酶學分析方法及酶活性測定復習與練習

1、酶學分析方法及酶活性測定復習與練習一、有關(guān)酶的基本理論知識1、 酶濃度與酶促反應(yīng)速度的關(guān)系是？2、 底物濃度與酶促反應(yīng)速度的定量關(guān)系式是？3、 影響酶促反應(yīng)速度的因素主要有哪些？4、 Km及Vm代表的含義及它們在臨床酶活性測定中應(yīng)用及意義。二、酶活性測定的基本知識1、酶活性的概念及酶活性單位如何表示表示2、目前酶活性單位有-、-、-三種表示方式。？3、解釋酶活性國際單位、催量（Katal）的概念，并比較兩者的關(guān)系？4、酶活性單位的計算：幾類計算公式要求理解并熟練應(yīng)用。 1）通用公式2）慣用單位的計算公式（測定產(chǎn)物生成類的計算公式；測定底物消耗類的計算公式）3）*連續(xù)監(jiān)測法根據(jù)摩爾吸光系數(shù)進行酶

2、活性濃度的計算；*連續(xù)監(jiān)測法因素F值（全自動化生化儀多用K表示）的計算和應(yīng)用？三、酶活性的測定方法 1、酶活性測定的基本原則是什么？2、酶反應(yīng)時間進程曲線有、三個時期 酶活性測定是在期測定，此時期反應(yīng)速度不受-的影響也稱-期3、根據(jù)反應(yīng)時間，酶活性測定分為兩類方法是-和-兩種從概念、結(jié)果計算、優(yōu)缺點敘述并比較兩類方法 ？其中連續(xù)監(jiān)測法4、按檢測對象的酶活性測定方法分為-和-法；其直接法的方法類型有哪些？5、何謂酶偶聯(lián)反應(yīng)？寫出酶偶聯(lián)反應(yīng)的基本模式？什么是待測酶、輔助酶、指示酶？6、何謂工具酶？酶作為工具應(yīng)用于臨床生化檢驗可進行酶活性測定或進行代謝物濃度（底物）的測定時一般有哪兩大指示系統(tǒng)？何謂

3、-Trinder反應(yīng)？Trinder反應(yīng)的主要缺點或影響因素有哪些？7、何謂同工酶？同工酶分析的常用原理有哪些？檢測同工酶有何臨床意義？并舉例說明？8、酶活性測定條件及影響因素有哪些？9、從幾個酶類測定（如AMY、ALT、LD、ALP|等）的實驗操作中，討論酶活性測定應(yīng)注意的問題？10、試述影響血清酶的生理變異有哪些？11、酶活性測定，標本的采集、處理、貯存及樣品試劑比有何要求？四、體液酶測定：1、常用于臨床協(xié)助診斷的血漿酶有哪些？用于協(xié)助診斷心肌損傷、肝臟疾病、胰腺疾病、骨骼骨骼肌、前列腺疾病等的常用的血清酶有哪些？常用的臨床診斷酶譜有哪些？2、將各血清酶活性測定的方法學原理進行分析歸納，請

4、總結(jié)出有哪幾大反應(yīng)基礎(chǔ)。3、書寫出AMS、ALP兩種（化學比色法、（連續(xù)監(jiān)測法）方法及ALT、AST、GGT、LDH、CK酶測定（連續(xù)監(jiān)測法）反應(yīng)原理、主要試劑成分和作用？影響結(jié)果準確性因素有哪些？評價LD-L反應(yīng)和LD-P反應(yīng)試劑盒的優(yōu)缺點？4、血清ALT、AST、ALP、GGT、AMS、CK、LD等酶測定的臨床意義？五、選擇題：A 1、K m是指反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時的 A 底物濃度 B 酶濃度 C 激活劑濃度D 溫度 E 抑制劑濃度D 2、根據(jù)1976年國際生化學會生化委員會規(guī)定，酶的一個國際單位是指A 最適條件下，每小時催化生成1mmol/l產(chǎn)物的酶量B 最適條件下，每分鐘催化生

5、成1mmol/l產(chǎn)物的酶量C 最適條件下，每小時催化生成1umol/l產(chǎn)物的酶量D 特定條件下，每分鐘催化1umol底物產(chǎn)生變化所需的酶量E 25及其它最適條件下，每分鐘催化1umol底物產(chǎn)生變化所需的酶量E 3、IFCC推薦法測定AST的輔助酶是 A G6PD B HK C POD D LDH E MDHB 4、以NAD（P）或NAD（P）H為指示系統(tǒng)的酶活性測定主波長應(yīng)設(shè)置為： A 293nm B 340nm C 405nm D 380nm E 500nmD 5、以還原為反應(yīng)為基礎(chǔ)的生化分析，采用波長及吸光度變化為： 、340nm 下降 、405nm 上升 、500nm 下降 、340nm

6、 上升、405nm 下降A(chǔ) 6、淀粉酶測定顯著升高主要見于： 、潰瘍病穿孔 、急性胰腺炎 、甲亢 、糖尿病 、腎病綜合癥C 7、正常成人血清LD同工酶電泳區(qū)帶的結(jié)果應(yīng)符合： A LD1>LD2>LD3>LD4>LD5 B LD1<LD2<LD3<LD4<LD5 C LD2>LD1>LD3>LD4>LD5 D LD3>LD1>LD2>LD4>LD5 E LD4>LD1>LD2>LD3>LD5B 8、IFCC推薦法測定ALP選擇用哪種緩沖液 A 乙二胺 B AMP C Tris

7、D 甘氨酸 E 二乙醇胺C 9、單底物酶促反應(yīng)的最適底物濃度的確定原則： A 1Km B 2Km C 1020Km D 100Km E 越大越好B 10、前列腺疾病最敏感的指標是： A ALP B ACP D CHE D AMY E ASTC 11自動化生化分析儀測定酶活性常用計算K值的主要原因是 A 方便 B 準確 C 無標準品和校正品 D 酶校正品不準確D 12、GPT測定時，底物液中的酮戊二酸的量比丙氨酸的量小近百倍的原因是A 防止酶促反應(yīng)時，丙酮酸生成過量 B 保證酶有足夠的底物 C 防止基質(zhì)中PH小于7.4 D 減少酮戊二酸與24二硝基苯肼的呈色反應(yīng)E 酮戊二酸過多可激活酶的活性D

8、13、AST測定（速率法）的試劑中，不含有A 天冬氨酸 B NADH C 酮戊二酸 D 丙氨酸 E Tris緩沖液C 14、酶聯(lián)反應(yīng)中最后一個外加酶稱為：A 偶聯(lián)酶 B 輔酶 C 指示酶 D 工具酶 E 同工酶D 15、ALP測定（King法）其底物是A 鐵氰化鉀 B 酚 C 4AAPD 磷酸苯二鈉 E 丙氨酸B 16、血清測定中，標準曲線為拋物線的干擾物為 丙酮酸 二硝基苯肼 谷氨酸 酮戊二酸 二硝基苯腙B 17、測定（）終止酶促反應(yīng)是用 mola 二硝基苯肼 a酮戊二酸二硝基苯腙 磷酸鹽緩沖液 碳酸鹽緩沖液A 18、血清測定（法），下列哪些情況會導致結(jié)果偏低： 制作標準曲線所用的丙酮酸鈉變

9、質(zhì) 標本嚴重溶血 對照管混濁未被發(fā)現(xiàn) 水浴溫度偏高 （升至） 血清與基質(zhì)混合勻后未及時放入水浴保溫A 19、n Kat單位酶量等于 E 20、根據(jù)米氏方程，不符合S與Km的關(guān)系的是 A 當SKm時，反應(yīng)速度與底物濃度無關(guān)，成零級反應(yīng) B 當SKm時，反應(yīng)速度與底物濃度成正比，成一級反應(yīng) C 當SKm時，VVm2 D 度量兩者的單位是相同的 E 當SKm3時，V67VmA 丙氨酸+酮戊二酸 丙氨酸+谷氨酸 B 天冬氨酸+酮戊二酸 草酸乙酸+谷氨酸C 肌酸+ATP 磷酸肌酸 + ADP D 丙酮酸 +NADH 乳酸 + NADE 草酸乙酸 +NADH 蘋果酸 + NADB 21、AST催化的反應(yīng)D

10、 22、LDH催化的反應(yīng)C 23、CK催化的反應(yīng) 磷酸苯二鈉 鐵氰化鉀 酚 堿性試劑B 24、（ing）測定 氧化劑C 25、 顯色劑D 26、 標準物A 27 底物 A ALT B ALP C GGT D AMS E CK-MBA 28、肝細胞急性損傷最好的指標C 29、肝占位性病變D 30、急性胰腺炎E 40、心肌梗死B 41、骨骼疾病A NAD（P）H指示系統(tǒng) B POD指示系統(tǒng)C 兩者均有 D 兩者均無C 42、葡萄糖測定C 43、TG測定B 44、膽固醇測定B 45、尿酸測定D 46、尿TP測定（ALT AST 膽汁酸 膽紅素、 肌酐等）A 平衡法 B 速率法C 兩者均有 D 兩者均

11、無A 47、GOD-POD測葡萄糖B 48、堿性苦味酸法測肌酐C 49、GLDH測尿素A 酶試劑法測定 B 離子選擇電極法測定C 兩者均有 D 兩者均無C 50、血清鈉、鉀測定C 51、血清氯、鈣的測定A 52、血清磷的測定D 53、血清總蛋白、清蛋白測定A 54、血清ALT、AST測定ABCD 55、酶偶聯(lián)方法測定酶活性的有： A ALT B AST C CK D AMY E LDHABCD 56、下列哪些因素影響酶活性的測定A 緩沖液的種類和離子強度 B PH C 反應(yīng)溫度D 激活劑濃度 E 比色皿光徑BC 57、酶促反應(yīng)指示物的檢測波長為405nm的有 A NADH B 4-硝基酚 C

12、5-氨基-2-硝基苯甲酸 D 磷鉬酸 E NADPHABCD 58、測定時，A-A的意義有 消除二硝基苯肼溶液的值 消除a酮戊二酸二硝基苯腙的值 消除血清色素的干擾 消除血可能存在的酮酸的干擾BC 59、屬于Trinder反應(yīng)的色原物是:A H2O2 B 酚 C 4-AAP D POD E CODACDE 60以下說法正確的是A當SKm時，反應(yīng)速度與底物濃度成正比，成一級反應(yīng)B當SKm時，反應(yīng)速度與酶濃度成正比，酶促反應(yīng)呈一級反應(yīng)C零級反應(yīng)時V=Vman=KED一級反應(yīng)是用工具酶測定各種代謝物濃度的方法學基礎(chǔ)E零級反應(yīng)是用于測定酶活性或濃度的方法學基礎(chǔ)ABCD 61溶血時對測定結(jié)果有影響的血清

13、酶是 A、CK B、LD C、ALT D、AST E、GGTABE 62、ALP活性升高可見于A、多發(fā)性骨腫瘤 B、骨折 C 貧血 D、甲低 E、阻塞性黃疸AE 63、G6PD可用于測定A、葡萄糖 B、淀粉酶 C、乳酸脫氫酶 D、堿性磷酸酶 E、肌酸激酶ACDE 64、下列代謝物與其酶法測定所用試劑的組合，正確的是A、尿酸尿酸酶過氧化氫酶B、葡萄糖葡萄糖氧化酶葡萄糖-6-磷酸脫氫酶C、尿素-尿素酶-谷氨酸脫氫酶D、三酰甘油脂蛋白脂肪酶甘油激酶E、膽固醇膽固醇氧化酶過氧化物酶ABDE 65、下列酶活性測定描述正確的是A、可測定產(chǎn)物的生成量 B、可測定底物的消耗量 C、與底物濃度無關(guān)D、需最適溫度

14、 E、需最適的酸堿度補充選擇題：A 1當?shù)孜餄舛却笥贙m時，此時的反應(yīng)速度為A零級反應(yīng) B一級反應(yīng) C二級反應(yīng) D混合級反應(yīng) E無法確定反應(yīng)級D 2、為保證酶動力學分析，底物濃度最好是：A0.5Km B2Km C25Km D1020Km E100Km3、連續(xù)監(jiān)測法測定ALT所用的底物通常是：對硝基苯酚磷酸鈉C 4、測定下列哪種血清酶有助于鑒別ALP的來源 AACP BAMS CGGT DLD ECKB 5、疾病時血清及尿液淀粉酶升高，應(yīng)除外：A急性胰腺炎 B肝炎 C腸梗阻 D急性腮腺炎 E潰瘍病穿孔其它練習：1、以NAD+還原為NADH反應(yīng)為基礎(chǔ)的生化分析,采用波長是_nm, 吸光度變化為_. 當測定時其S:R=1:20時(酶速率法) 結(jié)果計算是IU/L=A/min×factor, factor為_（附NADH在340nm毫克分子