麻醉學(xué)研究生畢業(yè)答辯交流幻燈

1、 專業(yè)：麻醉學(xué)專業(yè)：麻醉學(xué) 姓名：郭文義姓名：郭文義 2010-4-24Company Company Logo前前 言言材料與方法材料與方法研研 究究 結(jié)結(jié) 果果討討 論論結(jié)結(jié) 論論Company name 前前 言言手術(shù)中發(fā)生心跳驟停的概率不僅威脅著每一位接受手術(shù)治療的患者的生命安全，其造成的腦缺血再灌注損傷也對現(xiàn)代臨床麻醉的心肺腦復(fù)蘇技術(shù)提出了課題和挑戰(zhàn)；近年來國內(nèi)外關(guān)于腦缺血再灌注損害的研究普遍關(guān)注于各種預(yù)處理方法的腦保護作用，而本課題則主要研究甘露醇在腦缺血再灌注損傷后的干預(yù)效果；目前，臨床急救中甘露醇脫水屬于心肺腦復(fù)蘇的后處理措施，其給藥時間問題還沒有學(xué)者關(guān)注。本課題主要通過動物實

2、驗探討甘露醇在心肺腦復(fù)蘇中的最佳用藥時機。Company name心跳驟停心跳驟停后再灌注腦損后再灌注腦損傷為臨床傷為臨床急救復(fù)蘇急救復(fù)蘇中中經(jīng)常面臨經(jīng)常面臨的問題的問題如何減輕甚至如何減輕甚至逆轉(zhuǎn)逆轉(zhuǎn)腦損傷？腦損傷？Company name多為預(yù)先給藥，臨床實際差距較大采用采用再灌注后再灌注后給藥？給藥？近年來腦保護的措施Company nameCompany name在臨床心肺復(fù)蘇中在臨床心肺復(fù)蘇中一直列為一直列為心肺復(fù)蘇心肺復(fù)蘇后處理措施后處理措施早期應(yīng)用甘露醇早期應(yīng)用甘露醇液體梯度對抗復(fù)蘇后液體梯度對抗復(fù)蘇后建立的血壓梯度建立的血壓梯度甘露醇應(yīng)甘露醇應(yīng)用的最佳用的最佳時機是？時機是？C

3、ompany name材料與方法材料與方法Company name實驗動物實驗動物 健康昆明小鼠36只，體重355克，雌雄隨機，由山西省腫瘤研究所實驗動物中心提供。Company name實驗分組和干預(yù)實驗分組和干預(yù)取健康小鼠36只隨機將其分為6組各組6只分別為： A組： 假手術(shù)組，手術(shù)但不給藥B組： 缺血再灌注損傷對照組，分離雙側(cè)頸總動脈，穿線但不結(jié)扎也不給藥C組： 再灌注即刻甘露醇干預(yù)組，恢復(fù)灌注即刻尾靜脈注射甘露醇D組： 再灌注30min甘露醇干預(yù)組，恢復(fù)灌注30min后給予甘露醇E組： 再灌注1h甘露醇干預(yù)組，恢復(fù)灌注1h后給予甘露醇F組： 再灌注1.5h甘露醇干預(yù)組，恢復(fù)灌注1.5h

4、后給予甘露醇Company name實驗路線圖Company name模型制備模型制備 過程過程麻醉頸部正中切口下頜下腺上翻分離雙側(cè)頸總動脈活結(jié)結(jié)扎動脈實現(xiàn)缺血松開活結(jié)恢復(fù)灌注Company name 模型制備成功標準模型制備成功標準 在結(jié)扎小鼠雙側(cè)頸總動脈后,以出現(xiàn)驚厥、呼吸深慢、心跳加快為缺血成功標準； 松開線結(jié)以血管遠端充盈、變紅、觀察到搏動為恢復(fù)灌注成功標準。 Company name觀察指標和統(tǒng)計分析觀察指標和統(tǒng)計分析 1 小鼠的行為學(xué)改變 2 存活細胞數(shù) 3 變性細胞率 4 觀察描述海馬CA1區(qū)細胞形態(tài)學(xué)變化 實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)標準差表示，采用單因素方差分析，組間進行多重比較，SPSS

5、17統(tǒng)計軟件分析，P0.05認為有顯著性差異。Company name研究結(jié)果研究結(jié)果Company name各組小鼠行為學(xué)改變各組小鼠行為學(xué)改變A組 小鼠自發(fā)活動，刺探，梳理毛發(fā)，翻正反射存在，無運動失調(diào)。B組 小鼠活動減少，運動失調(diào)，翻正反射消失，疼痛反射消失，甚至昏迷。C組 小鼠活動自如，多無運動失調(diào)，翻正反射存在，疼痛反射存在。D、E、F組 小鼠活動減少，翻正反射和疼痛反射減弱或消失，精神困倦。Company name存活細胞數(shù)和變性細胞率存活細胞數(shù)和變性細胞率 甘露醇即刻干預(yù)組小鼠海馬CA1區(qū)存活細胞數(shù)明顯高于缺血再灌注對照組（P0.05）（如表1）；變性細胞率明顯低于缺血再灌注對照

6、組（P0.05）（如表2），而與假手術(shù)組無顯著差別（P0.05），30min后甘露醇干預(yù)組與缺血再灌注對照組比較均無顯著差別（P0.05）。 Company name組別 存活細胞數(shù)（個）A 假手術(shù)組 23.000.89* *B 缺血再灌注對照組 9.002.10C 甘露醇即刻干預(yù)組 22.001.05* *D 甘露醇30min干預(yù)組 10.831.60E 甘露醇1h 干預(yù)組 10.082.22F 甘露醇1.5h干預(yù)組 9.081.99表表1 各實驗組小鼠海馬各實驗組小鼠海馬CA1區(qū)正常細胞數(shù)的比較區(qū)正常細胞數(shù)的比較Company name組別 變性細胞率（%）A 假手術(shù)組 7.330.82*

7、 *B 缺血再灌注對照組 30.671.75C 甘露醇即刻干預(yù)組 8.170.41* *D 甘露醇30min干預(yù)組 29.501.05E 甘露醇1h 干預(yù)組 29.830.75F 甘露醇1.5h干預(yù)組 30.160.75表表2 各實驗組小鼠海馬各實驗組小鼠海馬CA1區(qū)變性細胞率的比較區(qū)變性細胞率的比較Company name A組 海馬CA1區(qū)錐體細胞有層次分明的45層細胞結(jié)構(gòu),胞質(zhì)均質(zhì)紅染,核大而圓，核膜完整，核仁清晰。細胞層向心側(cè)間質(zhì)呈纖維束樣結(jié)構(gòu)，排列整齊。 B組 細胞層明顯擠壓狀，僅見3層細胞結(jié)構(gòu)，排列散亂。正常錐體細胞數(shù)明顯減少，可見大量的變性壞死細胞，細胞腫脹，胞漿內(nèi)有空泡形成，胞

8、質(zhì)嗜酸性增強，壞死細胞核呈梭形或三角形固縮，深染成藍紫色。細胞間質(zhì)水腫明顯，呈團塊狀，纖維結(jié)構(gòu)消失。 形態(tài)學(xué)結(jié)果（見圖1）Company nameC 組 絕大多數(shù)椎體細胞保持正常形態(tài)，45層細胞結(jié)構(gòu)完好。纖維結(jié)構(gòu)清晰可辨。細胞間質(zhì)無水腫表現(xiàn)，比較A組更顯稀松，呈現(xiàn)脫水表現(xiàn)。 D、E、F組細胞層均存在受壓表現(xiàn)，僅見34層細胞結(jié)構(gòu)，排列散亂。雖然比較B組間質(zhì)水腫有所改善，但纖維束樣結(jié)構(gòu)凌亂不清晰，并有斷續(xù)現(xiàn)象。變性和壞死細胞數(shù)明顯增多。Company name 圖圖1：各組小鼠海馬：各組小鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細胞的形態(tài)學(xué)改變區(qū)神經(jīng)細胞的形態(tài)學(xué)改變 A A組組 假手術(shù)組假手術(shù)組 B B組組 缺血再灌注

9、損傷組缺血再灌注損傷組 C C組組 即刻甘露醇干預(yù)組即刻甘露醇干預(yù)組 D D組組 3030分鐘甘露醇干預(yù)組分鐘甘露醇干預(yù)組 E E組組 6060分鐘甘露醇干預(yù)組分鐘甘露醇干預(yù)組 F F組組 9090分鐘甘露醇干預(yù)組分鐘甘露醇干預(yù)組Company name 本課題成功復(fù)制了郗東鋒報告的昆明小鼠腦缺血再灌注損害實驗動物模型，該實驗動物模型與其他同類研究的動物模型相比成本低廉，簡單易行，成功率高，重復(fù)性好，能夠獲得相關(guān)研究結(jié)果，并能夠進行腦缺血再灌注損傷后醫(yī)學(xué)干預(yù)的評價研究。本課題實踐結(jié)果與王雪紅、邢春平等作者的報告一致。 討討 論論Company name 本實驗選取小鼠對缺血最敏感的海馬CA1區(qū)

10、為觀察對象，采用甘露醇對小鼠腦缺血再灌注后的不同時間點進行醫(yī)學(xué)干預(yù)。觀察結(jié)果表明：再灌注即刻甘露醇干預(yù)可使小鼠海馬CA1區(qū)細胞形態(tài)，組織結(jié)構(gòu)接近正常，無間質(zhì)水腫表現(xiàn)，而恢復(fù)灌注30min,1h,1.5h后甘露醇干預(yù)的效果不明顯。證實早期給予甘露醇能夠有效的逆轉(zhuǎn)腦缺血再灌注損傷后細胞的變性水腫，但是再灌注30分鐘后細胞水腫較為嚴重，再給予甘露醇救治基本無效，從而為臨床心肺腦復(fù)蘇合理用藥時間提供理論依據(jù)。Company name 結(jié)結(jié) 論論根據(jù)本課題觀察結(jié)果作者認為：1. 恢復(fù)血流灌注后血壓梯度重新建立是細胞水腫形成的必備條件。再灌注早期及時應(yīng)用甘露醇建立反相的滲透壓梯度，可以有效防止腦缺血再灌注

11、后細胞水腫的形成；2. 神經(jīng)細胞水腫是腦缺血再灌注損傷的始動環(huán)節(jié)，有效防止細胞水腫的形成可以避免過氧化物、鈣離子超載等不可逆細胞損害機制的發(fā)生；3. 本觀察組發(fā)現(xiàn)：再灌注30分鐘后給與甘露醇效果不明顯，似說明細胞水腫已經(jīng)形成，多種細胞損害機制均已啟動，再給予甘露醇救治基本無效；有待進一步研究證實。Company name參考文獻參考文獻1 李澤東,馬靜萍. 阿司匹林預(yù)處理對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用 J . 中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2009，7（1）：56-57. 2 程謙濤,項潔,李繼珍.辛伐他汀預(yù)處理對大鼠局灶性腦缺血不同灌注時間窗腦損傷的保護作用及機制研究 J . 徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，

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