第九章吸光光度法

1、第九章 吸光光度法Spectrophotometry9-1 吸光光度法基本原理9-2 光度計及其基本部件9-3 顯色反應及顯色條件的選擇9-4 吸光度測量條件的選擇9-5 吸光光度法的應用9-6 紫外吸收光普法簡介14:50:09概述1. 比色法2. 可見分光光度法3. 紫外分光光度法14:50:0914:50:09分光光度法（紫外分光光度法（紫外-可見分光光度法）可見分光光度法）UV-VIS0.575I0ItbCTIIAt lglg0未考慮吸收池和溶劑對光子的作用未考慮吸收池和溶劑對光子的作用14:50:10吸光光度法特點：1）檢出限低 10-5-10-6mol/L2）靈敏度高，適于測定微量

2、組分3）誤差2-5%4）測定迅速、操作簡單、價格便宜，應用廣泛14:50:109-1 吸光光度法基本原理 射射線線x射射線線紫紫外外光光紅紅外外光光微微波波無無線線電電波波10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm可可 見見 光光一、物質(zhì)對光的選擇性吸收14:50:10單色光、復合光、光的互補單色光、復合光、光的互補藍藍黃黃紫紅紫紅綠綠紫紫黃綠黃綠綠藍綠藍橙橙紅紅藍綠藍綠14:50:10完全吸收完全吸收完全透過完全透過吸收黃色光吸收黃色光光譜示意光譜示意表觀現(xiàn)象示意表觀現(xiàn)象示意14:50:11光吸收原理分子的分子的紫外紫外-可見吸

3、收光譜可見吸收光譜是由是由電子電子躍遷躍遷引起的，故又稱引起的，故又稱電子光譜電子光譜.S2S1S0S3h E2E0E1E3A h 分子內(nèi)電子躍遷分子內(nèi)電子躍遷帶狀光譜帶狀光譜 AS2S1S014:50:11 吸收光譜（吸收曲線）14:50:11吸收曲線的討論：同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對應的波長稱為不同。吸光度最大處對應的波長稱為最最大吸收波長大吸收波長maxmax不同濃度的不同濃度的同一同一種物質(zhì)，其吸收曲種物質(zhì)，其吸收曲線形狀線形狀相似相似maxmax不變。而對于不變。而對于不同不同物質(zhì)，物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和它們的吸收曲線形狀和m

4、axmax則則不同。不同。吸收曲線吸收曲線可以提供物質(zhì)的結構信息，并作為物質(zhì)可以提供物質(zhì)的結構信息，并作為物質(zhì)定性定性分析的分析的依據(jù)之一。依據(jù)之一。14:50:11討論：不同濃度的同一種物質(zhì)，在某一定波長下吸光度不同濃度的同一種物質(zhì)，在某一定波長下吸光度 A A 有差異，在有差異，在maxmax處吸光度處吸光度A A 的差異最大。此特性可作作的差異最大。此特性可作作為物質(zhì)為物質(zhì)定量定量分析的依據(jù)。分析的依據(jù)。在在maxmax處吸光度隨濃度變化的處吸光度隨濃度變化的幅度幅度最最大大，所以測定，所以測定最最靈敏靈敏。吸收曲線是。吸收曲線是定量定量分析中選擇入射分析中選擇入射光光波長波長的重要的重

5、要依據(jù)依據(jù)。14:50:11定性分析與定量分析的基礎定性分析與定量分析的基礎ABA )(maxA)(maxBA C增增大大14:50:11二、光吸收的基本定律-朗伯-比爾定律透光率透光率 （透射比）（透射比）Transmittance透光率定義：透光率定義：0IITtT 取值為取值為0.0 % 100.0 %14:50:12吸光度 與透光率 Absorbance and transmittanceAKcbTlgT ： 透光率透光率A： 吸光度吸光度1.00.50ACA100500T %TKbcAT101014:50:12吸光系數(shù) AbsorptivityKcbA c 吸光物質(zhì)的濃度：吸光物質(zhì)的

6、濃度： g/L, mol/LK （或（或k）K aK %11cmEMaEcm1010%11相互關系相互關系14:50:12吸光的加合性iiiiiiiicbbcAA14:50:12非單色光引起的對吸光定律的偏離設設入射光由入射光由 1 和和 2 兩種波長組成，溶液的吸光質(zhì)點對兩種波長組成，溶液的吸光質(zhì)點對兩種波長的光的吸收均遵從吸收定律兩種波長的光的吸收均遵從吸收定律 1 bcIIA11011lgbcII110011 2 bcIIA 22022lgbcII210022 1 + 2 210201lgIIIIA bcbcIIII211010lg02010201 21bcA1或或bcA221bcA1或

7、或bcA214:50:12非單色光引起的對吸光定律的偏離iKAA或或 1 2 1 對應的對應的 1較小較小 2 對應的對應的 2較大較大14:50:13吸光質(zhì)點間相互作用引起的對吸光定律的偏離吸光質(zhì)點間相互作用引起的對吸光定律的偏離14:50:130.575I0ItbcTIIAtlglg0未考慮吸收池和溶劑對光子的作用未考慮吸收池和溶劑對光子的作用9-2 光度計及其基本部件14:50:13單波長單光束分光光度計0.57514:50:13比值比值單波長雙光束分光光度計14:50:13雙波長雙波長 將不同波長的兩束單色光(1、2) 快速交替通過同一吸收池而后到達檢測器。產(chǎn)生交流信號。無需參比池。=

8、 12nm。A=A2-A1=(2-1)bc=Kc14:50:14一、基本組成一、基本組成 general process光源單色器樣品室檢測器顯示1. 1. 光源光源 在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。分光光度計中常用的光源有熱輻射光源和氣體放電光源兩類 可見光區(qū)：作為光源，其輻射波長范圍在3202500 nm。 紫外區(qū)：氫、氘燈氫、氘燈。發(fā)射185400 nm的連續(xù)光譜。14:50:14 2.2.單色器單色器 將光源發(fā)射的復合光分解成單色光并可從中選出一任波長單色光的光學系統(tǒng)。 入射狹縫：入射狹縫：光源的光由此進入單色器； 準光裝置

9、：準光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束； 色散元件：色散元件：將復合光分解成單色光；使不同波長不同波長的輻射以的進行傳播；棱鏡或光柵；棱鏡或光柵； 聚焦裝置：聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫； 出射狹縫出射狹縫。14:50:14棱鏡根據(jù)光的折射現(xiàn)象進行分光根據(jù)光的折射現(xiàn)象進行分光 棱鏡對不同波長的光具有不同的折射率，波長長的光，折射率??；波長短的光，折射率大。 平行光經(jīng)過棱鏡后按波長順序排列成為單色光；經(jīng)聚焦后在焦面上的不同位置上成像，獲得按波長展開的光譜； 棱鏡的光學特性可用色散率和分辨率來表征；14:50:14光柵 通過在平板通過在平板玻璃玻璃或或金屬板金

10、屬板上刻劃出一道道上刻劃出一道道等寬、等間等寬、等間距距的刻痕制成。常用的光柵刻痕密度每毫米為的刻痕制成。常用的光柵刻痕密度每毫米為12001200條、條、18001800條或條或24002400條；條；根據(jù)工作方式不同分為：根據(jù)工作方式不同分為：透射光柵，反射光柵；透射光柵，反射光柵； 光柵光譜的產(chǎn)生是多狹縫與單狹縫共同作用的結果，前者決定光譜出現(xiàn)的位置位置，后者決定譜線強譜線強度分布度分布；14:50:14光柵的色散原理14:50:14狹縫 單色器的進口狹縫起著單色器光學系統(tǒng)虛光源的作用。復合光經(jīng)色散元件分開后，在出口曲面上形成相當于每條光譜線的像，即光譜。轉(zhuǎn)動色散元件可使不同波長的光譜線

11、依次通過。 14:50:143.3.樣品室樣品室 樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外紫外區(qū)須采用區(qū)須采用石英石英池池，可見區(qū)一可見區(qū)一般用玻璃池。般用玻璃池。4.4.檢測器檢測器 利用光電效應將透過吸收池的光信號變成可測的電信號，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。5. 5. 結果顯示記錄系統(tǒng)結果顯示記錄系統(tǒng) 檢流計、數(shù)字顯示、微機進行儀器自動控制和結果處理14:50:14基本組成總結14:50:14顯色反應顯色反應：顯色反應：將待測組分轉(zhuǎn)變成有顏色化合物的反應將待測組分轉(zhuǎn)變成有顏色化合物的反應 選擇性好，干擾少；選擇性好，干擾少； 靈

12、敏度高；靈敏度高； 有色化合物的組成恒定；有色化合物的組成恒定； 有色化合物的性質(zhì)穩(wěn)定有色化合物的性質(zhì)穩(wěn)定 色差大色差大 60nm60nm MRMR（待測組分）（顯色劑）（有色化合物）14:50:15顯色條件的選擇 吸光光度法是測定顯色反應達到平衡后溶液的吸光度，為了得到準確的結果，必須從研究平衡著手了解影響顯色反應的因素，控制適當?shù)臈l件，使反應完全和穩(wěn)定。14:50:15顯色反應的主要條件 顯色的主要條件有以下幾點： （1）顯色劑用量 顯色反應一般可以用下式表示：M + R MR 為了減少反應的可逆性，根據(jù)同離子效應，加入過量的顯色劑是必要的，但過量太多，有時會有副反應產(chǎn)生，反而不利。14:

13、50:15吸光度與顯色劑用量關系圖是吸光度與顯色劑用量關系的幾種情況。圖211吸光度與顯色劑用量的關系 從三個圖中可以得到： 1)可以選用的用量較寬 2)可以選用的用量較窄 3)表明隨著顯色劑用量的增加，吸光度也不斷增大。 14:50:15（2）溶液的酸度 溶液的酸度對顯色反應的影響是多方面的 : 例如由于顯色劑大多是有機弱酸，酸度影響顯色劑的離解，因而影響顯色劑反應的完全程度。 又如許多顯色劑本身就是酸堿指示劑，配位反應后的顏色必須與顯色劑本身的顏色有顯著的不同。 二甲酚橙pH6.3呈紅紫色，pH6.3呈黃色，與金屬配合物則呈紅色，故只適合于pH 12 配合物被破壞，生成 Fe（OH）3 沉

14、淀14:50:16（3）顯色時間的影響 由于反應速率不同，完成反應所需的時間常有很大差別同時，有色化合物在放置過程中也會發(fā)生變化。 有的迅速反應且能穩(wěn)定較長時間（如Fe3+與磺基水楊酸反應）。有的放置一段時間反應才達平衡，溶液顏色才達穩(wěn)定程度（如硅鉬藍的生成）。 有的放置一段時間后由于各種原因，如空氣氧化、試劑分解或揮發(fā)、光照射等而褪色（如硅鉬藍只穩(wěn)定0.51h）。 14:50:16（4）溫度對顯色反應也有影響 如Fe3與磺基水楊酸反應室溫就能進行，硅鉬藍的生成如果在沸水中則只需30s。 14:50:16（5） 干擾離子的影響及其消除 有的干擾離子本身有顏色， 如Cu2（藍）、Co2（紅）、C

15、r3（綠）、Fe3（黃）； 有的與試劑生成有色配合物，如硅鉬藍法測Si時，P、As也與鉬酸銨生成雜多酸且同時被還原成鉬藍干擾測定； 有的與試劑或被測離子生成更穩(wěn)定化合物，使被測離子配位不完全等。 因此，對與一個新的比色方法的提出，往往必須做干擾離子試驗。14:50:16干擾離子的消除 對于干擾離子的消除通常采用下述方法。（1）加入配位劑掩蔽干擾離子 如測Ti4時，F(xiàn)e3黃色干擾，可加H3PO4使其成為Fe（PO4）3（無色）。（2）調(diào)節(jié)溶液酸度 如硅鉬藍在酸度46mol/L仍然穩(wěn)定，但磷砷鉬藍在1.6mol/L以上時則被破壞。14:50:16顯色劑顯色劑無機顯色劑無機顯色劑:有機顯色劑有機顯色

16、劑:生色團生色團 從廣義來說，所謂生色團，是指分子中可以吸收光子而產(chǎn)生電子躍遷的原子基團。但是，人們通常將能吸收紫外、可見光的原子團或結構系統(tǒng)定義為生色團（發(fā)色團）。 具有不飽和鍵電子的基團，產(chǎn)生 *躍遷，躍遷E較低,往往是生色團 助色團：助色團： 有一些含有n電子的基團，它們本身沒有生色功能(不能吸收200nm的光)，但當它們與生色團相連時，就會發(fā)生p共軛共軛作用，增強生色團的生色能力(吸收波長向長波方向移動，且吸收強度增加)，這樣的基團稱為助色團。 14:50:16紅移紅移與藍移與藍移有機化合物的吸收譜帶常常因引入取代基或改變?nèi)軇┦棺畲笪詹ㄩLmax和吸收強度發(fā)生變化:max向長波方向移動

17、稱為紅移紅移，向短波方向移動稱為藍移藍移 (或紫移)。有機顯色劑種類有機顯色劑種類(1)偶氮類偶氮類 顯色分子中含有偶氮基顯色分子中含有偶氮基(2)三苯甲烷類三苯甲烷類14:50:16三元配合物的分析特性 如果顯色反應加兩種顯色劑可以形成三個組分的混合配合物。這種方法大大的提高了顯色劑的穩(wěn)定性、靈敏性、選擇性。 a. 三元配合物比較穩(wěn)定,可提高分析測定的準確度和重現(xiàn)性。 例如Ti-EDTA-H2O2三元絡和物的穩(wěn)定性比Ti-EDTA和Ti-H2O2二元絡和物的穩(wěn)定性分別增加強約1000倍和100倍。14:50:16三元配合物的分析特性b. 三元絡合物對光有較大的吸收容量,所以進行光度測定時它比

18、二元絡合物具有更高的靈敏度。如用H2O2測定釩，靈敏度太低(=2.7102)。而用PAR顯色靈敏度雖有提高，但選擇性差。 如果將V5+、H2O2、PAR三者混合,一定條件下則形成紫紅色的三元絡合物，靈敏度可大大提高(=1.4104)，最大吸收波長也移至540nm（原最大吸收波長為450nm），出現(xiàn)較大紅移。 14:50:16三元配合物的分析特性c. 形成三元絡合物的顯色反應比二元體系具有更高的選擇性。這是因為在二元絡合物中，一種配位體常與多種金屬離子產(chǎn)生類似絡合反應，而當體系中兩種配位體形成三元絡合物時，就減少了金屬離子形成類似絡合物的可能性。 例如：鈮和鉭都可與鄰苯三酚生成二元絡合物，但是在

19、草酸介質(zhì)中，只有鉭能與鄰苯三酚形成黃色的鉭-鄰苯三酚-草酸三元絡合物，鈮則不能形成類似的三元絡合物，因而提高了反應的選擇性。14:50:16三元絡合物在光度分析中的應用特點 三元絡合物在光度分析中的應用特點還有很多：三元絡合物在光度分析中的應用特點還有很多： 可以改善顯色條件,例如有CTMAC（氯化十六烷基三甲基胺）存在時,Al3+與絡天青S形成三元絡合物比沒有CTMAC時形成二元絡合物的pH范圍寬; 具有較好的萃取性能,例如Mn2+在pH11時能與雙硫腙形成有色絡合物,加入吡啶萃取時,穩(wěn)定的三元配合物大大提高了萃取率。14:50:169-4: 9-4: 光度測量誤差和測量條件光度測量誤差和測

20、量條件的選擇的選擇 cb 測量靈敏度測量靈敏度= M1061000 0.001 MS= M103= (g/cm2) A 顯色反應靈敏度顯色反應靈敏度：= (Lmol-1cm-1) bc14:50:16檢測計標尺上A與T的關系若測A時產(chǎn)生微小的絕對差dA，則相對誤差Er為：Er=dA/A；A=bc當b一定時，兩邊積分得：dA=bdcdc為測量濃度時的絕對誤差，二式相除： dA/A=dc/c=Er因c A ，故dc亦正比dA而測量時Er相等，上式成立。一一.儀器測量誤差儀器測量誤差 14:50:170.434lgCTCTT濃度的相對誤差cdcTTdTTTdTAdATdTdATTA lg434. 0

21、ln434. 0ln434. 0lg微分微分T- 儀器刻度讀數(shù)不可靠所引起的誤差儀器刻度讀數(shù)不可靠所引起的誤差（0.2% 2% ）14:50:17例如例如某光度計的透光率刻度讀數(shù)誤差為某光度計的透光率刻度讀數(shù)誤差為T=1%，計算下列各百分透過率時濃度的相計算下列各百分透過率時濃度的相對誤差對誤差 c/ c，指出指出 c/ c4%時，百分透光率時，百分透光率讀數(shù)范圍讀數(shù)范圍 T% = 1，10，20，30，50，70，80，90 T=0.01，0.02，0.03，0.50，0.70，0.80，0.90 c/ c（%）=21.7，4.34，3.10，2.77，2.88，4.00，5.60，10.5

22、4 解解為使結果為正，為使結果為正，T取負值取負值 14:50:17用誤差公式：用誤差公式： c 0.434T 0.434(-1%) = = =21.7% c TlgT 0.01lg 0.01 由計算可知：由計算可知：此時吸光度在0.20-0.80之間A= -lgT=-lg0.368=0.434 此時相對誤差最小。 c當當 (%) 4%時；時； T為為 15 65% c14:50:17影響測定結果的相對誤差兩個因素影響測定結果的相對誤差兩個因素： T和T T- T- 儀器刻度讀數(shù)不可靠所引起的誤差（儀器刻度讀數(shù)不可靠所引起的誤差（0.2%0.2% 2%2% ）當當T=0.368T=0.368（

23、A=0.434A=0.434）時，濃度相對誤差最小）時，濃度相對誤差最小當吸光度在當吸光度在0.150.15 1.01.0范圍內(nèi)濃度的測量誤差約為范圍內(nèi)濃度的測量誤差約為1.4%-2.2%1.4%-2.2%14:50:17二二. .測量條件的選擇測量條件的選擇 1.入射光波長的選擇：最大吸收的原則入射光波長的選擇：最大吸收的原則max2.控制吸光度讀數(shù)范圍：調(diào)控制吸光度讀數(shù)范圍：調(diào) c或或b，使使A介于介于0.2-0.8 3.參比溶液的選擇：選合適的參比溶液，調(diào)儀參比溶液的選擇：選合適的參比溶液，調(diào)儀器器A =0，T=100% 14:50:17 如果樣品溶液、試劑、顯色劑均無色時，選溶劑作參比

24、，稱如果樣品溶液、試劑、顯色劑均無色時，選溶劑作參比，稱 為為“溶劑空白溶劑空白”； 如果樣品溶液有色，而試劑、顯色劑無色時，選不加顯色劑如果樣品溶液有色，而試劑、顯色劑無色時，選不加顯色劑 的樣品溶液作參比，稱為的樣品溶液作參比，稱為“樣品空白樣品空白”； 如果試劑、顯色劑有色，而樣品溶液無色時，選不加樣品的如果試劑、顯色劑有色，而樣品溶液無色時，選不加樣品的 試劑、顯色劑溶液作參比，稱為試劑、顯色劑溶液作參比，稱為“試劑空白試劑空白”。(4)(4)顯色劑與試液均有顏色顯色劑與試液均有顏色, ,可將一份試液加入適當掩蔽劑可將一份試液加入適當掩蔽劑, ,將被將被測組分掩蔽起來測組分掩蔽起來,

25、,使之不再與顯色劑作用使之不再與顯色劑作用, ,而顯色劑及其他試劑而顯色劑及其他試劑均按試液測定方法加入均按試液測定方法加入, ,以此作為參比溶液以此作為參比溶液, ,可以消除顯色劑和可以消除顯色劑和一些共存組分的干擾一些共存組分的干擾. .(5)(5)改變加入試劑的順序改變加入試劑的順序, ,使被測組分不發(fā)生顯色反應使被測組分不發(fā)生顯色反應, ,以此溶液以此溶液作為參比溶液消除干擾作為參比溶液消除干擾. .14:50:179.5 9.5 吸光光度法的應用吸光光度法的應用 一一. .標準曲線法測單一組分標準曲線法測單一組分 1.選擇合適的顯色反應和顯色條件選擇合適的顯色反應和顯色條件 2.繪出

26、被測組分的吸繪出被測組分的吸 A收光譜曲線收光譜曲線(用標液用標液) 3.在在max下測一系列標準溶液下測一系列標準溶液 A的的A值，繪制工作曲線值，繪制工作曲線A-c4.與工作曲線相同的方法，測未知物與工作曲線相同的方法，測未知物AX ， 從工從工作曲線上查作曲線上查cX Ax Cx14:50:17例例1用用phen測微量測微量Fe2+： (1)c Fe(標標)= 100g/mL 10010-6 = =1.7910-3mol/L M 1000b=1cm：VFe(標標)(mL)：0.20，0.40，0.60，0.80，1.0/ 50mL容量瓶容量瓶 A508：0.080，0.150，0.225

27、，0.300，0.375 14:50:17(2)試樣水泥試樣水泥 50ml顯色與標準曲線方法相顯色與標準曲線方法相同，測同，測A=0.770 MFe 1000 (3)計算計算 Fe%= cXV50 100 mS bAc 14:50:17例例2稱鋼樣稱鋼樣0.500g，酸溶解，將錳全部氧化酸溶解，將錳全部氧化為為MnO4-，轉(zhuǎn)移到，轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶中，搖勻，從中容量瓶中，搖勻，從中取取5.00mL50mL容量瓶定溶，用容量瓶定溶，用2cm比色皿在比色皿在525nm，=2235，測測A=0.124，計算計算Mn%=？(Mn=54.94) 解解 A 0.124 c2= = = 2.7710-5m

28、ol/L b 22352 MMn c2 50 1000 Mn%= 100=0.152 5.00 0.500 5014:50:17例例3Phen測測Fe，欲配欲配Fe2+標液標液 1L，使其稀使其稀釋釋100倍時，放在倍時，放在1.0cm的比色皿中，測得的比色皿中，測得A=0.50，問稱取問稱取(NH4)2Fe(SO4)26H2O (Mr= 392.13) 多少克？多少克？(=1.1104 ) 解解設稀釋后設稀釋后 A 0.50 cFe2+ = = = 4.510-5mol/L b 1.11041.0 所以：所以： mS= cVM= 4.5 10-5100 392.13 =1.8g 14:50:

29、17例例4某試液用某試液用2.0cm比色皿測比色皿測T=60%，若改若改用用3.0cm，求求T% 和和A 解解(1)A= -lgT= -lg0.60 =0.222=b c A1 b1 b2(2) = A2= A1=0.333 A2 b2 b1 1 100(3)A=2- lgT%=lg()=lg() T T%lgT=2-A=2-0.333=1.667 T%=46.45 14:50:18例例5稱純稱純Fe0.5000g溶解定容溶解定容1000mL作標作標準準Fe，取取10.0mL稀釋稀釋100mL，取取5.0mL顯色顯色定溶定溶50mL，測測As=0.230；稱試樣；稱試樣1.500g溶解定溶解定

30、容容250.0ml，從中取，從中取5.00ml與標準曲線相同方法與標準曲線相同方法測測Ax=0.200，求試樣，求試樣Fe%=？ 解解 0.500g 10.0 1000 5.0 c標標 = =5.010-6g/mL 100mL 50 A標標 AS 0.230 c標標 5.010-6 = = ； = A樣樣 AX 0.200 c樣樣 c樣樣 14:50:18因為因為Beer Law ： AS AX = cS cX AX所以所以 cX= cS = 4.35 10-6g/mL AS 4.3510-6 g/mL50mL 所以所以 Fe%= 100 5.0 1.50g 250 = 0.725 14:50

31、:18一一.多組分的定量方法多組分的定量方法cbaAAAA總定量依據(jù)：三種情況：三種情況：1 1兩組分吸收光譜不重疊兩組分吸收光譜不重疊（互不干擾）兩組分在各自兩組分在各自max下不重疊下不重疊分別按單組分定量分別按單組分定量aaaaaaEACCEA1111由bbbbbbEACCEA2222由111222aabbEAEA過 程 ：測 定；測 定；9-6吸光度法的其他應用吸光度法的其他應用14:50:182 2兩組分吸收光譜部分重疊兩組分吸收光譜部分重疊1測測A1b組分不干擾組分不干擾可按單組分定量測可按單組分定量測Ca2測測A2a組分干擾組分干擾不能按單組分定量測不能按單組分定量測Ca aaaaaaEACCEA1111由bbaababaCECEAAA22222由baababECEAC2221112222aaababEAEEA過程：測定；測定和；14:50:18解線性方程組法解線性方程組法babababaAEEAEE22221111；和測定；和測定bbaababaCECEAAA11111bababbabbaaEEEEEAEAC12211221babaabaa