《動物的克隆》課件(浙科版選修3)

1、第三節(jié)第三節(jié) 動物的克隆動物的克隆動物細胞的培養(yǎng)和克隆形成動物細胞的培養(yǎng)和克隆形成（1）離體的動物細胞能否正常的生活、）離體的動物細胞能否正常的生活、表現(xiàn)出正常的生命活動？表現(xiàn)出正常的生命活動？只要條件適合就能表現(xiàn)出正常的生命活只要條件適合就能表現(xiàn)出正常的生命活動，如細胞的分裂、生長等動，如細胞的分裂、生長等（2）是不是所有的動物細胞都能在）是不是所有的動物細胞都能在離體的情況下表現(xiàn)出生命活動？離體的情況下表現(xiàn)出生命活動？不是，越是幼嫩的細胞越容易培養(yǎng)并表不是，越是幼嫩的細胞越容易培養(yǎng)并表現(xiàn)出正常的生命活動，因此在細胞培養(yǎng)現(xiàn)出正常的生命活動，因此在細胞培養(yǎng)時一般選擇幼嫩的細胞時一般選擇幼嫩的細

2、胞（3）細胞離體培養(yǎng)時，表現(xiàn)出什么樣的）細胞離體培養(yǎng)時，表現(xiàn)出什么樣的生命活動？生命活動？生長、分裂（繁殖）至接觸抑制生長、分裂（繁殖）至接觸抑制（4）離體的動物組織能否像離體的動物細胞）離體的動物組織能否像離體的動物細胞一樣表現(xiàn)出體外培養(yǎng)的特征？一樣表現(xiàn)出體外培養(yǎng)的特征？動物組織在離體的情況下，也能培養(yǎng)并動物組織在離體的情況下，也能培養(yǎng)并表現(xiàn)出正常的生命活動；但與細胞培養(yǎng)表現(xiàn)出正常的生命活動；但與細胞培養(yǎng)也有不同的地方：在得到離體的組織后，也有不同的地方：在得到離體的組織后，需要機械處理或胰蛋白酶處理得到分散需要機械處理或胰蛋白酶處理得到分散的細胞再進行細胞培養(yǎng)，同時動物組織的細胞再進行細胞

3、培養(yǎng)，同時動物組織培養(yǎng)過程中可以伴隨組織分化。培養(yǎng)過程中可以伴隨組織分化。（5）動物組織培養(yǎng)具體是如何實現(xiàn)的？）動物組織培養(yǎng)具體是如何實現(xiàn)的？動物組織培養(yǎng)的發(fā)展歷史動物組織培養(yǎng)的發(fā)展歷史什么是原代培養(yǎng)？什么是傳代培養(yǎng)什么是原代培養(yǎng)？什么是傳代培養(yǎng)動物組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)細胞能不能動物組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)細胞能不能無限制地存活下去無限制地存活下去閱讀教材閱讀教材1.1.過程：過程：（一）動物細胞培養(yǎng)（一）動物細胞培養(yǎng)動物動物胚胎胚胎或或幼齡幼齡動動物的組織、器官物的組織、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎單個細胞單個細胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液制成制成細細胞胞懸懸浮浮液液細胞系、細胞系、細胞株細胞株細胞增殖細胞增殖去

4、掉組織去掉組織間蛋白間蛋白動物細胞培養(yǎng)不能動物細胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成生物體最終培養(yǎng)成生物體原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細胞株和細胞系？如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)；細胞株和細胞系？細胞懸細胞懸浮液浮液轉(zhuǎn)入特轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)殊培養(yǎng)液中培液中培養(yǎng)養(yǎng)分瓶培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞系（可傳代的細胞）細胞系（可傳代的細胞）連續(xù)細胞系：連續(xù)細胞系：有限細胞系：有限細胞系：二倍體細胞二倍體細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化的細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化的細胞系（遺傳物質(zhì)發(fā)系（遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，具不生了改變，具不死性）死性）細胞株：細胞株：從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得用單細胞

5、分離培養(yǎng)或通過得用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群，稱細胞株。形成的細胞群，稱細胞株。遺傳物質(zhì)未變遺傳物質(zhì)未變 （5）如何獲得純系的細胞系？）如何獲得純系的細胞系？采用細胞克隆采用細胞克隆什么是克隆培養(yǎng)法。什么是克隆培養(yǎng)法。細胞克隆的最基本要求是什么？細胞克隆的最基本要求是什么？什么細胞容易進行克隆培養(yǎng)什么細胞容易進行克隆培養(yǎng)閱讀教材閱讀教材如何提高細胞克隆形成率？如何提高細胞克隆形成率？克隆培養(yǎng)法的主要用途是什么？克隆培養(yǎng)法的主要用途是什么？1.1.過程：過程：誘導方式誘導方式物理法：物理法：化學法：化學法：生物法：生物法： 滅活仙臺病毒滅活仙

6、臺病毒聚乙二醇聚乙二醇電刺激等電刺激等（二）動物細胞融合（二）動物細胞融合1.1.過程：過程：滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面滅活的病毒顆粒黏附于細胞表面細胞膜被病毒顆粒穿通細胞膜被病毒顆粒穿通細胞膜連接細胞膜連接細胞融合，形成雜種細胞細胞融合，形成雜種細胞主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體獲得雜種植株獲得雜種植株用途用途物理、化學方法物理、化學方法（同左）（同左）滅活的病毒滅活的病毒物理（離心、振物理（離心、振蕩、電刺激）蕩、電刺激）化學（聚乙二醇）化學（聚乙二醇）誘導方法誘導方法使細胞分散后誘使細胞分散后誘導細胞融合導細胞融合去除細胞壁后誘去除細胞壁后誘導原生質(zhì)體融合導原生質(zhì)體融合細

7、胞融合的方法細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞膜的流動性、細胞膜的流動性、植物細胞全能性植物細胞全能性原理原理動物細胞融合動物細胞融合植物體細胞雜交植物體細胞雜交比較項目比較項目植物體細胞雜交、動物細胞融合的比較植物體細胞雜交、動物細胞融合的比較1.其由何種細胞產(chǎn)生？其由何種細胞產(chǎn)生？2.主要分布在哪里？主要分布在哪里？3.如何得到抗體？如何得到抗體？(三）單克隆抗體三）單克隆抗體 動物細胞融合的重要應用動物細胞融合的重要應用 抗體抗體1 1、抗原抗原 動物體內(nèi)動物體內(nèi)刺激刺激漿細胞漿細胞 抗原抗原 動物體內(nèi)動物體內(nèi)刺激刺激漿細胞漿細胞 抗體抗體抗原不純抗原不純抗體不純抗體不純篩選

8、單一漿細胞篩選單一漿細胞不能增殖，產(chǎn)生大量抗體不能增殖，產(chǎn)生大量抗體2 2、特異性差、純度低；特異性差、純度低； 產(chǎn)量低、反應不夠靈敏產(chǎn)量低、反應不夠靈敏設(shè)計方案：設(shè)計方案：一個一個B B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體淋巴細胞只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖單克隆抗體的優(yōu)點：化學性質(zhì)單一單克隆抗體的優(yōu)點：化學性質(zhì)單一 特異性特異性 靈敏度高靈敏度高雜種細胞雜種細胞2.2.制備過程：制備過程：（1 1）給小鼠抗原注射的目的是什么？）給小鼠抗原注射的目的是什么？誘導小鼠體內(nèi)的特異性免疫應答，分化誘導小鼠體內(nèi)的特異性免疫應答，分化出漿細胞。出漿細胞。（2 2）兩次篩

9、選的目的相同嗎？）兩次篩選的目的相同嗎？不同，第一次篩選是為了篩選雜交瘤細不同，第一次篩選是為了篩選雜交瘤細胞，第二次篩選是做抗體檢驗，篩選產(chǎn)胞，第二次篩選是做抗體檢驗，篩選產(chǎn)生特異性抗體的細胞。生特異性抗體的細胞。（3 3）最后培養(yǎng)有幾種方案？）最后培養(yǎng)有幾種方案？兩種，體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)。兩種，體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)。多莉多莉克隆猴克隆猴四、動物的克隆繁殖四、動物的克隆繁殖1、動物細胞全能性的表現(xiàn)程度：、動物細胞全能性的表現(xiàn)程度： 全能干細胞全能干細胞 多能干細胞多能干細胞 單能干細胞單能干細胞2、動物難以克隆繁殖的根本原因：、動物難以克隆繁殖的根本原因： 細胞分化使得細胞發(fā)生了基因的差異性表

10、達，有細胞分化使得細胞發(fā)生了基因的差異性表達，有的基因開放，有的基因關(guān)閉。體細胞基因組中的的基因開放，有的基因關(guān)閉。體細胞基因組中的基因活動很不完全，不能像受精卵那樣發(fā)揮細胞基因活動很不完全，不能像受精卵那樣發(fā)揮細胞的全能性。的全能性。卵細胞卵細胞母綿羊母綿羊母綿羊母綿羊乳腺細胞乳腺細胞細胞質(zhì)細胞質(zhì)細胞核細胞核細胞核移植細胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母綿羊子宮母綿羊子宮胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多莉羊的培育過程多莉羊的培育過程融合后的卵細胞融合后的卵細胞克隆動物的研究意義克隆動物的研究意義1.1.用于生物學和醫(yī)學研究的實驗動物用于生物學和醫(yī)學研究的實驗動物2.2.改良動物品種改良動物品種 3.3.治療人類疾病治療人類疾病4.4.保護瀕危動物保護瀕危動物6.6.世界上第一只克隆綿羊世界上第一只克隆綿羊“多莉多莉”的培育等程序如圖的培育等程序如圖所示。請仔細看圖后回答問題：所示。請仔細看圖后回答問題：黑面綿羊去黑面綿羊去核卵細胞核卵細胞白面綿羊卵白面綿羊卵腺細胞核腺細胞核重組細胞重組細胞早期胚胎早期胚胎另一頭母綿羊子宮另一頭母綿羊子宮克隆綿羊多莉克隆綿羊多莉ab電脈沖處理妊娠、出生寫出寫出 、所指的細胞工程、所指的細胞工程各稱：各稱：。實施細胞工程時，所需的實施細胞工程時，所需的受體細胞大多采用動物卵細胞受體細胞大多采用動物卵細胞的