益氣活血藥對心肌組織及H9C2細胞Cx43表達和凋亡的影響精品ppt課件PPT學習教案

1、會計學1益氣活血藥對心肌組織及益氣活血藥對心肌組織及H9C2細胞細胞Cx43表達和凋亡的影響精品表達和凋亡的影響精品ppt課件課件2心肌縫隙連接蛋白43心肌細胞凋亡n心血管系統(tǒng)疾病是危害人類健康的常見病。心肌縫隙連接蛋白43和細胞凋亡的異常在心血管疾病的發(fā)病過程中都扮演了重要角色。 第1頁/共42頁3第2頁/共42頁4第3頁/共42頁5n過度的細胞凋亡會加速心肌細胞的丟失，造成心功能的惡化，并促進心室重構的發(fā)生和發(fā)展。 第4頁/共42頁6第5頁/共42頁7第6頁/共42頁8第7頁/共42頁9第8頁/共42頁10參照文獻，采用冠脈結扎法制作大鼠心肌梗死模型。王碩仁,王振濤,趙明鏡,李敏.心氣虛病

2、證動物模型及其評價體系的構建.中國實驗動物學報.2002;10(1): 33-38. 第9頁/共42頁11結扎冠脈前 結扎冠脈后模型組 心功能比較n采用心電圖和心臟超聲評價心梗大鼠造模是否成功。n術后與術前比較，大鼠心電圖ST段明顯抬高。n取材前超聲檢查顯示模型大鼠左心室內徑明顯擴大，室壁變薄，收縮運動減弱，心功能降低。第10頁/共42頁12第11頁/共42頁13n生脈低劑量組n生脈高劑量組n生脈和血塞通低劑量組n生脈和血塞通高劑量組第12頁/共42頁14第13頁/共42頁15第14頁/共42頁16第15頁/共42頁17第16頁/共42頁18sx 第17頁/共42頁19第18頁/共42頁20第

3、19頁/共42頁21第20頁/共42頁22 在芯片實驗基礎上，對心梗大鼠Cx43的基因和蛋白表達進行了驗證，結果同樣證實心肌梗死發(fā)生后Cx43 mRNA和蛋白的表達均明顯降低。第21頁/共42頁23不同時間點兩組心肌細胞凋亡百分率(%)的變化0510152025303天5天10天4周8周12周時間心 肌細 胞凋 亡百 分率 （% ）手術組邊緣區(qū)假手術組邊緣區(qū) *與同一時間點假手術組比較* P 0 . 0 1 ；與其它時間模型組邊緣區(qū)比較P 0 . 0 1 ；與3 、 5 、10 天、 12 周模型組 邊 緣區(qū)比較P 0 . 0 1 ；與3 天 、5 天、12 周模型組 邊 緣區(qū)比較P 0 .

4、0 1 在凋亡方面，我們動態(tài)觀察了從冠脈結扎術后3天到12周，心肌細胞凋亡率的變化，模型組在各個時點凋亡率均明顯高于假手術組。并且從3天到4周，模型組凋亡率先呈下降趨勢，而后從4周到12周凋亡率又逐漸增加。第22頁/共42頁24第23頁/共42頁25室顫閾值的降低，表明心臟電穩(wěn)定性差，容易發(fā)生室顫。與假手術組比較，心梗模型組室顫閾值降低，益氣活血藥治療后室顫閾值提高。第24頁/共42頁26假手術組假手術組模型組模型組益氣活血組益氣活血組卡托普利組卡托普利組 取材時可見，模型組大鼠梗死范圍較大，室壁變薄和心腔擴大明顯。益氣活血藥治療后，梗死范圍有一定程度的縮小。第25頁/共42頁27 心肌梗死大

5、鼠的心重/體重比明顯增加，益氣活血藥治療后，臟體比值下降。第26頁/共42頁28 模型組左心室內徑明顯高于假手術組，益氣活血藥治療后，左室內徑變小。第27頁/共42頁29益氣活血藥治療后，心肌梗死范圍明顯縮小。第28頁/共42頁30 心肌梗死大鼠Cx43 mRNA表達明顯降低，益氣活血藥治療后Cx43 mRNA表達增加。第29頁/共42頁31 免疫組化染色心肌Cx43呈棕黃色顆粒表達，假手術組界線清晰成線狀排列，主要位于閏盤內，分布整齊。模型組Cx43表達明顯減弱甚至消失，殘存的Cx43界線不清，分布紊亂。與模型組比較，益氣活血組和卡托普利組Cx43表達增加，分布比較整齊。 第30頁/共42頁32圖像分析顯示，模型組Cx43表達的強度和陽性面積均低于假手術組；益氣活血藥治療后，Cx43的表達和面積均顯著增加。第31頁/共42頁33第32頁/共42頁34 H9C2細胞HE染色 200 H9C2細胞HE染色 400第33頁/共42頁35第34頁/共42頁36Hoechst染色是一種經(jīng)典而快速的細胞凋亡檢測方法。正常細胞染色后細胞核呈藍色；細胞發(fā)生凋亡時，染色質固縮，細胞核會呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染，顏色高亮。第35頁/共42頁37第36頁/共42頁38第