藥物分析部分：課件二

1、第九章 芳酸及其酯類藥物的分析藥物鑒別檢查含量測定 阿司匹林 三氯化鐵反應(yīng)®紫堇色(酚羥基特征反應(yīng))條件：pH4-6，水解后。水解反應(yīng)：加碳酸鈉試液，加熱，酸化白色沉淀(水楊酸),醋酸臭IR溶液澄清度(碳酸鈉試液中不溶物苯酚、醋酸苯酯、水楊酸苯酯、乙酰水楊酸苯酯等)水楊酸（比色法），限量0.1%易炭化物直接酸堿滴定法：滴定劑NaOH；指示劑酚酞；溶劑中性乙醇，避免酸性雜質(zhì)影響測定及阿司匹林水解阿司匹林片水楊酸（比色法）0.3%兩步滴定法目的：消除酸性雜質(zhì)和酸性水解產(chǎn)物影響方法：先以堿液中和酸性雜質(zhì)(不計量)過量堿液水解后以標(biāo)準(zhǔn)酸液剩余滴定。（做空白）阿司匹林腸溶片水楊酸（比色法）1.

2、5%阿司匹林栓劑水楊酸（HPLC法）1.0%HPLC內(nèi)標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)：咖啡因；應(yīng)做系統(tǒng)適用性試驗對氨基水楊酸鈉酸化后三氯化鐵反應(yīng)（紫紅色，放置不沉淀。）鈉鹽的反應(yīng)：焰色反應(yīng)(鮮黃)、醋酸氧鈾鋅反應(yīng)(黃色¯)IR間氨基酚（雙相滴定法）方法：先以乙醚溶解提取藥物中的間氨基酚，再以鹽酸標(biāo)液滴定，成鹽酸鹽轉(zhuǎn)入水相。限量0.02%原料藥、腸溶片、注射劑：亞硝酸鈉滴定法永停法指示終點苯甲酸鈉三氯化鐵反應(yīng)(赭色沉淀；加稀HCl,轉(zhuǎn)化為白色)分解產(chǎn)物的反應(yīng)(酸性條件，加熱)白色升華物（苯甲酸）鈉鹽的反應(yīng)IR雙相滴定法原理：以水和乙醚兩互不相溶物為溶劑，鹽酸標(biāo)液滴定；苯甲酸鈉滴定成苯甲酸，并進(jìn)入乙醚層。此

3、方法可使反應(yīng)完全。指示劑：甲基橙第十章 胺類藥物的分析藥物鑒別檢查含量測定鹽酸普魯卡因芳香第一胺反應(yīng)重氮化-偶合反應(yīng)（橙黃或猩紅色¯）水解反應(yīng)（白色¯）氯化物的反應(yīng)：Ag+Cl-®AgCl¯+MnO2(H+)®Cl2­IR亞硝酸鈉滴定法條件：酸性條件下。測定條件：加入適量KBr,加快反應(yīng)。加入強(qiáng)酸；室溫終點指示：永停法，鹽酸普魯卡因注射液水解產(chǎn)物，其中對氨基苯甲酸<1.2%（TLC法）鹽酸利多卡因制備衍生物測熔點碳酸鈉試液中+硫酸銅®藍(lán)紫色配合物，再加氯仿，氯仿層黃色氯化物的反應(yīng)IR非水溶液滴定法(堿量法)：高氯酸滴定

4、劑，冰醋酸溶劑，加醋酸汞，結(jié)晶紫指示劑，空白校正鹽酸丁卡因制備衍生物測熔點硝酸顯色反應(yīng)®黃色氯化物的反應(yīng)IR非水溶液滴定法：冰醋酸醋酐溶劑，加醋酸汞，結(jié)晶紫指示劑，空白校正。醋酐的加入，為增強(qiáng)鹽酸丁卡因堿性，使終點敏銳對乙酰氨基酚三氯化鐵反應(yīng)（藍(lán)紫色）酸中水解后重氮化-偶合反應(yīng)®紅色I(xiàn)R有關(guān)物質(zhì)：對氨基酚、對氯乙酰苯胺、偶氮苯、苯醌等（TLC，對氯乙酰苯胺為對照）對氨基酚，與亞硝基鐵氰化鈉在堿性條件下®藍(lán)色（比色法）限量0.005%UV吸收系數(shù)法（原料藥、片劑、注射劑、栓劑、片劑溶出度）腎上腺素三氯化鐵反應(yīng)(稀HCl)®翠綠色，再加氨試液，顯紫色，最后紫

5、紅氧化反應(yīng)(中性或酸性)+過氧化氫，煮沸®血紅色酮體原理：酮體在310nm處有紫外吸收，而腎上腺素、鹽酸去氧腎上腺素此處無吸收方法：HCl(9®1000)為溶劑，樣品C=2.0mg/ml,測定藥物在310nm的吸收度。限量0.06%，A<0.05原料藥：非水溶液滴定法，做空白注射液：反相離子對高效液相色譜法外標(biāo)法鹽酸去氧腎上腺素顯色反應(yīng)：堿性條件，與硫酸銅®紫色，不溶于乙醚三氯化鐵反應(yīng)®紫色氯化物的反應(yīng)IR測定方法同上，溶劑為水，A<0.20溴量法，做空白（注：溴滴定液的濃度是以溴原子計算的）樣品:溴原子1:6第十一章 巴比妥類藥物的分析本類

6、藥物結(jié)構(gòu)特征：具有丙二酰脲基本結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)鑒別檢查含量測定共性：丙二酰脲類(藥典附錄“一般鑒別試驗”)與銀鹽的反應(yīng)(碳酸鈉試液中)白色二銀鹽¯與銅鹽反應(yīng)(銅吡啶試液) ®紫色或紫色¯ (硫噴妥為綠色¯)，個性：苯環(huán)取代基(苯巴比妥)亞硝酸鈉硫酸反應(yīng)®橙黃色，即轉(zhuǎn)橙紅色甲醛硫酸反應(yīng)®接界面玫瑰紅色鈉鹽：制備衍生物測熔點酸度：檢查苯丙二酰脲，水溶液中加甲基橙，不得顯紅色乙醇溶液的澄清度：檢查苯巴比妥酸中性或堿性物質(zhì)：檢查2-苯基丁酰胺、2-苯基丁酰脲或分解產(chǎn)物(提取重量法)苯巴比妥及其制劑：銀量法：甲醇溶解，加適量碳酸鈉溶液，電位法指示終點苯

7、巴比妥:硝酸銀1:1丙烯基取代基(司可巴比妥)與碘試液反應(yīng)®碘試液棕黃色消失鈉鹽：制備衍生物測熔點中性或堿性物質(zhì)(同上)司可巴比妥鈉原料藥及其膠囊：溴量法，做空白淀粉指示液樣品:溴原子=1:2硫元素反應(yīng)(硫噴妥) 堿性試液中與鉛離子®白色¯，加熱®黑色¯ (PbS)與銅鹽反應(yīng)®綠色¯注射用硫噴妥鈉：制備衍生物測熔點注射用硫噴妥鈉：UV對照品比較法，硫噴妥為對照品鈉鹽的反應(yīng)焰色反應(yīng)醋酸氧鈾鋅反應(yīng)第十二章 磺胺類藥物的分析藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)鑒別含量測定磺胺嘧啶(SD)芳伯氨基(重氮化偶合反應(yīng)),藥典附錄“一般鑒別試驗”磺酰胺基（酸性

8、）重氮化偶合反應(yīng)®橙黃至猩紅¯與硫酸銅成鹽：反應(yīng)后顏色的區(qū)別(磺胺嘧啶®黃綠色¯，后變紫色；磺胺甲惡唑®草綠色¯)IR原料藥、各種制劑：亞硝酸鈉滴定法復(fù)方磺胺制劑：UV，雙波長分光光度法?；前芳讗哼?SMZ)第十三章 雜環(huán)類藥物的分析藥物結(jié)構(gòu)性質(zhì)鑒別檢查含量測定異煙肼具有吡啶環(huán)，環(huán)上氮有堿性酰肼基取代，有較強(qiáng)還原性，且能與含羰基試劑縮合。制備衍生物測熔點與硝酸銀試液反應(yīng)(銀鏡反應(yīng),并有氣體生成)IR原料藥、制劑：游離肼（TLC）對照品：硫酸肼原料藥、片劑、注射劑：溴酸鉀法，異煙肼:溴酸鉀=3:2；指示劑甲基橙，終點褪色尼可剎米具有吡啶

9、環(huán)，環(huán)上氮有堿性有酰胺基，可水解為白色或淡黃色油狀液體戊烯二醛反應(yīng)+溴化氰+苯胺黃色希夫堿水解反應(yīng)：（堿性條件）加熱二乙胺臭味（石蕊試紙變藍(lán)）沉淀反應(yīng)+硫酸銅+硫氰酸銨®草綠色¯有關(guān)物質(zhì)：主要是乙基煙酰胺(TLC高低濃度對比法)原料藥：非水溶液滴定法，做空白注射劑：UV吸收系數(shù)法；(0.5%硫酸為溶劑)鹽酸氯丙嗪硫氮雜蒽母核，三環(huán)共軛系統(tǒng)，較強(qiáng)紫外吸收，三峰值硫原子具有還原性側(cè)鏈氮堿性是鹽酸鹽氧化反應(yīng)：可被硫酸、硝酸氧化。+HNO3®紅色，漸變淡黃UV：lmax:254,306nmCl-的反應(yīng)IR溶液澄清度與顏色(比濁，比色,水為溶劑)澄清度：控制氯丙嗪；顏色：控

10、制氧化產(chǎn)物有關(guān)物質(zhì)：氯吩噻嗪、間氯二苯胺(TLC高低濃度對比法)原料藥：非水溶液滴定法（滴定前需加一定量醋酸汞，橙黃IV指示液，做空白）片劑、注射劑：UV吸收系數(shù)法(注射劑中的抗氧劑維生素C在243nm處有最大吸收，故測定波長定在306nm，避免維生素C干擾)奮乃靜硫氮雜蒽母核，三環(huán)共軛系統(tǒng)，較強(qiáng)紫外吸收，三峰值硫原子具有還原性哌嗪基堿性氧化反應(yīng)(酸性，加熱)：+過氧化氫®深紅色UV：lmax:258nmIR溶液澄清度與顏色(甲醇為溶劑)有關(guān)物質(zhì)： (TLC高低濃度對比法)原料藥：非水溶液滴定法，做空白；奮乃靜:高氯酸=1:2片劑：UV對照品比較法注射液：堿化，氯仿提取藥物后非水滴定

11、地西泮二氮雜卓環(huán)氮原子具有堿性有共軛體系，(有紫外吸收)，溶于硫酸后顯熒光均有Cl原子取代硫酸-熒光反應(yīng)：溶于硫酸，在365nm處顯黃綠色熒光氧瓶燃燒破壞后顯氯化物鑒別反應(yīng)UV：lmax:242,284, 366nmIR有關(guān)物質(zhì)：去甲基安定、2-甲氨基-5-氯二苯酮(原料藥和片劑：TLC高低濃度對比法)注射液中2-甲氨基-5-氯二苯酮(HPLC主成分自身對照法)原料藥：非水溶液滴定法片劑：UV吸收系數(shù)法 注射劑：HPLC，內(nèi)標(biāo)：萘做系統(tǒng)適用性試驗氯氮卓酸性水解后重氮化-偶合反應(yīng)®橙紅色¯(地西泮無此反應(yīng))與碘化鉍鉀試液反應(yīng)®橙色¯UV：lmax:245,

12、308nm原料藥：非水溶液滴定法片劑：UV吸收系數(shù)法第十四章 生物堿類藥物的分析藥物鑒別檢查含量測定鹽酸麻黃堿(苯烴胺類)雙縮脲反應(yīng)：堿性溶液+Cu2+ ®醚層紫紅，水層藍(lán)色I(xiàn)RCl-的反應(yīng)非水溶液滴定法(滴定前加醋酸汞，做空白)硫酸阿托品(托烷類)Vitali反應(yīng)：與發(fā)煙硝酸共熱®黃色三(二)硝基衍生物，冷后加醇制氫氧化鉀®深紫色I(xiàn)RSO42-的反應(yīng)：與Ba2+沉淀、與Pb2+沉淀、與鹽酸不沉淀(區(qū)別于硫代硫酸鈉) 莨菪堿：旋光度法其它生物堿：莨菪堿、顛茄堿等，堿性弱于阿托品，方法：稀HCl溶液中，加氨，不得立即渾濁原料藥：非水滴定法，做空白硫酸阿托品:高氯酸=

13、1:1片劑：酸性染料比色法藥物在酸性條件下成陽離子，與酸性染料陰離子結(jié)合成離子對，氯仿提取后比色測定(UV對照品比較法)(片劑含量均勻度、注射液也用此法)硫酸奎寧(喹啉類)產(chǎn)生熒光反應(yīng)(稀硫酸中，藍(lán)色熒光)綠奎寧(thalleiqllin)反應(yīng):藥物微酸性溶液+微過量溴水或氯水，+過量氨®翠綠色SO42-的反應(yīng)IR氯仿乙醇中不溶物：檢查制備過程中引入的無機(jī)鹽與其它生物堿其它金雞納堿(TLC高低濃度對比法)限量0.5%原料藥：非水溶液滴定法，做空白硫酸奎寧:高氯酸1:3片劑：堿性溶液，氯仿提取后非水溶液滴定法，二甲基黃指示液，做空白硫酸奎寧片:高氯酸1:4 鹽酸嗎啡(異喹啉類)與甲醛硫

14、酸試液(Marquis)反應(yīng)®紫堇色與鉬硫酸試液(Frohde)反應(yīng)®紫色，變藍(lán)色，最后變棕綠色與鐵氰化鉀試液反應(yīng)：嗎啡+鐵氰化鉀+三氯化鐵®普魯士藍(lán)(磷酸可待因無)IRCl-的反應(yīng)阿撲嗎啡：加I2，水、醚層均不顯色罌粟酸:稀HCl+FeCl3，不得顯紅色其它生物堿：可待因、蒂巴因、罌粟堿、那可汀等(TLC, 檢查嗎啡中可待因，以磷酸可待因?qū)φ?；檢查其它生物堿高低濃度對比法)原料藥：非水溶液滴定法(滴定前加醋酸汞，做空白)片劑：UV對照品比較法硝酸士的寧(吲哚類)與重鉻酸鉀反應(yīng)®紫色NO3-的反應(yīng)：棕色環(huán)、棕色氣體等(p496)馬錢子堿：與硝酸水等容混合

15、液作用，不得顯紅色原料藥：非水溶液滴定法，必須用電位法指示終點注射液：UV吸收系數(shù)法注：非水溶液滴定法（堿量法）一般均用高氯酸為滴定劑，冰醋酸或冰醋酸醋酐為溶劑；結(jié)晶紫為指示劑。第十五章 糖類和苷類藥物的分析藥物鑒別檢查含量測定葡萄糖(單糖)與堿性酒石酸銅(斐林試劑)的反應(yīng)®紅色氧化亞銅¯IR比旋度的測定(可用于鑒別和純度檢查)溶液的澄清度和顏色(比濁、比色)亞硫酸鹽和可溶性淀粉：加碘試液，亞硫酸鹽可使碘褪色；淀粉可使碘變藍(lán)蛋白質(zhì)：加磺基水楊酸溶液，不得沉淀乙醇溶液的澄清度：控制糊精一般雜質(zhì)：干燥失重、熾灼殘渣、鐵鹽、重金屬、砷鹽等葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛的檢查：UV:

16、 284nm原料藥：未收載，但對比旋度范圍有嚴(yán)格規(guī)定：25°C的比旋度應(yīng)為+52.5°-53.0°(葡萄糖一水合物)葡萄糖注射液：旋光度法，加氨試液，加速變旋平衡到達(dá)；計算因素：2.0852葡萄糖氯化鈉注射液：葡萄糖用旋光度法；氯化鈉用銀量法：加硼砂溶液，為使pH=7，可促使熒光黃電離，終點變化敏銳乳糖(雙糖)與硫酸銅試液的反應(yīng)：堿性條件®黃色，變棕紅，再加硫酸銅®氧化亞銅紅色¯IR比旋度的測定(可用于鑒別和純度檢查)蛋白質(zhì)：利用蛋白質(zhì)類雜質(zhì)遇硝酸汞試液產(chǎn)生白色絮狀沉淀。檢查時不得有¯比旋度的測定控制純度：按藥典要求配制溶液

17、，比旋度應(yīng)為+52.0°+52.6° 蔗糖(雙糖)與堿性酒石酸銅試液的反應(yīng)：酸性水解®葡萄糖®氧化亞銅紅色¯炭化反應(yīng)：直火加熱，有焦糖臭，遺留多量炭比旋度的測定(可用于鑒別和純度檢查)還原糖：葡萄糖或麥芽糖等：氧化還原滴定法(+定量過量的堿性枸櫞酸銅+過量I-，再用Na2S2O3滴定生成的I2，限量0.10%)鈣鹽：比濁比旋度的測定控制純度：按藥典要求配制溶液，比旋度不得少于+66°洋地黃毒苷Keller-Kiliani反應(yīng)：+三氯化鐵冰醋酸溶液®靛藍(lán)色Kedde反應(yīng)：乙醇溶解，加二硝基苯甲酸試液與乙醇制氫氧化鉀試液

18、4;紅紫色洋地黃皂苷：乙醇溶解，加膽甾醇的乙醇溶液，不得沉淀原料藥：UV對照品比較法，先用柱色譜分離雜質(zhì)，與三硝基苯酚顯色后進(jìn)行片劑：熒光分析法，抗壞血酸、過氧化氫和鹽酸等試劑可使本類藥物產(chǎn)生熒光(因片劑含量低，熒光法靈敏度高)地高辛同上同上紙色譜法IR洋地黃毒苷：紙色譜法，對照品對照法，限量<6%原料藥：UV，與三硝基苯酚顯色后,對照品比較法片劑：熒光法(同上)第十六章 甾體激素類藥物的分析藥物結(jié)構(gòu)特征鑒別檢查含量測定醋酸地塞米松(腎上腺皮質(zhì)激素類)共軛體系，有紫外吸收C17上為a醇酮基醋酸酯，a醇酮基有還原性C11上有羥基與堿性酒石酸銅(斐林試劑)的反應(yīng)®紅色氧化亞銅

19、75;與硫酸反應(yīng)：在堿性條件下水解®醋酸，再加硫酸、乙醇®醋酸乙酯香氣氧瓶燃燒破壞后氟化物反應(yīng)：NaOH吸收后+茜素氟藍(lán)+醋酸鈉稀醋酸液(pH4.3)+ Ce3+®藍(lán)紫色 IR其它甾體(TLC高低濃度對比法)硒：氧瓶燃燒破壞，吸收液中加鹽酸羥胺，UV測定，限度0.005%(藥典附錄“硒檢查法”)原料藥：HPLC內(nèi)標(biāo)法，甲睪酮為內(nèi)標(biāo)片劑：UV吸收系數(shù)法注射液：UV(四氮唑比色，對照品比較法)丙酸睪酮(雄性激素)D4-3-酮基，有紫外吸收C17上為b羥基形成的丙酸酯制備衍生物測熔點IR其它甾體：HPLC，不加校正因子的主成分自身對照法原料藥和注射液：HPLC內(nèi)標(biāo)法，內(nèi)

20、標(biāo)物為苯丙酸諾龍黃體酮(孕激素)D4-3-酮基，有紫外吸收C17上具甲酮基與亞硝基鐵氰化鈉的反應(yīng)®藍(lán)紫色(其它甾體激素均顯淡橙色或不顯色)與異煙肼反應(yīng)®酸性條件與羰基試劑縮合成黃色異煙腙IR其它甾體：HPLC，不加校正因子的主成分自身對照法原料藥：HPLC內(nèi)標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)物為己烯雌酚炔雌醇(雌激素)A環(huán)為苯環(huán)，C3有酚羥基C17上為b羥基和乙炔基與硫酸的反應(yīng)®橙紅色，在反射光下出現(xiàn)黃綠色熒光，將其傾入水中®玫瑰紅色絮狀¯與硝酸銀的反應(yīng)®白色¯(炔銀)IR其它甾體：HPLC，不加校正因子的主成分自身對照法原料藥：HPLC內(nèi)標(biāo)法，內(nèi)

21、標(biāo)物為醋酸甲地孕酮片劑：Kober反應(yīng)顯色，UV對照品比較法(因輔料干擾，先用水提取除去輔料后進(jìn)行)第十七章 維生素類藥物的分析藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)鑒別檢查含量測定維生素A含共軛多烯側(cè)鏈的環(huán)己烯，有強(qiáng)紫外吸收烯，易被氧化脂溶性三氯化銻反應(yīng)(Carr-Price反應(yīng))+飽和無水三氯化銻的無醇氯仿液®藍(lán)色，漸變紫紅色UV(三點校正法，應(yīng)用此法要求，p517)維生素A醋酸酯：等波長差法，l1=328nm,l2=316nm l3=340nm，F(xiàn)=1900維生素A醇：等吸收度法，l1=325nm,l2=310nm l3=334nm， l2和l3處吸收度A相等F=1830維生素B1(鹽酸硫胺)氨基嘧啶

22、環(huán)和噻唑環(huán)由亞甲基相連噻唑環(huán)上季胺和嘧啶環(huán)上氨基的堿性共軛體系，有紫外吸收水溶性硫色素反應(yīng)：+氫氧化鈉+鐵氰化鉀+正丁醇®醇層強(qiáng)烈藍(lán)色熒光，加酸，熒光消失，加堿，熒光復(fù)現(xiàn)氯化物反應(yīng)原料藥：非水溶液滴定法(滴定前加醋酸汞，喹哪啶紅亞甲藍(lán)混合指示劑)片劑：UV吸收系數(shù)法維生素C二烯醇結(jié)構(gòu)，弱酸性手性碳，旋光性較強(qiáng)還原性水溶性與硝酸銀試液反應(yīng)®黑色¯(銀)與二氯靛酚鈉試液反應(yīng)®藍(lán)色消失IR鐵和銅：原子吸收分光光度法(標(biāo)準(zhǔn)加入法)鐵限量百萬分之二銅限量百萬分之五原料藥：碘量法。滴定前加稀醋酸，使滴定時VC氧化作用減慢；新沸冷水溶劑可減少水中溶解氧的影響注射液：碘

23、量法。需加丙酮，消除抗氧劑亞硫酸氫鈉的影響維生素E苯并二氫吡喃結(jié)構(gòu)，苯環(huán)上有乙?；恿u基易水解成生育酚，具較強(qiáng)還原性為微黃或黃色透明粘稠液體脂溶性與硝酸反應(yīng)：用無水乙醇溶解，加硝酸，加熱®橙紅色(生育紅)水解后的氧化反應(yīng)：+醇制氫氧化鉀試液+水+乙醚萃取。乙醚層加聯(lián)吡啶乙醇液和三氯化鐵乙醇液®血紅色 生育酚：鈰量法硫酸鈰滴定液，二苯胺指示劑，生育酚限量2.15%中國藥典、USP、BP均用GC測定(內(nèi)標(biāo)法)內(nèi)標(biāo)：正三十二烷第十八章 抗生素類藥物的分析類別藥物結(jié)構(gòu)與性質(zhì)鑒別檢查含量測定b內(nèi)酰胺類青霉素鈉母核為6-氨基青霉烷酸(6- APA)，由b內(nèi)酰胺環(huán)和氫化噻唑環(huán)并合成，b內(nèi)

24、酰胺環(huán)不穩(wěn)定，C3羧基成鈉鹽側(cè)鏈芐基，苯環(huán)有紫外吸收易水解，堿性或青霉素酶存在，水解產(chǎn)物青霉噻唑酸；pH4，水解產(chǎn)物青霉烯酸，最終產(chǎn)物青霉醛和青霉胺抑菌試驗沉淀反應(yīng)：+稀鹽酸®白色¯(青霉素)此沉淀在乙醇、醋酸戊酯、氯仿、乙醚或過量鹽酸中溶解IR鈉鹽的焰色反應(yīng)280nm吸收度：控制降解產(chǎn)物水分：遇水水解失效(費休法)細(xì)菌內(nèi)毒素：按藥典附錄“細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法”檢查無菌：先用青霉素酶滅活，再按藥典附錄“無菌檢查法”檢查汞量法(電位滴定)：青霉素不與汞鹽反應(yīng)，其降解產(chǎn)物與汞鹽定量反應(yīng)。測總含量：以第二突越為準(zhǔn)，此時 青霉素鈉:Hg(NO3)2=1:1測原樣品中降解產(chǎn)物(空白試驗)

25、也要稱取供試品，不經(jīng)水解直接滴定，消除樣品中降解產(chǎn)物影響青霉素含量=總青霉素含量-降解產(chǎn)物含量青霉素V鉀側(cè)鏈為苯氧乙酰基C3羧基成鈉鹽水解反應(yīng)：堿性+中性紅®持久橙色，加青霉素酶®紅色UV(比較吸收度比值)IR鉀鹽的焰色反應(yīng)®紫色306nm吸收度：控制雜質(zhì)量水分(費休法)：限量1.5%原料藥：汞量法(同青霉素鈉)片劑：硫醇汞法(UV對照品比較法測)，原理：藥物+HgCl2+咪唑(催化劑)®青霉烯酸硫醇汞鹽(325nm有最大吸收)氨芐西林(青霉素類)側(cè)鏈為a氨基取代的苯乙?；鵌RN,N-二甲基苯胺：GC,內(nèi)標(biāo)：萘，限量百萬分之二十水分(費休法)HPLC外標(biāo)

26、法頭孢羥氨芐(頭孢菌素類)母核為7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)，由b內(nèi)酰胺環(huán)和氫化噻嗪環(huán)并合成，b內(nèi)酰胺環(huán)不穩(wěn)定共軛雙鍵，有紫外吸收HPLC，保留時間與對照品一致IR有關(guān)物質(zhì)：a對羥基苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸及其它有關(guān)物質(zhì)(反相TLC)，限量均為1%水分(費休法)原料藥、片劑、膠囊劑：HPLC外標(biāo)法氨基糖苷類硫酸鏈霉素由鏈霉胍、鏈霉糖、N-甲基L-葡萄糖胺組成有三個堿性中心pH7.5最穩(wěn)定，過酸、過堿均水解茚三酮反應(yīng)®紫色N-甲基葡萄糖胺的反應(yīng)：堿性水解，與乙酰丙酮縮合®紅色縮合物麥芽酚反應(yīng)(鏈霉素特有)+氫氧化鈉試液，加熱+硫酸鐵銨液®紫紅色坂口反應(yīng)

27、(鏈霉胍特有)+氫氧化鈉試液+8-羥基喹啉乙醇液+次溴酸鈉液®橙紅色硫酸鹽的鑒別干燥失重(恒溫減壓干燥法)異常毒性熱源降壓物質(zhì)無菌(微孔濾膜濾除藥物后進(jìn)行)注：均按藥典附錄檢查微生物檢定法硫酸慶大霉素由絳紅糖胺、2-脫氧鏈霉胺、加洛糖胺組成有五個堿性中心易溶于水，水溶液穩(wěn)定是C組分的復(fù)合物茚三酮反應(yīng)®紫色N-甲基葡萄糖胺的反應(yīng)®紅色縮合物TLC：標(biāo)準(zhǔn)品對照(Rf值，顏色)水分(費休法)硫酸鹽：配位剩余滴定法異常毒性細(xì)菌內(nèi)毒素降壓物質(zhì)C組分的檢查：HPLC微生物檢定法大環(huán)內(nèi)酯類羅紅霉素內(nèi)酯環(huán)與去氧氨基糖和紅霉糖所成的苷TLC：標(biāo)準(zhǔn)品對照(Rf值，顏色)IR有關(guān)物質(zhì)：

28、TLC：標(biāo)準(zhǔn)品對照法水分(費休法)異常毒性微生物檢定法四環(huán)素類鹽酸美他環(huán)素較長的共軛體系，有紫外吸收二甲氨基具堿性結(jié)構(gòu)中還有酮基、酰胺基、酚羥基等UV: lmax:345nmHPLC:tR氯化物的鑒別490nm吸收度：控制差向異構(gòu)體、脫水美他環(huán)素及其它雜質(zhì)有關(guān)物質(zhì)：主要是土霉素(HPLC主成分自身對照法,供試品土霉素峰面積<對照液主峰面積)HPLC外標(biāo)法第十九章 制劑分析一片劑的分析1常規(guī)檢查項目(1)重量差異的檢查：取樣量20片片劑的重量差異限度平均片重 重量差異限度 0.30g以下 ±7.5% 0.30g或0.30g以上 ±5%中國藥典規(guī)定：20片中超出重量差異限

29、度的藥片不得多于2片，并不得有一片超出限度的1倍。糖衣片和腸溶衣片應(yīng)在包衣前檢查片芯的重量差異，符合規(guī)定后方可包衣，包衣后不再檢查重量差異。(2)崩解時限的檢查：取樣量6片，溫度37±0.1°C普通片：水中應(yīng)15分鐘內(nèi)全部崩解。如有1片崩解不完全，另取6片復(fù)試。糖衣片、薄膜衣片、浸膏片同法檢查，崩解時限為1小時。如有1片不崩解，另取6片復(fù)試。薄膜衣片可改在鹽酸溶液(9®1000)中檢查。腸溶衣片：先在鹽酸溶液(9®1000)中檢查2小時，每片均不得有裂縫、崩解或軟化現(xiàn)象；再在磷酸鹽緩沖液(pH6.8)中檢查，1小時內(nèi)應(yīng)全部崩解，如有1片不崩解，另取6片復(fù)

30、試。泡騰片：水溫15-25°C，應(yīng)有許多氣泡放出，應(yīng)在5分鐘內(nèi)崩解。2特殊檢查項目(1)含量均勻度檢查此項目是指小劑量片劑、膠囊劑、膜劑、注射用無菌粉末等每片(個)含量偏離標(biāo)示量的程度。凡檢查此項，不再檢查重量差異。檢查方法：取樣量10片(個)，測每片(個)以標(biāo)示量為100的相對含量X，求其均值X均和標(biāo)準(zhǔn)差S及A，規(guī)定A=|100-X均|。結(jié)果判斷：A+1.80S£15.0，則供試品含量均勻度符合規(guī)定；A+S>15.0，則不符合規(guī)定；A+1.80S>15.0，且A+S£15.0，另取20片復(fù)試，復(fù)試結(jié)果，計算30片的X、S、A，如A+1.45S

31、3;15.0，則供試品含量均勻度符合規(guī)定；A+1.45S>15.0，則不符合規(guī)定；注：若藥品項下規(guī)定含量均勻度限度為其它百分?jǐn)?shù)，則將式中15.0改成其它相應(yīng)數(shù)值即可。(2)溶出度的測定取樣量6片(個)，溶劑溫度37±0.5°C。有三種方法：第一法為轉(zhuǎn)籃法；第二法為槳法；第三法為小杯法。結(jié)果判斷：6片(個)中每片(個)的溶出量，按標(biāo)示量計算，均不低于規(guī)定限度(Q=70%)，符合規(guī)定；6片(個)中有1-2片(個)低于Q，但不低于Q10%，且平均溶出度不低于Q, 符合規(guī)定；6片(個)中有1片(個)低于Q10%，另取6片(個)復(fù)試；初、復(fù)試12片(個) 中僅有1-2片(個)低

32、于Q10%，且平均溶出度不低于Q, 符合規(guī)定；供試品取樣量若為2片(個)，每片(個)溶出量均不得低于規(guī)定限度。3附加劑對測定的干擾及排除(1)糖類：糖類是片劑常用的稀釋劑，包括淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等，期中乳糖本身有還原性，淀粉、糊精、蔗糖水解產(chǎn)生葡萄糖有還原性。對氧化還原滴定有干擾。排除干擾：避免使用氧化性強(qiáng)的滴定劑；做陰性對照試驗(2)硬脂酸鎂其中Mg2+離子干擾配位滴定；硬脂酸根離子干擾非水滴定排除干擾：加掩蔽劑掩蔽鎂離子(如酒石酸)；硬脂酸鎂含量大，主藥為脂溶性時，可用適當(dāng)有機(jī)溶劑提取出藥物后再測定；采用其它方法(硬脂酸鎂不干擾)測定二注射劑的分析1檢查項目(1)裝量差異中國藥典規(guī)定：標(biāo)示裝量£2.0ml，取5支；2.0ml 10.0ml 者取3支；10.0ml 以上者取2支。每支裝量均不得少于標(biāo)示量。(限度表見p546表19-2)(2)注射用無菌粉末的裝量差異(p546)(3)澄明度 傘棚式裝置，背景用不反光的黑色絨布。無色溶液注射劑用照度1000-2000Lx的裝置；有色溶液注射劑用照度2000-3000Lx的裝置。抽檢的不合格率應(yīng)<5%(4)無菌直接接種法；濾膜過濾法(5)熱源和細(xì)菌內(nèi)毒素(6)不溶性微粒2附加劑對測定的干擾及排除(1)抗氧劑：加入掩蔽劑，如丙酮或