生物常規(guī)試劑的配制

1、附錄1 生物實(shí)驗(yàn)室常用試劑的配制 一、檢驗(yàn)酸堿性的試劑 1.酚酞試液 取0.1g酚酞，溶解在100mL6090%的乙醇溶液里，裝在試劑瓶內(nèi)密閉保存。酚酞試液在堿性溶液中呈紅色。2.甲基橙試液 甲基橙是橙黃色粉末或晶狀鱗片。取0.1g甲基橙溶解在100mL蒸餾水里制成。當(dāng)pH值由3.14.4時(shí)，顏色為紅至黃色。3.甲基紅試液 甲基紅是紅紫色晶體或紅色粉末。把0.1g甲基紅溶在100mL60%乙醇里制得。當(dāng)pH值由4.46.2時(shí)，顏色由紅色至黃色。4.麝香草酚酞（百里酚酞）試液 把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL 90%乙醇里制得。當(dāng)pH值由9.410.6時(shí)，顏色為無色至藍(lán)色。5.溴甲酚紫

2、指示劑 將0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02mol/L氫氧化鈉溶液中，加蒸餾水稀釋至250mL制得。當(dāng)pH值由6.26.8時(shí)，顏色由淡黃色變?yōu)榈仙?，變色點(diǎn)在pH 6.7。6.溴甲酚綠試液 溴甲酚綠是黃色晶體或紅棕色粉末。把0.1g溴甲酚綠溶于100mL 20%乙醇中，或把0.1g溴甲酚綠與2.9mL 0.05mol/L 氫氧化鈉溶液研勻，用水稀釋到100mL制得。當(dāng)pH值由3.85.4時(shí)，顏色由黃至藍(lán)色。7.甲基紫（結(jié)晶紫）試液 把0.1g深綠紫色的甲基紫溶解在100mL的水里制得。當(dāng)pH值由0.130.5時(shí)，顏色由黃至綠；pH值由1.01.5時(shí)，顏色由綠至藍(lán)；pH值由2.03.0時(shí)，

3、顏色由藍(lán)至紫。8.甲酚紅指示劑 把0.1g深紅色的甲酚紅溶解于100mL 50%的乙醇中，或?qū)?.1g甲酚紅與5.3mL 0.05mol/L氫氧化鈉研勻，用水稀釋到100mL制得。當(dāng)pH值由0.21.8時(shí)顏色由紅至黃；pH值由7.08.8時(shí)，顏色由亮黃至紫紅。甲酚紅指示劑遇少量二氧化碳，能快速變色，反應(yīng)靈敏，效果明顯。9.剛果紅試紙（紅色） 把 0.5g峋果紅溶解于1L水中，加入5滴乙酸，濾紙用溫?zé)崛芙庖航负?，取出晾干。遇酸性溶液變藍(lán)色。當(dāng)pH值變化范圍為3.05.2時(shí)，顏色由藍(lán)至紅。二、反應(yīng)試劑1. 鑒定葡萄糖的試劑（1）班氏（Benedict）試劑在600mL蒸餾水中溶解173g檸檬酸鈉

4、和100g 無水碳酸鈉，冷卻后稀釋到850mL。在100mL熱蒸餾水中溶解17.4g無水硫酸銅。冷卻后稀釋到150mL。把硫酸銅溶液緩緩倒入上述檸檬酸鈉一碳酸鈉溶中，邊加邊攪拌，如產(chǎn)生沉淀。要過濾，班氏試劑配制后能長期使用。如存放較久而產(chǎn)生沉淀時(shí)，可取上層清液使用，不必重配。（2）斐林氏（Fehlings Solution）試劑取35g硫酸銅，溶解在400mL蒸餾水里，加蒸餾水到500mL。取85g氫氧化鉀（或70g氫氧鈉）和175g酒石酸鉀鈉，溶解在400mL蒸餾水里，加水餾水到500mL。上述兩種溶液要分別保存，使用時(shí)再等量地混和并攪拌。如溶液里有葡萄糖，加等量斐林試劑，煮沸，會(huì)產(chǎn)生紅色的

5、氧化亞銅沉淀。2.鑒定淀粉用的碘液 取2g碘化鉀，溶解在10 mL蒸餾水中，再加1g碘，待溶解后用蒸餾水稀釋到300mL，即成碘液。溶液在光亮處容易變成氫碘酸，須保存在深色玻瓶里。3.鑒定蛋白質(zhì)用的雙縮脲試劑 分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液，待用。在3毫升待測中加入1 mL 10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液。如果有蛋白質(zhì)，會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)。4.鑒定脂肪的試劑 蘇丹IV乙醇飽和溶液。取0.2g蘇丹IV，放入無水乙醇中，加熱，使它充分溶解，成為飽和乙醇溶液。過濾后倒進(jìn)試劑瓶內(nèi)密閉保存?zhèn)溆谩?#160;蘇丹溶液的配制是：0.1g蘇丹粉末加入95%乙醇100mL，待全部溶解后便可使用。

6、5.提取植物DNA用的研磨液 10.1g三羥甲基氨基甲烷（Tris）的鹽酸溶液(PH=8)2mL和8.67gNaCl、37.2g乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）、20g十二烷基磺酸鈉（SDS）混合溶解后，再用蒸餾水定容至1000mL。研磨液中各種成分的作用Tirs/HCl：提供緩沖體系，DNA在這個(gè)緩沖體系中呈穩(wěn)定狀態(tài)。NaCl溶液：0.15mol/L，能很好地溶解DNA。EDTA：為DNA酶的抑制劑，可防止細(xì)胞破碎后DNA酶降解DNA。SOS：可使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離。6.鑒定二氧化碳的試劑（1）石灰水 取飽和石灰水澄清液，密閉瓶內(nèi)備用。（2）氫氧化鋇（Ba(OH)2）在蒸餾水中加氧化鋇得氫

7、氧化鋇。氫氧化鋇遇到二氧化碳，也會(huì)生成碳酸鋇白色沉淀，使溶液渾濁。（3）溴代麝香草酚藍(lán)溶液 取0.1g溴代麝香草酚藍(lán)，溶解在100mL蒸餾水里，滴入少量0.1%氫氧化鉀溶液，使它成為堿性溶液而呈藍(lán)色。本溶液 pH值變化范圍是6.0（黃）至7.6（藍(lán)）。待測物中如有二氧化碳，會(huì)形成碳酸而使溶液變成黃色。三、分離液1.用于分離肌纖維的試劑（1）馬克凱郎（Maecallum）氏液 也叫硝酸甘油溶液，取1份濃硝酸、2份甘油、2份水、混合制得。適于分離橫紋肌和心肌組織。（2）30%氫氧化鉀溶液或30%氫氧化鈉溶液 肌肉小塊浸泡時(shí)間0.51小時(shí)。2.用于分離神經(jīng)細(xì)胞的試劑（1）甲醛一生理鹽水溶液

8、 稱取58.44g氯化鈉，用蒸餾水溶解，再稀釋到1000mL，加入2g 40%甲醛溶液，可得甲醛一生理鹽水溶液。這種溶液也是很好的上皮細(xì)胞分離液，既分離迅速，又能保護(hù)纖細(xì)的上皮細(xì)胞纖毛。在上述溶液里，分離小腸和氣管上皮組織需2h，口腔和皮膚上皮組織需3天。（2）硼酸一生理鹽水溶液 在0.75%生理鹽水中加入硼酸，使成為飽和溶液。可用來分離脊髓灰質(zhì)或腦灰質(zhì)部位的神經(jīng)組織。3.用于分離神經(jīng)纖維的試劑 硝酸銀溶液。取0.5g硝酸銀，溶解在100 mL水在即成。4.用于分離植物根尖細(xì)胞的試劑（1）鹽酸乙醇溶液 在1份95%乙醇中徐徐加入1份濃鹽酸，即成鹽酸乙醇溶液。密閉保存。（2）4%鹽酸溶液。5.用

9、于分離植物纖維的試劑 取10g氫氧化鈉（或氫氧化鉀），溶解在90mL水里，密閉保存。6.用于分離植物木質(zhì)部細(xì)胞的試劑硝酸鉻酸溶液 取1%硝酸和10%鉻酸各1份配成。7.用于細(xì)胞質(zhì)壁分離的試劑 （1）30%蔗糖液（2）5%氯化鈉溶液（3）5%硝酸鉀溶液。8.用于分離上皮細(xì)胞的試劑（1）甲醛一生理鹽水溶液 （配方同前述）；（2）水合氯醛溶液 取5g水合氯醛，用蒸餾水溶解，再稀釋到100mL制得。上皮組織浸泡時(shí)間為一二天。9.用于分離植物細(xì)胞中綠體的試劑 0.3mol/L蔗糖-0.01mol/L3氯化鉀-0.05mol/L磷酸鹽緩沖液（PH=7.2）。0.05mol/L磷酸鹽緩沖液的配制法是：A液：

10、取0.05mol/L的Na2HPO4·12H2O(1.79g)溶解在100mL蒸餾水里。B液：取0.05mol/L的KH2PO4（0.58g）溶解在100mL蒸餾水里。取A液80mL和B液20mL混和后調(diào)整PH=7.2即可。四、染色劑 有些動(dòng)植物組織和大多數(shù)細(xì)胞及細(xì)胞器是無色透明的，必須經(jīng)染色劑染色，才能在顯微鏡下觀察清楚，常用染色劑的制法和適用范圍如下表。名 稱制 法適用范圍洋紅溶液取5g明礬溶解在95 mL蒸餾水里，再加0.5克洋紅，煮沸，冷卻，過濾，可加少許石炭酸防霉細(xì)胞核、整體標(biāo)本、如水螅、血吸蟲乙酸洋紅溶液取100mL 45%乙酸，煮沸30秒，加入1克洋紅，攪拌，再煮25m

11、in，冷卻，過濾染色體、洋蔥表皮細(xì)胞、口腔上皮細(xì)胞硼砂洋紅溶液取4g硼砂溶解在96mL蒸餾水里，再加3g洋紅，加熱到溶解，復(fù)用100mL 70%乙醇沖淡。經(jīng)24h過濾細(xì)胞核、淀粉粒、整體標(biāo)本銨明礬洋紅溶液取5g硫酸鋁銨（銨明礬）溶解在95mL蒸餾水里，再加0.5g洋紅，煮沸，冷卻，過濾?？杉由僭S防腐劑整體標(biāo)本、蕨類原葉體、植物表皮中性紅溶液取0.1g中性紅溶解在500mL的蒸餾水里原生動(dòng)物食物泡、動(dòng)植物組織活細(xì)胞內(nèi)含物石炭酸品紅（苯酚品紅）溶液取10g石炭酸溶解在190mL蒸餾水里，成甲液。另取0.3g堿性品紅（品紅）溶解在10mL 95%乙醇里，成乙液。把甲液倒入乙液，以蒸餾水稀釋5倍現(xiàn)用細(xì)

12、菌、放線菌、原球藻，膠原纖維、彈性纖維。中樞神經(jīng)組織核質(zhì)酸性品紅溶液取1g酸性品紅（品紅）溶解在99mL蒸餾水里細(xì)胞中白質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)，植物皮層、髓部的薄壁細(xì)胞和纖維素壁伊紅溶液取1g伊紅溶解在99mL蒸餾水里或99mL 70%乙醇里細(xì)胞質(zhì)剛果紅溶液 取0.10.2 g剛果紅溶液在100mL蒸餾水里活菌、植物纖維素、動(dòng)物彈性纖維、胚胎材料乙酸地衣紅溶液 取100mL 45%乙酸，煮沸，徐徐加入地衣紅，直到飽和為止，冷卻、過濾染色體番紅花紅溶液用番紅花紅配成0.51.0%乙醇溶液植物木質(zhì)化、木栓化、角質(zhì)化組織、植物蛋白孢子囊、細(xì)胞核、染色體蘇木精溶液 取1g蘇木精溶解在6mL無水乙醇里，成

13、甲液。另配銨明礬飽和水溶液，成乙液。取4mL甲液同150mL乙液混和，用紙遮蓋，放光亮處約一周，經(jīng)氧化（“成熟” ），過濾，加入25mL甘油，25mL甲醇、玻瓶密存?zhèn)溆脛?dòng)植物組織、纖維素細(xì)胞壁、細(xì)胞核鐵銨明礬蘇木精溶液 取2g鐵銨明礬溶解在98mL蒸餾水里，成甲液。另取0.5g蘇木精溶解在100mL蒸餾水里，成乙液。甲乙液不混合，甲液僅用作媒染。使材料易被乙液染色。甲液宜放18以下處，以免產(chǎn)生黃色氧化膜。乙液氧化一月，染色效能最高，過3個(gè)月會(huì)變質(zhì)，不能再用。細(xì)胞核、纖維素細(xì)胞壁蘇丹IV溶液取0.1g蘇丹IV溶解在20mL95%乙醇里，因乙醇能溶解脂肪，所以脂肪染色不要超過10min。木栓、角質(zhì)

14、層、脂肪瑞氏染液 取0.1g干的瑞氏色素溶解在50mL甲醇里，深色玻瓶密封存用，防止光解和揮發(fā)。血、瘧原蟲甲基紫溶液取甲基紫0.5g溶解在100mL蒸餾水里，再加乙酸0.02 mL血、瘧原蟲龍膽紫溶液取龍膽紫溶解在2%乙酸溶液，直到溶液不變成深紫色為止（它有極強(qiáng)的致癌性）細(xì)胞核、染色體結(jié)晶紫溶液取2g結(jié)晶紫溶解在20mL95%乙醇里，研磨，成甲液。另取0.8g草酸銨溶解在80mL蒸餾水里，成乙液。甲乙液混和使用。細(xì)菌、細(xì)胞核、染色體、中心體、淀粉、纖維蛋白、神經(jīng)膠質(zhì)、纖毛亮綠溶液取0.5g亮綠溶解在100mL蒸餾水里細(xì)胞質(zhì)固綠溶液取0.1g固綠溶解在100mL 95%乙醇里纖維素細(xì)胞壁、動(dòng)植物

15、漿質(zhì)甲基綠溶液取1g甲基綠溶解在60mL蒸餾水里，再加1mL冰乙酸木質(zhì)化細(xì)胞壁、細(xì)胞核、染色質(zhì)甲基藍(lán)取1g甲基藍(lán)溶解在29mL 70%乙醇里，再加70mL蒸餾水細(xì)胞質(zhì)、原生動(dòng)物活體亞甲基藍(lán)（美藍(lán)）溶液取0.5 g亞甲基藍(lán)溶解在30mL 95%乙醇里，再加100mL0.01%氫氧化鉀溶液細(xì)菌、細(xì)胞核、血、活體神經(jīng)靛紅溶液（1）取0.2g靛紅溶解在100mL蒸餾水里鑒定種子生命力（2）取0.5g靛紅溶解在94mL蒸餾水里，再加入5mL 5%硫酸鈉液和0.5mL冰乙酸分生組織苦味酸溶液取1克苦味酸溶解在99mL蒸餾水或99mL 70%乙醇里。細(xì)胞質(zhì)五、干燥劑干燥劑對(duì)游離水往往具有化學(xué)結(jié)合的作用，物理

16、吸附作用或兩種作用兼有。選用干燥劑應(yīng)注意其本身和被干燥的物質(zhì)有無化學(xué)作用，以免引起被干燥物質(zhì)的破壞或吸收。常用干燥有：氧化鈣（CaO） 白色固體，堿性氧化物，可干燥氧、氮、氨、胺等氣體，不可用來干燥酸性氣體，如二氧化碳、氯化氫、硫化氫。堿石灰 白色固體，呈堿性。它由氧化鈣粉末加入氫氧化鈉溶液，經(jīng)充分混和后置鐵皿中于200250下干燥而成。可以干燥氨、胺等氣體。常用于避免水或二氧化碳進(jìn)入反應(yīng)系統(tǒng)的裝置中。濃硫酸（H2SO4） 氧化性酸?？筛稍餁洹⒀?、氮、二氧化碳、二氧化硫、氯、氯化氫、甲烷等多種氣體；不能用來干燥堿性或易被氧化的氣體，常在干燥器中使用。硅膠 半透明，內(nèi)表面很大的多孔性固體，對(duì)水有

17、強(qiáng)烈的吸附作用?？筛稍镅?、氮、氨、胺等氣體。常用于干燥器中。含有鈷鹽的硅膠，叫變色硅膠，干燥時(shí)呈藍(lán)色，吸水后呈粉紅色。硅膠吸附水后可以在120烘干再用。其他的干燥劑還有五氧化二磷、氯化鈣、硫酸鈣、氧化鋁、氧化鋇、硫酸鎂、硫酸鈉、碳酸鉀和高氯酸鎂等。六、生理鹽水1.各類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用的生理鹽水 兩棲類生理鹽水是0.65%的氯化鈉溶液；鳥類生理鹽水是0.75%的；哺乳類和人生理鹽水是0.9%。2.任氏（Ringers）生理鹽水 先把6.5g氯化鈉、0.14g氯化鉀、0.2g碳酸氫鈉和0.01g磷酸二氫鈉分別溶解在少量蒸餾水中，混和后用蒸餾水稀釋到980mL。取0.12g氯化鈣溶解在20mL的蒸餾水中

18、，把氯化鈣溶液逐滴加入到上述溶液中，邊滴邊攪拌，以免產(chǎn)生不溶性的磷酸鈣沉淀。任氏液常用于變溫動(dòng)物，如兩棲類。3.樂氏（Lockes）生理鹽水 先把9g氯化鈉、0.42g氯化鉀、0.10.3g碳酸氫鈉分別用少量蒸餾水溶解，混和后加蒸餾水到980mL。再取0.24g氯化鈣溶解在20mL蒸餾水中，逐滴加入上述溶液中，樂氏液常用于恒溫動(dòng)物，如哺乳類。七、固定液和保存液 固定液能把有生命的材料迅速殺死，并盡可能保持它原有的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，固定液具有防腐和保存和作用。1.甲醛也叫福爾馬林液（Formalin），固定材料常用5%甲醛溶液，保存生物標(biāo)本常用45%的，消毒常用3%的。市售的是40%甲醛溶液，加7、9

19、、12倍水分別稀釋成5%、4%、3%甲醛溶液。甲醛溶液無色透明，有刺激性氣味，味灼烈，是良好的動(dòng)、植物材料固定液，有強(qiáng)烈的殺菌能力，穿透力大（僅次于乙酸），防腐性強(qiáng)，固定速度快，效果好。缺點(diǎn)是固定后可使材料少許膨脹，有濃度過高，能使材料發(fā)硬發(fā)脆，因此對(duì)于精細(xì)的解剖標(biāo)本，最好用甲醛與甘油、乙醇、石炭酸等混和使用。2乙醇（C2H5OH）有強(qiáng)烈的殺菌作用，滲透力較大，但固定效果不及甲醛溶液?？墒沟鞍踪|(zhì)凝固，并有較強(qiáng)的脫水作用，因此，單純用乙醇固定的材料會(huì)產(chǎn)生硬化和收縮，而使體積變小。對(duì)含水量多的材料，固定應(yīng)從低濃度開始，逐步轉(zhuǎn)入高濃度。從經(jīng)濟(jì)和效果來考慮，乙醇宜與甲醛等固定液混和使用。常用的乙醇固定

20、液或保存液濃度都是70%左右。3.乙酸 帶有刺激味的無色液體，純乙酸在16.7以下凝固，故名冰乙酸。乙酸固定液的常用濃度是0.30.5%。乙酸能凝固細(xì)胞核內(nèi)的蛋白質(zhì)（核蛋白），對(duì)染色質(zhì)或染色體的固定，染色較好。用乙酸溶液固定材料，可使細(xì)胞膨脹和防止收縮，組織也不會(huì)硬化。/它常跟乙醇、甲醛、鉻酸等易引起硬變的收縮的液體組成混合固定液，效果較好。4.乙酸-乙醇溶液 由冰乙酸1份跟純乙醇3份混和而成，適用于動(dòng)、植物組織和細(xì)胞核內(nèi)DNA的測定。動(dòng)物的組織固定需1.53h后，即移入純乙醇中15min，再透明。根尖固定需15min，花藥固定需1h。八、脫水劑 材料中含有水分，就會(huì)降低透明度。脫水劑有利于材

21、料透明，也有利于材料的永久保存。脫水劑的種類很多，如乙醇、丙酮、甘油、正丁醇和叔丁醇等。中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)最常用的乙醇，而甘油則常用于菌類和藻類等。在用乙醇脫水時(shí)，為了避免材料萎縮、僵硬，應(yīng)從低到高使用不同的濃度，逐漸脫水，有時(shí)還用無水乙醇脫水。一般組織（除神經(jīng)組織，柔軟組織外）可從70%乙醇開始經(jīng)80%、95%、100%乙醇，使它逐步脫水。對(duì)一些柔軟組織如胚胎組織、低等無脊椎動(dòng)物組織，要從50%或30%或20%乙醇開始，否則組織收縮較嚴(yán)重。九、透明劑 材料經(jīng)脫水后，須經(jīng)透明劑透明，方能浸蠟包埋或在樹膠中封藏。其目的在于使組織中的乙醇或丙酮被透明劑所替代，使石蠟?zāi)芎茼樌M(jìn)進(jìn)入組織和增強(qiáng)組織的折光系數(shù)

22、，便于顯微鏡的觀察，并能和封藏劑混和進(jìn)行封藏。透明劑的種類很多，常用的有二甲苯、甲苯、苯、氯仿和香柏油。如二甲苯是應(yīng)用最廣的廉價(jià)透明劑。它是易揮發(fā)和無色透明的液體。易溶于乙醇又能溶解石蠟，能與封藏劑樹膠混和，但不能和水混合，透明力強(qiáng)，作用較快。用二甲苯透明時(shí)，先經(jīng)純乙醇和二甲苯等量混合浸12h，以置換材料中的乙醇，再置于純二甲苯中透明，全部時(shí)間不宜超過3h。如是染色后的制片，在二甲苯中經(jīng)過510min即可透明。十、封藏劑 材料經(jīng)脫水，透明或染色后，須經(jīng)封藏才能長期保存。1.加拿大樹膠 半透明的固體樹脂，溶于二甲苯或苯里，用以封片透明度很好，干后堅(jiān)硬牢固，可長期保存。2.甘油 臨時(shí)封片常用的封藏

23、劑。材料先用10%的甘油浸潤數(shù)日，待水分蒸發(fā)，濃縮成純甘油時(shí)，再加蓋玻片。3松香 取上等純松香將其磨碎，放入燒杯內(nèi)，置于80100處加熱12h后，待松香熔解時(shí)其中揮發(fā)性雜質(zhì)和氣泡外逸，加入約為松香重量半的二甲苯，攪拌均勻即成松香封藏劑。本品原料易得，效果與加拿大樹膠相同。缺點(diǎn)是材料不純或調(diào)制不好時(shí)，易發(fā)生結(jié)晶和褪色。 十一、消毒劑 優(yōu)良的消毒劑應(yīng)具有殺菌力強(qiáng)、性質(zhì)穩(wěn)定，易于溶解和穿透力大的特性，此外還要求對(duì)人和動(dòng)物組織的毒性低，對(duì)器具衣服沒有腐蝕性，且價(jià)格低廉。 1乙醇 它可使蛋白質(zhì)脫水和變性，故有消毒和防腐的作用。70%乙醇的殺菌力最強(qiáng)，可在35min內(nèi)殺死細(xì)菌。且對(duì)人毒性小，適用于皮膚及器

24、械等消毒。95100%乙醇能引起菌體表層蛋白質(zhì)凝固，形成保護(hù)層，。使乙醇分子不易繼續(xù)透入，殺菌能力反而減弱。2碘酒 它是碘和碘化鉀的乙醇溶液，有稀碘酒和濃碘酒兩種。市售的是2%的稀碘酒，在10min內(nèi)能殺死細(xì)菌及芽孢，可用于消毒皮膚，但對(duì)皮膚的刺激性很大，故用后應(yīng)以70%乙醇拭凈。濃碘酒多用于手術(shù)后創(chuàng)面消毒。自配碘酒可取5g碘化鉀和7g碘溶解在5mL蒸餾水中，再加無水乙醇到100mL。3高錳酸鉀 它是強(qiáng)氧化劑，遇到機(jī)物即放出新生態(tài)氧而使有機(jī)物氧化，其殺菌作用強(qiáng)于過氧化氫。高濃度時(shí)有刺激及腐蝕作用；0.1%水溶液可作創(chuàng)口或粘膜洗滌劑，使皮膚消毒；25%水溶液能在24h內(nèi)殺死細(xì)菌芽孢。本液在空氣中

25、易分解，失去氧化能力，要現(xiàn)配現(xiàn)用。4甲醛溶液 它常用來殺滅細(xì)菌、病毒。通常以25%溶液消毒器具。本品又可作實(shí)驗(yàn)室熏蒸消毒。5漂白粉 本品含有效氯為2530%，有強(qiáng)殺菌力，能消毒、防腐、防臭和溶解壞死組織，但作用時(shí)間短。此外，用作消毒劑的還有苯酸（石炭酸）、煤酚和煤酚皂液等。十二、麻醉劑 它可分揮發(fā)性（如乙醚）和非揮發(fā)性（如氨基甲酸乙酯）兩類。前者作用時(shí)間短麻醉深度容易掌握，動(dòng)物麻醉后也容易蘇醒；后者作用的時(shí)間比較長，用法簡單，但麻醉后蘇醒較慢，不大容易掌握麻醉的深淺程度。在中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)中，使用較多的是乙醚和氨基甲酸乙酯兩種。1.乙醚 無色液體，味灼烈，有強(qiáng)揮發(fā)性和易燃性。乙醚能使中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)

26、生暫時(shí)性機(jī)能麻痹。乙醚吸入法是最常用的麻醉方法。2.氨基甲酸乙酯 它是無色的柱狀結(jié)晶或白色顆粒粉末，其水溶液是比較溫和的麻醉藥，安全度大，多數(shù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物都可使用，更適用于小動(dòng)物。作為麻醉劑，氨基甲酸乙酯常配成20%水溶液注射入動(dòng)物體內(nèi)。劑量是，狗、貓、兔直腸灌注1.5g/Kg體重，皮下靜脈或腹腔注射0.751g/Kg體重。蛙類，2g/Kg體重，由背部淋巴囊注射。在作靜脈注射時(shí)必須溶在生理鹽水（哺乳類用8.59.0%）中，配成10%的溶液，每Kg體重注射10mL。十三、防腐劑 防腐劑多用于剝制標(biāo)本，現(xiàn)將其中的防腐劑分述如下：如最簡單的無毒防腐劑是用硼酸粉130g、明礬粉60g和樟腦粉60g3種粉末

27、混和后撒在動(dòng)物皮內(nèi)，效果一般，但使用安全。十四、密封劑 它常用來封標(biāo)本瓶口。1.石蠟 取石蠟（熔點(diǎn)52）1份+松香1份+甘油數(shù)滴，溶化后趁熱使用。2.賽璐珞 取賽璐珞，如碎、廢乒乓球剪碎后，浸入在乙醚、丙酮或氯仿等有機(jī)溶劑中加蓋后靜置二三天，等溶化成糊狀時(shí)，涂在瓶口和瓶塞外面，形成不透氣的薄膜。十五、培養(yǎng)液和培養(yǎng)基1.植物無土栽培完全培養(yǎng)液有三種配方：（1）硝酸鈣0.821g、硝酸鉀 0.506g、磷酸二氫鉀0.136g、硫酸鎂0.120g、酒石酸鐵0.005g，把這些鹽類溶解在少量蒸餾水里，稀釋到1000mL。（2）稱取1g硝酸鈣、0.25g磷酸二氫鉀、0.25g硫酸鎂和0.25g硝酸鉀。準(zhǔn)

28、備1滴1%氯化鐵溶液。把上述各種固體成分先分別用少量水溶解，然后混和在一起稀釋到1000mL，最后加1滴1%氯化鐵溶液。（3）稱取0.02%硝酸氨、0.01%氯化鈣、0.01%磷酸二氫鉀和0.01%硫酸鎂，準(zhǔn)備1滴1%氯化鐵溶液。 2.配制缺氮、缺磷和缺鉀的不完全營養(yǎng)液：（1）缺氮培養(yǎng)液：硫酸鈣0.52g、磷酸二氫鉀0.25g、硫酸鎂0.25g、氯化鉀0.08g、氯化鐵微量。（2）缺磷培養(yǎng)液：硫酸鈣0.52g、硝酸銨0.16g、硝酸鎂0.25g、硝酸鉀0.20g、氯化鐵微量。（3）缺鉀培養(yǎng)液：硫酸鈣0.34g、硝酸銨0.24g、硫酸鎂0.25g、磷酸一氫鈣0.17g、氯化鐵微量。以上3種不完全

29、營養(yǎng)液跟前面列出的完全營養(yǎng)液的配法相同，都稀釋到1000mL。2.土壤浸出液 把肥沃的土壤放在清水中（重量比1：1）攪拌后，用濾紙過濾即得。3.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于細(xì)菌培養(yǎng)） 牛肉膏3g，蛋白胨10g .NaCl 5g,水1000mL，PH7.47.6。4.高氏1號(hào)培養(yǎng)基（用于放線菌培養(yǎng)） 可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4·3H2O 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，F(xiàn)eSO4·7H2O 0.01g，水1000mL，pH7.47.6。配制時(shí)注意，可溶性淀粉要先用冷水調(diào)勻后再加入到以上培養(yǎng)基中。5馬丁氏（Mar

30、tin）培養(yǎng)基（用于從土壤中分離真菌） K2HPO4 lg,MgSO4·7H2O 0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/30000孟加拉紅水溶液100ml，水900ml，自然pH，121濕熱滅菌30min，待培養(yǎng)基融化后冷卻至5560時(shí)加入鏈霉素（含量30g/mL）。6.馬鈴薯培養(yǎng)基（PDA）（用于霉菌或酵母菌培養(yǎng)） 馬鈴薯（去皮）200g，蔗糖（或葡萄糖）20g，水1000mL。配制方法如下：將馬鈴薯去皮，切成約2cm2的小塊，放入1500mL和燒杯中煮沸30min，注意用玻棒攪拌以防糊底，然后用雙層布過濾，取其濾液加糖，再補(bǔ)足水至1000ml。自然pH。霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄

31、糖。7察氏培養(yǎng)基（蔗糖硝酸鈉培養(yǎng)基）（用于霉菌培養(yǎng)） 蔗糖30g，NaNO3 2g, K2HPO4 1g, MgSO4 ·7H2O 0.5g，KCl 0.5g, FeSO4·7H2 O0.01g,水1000ml，pH7.07.2。8乳酸菌培養(yǎng)基（用于乳酸發(fā)酵） 牛肉膏5g，酵母膏5g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，乳糖5g，NaCl5g，水1000ml，pH6.8，121濕熱滅菌20min.9酒精發(fā)酵培養(yǎng)基（用于酒精發(fā)酵） 蔗糖10g，MgSO4·7H2O 0.5g，NH4NO 30.5g，20%豆芽汁2mL，KH2PO4 0.5g，水100mL，自然pH。10豆芽

32、汁培養(yǎng)基 黃豆芽500g，加水1000ml，煮沸1h，過濾后補(bǔ)足水分，121濕熱滅菌后存放備用，此即為50%的豆芽汁。5用于細(xì)菌培養(yǎng)：10%豆芽汁200mL，葡萄糖（或蔗糖）50g，水800mL，PH7.27.4。用于霉菌或酵母菌培養(yǎng)：10%豆芽汁200ml，糖50g，水800mL自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。11無氮瓊脂培養(yǎng)基 葡萄糖（或蔗糖）10g，磷酸氫二鉀0.2g、氯化鈉0.2g、硫酸鎂0.2g、硫酸鉀0.2g、碳酸鈣5.0g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL.。附錄2 蓋魯薩克氏乙醇稀釋表每 原有100 mL乙醇原濃 濃度度乙醇加水的mL數(shù)欲稀釋的乙醇濃度9%90%85%80%

33、75%70%65%60%55%50%90%6.485%13.36.680%20.913.86.875%29.721.914.57.270%39.231.123.115.47.665%50.741.533.024.716.48.260%63.253.744.535.426.517.68.855%78.467.957.948.138.328.619.09.550%96.484.773.963.052.441.731.320.510.445%117.9105.393.381.469.557.846.134.522.911.440%144.9130.8117.3104.090.877.664.551.438.525.635%178.9163.3148.0132.9117.8102.887.973.158.313.630%224.4206.2188.6171.1153.6136.0118.9101.784.567.525%287.1266.1245.2224.3203.5182.8162.2141.7121.2100.720%382.0355.8329.8304.3278.3252.6227.0201.4176.0150.615%540.0505.3471.043