制果醋，應(yīng)將溫度控制在_。 4葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留有大約1/3的空的空間，這是因?yàn)殚g，這是因?yàn)開。既為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，又防止發(fā)酵旺盛時(shí)汁液溢出既為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣，又防止發(fā)酵旺盛時(shí)汁液溢出兼性厭氧型兼性厭氧型附著在葡萄皮上的野生型酵母菌附著在葡萄皮上的野生型酵母菌 182530355甲裝置中，甲裝置中，A液體是液體是_，NaHCO3

3、溶液的作用溶液的作用是是 ；葡萄汁葡萄汁假設(shè)用乙裝置，在發(fā)酵過程中，必須進(jìn)行的操作假設(shè)用乙裝置，在發(fā)酵過程中，必須進(jìn)行的操作是是 。與乙裝置相。與乙裝置相比，甲裝置的優(yōu)點(diǎn)是比，甲裝置的優(yōu)點(diǎn)是 。6果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用 來檢來檢驗(yàn)。在酸性條件下，該試劑與酒精反響呈現(xiàn)驗(yàn)。在酸性條件下，該試劑與酒精反響呈現(xiàn) 。在果酒釀造過程中，如果果汁滅菌不嚴(yán)格，含有醋在果酒釀造過程中，如果果汁滅菌不嚴(yán)格，含有醋酸桿菌酸桿菌 ，在酒精發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸桿菌能否將果汁，在酒精發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸桿菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸中的糖發(fā)酵為醋酸? 。灰綠色灰綠色不能不能吸收酵母菌酒精發(fā)酵

4、產(chǎn)生的吸收酵母菌酒精發(fā)酵產(chǎn)生的CO2每隔每隔12小時(shí)左右一定的時(shí)間將瓶蓋擰松一次小時(shí)左右一定的時(shí)間將瓶蓋擰松一次既能及時(shí)吸收發(fā)酵產(chǎn)生的既能及時(shí)吸收發(fā)酵產(chǎn)生的CO2，又能減少被雜菌污染的時(shí)機(jī)，又能減少被雜菌污染的時(shí)機(jī)重鉻酸鉀重鉻酸鉀二、果醋制作二、果醋制作1 1、醋酸菌：原核、分裂生殖、異養(yǎng)需氧、醋酸菌：原核、分裂生殖、異養(yǎng)需氧、3030度度3 3、流程：選果榨汁、流程：選果榨汁酒精發(fā)酵酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵醋酸發(fā)酵2 2、原理：、原理： 2 2C6H12O62C2H5OH+2CO2C6H12O62C2H5OH+2CO21 1C6H12O6+2O22CH3COOH+2CO2+H2OC6H12O6+2O

5、22CH3COOH+2CO2+H2OC C2 2H H5 5OH+OOH+O2 2CHCH3 3COOH+HCOOH+H2 2O O三、腐乳制作三、腐乳制作1 1、毛霉：真菌、孢子生殖、異養(yǎng)需氧、毛霉：真菌、孢子生殖、異養(yǎng)需氧、1818度度3 3、流程：、流程：豆腐長(zhǎng)毛豆腐長(zhǎng)毛加鹽腌制加鹽腌制瓶裝鹵湯瓶裝鹵湯密封腌制密封腌制 2 2、原理：毛霉的、原理：毛霉的蛋白酶蛋白酶、脂肪酶脂肪酶分解豆腐分解豆腐 小分子肽、氨基酸小分子肽、氨基酸、甘油、脂肪酸甘油、脂肪酸4 4、鹽與酒精：抑制微生物生長(zhǎng)、鹽與酒精：抑制微生物生長(zhǎng) 1 1腐乳制作有多種微生物參與，其中起主要腐乳制作有多種微生物參與，其中起主

6、要作用的是。作用的是。 2 2豆腐發(fā)酵主要利用了微生物產(chǎn)生的，通豆腐發(fā)酵主要利用了微生物產(chǎn)生的，通過發(fā)酵，豆腐中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類，且更易于消化和過發(fā)酵，豆腐中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類，且更易于消化和吸收。吸收。 3 3在腐乳制作過程中，抑制微生物的物質(zhì)有在腐乳制作過程中，抑制微生物的物質(zhì)有鹽、鹽、 、等。、等。 4 4含水量為左右的豆腐適于制作腐乳，假含水量為左右的豆腐適于制作腐乳，假設(shè)你完成了腐乳制作，可以從等方面評(píng)價(jià)乳腐的質(zhì)設(shè)你完成了腐乳制作，可以從等方面評(píng)價(jià)乳腐的質(zhì)量。量。毛霉毛霉 蛋白酶等酶類蛋白酶等酶類 增多增多 酒酒 香辛料香辛料 7070 色澤、口味、塊形等色澤、口味、塊形等實(shí)例：就腐乳制作

7、答復(fù)以下問題：實(shí)例：就腐乳制作答復(fù)以下問題：四、泡菜制作四、泡菜制作1 1、乳酸菌：原核、分裂生殖、異養(yǎng)厭氧、乳酸菌：原核、分裂生殖、異養(yǎng)厭氧3 3、流程：菜葉、鹽水、裝壇、密閉、流程：菜葉、鹽水、裝壇、密閉2 2、原理：、原理：C C6 6H H1212O O6 62C2C3 3H H6 6O O3 3+2ATP+2ATP4 4、測(cè)定亞硝酸鹽：、測(cè)定亞硝酸鹽：NONO2 2- -+ +對(duì)氨基苯磺酸對(duì)氨基苯磺酸玫瑰紅玫瑰紅專題專題2：微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用：微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用如下圖的接種方法為如下圖的接種方法為 ，在此接種過程中接種環(huán)在火焰上灼燒在此接種過程中接種環(huán)在火焰上灼燒 次。次。一、培養(yǎng)基

8、：一、培養(yǎng)基：3 3、種類：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基瓊脂、種類：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基瓊脂4 4、選擇培養(yǎng)基：、選擇培養(yǎng)基： 青霉素培養(yǎng)基：殺細(xì)菌、留真菌青霉素培養(yǎng)基：殺細(xì)菌、留真菌1 1、概念：微生物生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、概念：微生物生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)2 2、成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源、成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源二、無菌技術(shù)二、無菌技術(shù)1 1、消毒：溫和方法殺死外表局部有害微生物、消毒：溫和方法殺死外表局部有害微生物巴氏消毒、煮沸、藥劑、如：巴氏消毒、煮沸、藥劑、如：75%75%酒精、酒精、紫外線紫外線2 2、滅菌：強(qiáng)烈方法殺死一切微生物、孢子和芽孢、滅菌：強(qiáng)烈方法殺死一切微生物、孢子和芽孢 1 1

9、灼燒滅菌：接種環(huán)、試管口灼燒滅菌：接種環(huán)、試管口 2 2干熱滅菌：玻璃器皿、金屬用具干熱滅菌：玻璃器皿、金屬用具 3 3高壓蒸氣滅菌：培養(yǎng)基、無菌水高壓蒸氣滅菌：培養(yǎng)基、無菌水三、微生物培養(yǎng)技術(shù)三、微生物培養(yǎng)技術(shù)1 1、步驟：、步驟：1 1配制培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基2 2滅菌：高壓蒸氣滅菌滅菌：高壓蒸氣滅菌3 3倒平板：把培養(yǎng)基分裝培養(yǎng)皿倒平板：把培養(yǎng)基分裝培養(yǎng)皿4 4接種：分散菌種、形成菌落接種：分散菌種、形成菌落 方法：平板劃線法、稀釋涂布平板法方法：平板劃線法、稀釋涂布平板法 2 2、應(yīng)用：、應(yīng)用：(1)(1)土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離和計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離和計(jì)數(shù) 1 1選擇培養(yǎng)基：

10、氮源選擇培養(yǎng)基：氮源-尿素尿素 2 2步驟：土壤溶液步驟：土壤溶液稀釋稀釋 接種接種菌落計(jì)菌落計(jì)數(shù)數(shù) 2 2土壤中分解纖維素的微生物的別離土壤中分解纖維素的微生物的別離 1 1選擇培養(yǎng)基：碳源選擇培養(yǎng)基：碳源-纖維素纖維素 2 2原理：纖維素原理：纖維素 纖維二糖纖維二糖 葡葡萄糖萄糖 C1 C1酶、酶、CXCX酶酶 葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶 纖維素纖維素+ +剛果紅剛果紅紅色物紅色物纖分解纖分解透明圈透明圈 4 4轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí)，常轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時(shí)，常 的方法接種的方法接種. .5 5以下材料或用具：培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿，玻棒、試管、錐以下材料或用具：培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿，玻棒、試

11、管、錐形瓶和吸管，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。其中需形瓶和吸管，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。其中需要滅菌的是：要滅菌的是： ；需要消毒的是：；需要消毒的是： 。填序號(hào)。填序號(hào)6 6在進(jìn)行別離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在進(jìn)行別離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150150個(gè)個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約5050個(gè)菌落。個(gè)菌落。A A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有有 填序號(hào)填序號(hào)由于土樣不同由于土樣不同 由于培養(yǎng)基污染由于培養(yǎng)基污染 由于操作失誤由于操作失誤 沒有設(shè)置對(duì)照沒有設(shè)置對(duì)照7 7實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行

12、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行 處理后，才能倒掉。處理后，才能倒掉。1右表所示的培養(yǎng)基不能用于植物組織培養(yǎng)的右表所示的培養(yǎng)基不能用于植物組織培養(yǎng)的理由是理由是 。2培養(yǎng)基中參加尿素的目的是篩選培養(yǎng)基中參加尿素的目的是篩選 。 3“目的菌生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來自目的菌生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的培養(yǎng)基中的 和和 ，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是養(yǎng)，原因是 。缺少植物激素缺少植物激素 目的菌目的菌尿素尿素葡萄糖葡萄糖為目的菌提供氧氣為目的菌提供氧氣 稀釋涂布平板法或平板劃線法稀釋涂布平板法或平板劃線法和和 滅菌滅菌 實(shí)例：分解尿素的細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)實(shí)例：分解尿素的細(xì)菌的

13、別離與計(jì)數(shù)一、菊花組織的培養(yǎng)一、菊花組織的培養(yǎng)1 1、原理：植物細(xì)胞的全能性、原理：植物細(xì)胞的全能性2 2、步驟：、步驟：1 1制備制備MSMS固體培養(yǎng)基滅菌固體培養(yǎng)基滅菌 無機(jī)鹽、維生素、蔗糖、激無機(jī)鹽、維生素、蔗糖、激素素 2 2外植體消毒未開花新生側(cè)外植體消毒未開花新生側(cè)枝枝 3 3接種、培養(yǎng)、移栽接種、培養(yǎng)、移栽 脫分化脫分化-愈傷組織愈傷組織-再分化再分化-從芽從芽-誘導(dǎo)誘導(dǎo)生根生根 PH5.8 PH5.8、溫度、溫度18-2218-22、每日光照、每日光照12h12h專題專題3 植物的組織培養(yǎng)技術(shù)植物的組織培養(yǎng)技術(shù)二、月季花藥培養(yǎng)二、月季花藥培養(yǎng)1 1、花藥選?。撼趸ㄆ凇⑽撮_放花蕾

14、、單核期、花藥選取：初花期、未開放花蕾、單核期2 2、培養(yǎng)過程：、培養(yǎng)過程： 花粉脫分化花粉脫分化愈傷組織愈傷組織 脫分化脫分化 再分化再分化 胚狀體分化胚狀體分化 叢芽叢芽誘導(dǎo)生根誘導(dǎo)生根3 3、花粉發(fā)育檢查：、花粉發(fā)育檢查：1 1醋酸洋紅法細(xì)胞核紅色醋酸洋紅法細(xì)胞核紅色2 2焙花青焙花青- -鉻礬法細(xì)胞核藍(lán)黑色鉻礬法細(xì)胞核藍(lán)黑色接種和培養(yǎng)接種和培養(yǎng)植物體植物體選取水稻花藥選取水稻花藥對(duì)花蕾消毒對(duì)花蕾消毒實(shí)例：就水稻花藥培養(yǎng)的步驟，請(qǐng)答復(fù)以下問題：實(shí)例：就水稻花藥培養(yǎng)的步驟，請(qǐng)答復(fù)以下問題： 1. 1.選取的水稻花藥應(yīng)為選取的水稻花藥應(yīng)為期期，此時(shí)細(xì)胞核由中央移向細(xì)，此時(shí)細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞

15、一側(cè)，花藥培養(yǎng)成功率最高胞一側(cè)，花藥培養(yǎng)成功率最高 2.2.通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑：一種通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體植株一般有兩種途徑：一種是花粉通過是花粉通過階段階段發(fā)育為植株，另一種是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先發(fā)育為植株，另一種是在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成形成再將其誘導(dǎo)分化成植株再將其誘導(dǎo)分化成植株 3.3.試管苗形成過程中，必須從培養(yǎng)基中獲得無機(jī)鹽或礦試管苗形成過程中，必須從培養(yǎng)基中獲得無機(jī)鹽或礦質(zhì)元素和小分子有機(jī)物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂質(zhì)元素和小分子有機(jī)物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有和生長(zhǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)有和和兩類激素兩類激素單核胚狀體愈傷組織細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素單核

16、胚狀體愈傷組織細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素一、果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用一、果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用1 1、作用：分解細(xì)胞壁、胞間層的果膠，形成半乳糖醛酸、作用：分解細(xì)胞壁、胞間層的果膠，形成半乳糖醛酸2 2、種類：、種類：多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶3 3、水果泥、水果泥+ +果膠酶果膠酶保溫混合保溫混合過濾記錄果汁量過濾記錄果汁量二、加酶洗衣粉的洗滌效果二、加酶洗衣粉的洗滌效果1 1、種類：堿性蛋白酶、堿性脂肪酶、淀粉酶、纖維、種類：堿性蛋白酶、堿性脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶素酶2 2、作用：分解污漬蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉、纖維素、作用：分解污漬蛋白質(zhì)、脂肪、淀

17、粉、纖維素3 3、酶制劑：用特殊化學(xué)物質(zhì)包裹酶，使之耐酸堿、酶制劑：用特殊化學(xué)物質(zhì)包裹酶，使之耐酸堿、耐高耐高 溫、忍受外表活性劑溫、忍受外表活性劑專題專題4：酶的應(yīng)用：酶的應(yīng)用三、固定化酶三、固定化酶1 1、原理：把酶固定在不溶水的載體上，、原理：把酶固定在不溶水的載體上，易于催化回收、重復(fù)使用易于催化回收、重復(fù)使用2 2、高果糖漿生產(chǎn)：、高果糖漿生產(chǎn)：1 1原理：葡萄糖原理：葡萄糖果糖葡萄糖異構(gòu)果糖葡萄糖異構(gòu)酶酶2 2固定化酶：酶固定在載體上、裝入固定化酶：酶固定在載體上、裝入反響柱反響柱3 3生產(chǎn)過程：上端注入葡萄糖，柱內(nèi)生產(chǎn)過程：上端注入葡萄糖，柱內(nèi)酶催化，下端生產(chǎn)果糖漿酶催化，下端生

18、產(chǎn)果糖漿固定化酶和固定化細(xì)胞固定化酶和固定化細(xì)胞是利用理化方是利用理化方法，把酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)發(fā)法，把酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)發(fā)揮作用的技術(shù)。揮作用的技術(shù)。四、固定化細(xì)胞四、固定化細(xì)胞2 2、方法：、方法：1 1包埋法：包埋在多孔載體里包埋法：包埋在多孔載體里2 2化學(xué)結(jié)合法：結(jié)合到載體上化學(xué)結(jié)合法：結(jié)合到載體上3 3物理吸附法：吸附到載體外表物理吸附法：吸附到載體外表1、概念：、概念： 3 3、固定化酵母細(xì)胞、固定化酵母細(xì)胞1 1酵母細(xì)胞活化：酵母細(xì)胞活化：1g1g干酵母干酵母10ml10ml水水2 2配制配制CaCl2CaCl2溶液：溶液：0.05M0.05M3 3配海藻酸鈉溶液：

19、配海藻酸鈉溶液：0.7g0.7g海藻酸鈉海藻酸鈉10ml10ml水水4 4海液與酵母細(xì)胞混合成海液與酵母細(xì)胞混合成A A液吸入注射器液吸入注射器5 5固定化酵母細(xì)胞：把固定化酵母細(xì)胞：把A A液滴入液滴入CaCl2CaCl2形成形成凝膠珠凝膠珠6 6沖洗凝膠珠蒸餾水沖洗凝膠珠蒸餾水7 7酒精發(fā)酵：凝膠珠酒精發(fā)酵：凝膠珠+ +葡萄糖液葡萄糖液酒精酒精2525度度專題專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù) DNADNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定一、實(shí)驗(yàn)原理一、實(shí)驗(yàn)原理 1.1.血細(xì)胞在蒸餾水中會(huì)滲透吸水過度而導(dǎo)致細(xì)胞膜和細(xì)血細(xì)胞在蒸餾水中會(huì)滲透吸水過度而導(dǎo)致細(xì)胞膜和細(xì)胞核膜的破裂。利用此特性可得

20、到含有胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液。的溶液。2.2.DNA在氯化鈉溶液中的溶解度，是隨著氯化鈉的濃度在氯化鈉溶液中的溶解度，是隨著氯化鈉的濃度的變化而改變的。的變化而改變的。DNA在在物質(zhì)的量濃度為物質(zhì)的量濃度為0.14 molL的氯化鈉溶液中的溶解度最低，的氯化鈉溶液中的溶解度最低，利用這一原理，可以使利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出析出。 3.DNA3.DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些物質(zhì)那么可以溶不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些物質(zhì)那么可以溶于酒精。利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少于酒精。利用這一原理，可以進(jìn)一步提取出含雜

21、質(zhì)較少的的DNADNA。 4.DNA4.DNA遇二苯胺沸水浴會(huì)變成藍(lán)色，因此，二苯胺可遇二苯胺沸水浴會(huì)變成藍(lán)色，因此，二苯胺可以作為鑒定以作為鑒定DNADNA的試劑。的試劑。 二、二、PCRPCR技術(shù)技術(shù)1 1、反響體系：、反響體系：1 1模板、原料、酶、模板、原料、酶、ATPATP、緩沖液、緩沖液 2 2耐高溫的耐高溫的DNADNA聚合酶聚合酶TaqTaq酶酶3 3引物：一小段引物：一小段DNADNA或或RNARNA2 2、過程：、過程：1 1變性：變性：95DNA95DNA解旋解旋2 2復(fù)性：復(fù)性：5555引物與模板配對(duì)引物與模板配對(duì)3 3延伸：延伸：7272合成子鏈合成子鏈例：例：PCR

22、PCR技術(shù)技術(shù)( (多聚酶鏈?zhǔn)椒错懚嗑勖告準(zhǔn)椒错? ) 在在DNADNA半保存復(fù)制的前提下，半保存復(fù)制的前提下，利用熱變性原理，在試管中進(jìn)行利用熱變性原理，在試管中進(jìn)行DNADNA的人工復(fù)制。很短的時(shí)的人工復(fù)制。很短的時(shí)間內(nèi)，將間內(nèi)，將DNADNA大量擴(kuò)增，使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受大量擴(kuò)增，使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。限于活的生物體。(1)PCR(1)PCR每次循環(huán)可分為每次循環(huán)可分為 、 、 三個(gè)步驟。三個(gè)步驟。(2)(2)當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板 端結(jié)合，在端結(jié)合，在DNADNA聚合酶聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成兩的作用下，引物沿

23、模板延伸，最終合成兩DNADNA分子，此過程分子，此過程中原料是中原料是 ，遵循的原那么是，遵循的原那么是 。(3)PCR(3)PCR技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、ATPATP、酶外以至、酶外以至少還需要三個(gè)條件，即：液體環(huán)境、適宜的少還需要三個(gè)條件，即：液體環(huán)境、適宜的 、 ，前者由前者由PCRPCR儀自動(dòng)調(diào)控，后者那么靠?jī)x自動(dòng)調(diào)控，后者那么靠 維持。維持。(4)DNA(4)DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因的復(fù)制需要引物，其主要原因是是 。變性復(fù)性延伸3堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么 四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸溫度溫度酸堿度酸堿度緩沖液緩沖液DNA聚

24、合酶只能從聚合酶只能從3端延伸端延伸DNA鏈鏈三、血紅蛋白的提取和別離三、血紅蛋白的提取和別離1 1、提?。?、提取： 1 1紅細(xì)胞的洗滌：生理鹽水紅細(xì)胞的洗滌：生理鹽水-除雜蛋除雜蛋白白 2 2血紅蛋白的釋放：蒸餾水血紅蛋白的釋放：蒸餾水-40%-40%甲苯甲苯 3 3別離血紅蛋白溶液：離心分層別離血紅蛋白溶液：離心分層 第第3 3層紅色透明層紅色透明液體液體 4 4透析：磷酸緩沖液除雜離子小分透析：磷酸緩沖液除雜離子小分子子 維持血紅蛋白正常特性維持血紅蛋白正常特性2 2、別離：、別離：1 1凝膠色譜法凝膠色譜法原理：根據(jù)分子量大小別離蛋白質(zhì)原理：根據(jù)分子量大小別離蛋白質(zhì) 不同蛋白質(zhì)通過多孔

25、凝膠通道時(shí)：不同蛋白質(zhì)通過多孔凝膠通道時(shí)： 大分子路程短、流動(dòng)快大分子路程短、流動(dòng)快先收集先收集 小分子路程長(zhǎng)、流動(dòng)慢小分子路程長(zhǎng)、流動(dòng)慢后收集后收集 2 2電泳法電泳法 原理：根據(jù)帶電性質(zhì)、分子大小形狀不同，電原理：根據(jù)帶電性質(zhì)、分子大小形狀不同，電 場(chǎng)下遷移速度不同，別離蛋白質(zhì)場(chǎng)下遷移速度不同，別離蛋白質(zhì) 電荷性質(zhì)電荷性質(zhì)- -移動(dòng)方向、電荷量移動(dòng)方向、電荷量- -移動(dòng)速度移動(dòng)速度 分子大小分子大小- -阻力大小阻力大小(4)洗脫用的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體洗脫用的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體 填填“相相同或同或“不同不同)洗脫時(shí)洗脫時(shí)對(duì)洗脫液的流速要求是對(duì)洗脫液的流速要求是(3)裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是是 。(2)自己制作凝膠色譜柱時(shí)。在色譜柱底部自己制作凝膠色譜柱時(shí)。在色譜柱底部d位位置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由 替代。替代。a相對(duì)分子質(zhì)量較大，無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快尼龍網(wǎng)和尼龍紗氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序降低別離效果相同保持穩(wěn)定實(shí)例：凝膠色譜技術(shù)，據(jù)圖答復(fù)以下問題：實(shí)例：凝膠色譜技術(shù)，據(jù)圖答復(fù)以下問題：(1)a、b均為蛋白質(zhì)分子，其中先