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文檔簡介
1、實驗七 果蠅的雜交試驗 一、實驗?zāi)康?了解伴性遺傳和常染色體遺傳的區(qū)別; 進一步理解和驗證伴性遺傳和分離、連鎖交換定律; 學(xué)習(xí)并掌握基因定位的方法。 二、實驗原理 紅眼與白眼是一對相對性狀,控制該對性狀的基因(W)位于X染色體上,且紅眼(W)對白眼(w)為完全顯性。當紅眼雌蠅與白眼雄蠅雜交時,無論雌雄均為紅眼,F(xiàn)2中紅眼:白眼=3:1,但雌蠅全為紅眼,雄蠅中紅眼:白眼=1:1;反交時F1中雌蠅為紅眼,雄蠅為白眼,F(xiàn)2中紅眼:白眼=1:1,雌蠅和雄蠅中的紅眼與白眼的比例均為1:1。正常翅(Sn3)對小翅(sn3)為顯性,正常剛毛(M)對焦剛毛(m)為顯性,與紅眼(W)和白眼(w)一樣,均位于(X
2、)染色體上。利用三點測交的方法只需通過一次雜交和一次測交就能同時確定三個基因在染色體上的位置順序和基因的相對距離,繪出連鎖圖。讓白眼小翅焦剛毛蠅與野生型蠅雜交,F(xiàn)1雌蠅是三雜合體:表型為野生型。F1蠅是白眼焦剛毛小翅。F1代的雌雄蠅互交實際上相當于三雜合體雌蠅與三隱性雄蠅的測交。通過對互交后代中各種表型比例的分析,就可進行w、sn3和m等基因的定位。三、實驗材料 野生型雄蠅、雌蠅、白眼焦剛毛小翅雌雄蠅。 四、實驗器具和藥品 1.器具:放大鏡、顯微鏡、麻醉瓶、白瓷板、毛筆、記錄本。 2.藥品:乙醚、酒精棉球、培養(yǎng)基。 五、實驗步驟 1.選處女蠅 選白眼焦剛毛小翅處女蠅510只,同時選野生型處女蠅
3、510只。 方法:將野生型和白眼焦剛毛小翅果蠅培養(yǎng)瓶內(nèi)的成蠅全部趕去,12小時內(nèi)將重新孵化出的雌雄果蠅分開,即可得所需處女蠅和雄蠅。 2.雜交 將白眼焦剛毛小翅處女蠅麻醉,并挑取野生型蠅510只麻醉后放入培養(yǎng)瓶,此雜交組合可用作伴性遺傳和基因定位的觀察統(tǒng)計。 將野生型處女蠅510只麻醉,同時將同樣數(shù)量的白眼焦剛毛小翅雄蠅麻醉,放入培養(yǎng)瓶,此組合用于分離定律和伴性遺傳實驗的反交。 貼好標簽。注明雜交組合和日期,學(xué)生姓名。接種一天后檢查成活情況,死亡應(yīng)及時補充。 3. 25條件下培養(yǎng) 78天后,趕去親本蠅。 4.觀察F1 1113天后,F(xiàn)1代羽化,用放大鏡對正交組合的F1進行觀察,看F1雌蠅是否為
4、野生型,雄蠅是否全為三隱性,若不是,表明處女蠅是非處女蠅,實驗失敗。 5.F1互交 正、反交各選510對F1雌雄蠅麻醉,轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)瓶,貼好標簽。6.放飛F1 78天后趕去F1。 7.觀察F2 1113天后,F(xiàn)2羽化,將其麻醉后于白瓷板上用放大鏡觀察,或用解剖鏡、顯微鏡觀察各種表型的果蠅并統(tǒng)計數(shù)目,每隔2天觀察一次,連續(xù)34次,統(tǒng)計總數(shù)約200300只。統(tǒng)計后的果蠅倒入死蠅盛留器中。六、實驗結(jié)果 1.分離定律:只觀察一對相對性狀的遺傳情況,并對觀察結(jié)果進行遺傳分析。 2.伴性遺傳:只觀察一對相對性狀(如紅眼和白眼)伴隨性別的遺傳情況,并填表。 基因定位:同時觀察三對相對性狀,但只用正交組合的F2代數(shù)據(jù),并將觀察結(jié)果填表。 七、作業(yè)及思考題 1.分析和解釋分離規(guī)律的實驗結(jié)果。 2.分析和解釋伴性遺傳的實驗結(jié)果。 3
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