特殊環(huán)境微生物

1、第10章 特殊環(huán)境中的微生物第1節(jié) 醫(yī)院環(huán)境微生物一、醫(yī)院環(huán)境特征二、醫(yī)院內(nèi)感染微生物特點(diǎn)三、醫(yī)院內(nèi)感染的來源與途徑四、醫(yī)院內(nèi)感染常見病原微生物五、醫(yī)院的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)監(jiān)測一、醫(yī)院環(huán)境特征(一) 醫(yī)院是病人集中的場所v 醫(yī)院的誤診、漏診、混合收容以及人群中傳染源、帶菌者的大量存在，在診治過程中級易造成院內(nèi)交叉感染。v 病人的密集程度和相互接觸機(jī)會決定了醫(yī)院這個特殊環(huán)境對醫(yī)院內(nèi)感染所起作用的程度。(二) 醫(yī)院病人多為易感人群v 住院前，病人的健康就已受到一定損耗，在醫(yī)院中由于手術(shù)治療和抗腫瘤藥物及免疫抑制劑的應(yīng)用，進(jìn)一步降低了病人的抵抗力，致使一些正常菌群從和條件致病菌也會引起嚴(yán)重的感染。(三) 特

2、殊的診治手段v 部分醫(yī)療器械需要經(jīng)人的皮膚、黏膜、血管和腔道進(jìn)行檢查和治療，不同程度損傷了機(jī)體的防御屏障。經(jīng)常應(yīng)用的侵襲性診治手段如尿道插管、纖維支氣管鏡、腦積水引流、體外循環(huán)等。二、醫(yī)院內(nèi)感染微生物特點(diǎn)(一) 多為條件致病菌或正常菌群v 引起醫(yī)院內(nèi)感染的細(xì)菌變化趨勢是G+球菌逐漸減少，而由G-桿菌引起的感染不斷增加，特別是一些毒力較弱的條件致病菌增加的幅度較大。v 人體各部位的正常菌群，如皮膚、口腔、消化道、上呼吸道等存在的金葡菌、鏈球菌、不動桿菌、大腸埃希氏菌等可在病人抵抗力低下、大量抗生素應(yīng)用情況下引起醫(yī)院內(nèi)感染。(二) 病原體抵抗力較強(qiáng)v 處于營養(yǎng)極差環(huán)境中仍可繁殖并具有抵抗力：新鮮水

3、中接種綠膿桿菌、經(jīng)48h培養(yǎng)后仍有繁殖現(xiàn)象，并對一些消毒劑（戊二醛、醋酸、二氧化氯）具有抵抗力。(三) 常具有耐藥性v 醫(yī)院內(nèi)感染的細(xì)菌，尤其是G-菌可產(chǎn)生耐藥性，甚至成為多重耐藥菌株（對本來敏感的兩種或兩種以上抗生素呈耐藥現(xiàn)象）。v 微生物對某一藥物抵抗的同時，也可對化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的藥物產(chǎn)生耐藥，使得耐藥現(xiàn)象擴(kuò)大流行。醫(yī)院內(nèi)常見耐藥菌株有金葡菌、痢疾志賀氏菌和綠膿桿菌。三、醫(yī)院內(nèi)感染的來源和途徑（一） 感染來源交叉感染v 從醫(yī)院內(nèi)其他人獲得的感染叫交叉感染。主要來源于病人和醫(yī)務(wù)人員。病人之間、病人和醫(yī)務(wù)人員之間相互傳播。v 自身感染v 從病人自身獲得的感染，也叫內(nèi)源性感染。引起自身感染的微生物

4、多是人體正常微生物群。環(huán)境感染接觸污染環(huán)境獲得的感染。病原體不能證明是他人或自身獲得，但可以確定為某一環(huán)境因素造成。（二）感染途徑q 醫(yī)院內(nèi)感染的主要部位肺部感染、尿路感染、手術(shù)傷口感染、胃腸道感染q 醫(yī)院內(nèi)感染的主要部位肺部感染v 病人口咽部微生物吸入。v 含細(xì)菌氣溶膠吸入。v 其他部位感染的血源性播散。尿路感染、手術(shù)傷口感染、胃腸道感染（二）感染途徑q 醫(yī)院內(nèi)感染的主要部位肺部感染、尿路感染、手術(shù)傷口感染、胃腸道感染v 導(dǎo)尿管消毒不徹底v 皮膚消毒不嚴(yán)密v 醫(yī)務(wù)人員手不清潔v 導(dǎo)尿管留置時間長引起尿路感染的微生物主要是G-桿菌，約占80%，以加單胞菌多見； G+球菌，約占20%，以腸球菌和

5、葡萄球菌為主。手術(shù)傷口感染v 手是傷口感染的重要原因v 各種手術(shù)及處理傷口的敷料和藥液v 空氣也是傷口感染的重要途徑引起手術(shù)傷口感染的微生物主要是金黃色葡萄球菌和G-桿菌胃腸道感染v 胃腸道感染造成的急性胃腸炎是較為常見醫(yī)院內(nèi)感染，主要致病菌有沙門菌、志賀菌、致病性大腸桿菌、耶爾森菌等。四、醫(yī)院內(nèi)感染常見病原微生物（一）細(xì)菌q 葡萄球菌q 克雷伯菌屬q 大腸埃希氏菌q 沙雷菌屬q 不動桿菌屬q 綠膿桿菌q 鼠傷寒沙門菌q 厭氧菌（二）病毒q 甲型肝炎病毒q 乙型肝炎病毒q 丙型肝炎病毒q 輪狀病毒q 柯薩奇病毒q 人類免疫缺陷病毒（三）真菌白色念珠菌廣泛分布于自然界，也存在于正常人的口腔、皮膚

6、、胃腸道和陰道。正常情況下不致病，當(dāng)機(jī)體抵抗力極度低下或某種原因造成局部菌群失調(diào)時，發(fā)生感染現(xiàn)象。q 新型隱球菌在土壤、糞便中均有存在。感染一般由呼吸道侵入，主要是由于吸入了含隱球菌的灰塵所致。五、醫(yī)院的衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)監(jiān)測人包括對醫(yī)院工作人員和病人的監(jiān)測。q 環(huán)境包括空氣、物體表面和儀器設(shè)備的監(jiān)測。得到各種監(jiān)測資料制定有效控制計劃（一）空氣、物體表面、醫(yī)務(wù)人員手的監(jiān)測q 醫(yī)院空氣微生物監(jiān)測醫(yī)院空氣中微生物含量可以反映空氣污染或潔凈的程度，是空氣衛(wèi)生學(xué)的重要指標(biāo)?？諝馕⑸锉O(jiān)測在醫(yī)院內(nèi)感染監(jiān)測中占有特殊重要的地位。q 醫(yī)院空氣微生物監(jiān)測采集醫(yī)院空氣標(biāo)本可應(yīng)用自然沉降法或氣流撞擊法。采樣在時間和地點(diǎn)上

7、應(yīng)有一定代表性，在同一室內(nèi)應(yīng)該選擇四角及中央5個點(diǎn)（房間小于10m2，可內(nèi)、外、中3個點(diǎn)）。q 醫(yī)院空氣微生物監(jiān)測應(yīng)用空氣采樣器采樣，一般置于距地面1.5m處，離門窗、人流處1m以上。采樣人應(yīng)穿隔離衣并戴口罩，采樣時與采樣器保持50cm以上距離。q 物體表面細(xì)菌污染的監(jiān)測物體表面采樣時，將內(nèi)徑為5cmx5cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有生理鹽水的棉拭子在規(guī)格板空格處涂抹10次（往返為1次），移動規(guī)格板用同樣方法涂抹采樣，連續(xù)采樣10處；將棉拭子放入無菌生理鹽水或液體增菌培養(yǎng)基中，檢查菌落總數(shù)或其他致病菌與條件致病菌。對醫(yī)院門把手、水龍頭和醫(yī)療器械采樣時，僅用生理鹽水棉拭子涂抹10次即可

8、。q 醫(yī)務(wù)人員手細(xì)菌污染的監(jiān)測用浸有生理鹽水的棉拭子在被檢人員手指掌面往返涂抹2次，放入采樣管內(nèi)。一般不作為常規(guī)監(jiān)測項目，在需要調(diào)查醫(yī)院內(nèi)感染事件，有必要查找與病人的接觸關(guān)系時才進(jìn)行檢測。各類環(huán)境空氣、物體表面、醫(yī)務(wù)人員手細(xì)菌菌落總數(shù)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境類別范圍標(biāo)準(zhǔn)空氣CFU/m3物體表面CFU/m3醫(yī)務(wù)人員手 CFU/m3I類潔凈手術(shù)室、潔凈病房1055II類普通手術(shù)室、產(chǎn)房、嬰兒房、早產(chǎn)兒室、普通保護(hù)性隔離室、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房20055III類兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、注射室、換藥室、治療室、急診室、化驗(yàn)室、各類普通病房和房間5001010IV類傳染科及病房1515（二）消毒滅菌效果監(jiān)測q 壓

9、力蒸汽滅菌效果監(jiān)測常用生物學(xué)測試法和化學(xué)測試法q 紫外線消毒效果監(jiān)測常用紫外線強(qiáng)度儀測定和人工染菌檢查法q 消毒劑使用過程中效果監(jiān)測常用生物學(xué)測試法第 2 節(jié)公 共 場 所 微 生 物一、公共場所環(huán)境特征二、公共場所微生物來源及種類三、公共場所微生物檢測與標(biāo)準(zhǔn)四、公共場所微生物的危害及預(yù)防一、公共場所環(huán)境特征q 人群密集，人員流動性大；q 公共設(shè)施及物品供公眾重復(fù)使用；q 人群中健康與非健康個體混雜；q 不同公共場所特色各異，管理苦難。二、公共場所微生物來源及種類q 來源v 自然來源：土壤，放線菌、酵母菌、真菌。v 人為來源：呼出氣體、人體脫落物?？諝馕廴局甘揪溓蚓?，檢出率與室內(nèi)人群密度、空

10、氣污染程度及細(xì)菌總數(shù)呈正相關(guān)。q 空氣微生物v 種類：細(xì)菌占多數(shù)，球菌比例最高。v 分布：城市>農(nóng)村，交通干道、商場、影劇院污染較重。v 意義：極易傳播呼吸道疾病。q 公共用品微生物v 概念：公共用品(public articles)指公共場所中專門供給客人反復(fù)使用和從業(yè)人員專門用于直接為顧客服務(wù)的各種用品、用具、設(shè)備和設(shè)施的總稱。v 種類：金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、銅綠假單胞菌、霉菌、乙肝病毒、寄生蟲卵等。q 公共用品微生物v 分布：飲具、毛巾、梳子、拖鞋、臉盆、浴缸。v 意義：消化道疾病，皮膚的細(xì)菌感染、真菌感染，病毒的感染。q 空氣微生物檢測：空氣細(xì)菌總數(shù)為指標(biāo)。v 平皿沉降法

11、：最普通的采樣方法，簡單但不是很理想。v 空氣采樣器法：目前規(guī)定撞擊式采樣作為空氣微生物采樣的首選方法。q 利用撞擊原理，恒定收集空中的微生物到含瓊脂培養(yǎng)基平皿中。檢測后的含瓊脂培養(yǎng)皿經(jīng)過恒溫，定時培養(yǎng)，形成菌落，最后進(jìn)行菌落計數(shù)計算，得到單位空氣中微生物數(shù)。q 當(dāng)檢測儀接通內(nèi)部真空泵產(chǎn)生負(fù)壓，將厘米距離的空氣吸進(jìn)檢測頭的前端窄縫中，窄縫的后端噴嘴出口處形成強(qiáng)進(jìn)的高速噴射氣流，空氣中被檢驗(yàn)的微生物粒子通過較長的窄縫時也隨之獲得高速運(yùn)動，當(dāng)高速氣流接進(jìn)采集面時，微生物粒子受慣性作用直接撞擊到含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上，空氣受阻，只能按照既定的路線沿采集面向四周擴(kuò)散，同時又借助高速擴(kuò)散氣流通過微孔紅外

12、傳感器推動內(nèi)部旋轉(zhuǎn)，將粒子均勻分布在平皿表面。q 公共用品微生物檢測v 旅店業(yè)：細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群為指標(biāo)。v 理發(fā)美容業(yè)：大腸菌群和金黃色葡萄球菌。v 公共浴池：霉菌和酵母菌。v 游泳場所：細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群。q 從業(yè)人員健康檢查v X線胸透、便檢、皮膚檢查、內(nèi)科檢查、乙肝表面抗原檢查。v 旅店業(yè)、公共浴室、理發(fā)美容店、游泳場等直接為顧客服務(wù)的人員每年檢查1次，其他每2年檢查1次。第 3 節(jié)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室微生物第 4 節(jié)極 端 環(huán) 境 微 生 物Extreme environment micro-organisms ; Extremophiles.What are extremophiles?

13、v EXTREMOPHILES are organisms that require extreme environments for growth.     v Extremophiles are organisms that are "fond of" or "love" (-phile) environments including high temperature, pH, pressure and salt concentration, or low temperature, pH, nutrient c

14、oncentration, or water availability. v Extremophiles are also organisms that can tolerate extreme conditions including high levels of radiation or toxic compounds, or those living in conditions that we consider unusual. v Most extremophiles are microorganisms that thrive under conditions t

15、hat from a human perspective are clearly extreme.v 通俗的講，極端環(huán)境微生物是指生長在極端環(huán)境下的一大類微生物。    v 它們偏好極端的環(huán)境，如高溫，低溫，高鹽，極端pH，極端營養(yǎng)條件等等。v 還包括一些能耐受極端條件，如強(qiáng)輻射，強(qiáng)毒性等一些非常規(guī)理化環(huán)境。v 許多的極端環(huán)境微生物還生存在人類未能探知的環(huán)境。不同生物的pH極限紅色為古細(xì)菌，藍(lán)色為細(xì)菌，淺綠色為藻類，棕色為真菌，黃色為原生動物，綠色為植物，紫色是動物。不同生物的溫度極限紅色為古細(xì)菌，藍(lán)色為細(xì)菌，淺綠色為藻類，棕色為真菌，黃色為原生動物，綠色為植物，

16、紫色是動物。極端環(huán)境微生物大腸桿菌8099及8170黑色變形芽孢作為對照。經(jīng)2萬Gy 60Co下輻照48小時后置于37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。 三軍大于1963年設(shè)置了強(qiáng)度為2.03.8萬居里的60Co輻射源，該源長期保存于地下一個蓄滿經(jīng)凈化處理的潔凈水的深井中。自1963年該輻射源設(shè)置日起井水未曾更換。由于該井水持續(xù)近40年長期受到強(qiáng)輻射源的作用，已成為獨(dú)特而寶貴的強(qiáng)輻射極端環(huán)境。從該環(huán)境中分離到的細(xì)菌CQ0205，已具備較強(qiáng)的對輻射損傷的抵抗或修復(fù)能力。 從特殊環(huán)境樣品中分離尋找抗輻射微生物源于1956年Anderson等從輻射滅菌的肉類罐頭中首次分離出來一種對輻射及其他DNA損傷劑都具有極

17、強(qiáng)抗性的微小球菌（Deinococcus radiodurans），該細(xì)菌在接受幾百萬拉德射線后粉碎為數(shù)百個片段，但能在一天內(nèi)將其恢復(fù)。日本Asgarani于2000年報道發(fā)現(xiàn)了一株對輻射的抗性較Deinococcus radioduran更強(qiáng)的菌株Rubrobacter radiotolerans, 從該菌中不僅找到了新的DNA損傷修復(fù)基因，還從細(xì)菌的粗提液中純化出了僅對損傷DNA特異的R-內(nèi)切酶。 · 醫(yī)院內(nèi)感染微生物特點(diǎn)· 醫(yī)院內(nèi)感染的來源和途徑· 公共場所環(huán)境特征· 什么是極端環(huán)境微生物極端環(huán)境微生物三軍大于1963年設(shè)置了強(qiáng)度為2.03.8萬居里的60Co輻射源，該源長期保存于地下一個蓄滿經(jīng)凈化處理的潔凈水的深井中。自1963年該輻射源設(shè)置日起井水未曾更換。由于該井水持續(xù)近40年長期受到強(qiáng)輻射源的作用，已成為獨(dú)特而寶貴的強(qiáng)輻射極端環(huán)境。從該環(huán)境中分離到的細(xì)菌CQ0205，已具備較強(qiáng)的對輻射損傷的抵抗或修復(fù)能力。 從特殊環(huán)境樣品中分離尋找抗輻射微生物源于1956年Anderson等從輻射滅菌的肉類罐頭中首次分離出來一種對輻射及其他DN