第五章農(nóng)藥登記殘留試驗(yàn)

1、第第 五五 章章農(nóng)農(nóng) 藥藥 登登 記記 殘殘 留留 試試 驗(yàn)驗(yàn) 生產(chǎn)（包括原藥生產(chǎn)、制劑加工和分裝）農(nóng)藥和進(jìn)口農(nóng)藥，生產(chǎn)（包括原藥生產(chǎn)、制劑加工和分裝）農(nóng)藥和進(jìn)口農(nóng)藥，必須進(jìn)行登記必須進(jìn)行登記 。 按農(nóng)藥登記的主管部門分類，目前世界上農(nóng)藥管理模式主按農(nóng)藥登記的主管部門分類，目前世界上農(nóng)藥管理模式主要分為三種：要分為三種： 第一種是以美國為代表的環(huán)保部門主管模式；第一種是以美國為代表的環(huán)保部門主管模式； 第二種是以日本、德國等為代表的農(nóng)業(yè)部門主管模式；第二種是以日本、德國等為代表的農(nóng)業(yè)部門主管模式； 第三種是以加拿大為代表的衛(wèi)生部門主管模式。第三種是以加拿大為代表的衛(wèi)生部門主管模式。 。農(nóng)藥殘留

2、田間試驗(yàn)農(nóng)藥殘留田間試驗(yàn)是為農(nóng)藥登記和制定農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥最大殘是為農(nóng)藥登記和制定農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)或制定農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則，提供殘留留限量標(biāo)準(zhǔn)或制定農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則，提供殘留資料而設(shè)計(jì)進(jìn)行的室外（田間或模擬）試驗(yàn)。資料而設(shè)計(jì)進(jìn)行的室外（田間或模擬）試驗(yàn)。 目的：根據(jù)供試農(nóng)藥的實(shí)際使用情況，按照殘留根據(jù)供試農(nóng)藥的實(shí)際使用情況，按照殘留試驗(yàn)要求設(shè)計(jì)試驗(yàn)，得到農(nóng)藥在農(nóng)作物、土壤、試驗(yàn)要求設(shè)計(jì)試驗(yàn)，得到農(nóng)藥在農(nóng)作物、土壤、水中的消解動態(tài)和作物收獲時的最終殘留狀況。水中的消解動態(tài)和作物收獲時的最終殘留狀況。農(nóng)藥殘留動態(tài)農(nóng)藥殘留動態(tài) 是指施藥后殘留農(nóng)藥逐步降解和消失的過程。是指施藥后殘留農(nóng)藥逐步降解

3、和消失的過程。 以殘留動態(tài)曲線來表征：以殘留動態(tài)曲線來表征： 為了考察作物和土壤中的農(nóng)藥，隨著施藥后天數(shù)為了考察作物和土壤中的農(nóng)藥，隨著施藥后天數(shù)的增加而不斷降解直至消失的過程，在施藥后不的增加而不斷降解直至消失的過程，在施藥后不同時間采樣測定其殘留量，以農(nóng)藥殘留量為縱坐同時間采樣測定其殘留量，以農(nóng)藥殘留量為縱坐標(biāo)，施藥后的天數(shù)為橫坐標(biāo)作圖，得到農(nóng)藥殘留標(biāo)，施藥后的天數(shù)為橫坐標(biāo)作圖，得到農(nóng)藥殘留動態(tài)曲線。動態(tài)曲線。 從曲線可以看出，一般農(nóng)藥消解有兩種情況：從曲線可以看出，一般農(nóng)藥消解有兩種情況：（1）迅速消解）迅速消解大多數(shù)易揮發(fā)、淋溶、光解的農(nóng)藥消解快，如辛硫大多數(shù)易揮發(fā)、淋溶、光解的農(nóng)藥消

4、解快，如辛硫磷，殺螟硫磷。磷，殺螟硫磷。（2）緩慢消解階段）緩慢消解階段不易揮發(fā)、降解，有一定脂溶性或內(nèi)吸滲透性的，不易揮發(fā)、降解，有一定脂溶性或內(nèi)吸滲透性的，消解緩慢，如殺蟲脒，消解緩慢，如殺蟲脒，DDT等。等。是評價農(nóng)藥對環(huán)境污染的指標(biāo)之一。是評價農(nóng)藥對環(huán)境污染的指標(biāo)之一。農(nóng)藥在漬水土壤和非漬水土壤中的半衰期相差很農(nóng)藥在漬水土壤和非漬水土壤中的半衰期相差很大。大。半衰期的長短，不僅直接影響土壤中動植物和微半衰期的長短，不僅直接影響土壤中動植物和微生物的生長，還影響其從土壤中對大氣、水源及生物的生長，還影響其從土壤中對大氣、水源及作物的污染，對后茬作物的藥害。作物的污染，對后茬作物的藥害。是

5、農(nóng)藥在作物上殘效期和殘留期長短的指標(biāo)。是農(nóng)藥在作物上殘效期和殘留期長短的指標(biāo)。太短，會影響藥效，太長，會造成最終殘留。太短，會影響藥效，太長，會造成最終殘留。各種農(nóng)藥的持久性是有區(qū)別的，以有機(jī)磷為例：各種農(nóng)藥的持久性是有區(qū)別的，以有機(jī)磷為例：辛硫磷，辛硫磷，DDV-低殘留農(nóng)藥，低殘留農(nóng)藥，對硫磷對硫磷-殘留期較長，毒性大，殘留期較長，毒性大，樂果樂果-中等殘留中等殘留內(nèi)吸磷內(nèi)吸磷-內(nèi)吸，劇毒（或慢性毒性），殘留期內(nèi)吸，劇毒（或慢性毒性），殘留期長，已在茶葉中禁用。長，已在茶葉中禁用。 指在良好農(nóng)業(yè)生產(chǎn)規(guī)范指在良好農(nóng)業(yè)生產(chǎn)規(guī)范(GAP)(GAP)和良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范和良好實(shí)驗(yàn)室規(guī)范(GLP)(GLP

6、)或相似條件下，為獲取推薦使用的農(nóng)藥在可或相似條件下，為獲取推薦使用的農(nóng)藥在可食用食用( (或飼用或飼用) )初級農(nóng)產(chǎn)品和土壤中可能的最高殘初級農(nóng)產(chǎn)品和土壤中可能的最高殘留量，以及這些農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品、土壤留量，以及這些農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品、土壤( (或水或水) )中的中的消解動態(tài)而進(jìn)行的試驗(yàn)。消解動態(tài)而進(jìn)行的試驗(yàn)。殘留試驗(yàn)數(shù)據(jù)殘留試驗(yàn)數(shù)據(jù)是按照風(fēng)險分析原理制定是按照風(fēng)險分析原理制定農(nóng)藥殘留最大農(nóng)藥殘留最大殘留限量殘留限量(MRL)的三個基本依據(jù)之一的三個基本依據(jù)之一(其余兩個分別是其余兩個分別是毒理毒理學(xué)數(shù)據(jù)學(xué)數(shù)據(jù)危害認(rèn)定和危害特征描述危害認(rèn)定和危害特征描述和和膳食攝入數(shù)據(jù)膳食攝入數(shù)據(jù)膳食膳食暴露評估參

7、數(shù)之一暴露評估參數(shù)之一)。 因此對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全和食品安全意義重大，因?yàn)槎鄶?shù)因此對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全和食品安全意義重大，因?yàn)槎鄶?shù)發(fā)達(dá)國家要求農(nóng)藥登記的同時制定相應(yīng)農(nóng)產(chǎn)品（食品）中發(fā)達(dá)國家要求農(nóng)藥登記的同時制定相應(yīng)農(nóng)產(chǎn)品（食品）中最大殘留限量，因此殘留試驗(yàn)數(shù)據(jù)也是農(nóng)藥登記必不可少最大殘留限量，因此殘留試驗(yàn)數(shù)據(jù)也是農(nóng)藥登記必不可少的數(shù)據(jù)之一。的數(shù)據(jù)之一。 我國在上世紀(jì)我國在上世紀(jì)7070年代末、年代末、8080年代初，根據(jù)當(dāng)時年代初，根據(jù)當(dāng)時FAOFAO 推薦的規(guī)范殘留試驗(yàn)要求，制定了我國的推薦的規(guī)范殘留試驗(yàn)要求，制定了我國的農(nóng)藥殘農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則留試驗(yàn)準(zhǔn)則，又在，又在20042004年以部頒標(biāo)準(zhǔn)（年

8、以部頒標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 788-NY/T 788-20042004）的形式根據(jù)國際規(guī)范農(nóng)藥殘留試驗(yàn)要求對）的形式根據(jù)國際規(guī)范農(nóng)藥殘留試驗(yàn)要求對原有試驗(yàn)準(zhǔn)則進(jìn)行了修改，使我國的殘留試驗(yàn)要原有試驗(yàn)準(zhǔn)則進(jìn)行了修改，使我國的殘留試驗(yàn)要求達(dá)到或接近國際及發(fā)達(dá)國家要求，為下一步按求達(dá)到或接近國際及發(fā)達(dá)國家要求，為下一步按照照GLPGLP要求進(jìn)行殘留試驗(yàn)，打下了基礎(chǔ)。要求進(jìn)行殘留試驗(yàn)，打下了基礎(chǔ)。4.3.1 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì) 殘留試驗(yàn)背景資料調(diào)查殘留試驗(yàn)背景資料調(diào)查 試驗(yàn)地點(diǎn)試驗(yàn)地點(diǎn) 選擇具有代表性的、能覆蓋主要種植區(qū)、種植方式、土壤選擇具有代表性的、能覆蓋主要種植區(qū)、種植方式、土壤和氣候條件的試驗(yàn)地點(diǎn)，進(jìn)行和氣

9、候條件的試驗(yàn)地點(diǎn)，進(jìn)行兩年兩年重復(fù)試驗(yàn)。重復(fù)試驗(yàn)。 不同作物的農(nóng)藥殘留試驗(yàn)地點(diǎn)數(shù)要求不同。不同作物的農(nóng)藥殘留試驗(yàn)地點(diǎn)數(shù)要求不同。 需要作三地試驗(yàn)的有需要作三地試驗(yàn)的有：水稻、小麥、甘藍(lán)、黃瓜、番茄：水稻、小麥、甘藍(lán)、黃瓜、番茄（辣椒）、柑桔、梨（蘋果）、大豆、茶、花生。（辣椒）、柑桔、梨（蘋果）、大豆、茶、花生。 作一地試驗(yàn)的作一地試驗(yàn)的：榴蓮、亞麻籽、可可、咖啡、調(diào)味品類、：榴蓮、亞麻籽、可可、咖啡、調(diào)味品類、香草類等。香草類等。 其它作物一般需要作兩地試驗(yàn)其它作物一般需要作兩地試驗(yàn)。 試驗(yàn)地點(diǎn)試驗(yàn)地點(diǎn)的多少取決于登記農(nóng)藥的應(yīng)用范圍、作物布局以的多少取決于登記農(nóng)藥的應(yīng)用范圍、作物布局以及耕作

10、方式的一致性，不一定在每一類生態(tài)和氣候種植區(qū)及耕作方式的一致性，不一定在每一類生態(tài)和氣候種植區(qū)設(shè)點(diǎn)試驗(yàn)，但是，應(yīng)該注意試驗(yàn)取得的數(shù)據(jù)有足夠的代表設(shè)點(diǎn)試驗(yàn)，但是，應(yīng)該注意試驗(yàn)取得的數(shù)據(jù)有足夠的代表性和避免未設(shè)試驗(yàn)點(diǎn)區(qū)域可能出現(xiàn)更高的殘留量。性和避免未設(shè)試驗(yàn)點(diǎn)區(qū)域可能出現(xiàn)更高的殘留量。不能少不能少于兩個生態(tài)和氣候不同的種植區(qū)。于兩個生態(tài)和氣候不同的種植區(qū)。供試農(nóng)藥供試農(nóng)藥供試作物供試作物試驗(yàn)小區(qū)試驗(yàn)小區(qū) 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)示意圖4.3.2 最終殘留量試驗(yàn)施藥量或施藥濃度施藥量或施藥濃度 施藥次數(shù)施藥次數(shù) 采收間隔期 4.3.3 消解動態(tài)試驗(yàn)消解動態(tài)試驗(yàn)消解動態(tài)試驗(yàn) 土壤、作物的消解動態(tài)土壤、作物的消解動

11、態(tài) 消解動態(tài)消解動態(tài) 以最終殘留量試驗(yàn)的高劑量作為消解動態(tài)試以最終殘留量試驗(yàn)的高劑量作為消解動態(tài)試驗(yàn)的施藥量。第一次采樣殘留量很低驗(yàn)的施藥量。第一次采樣殘留量很低( (低于最低檢測濃度低于最低檢測濃度的的l0l0倍倍) )時，根據(jù)分析方法的最低檢出濃度加大施藥量。時，根據(jù)分析方法的最低檢出濃度加大施藥量。 4.3.4 殘留試驗(yàn)的樣品采集和運(yùn)輸、貯藏 科學(xué)、規(guī)范化的采樣是獲得有代表性樣本的關(guān)鍵，樣本代科學(xué)、規(guī)范化的采樣是獲得有代表性樣本的關(guān)鍵，樣本代表性將直接影響檢測結(jié)果的規(guī)律性，采樣方法和采樣量是表性將直接影響檢測結(jié)果的規(guī)律性，采樣方法和采樣量是影響試驗(yàn)結(jié)果誤差的重要因素之一。影響試驗(yàn)結(jié)果誤差

12、的重要因素之一。 采樣方法采樣方法 根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮蜆颖痉N類實(shí)際情況確定采樣方法，通常有根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮蜆颖痉N類實(shí)際情況確定采樣方法，通常有 應(yīng)避免采有病、過小或未成熟的樣本。采果樹樣本時，需應(yīng)避免采有病、過小或未成熟的樣本。采果樹樣本時，需在植株各部位（上、下、內(nèi)、外、向陽和背陰面）采樣。在植株各部位（上、下、內(nèi)、外、向陽和背陰面）采樣。采土壤樣本時，一定要保持每次采樣操作規(guī)范及深度一致，采土壤樣本時，一定要保持每次采樣操作規(guī)范及深度一致，一般要求采一般要求采0 015 cm15 cm（耕作層）土樣。應(yīng)同時采空白樣本（耕作層）土樣。應(yīng)同時采空白樣本。 樣品采集-方法（1） 隨機(jī)法 五點(diǎn)法 對角線

13、法 Z型法樣品采集-方法（2） S型法 棋盤式法 交叉法 采樣注意事項(xiàng)采樣注意事項(xiàng)1 1. 在所選的采樣點(diǎn)上有選擇地采樣，應(yīng)避免采有病、過小在所選的采樣點(diǎn)上有選擇地采樣，應(yīng)避免采有病、過小或未成熟的樣品。采果樹樣品時，需在植株各部位或未成熟的樣品。采果樹樣品時，需在植株各部位( (上、上、下、內(nèi)、外、向陽和背陰面下、內(nèi)、外、向陽和背陰面) )采樣，果實(shí)密集的部位相對采樣，果實(shí)密集的部位相對多采。多采。2.2.避免在地頭或邊沿采樣（留避免在地頭或邊沿采樣（留0.5m0.5m邊緣），按規(guī)定采集所有邊緣），按規(guī)定采集所有可食用部分，注意盡可能符合農(nóng)產(chǎn)品采收實(shí)際要求?？墒秤貌糠?，注意盡可能符合農(nóng)產(chǎn)品采

14、收實(shí)際要求。3.3.先采對照區(qū)的樣品，再按劑量從低到高的順序采集其它小先采對照區(qū)的樣品，再按劑量從低到高的順序采集其它小區(qū)樣品。每個小區(qū)采集一個代表性樣品。區(qū)樣品。每個小區(qū)采集一個代表性樣品。4.4.應(yīng)戴一次性手套，每采集一個處理的樣品后，應(yīng)更換一次應(yīng)戴一次性手套，每采集一個處理的樣品后，應(yīng)更換一次手套，防止樣品間污染和對操作人員的危害。手套，防止樣品間污染和對操作人員的危害。 作物分類作物分類 采樣量采樣量(1) (NY/T 788-2004) 采樣量采樣量(2) 采樣量采樣量(3) 采樣量采樣量(4)采樣量采樣量 （匯總）（匯總） 樣本包裝和儲運(yùn)樣本包裝和儲運(yùn) 采集的樣本應(yīng)該用特制的惰性包

15、采集的樣本應(yīng)該用特制的惰性包裝袋（盒）裝好，寫好標(biāo)簽（裝袋（盒）裝好，寫好標(biāo)簽（ 包括內(nèi)外各一個）包括內(nèi)外各一個）和編號（伴隨樣本各個階段，直至報(bào)告結(jié)果）。和編號（伴隨樣本各個階段，直至報(bào)告結(jié)果）。 樣本（冷凍條件下）及有關(guān)樣本資料（樣本名稱、樣本（冷凍條件下）及有關(guān)樣本資料（樣本名稱、采樣時間、地點(diǎn)及注意事項(xiàng)等）應(yīng)盡快運(yùn)送到實(shí)采樣時間、地點(diǎn)及注意事項(xiàng)等）應(yīng)盡快運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室（一般在驗(yàn)室（一般在242436 h36 h以內(nèi)），并不得使樣本變以內(nèi)），并不得使樣本變質(zhì)、受損、污染或使殘留量和水分損失。質(zhì)、受損、污染或使殘留量和水分損失。 運(yùn)到實(shí)驗(yàn)室的樣本應(yīng)在運(yùn)到實(shí)驗(yàn)室的樣本應(yīng)在1 155溫度（最佳溫

16、度（最佳為為3 355）下貯存并應(yīng)盡快檢測（幾天之）下貯存并應(yīng)盡快檢測（幾天之內(nèi)），如需貯存較長時間，則樣本必須在內(nèi)），如需貯存較長時間，則樣本必須在2020條件下貯存，解凍后應(yīng)立即測定，條件下貯存，解凍后應(yīng)立即測定， 有些農(nóng)藥在貯存時可能會發(fā)生降解，需要有些農(nóng)藥在貯存時可能會發(fā)生降解，需要在相同條件下做添加回收率試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證在相同條件下做添加回收率試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。 取冷凍樣本進(jìn)行檢測時，應(yīng)不使水和冰晶取冷凍樣本進(jìn)行檢測時，應(yīng)不使水和冰晶與樣本分離，必要時應(yīng)重新勻漿。檢測后與樣本分離，必要時應(yīng)重新勻漿。檢測后的樣本需保存一的樣本需保存一段時間，以供復(fù)檢。段時間，以供復(fù)檢。 農(nóng)藥殘留樣本儲存與穩(wěn)定

17、性關(guān)系農(nóng)藥殘留樣本儲存與穩(wěn)定性關(guān)系 農(nóng)藥殘留樣本儲存是農(nóng)藥殘留分析過程中農(nóng)藥殘留樣本儲存是農(nóng)藥殘留分析過程中的一個重要環(huán)節(jié)，農(nóng)藥殘留在各種儲存過的一個重要環(huán)節(jié)，農(nóng)藥殘留在各種儲存過程中是否穩(wěn)定直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)程中是否穩(wěn)定直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性和可靠性。性和可靠性。 隨著儲存時間的延長，有些農(nóng)藥可能由于隨著儲存時間的延長，有些農(nóng)藥可能由于種種原因發(fā)生降解，導(dǎo)致分析結(jié)果出現(xiàn)偏種種原因發(fā)生降解，導(dǎo)致分析結(jié)果出現(xiàn)偏差，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。差，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 以以30種不同結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的農(nóng)藥、種不同結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的農(nóng)藥、5種具有代種具有代表性的作物樣本表性的作物樣本(生菜、橙子、黃瓜、甘藍(lán)生菜、橙子、黃瓜、甘藍(lán)和糙米和糙米)為研究對象，對搗碎樣本中農(nóng)藥殘為研究對象，對搗碎樣本中農(nóng)藥殘留在留在4和和-20條件下儲存條件下儲存6個月的穩(wěn)定性個月的穩(wěn)定性進(jìn)行比較研究：進(jìn)行比較研究： -20條件下條件下進(jìn)行樣本儲存比進(jìn)行樣本儲存比4要穩(wěn)定的多，但仍有少數(shù)要穩(wěn)定的多，但仍有少數(shù)農(nóng)藥農(nóng)藥(甲基硫菌靈在甲基硫菌靈在5種作物中；敵敵畏在生菜、黃瓜、橙種作物中；敵敵畏在生菜、黃瓜、橙子和甘藍(lán)；馬拉硫磷在黃瓜；倍硫磷在黃瓜和生菜；殺撲子和甘藍(lán)；馬拉硫磷在黃瓜；倍硫磷在黃瓜和生菜；殺撲磷在橙子磷在橙子)在一些作物樣本儲存中發(fā)生降解，其它穩(wěn)定性好在一些作物樣本儲存中發(fā)生降解，其它穩(wěn)定性好的農(nóng)藥在的