白血病細(xì)胞的免疫表達(dá)ppt課件

1、白血病細(xì)胞的免疫表達(dá)白血病細(xì)胞的免疫表達(dá)史蔚史蔚0303級交大教改班級交大教改班50318190045031819004研討方法研討方法n流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)n電鏡電鏡n熒光顯微鏡熒光顯微鏡n免疫組織化學(xué)免疫組織化學(xué)流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)(FCM)n流式細(xì)胞術(shù)白血病免疫分型是利用熒光素流式細(xì)胞術(shù)白血病免疫分型是利用熒光素標(biāo)志的單克隆抗體標(biāo)志的單克隆抗體McAb作分子探針，作分子探針，多參數(shù)分析白血病細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿多參數(shù)分析白血病細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿或細(xì)胞核的免疫表型，由此了解被測白血或細(xì)胞核的免疫表型，由此了解被測白血病細(xì)胞所屬細(xì)胞系列及其分化程度。病細(xì)胞所屬細(xì)胞系列及其分化程度。n白血病

2、構(gòu)成的分化阻斷學(xué)說白血病構(gòu)成的分化阻斷學(xué)說 B細(xì)胞分化各時(shí)期的細(xì)胞膜表現(xiàn)型細(xì)胞分化各時(shí)期的細(xì)胞膜表現(xiàn)型流式細(xì)胞儀免疫分型實(shí)驗(yàn)流式細(xì)胞儀免疫分型實(shí)驗(yàn)1. 樣本采集、運(yùn)輸、保管和操作樣本采集、運(yùn)輸、保管和操作2. 樣本制備樣本制備 單細(xì)胞懸液的制備單細(xì)胞懸液的制備 分別靶細(xì)胞群體分別靶細(xì)胞群體 估細(xì)胞懸液估細(xì)胞懸液 細(xì)胞染色細(xì)胞染色3. 抗體組合確實(shí)定抗體組合確實(shí)定4.樣本獲取樣本獲取5.數(shù)據(jù)分析數(shù)據(jù)分析6.數(shù)據(jù)解釋數(shù)據(jù)解釋電鏡電鏡(EM)n電鏡不僅可以根據(jù)細(xì)胞超微構(gòu)造發(fā)育情況電鏡不僅可以根據(jù)細(xì)胞超微構(gòu)造發(fā)育情況提示幼稚細(xì)胞來源和功能形狀進(jìn)展診斷，提示幼稚細(xì)胞來源和功能形狀進(jìn)展診斷，也經(jīng)常經(jīng)過對紅

3、系各階段細(xì)胞構(gòu)造分析判也經(jīng)常經(jīng)過對紅系各階段細(xì)胞構(gòu)造分析判別紅系病態(tài)造血的緣由。別紅系病態(tài)造血的緣由。 急性未分化或微分化型髓系白血病急性未分化或微分化型髓系白血病(MO)nA、幼稚細(xì)胞外形圓形或卵圓形，直徑10um，核質(zhì)比例高，核卵圓形，異染色質(zhì)較多，核仁明顯，細(xì)胞器少，8000； B、核膜MPO反響陽性，8000 急性巨核細(xì)胞白血病急性巨核細(xì)胞白血病(AMKL)nA、小巨核細(xì)胞核不規(guī)那么，有深切跡，異染色質(zhì)較多，胞漿中可見sER構(gòu)成管道網(wǎng)狀系統(tǒng)，顆粒少見，6000；B、核膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)PPO陽性反響，無陽性顆粒，6000。 免疫組化免疫組化(IHC)n免疫組織化學(xué)免疫組織化學(xué)(IHC)以其方法

4、簡單、特異性以其方法簡單、特異性強(qiáng)、設(shè)備要求低、形狀學(xué)與免疫學(xué)結(jié)合等強(qiáng)、設(shè)備要求低、形狀學(xué)與免疫學(xué)結(jié)合等優(yōu)勢，得到各級醫(yī)院尤其是基層醫(yī)院的廣優(yōu)勢，得到各級醫(yī)院尤其是基層醫(yī)院的廣泛認(rèn)可，成為其它方法不可完全取代的、泛認(rèn)可，成為其它方法不可完全取代的、血液系統(tǒng)腫瘤病理診斷、鑒別診斷與分型血液系統(tǒng)腫瘤病理診斷、鑒別診斷與分型的常規(guī)檢測手段。的常規(guī)檢測手段。白血病細(xì)胞的免疫表達(dá)白血病細(xì)胞的免疫表達(dá)n急性T淋巴細(xì)胞白血病(T-ALL)n急性B淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)n急性髓系白血病 (AML)n慢性淋巴細(xì)胞白血病CLLn慢性髓細(xì)胞性白血病CML 急性急性T淋巴細(xì)胞白血病淋巴細(xì)胞白血病(T-ALL)n

5、CD7、 CD5、CD2為全T細(xì)胞抗原，根本表達(dá)于T細(xì)胞分化的各階段 n常以CD45Ro和CD3作為檢測T細(xì)胞來源腫瘤較好的抗體組合 nCD4、CD8nTCR 、TCR基因重排nT淋巴細(xì)胞來源的腫瘤浸潤性較強(qiáng)，預(yù)后較差，并需求多種治療 急性急性B淋巴細(xì)胞白血病淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)nCD10(CALLA)區(qū)別ALL和AMLn與T細(xì)胞分化一樣，在淋巴干細(xì)胞階段，只表達(dá)TDT，CD34等非系抗原；到B系祖細(xì)胞，出現(xiàn)CD19、CD79a及胞漿CD10表達(dá)；隨著B 細(xì)胞分化發(fā)育到逐漸成熟，TDT消逝，相繼出現(xiàn)CD10、CD22、CD45RA、CD20表達(dá)，同時(shí)出現(xiàn)膜免疫球蛋白；淋巴細(xì)胞發(fā)育到終末

6、漿細(xì)胞，除表達(dá)漿細(xì)胞標(biāo)志抗體外，還表達(dá)胞漿免疫球蛋白。CD19、CD45RA、CD79a。 急性非淋巴細(xì)胞白血病急性非淋巴細(xì)胞白血病(AML)根據(jù)FAB分型：MO：有低的SSC和FSC。在CD45SSC圖上出如今淋巴細(xì)胞位置上，至少表達(dá)一個(gè)特異性標(biāo)志如CD13或CD116，但MPO比CD13與CD33更靈敏。普通淋系標(biāo)志陰性，但也可表達(dá)CD7或CD4。普通HLADR、CD34陽性，有些研討闡明CD7與CD34共表達(dá)在AML且預(yù)后差。M1：流式上M1與M0類似不易區(qū)分，M1普通CD13、CD33、HLADR，但CD34表達(dá)少于M0，能夠表達(dá)部分CD15。M2： M0與M1的主要區(qū)別是成熟度添加，

7、blasts減少，CD15較M1較顯著，CD34弱于M1，CD13有時(shí)表達(dá)強(qiáng)于CD33，多數(shù)病例HLADR -。CD45SSC圖顯示從髓系blast區(qū)至成熟骨髓細(xì)胞區(qū)的延續(xù)細(xì)胞帶，CD45SSC圖有助于確定blasts比例。nM3、高顆粒性，具較高的SSC，但CD45較成熟C少，多數(shù)情況HLADR-或表達(dá)減少，CD34少于M2、普通CD13弱，可有CD2表達(dá)。nM4 與M5：兩型表型類似，但M4較M5表達(dá)更多的CD34，較之M0、M1，M4與M5有更大的FSS和SSC，CD45SSC圖上，成熟C出如今單核區(qū)，重要的表型為CD13、CD33、HLADR、CD14和CD15，CD33可表達(dá)強(qiáng)于CD

8、13，CD33、CD13、CD34 很能夠?yàn)镸5，但只出如今少數(shù)病人中，部分M5可見CD56。nM6： M6較少見且特征不明顯，普通HLADR，CD34、CD13、CD33陽性，CD45SSC圖顯示主要為紅系成份。nM7： 巨核細(xì)胞白血病，在AML中少于1。普通CD61Gpa和/或CD41Gpb-a陽性，而留意由于血小板粘附在blasts上呵斥的假陽性，可以用流式雙色分析在EDTA存在下，測Gpb/a與CD34以減少激活血小板的粘附。慢性淋巴細(xì)胞白血病慢性淋巴細(xì)胞白血病CLLnB系抗原為CD19、CD20、CD43、CD79a與CD5共表達(dá)nCD23、CD13、CD15表達(dá) 慢性髓細(xì)胞性白血病慢性髓細(xì)胞性白血病CMLn由于慢性期顯著的細(xì)胞分化，在CD45SSC圖上除了髓系細(xì)胞占主導(dǎo)外，只顯示一個(gè)正常骨髓像，CML可確診，CML起病與開展相對緩慢，