




版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、淀粉酶蛋白質含量及活力測定生物化學實驗安排1 1、淀粉酶蛋白質含量及活力測定(淀粉酶蛋白質含量及活力測定(5 5課時課時2 2周)周)2 2、動物組織中核酸的提取與鑒定、動物組織中核酸的提取與鑒定 (5 5課時課時2 2周)周)3 3、細胞色素、細胞色素C C的制備及測定的制備及測定 (1212課時課時3 3周)周)4 4、SDS-PAGESDS-PAGE測定蛋白質分子質量測定蛋白質分子質量 (8 8課時課時2 2周周9,109,10周)周)5 5、層析技術分離生物大分子、層析技術分離生物大分子 (7 7課時課時2 2周周1111,1212周)周)6 6、凝膠等電聚焦法測定蛋白質等電點(、凝膠
2、等電聚焦法測定蛋白質等電點(8 8課時課時2 2周周1313,1414周)周)淀粉酶蛋白質含量測定一、常用蛋白質含量測定方法一、常用蛋白質含量測定方法n凱氏定氮法凱氏定氮法n雙縮脲法雙縮脲法n考馬斯亮藍考馬斯亮藍G250染色法染色法 nFolin酚法酚法n紫外分光光度法紫外分光光度法二、實驗方法及設計思路二、實驗方法及設計思路1、樣品預處理、樣品預處理 準確稱取準確稱取1.5000克酶粉,用蒸餾水溶解,放入研缽中研磨后定容克酶粉,用蒸餾水溶解,放入研缽中研磨后定容50毫毫升,過濾(升,過濾(準備準備5-6個漏斗,同時過濾個漏斗,同時過濾),除去沉淀,合并濾液,制成),除去沉淀,合并濾液,制成酶
3、儲備液。此溶液測定蛋白質含量。酶儲備液。此溶液測定蛋白質含量。 2、標準曲線測定、標準曲線測定3、待測樣品測定、待測樣品測定(樣品平行做兩次樣品平行做兩次)4、數(shù)據(jù)處理(、數(shù)據(jù)處理(用電腦處理用電腦處理)復習與思考n1、凱氏定氮法和比色法測定蛋白質含量有何不、凱氏定氮法和比色法測定蛋白質含量有何不同?(從測定原理進行分析)同?(從測定原理進行分析)n2、用計算機制作標準曲線的方法?(簡單描述)、用計算機制作標準曲線的方法?(簡單描述)n寫出流程。寫出流程。n3、分析測定誤差形成的原因。、分析測定誤差形成的原因。淀粉酶活力測定n一、原理一、原理n淀粉淀粉 糊精糊精n 淀粉酶淀粉酶n葡萄糖殘基葡萄
4、糖殘基60 藍色糊精藍色糊精n葡萄糖殘基葡萄糖殘基20 紅色糊精紅色糊精n葡萄糖殘基葡萄糖殘基6 無色糊精無色糊精n二、實驗方法及設計思路二、實驗方法及設計思路n1、取酶儲備液、取酶儲備液5.00mL,稀釋至,稀釋至50mL,制成酶應用液。,制成酶應用液。n 或或準確稱取準確稱取0.1500克酶粉,用蒸餾水溶解,放入研缽中研磨后定容克酶粉,用蒸餾水溶解,放入研缽中研磨后定容50毫升,制成酶應用液毫升,制成酶應用液(不測蛋白質含量時)。用時搖勻。(不測蛋白質含量時)。用時搖勻。 n2、取、取l.00mL標準糊精液置于盛有標準糊精液置于盛有3.00mL比色稀碘液的試管中,作為顏色的標準管。所有試管
5、應選用比色稀碘液的試管中,作為顏色的標準管。所有試管應選用管徑一致的。管徑一致的。n3、在、在60mL的試劑瓶(反應瓶)中加入的試劑瓶(反應瓶)中加入2%可溶性淀粉溶液可溶性淀粉溶液20.00mL,pH6.0緩沖液緩沖液5.00mL,在,在60水浴中平衡溫度(約水浴中平衡溫度(約10min),加入),加入0.50mL酶應用液,酶應用液,即刻記時,即刻記時,充分混勻,定時(充分混勻,定時(開始開始1分鐘左右,分鐘左右,后可以稍快后可以稍快)取出)取出lmL(用帶刻度的小滴管或移液槍用帶刻度的小滴管或移液槍)反應液于試管內(試管中先盛有)反應液于試管內(試管中先盛有3mL比色稀碘比色稀碘液,液,預先準備預先準備8支支),當由紫色逐漸轉變?yōu)樽爻壬?,與標準比色管顏色相同時,即為反應終點,記錄時),當由紫色逐漸轉變?yōu)樽爻壬c標準比色管顏色相同時,即為反應終點,記錄時間即為液化時間間即為液化時間(t),重復做一次取平均值。,重復做一次取平均值。n4、液化型淀粉酶的活力(、液化型淀粉酶的活力(u/g粗酶)粗酶)n 200.0260t10.5(50)1W復習與思考
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2024年廣東黃埔區(qū)紅山街招聘工作人員考試真題
- 2024-2025年中國專項債券行業(yè)市場運營現(xiàn)狀及投資規(guī)劃研究建議報告
- 2025年網(wǎng)管光纖收發(fā)器市場調查報告
- 三亞吊車出租合同范本
- 中國女士內衣行業(yè)市場全景評估及投資戰(zhàn)略研究報告
- 會議商務合同范例
- 2025年度金融科技股權投資與回購專項協(xié)議
- 2025年度專利權轉讓知識產(chǎn)權合同補充協(xié)議
- 八年級物理蘇科版上冊《5.3直線運動》教學設計教案
- 中國蘆薈霍爾素行業(yè)市場發(fā)展監(jiān)測及投資方向研究報告
- UPVC排水管技術標準
- 高中生安全教育主題班會課件
- 住戶調查輔助調查員培訓教學課件
- 數(shù)字營銷基礎PPT完整全套教學課件
- 園林植物環(huán)境PPT完整全套教學課件
- 跨境電商B2B數(shù)據(jù)運營高職PPT全套完整教學課件
- 2023中職27 嬰幼兒保育 賽題 模塊三 嬰幼兒早期學習支持(賽項賽題)
- 教師師德和專業(yè)發(fā)展課件
- 服務器巡檢報告模版
- 2023年中國煤化工行業(yè)全景圖譜
- 2023年高中生物新教材人教版(2023年)必修二全冊教案
評論
0/150
提交評論