流行性腦膜炎及其疫苗的發(fā)展現狀

1、流行性腦膜炎及其疫苗的發(fā)展現狀摘要流行性腦膜炎是由腦膜炎雙球菌引起腦膜發(fā)炎的急性呼吸道傳染病，發(fā)病率高，病死率高。主要預防措施為注射流腦疫苗本從從疾病概況、流腦的疫情處理預防、流腦疫苗供應情況及研究新進展等方面討論了流行性腦膜炎及其疫苗的發(fā)展現狀。流行性腦脊髓膜炎（流腦）是由腦膜炎奈瑟氏菌（Nm）引起的一種急性呼吸道傳染病，多發(fā)生在兒童，但近幾年，臨床上成年人發(fā)病越來越多，且病死率高。我國（未包括香港、澳門特別行政區(qū)和臺灣地區(qū).下同）部分地區(qū)還有暴發(fā)疫情出現，流行菌群也可能正在發(fā)生變遷。要做到針對性地改進防控策略，有效地控制流腦的流行，需要進一步了解流腦的疾病概況，加強對流腦的監(jiān)測與預防。本文

2、就流腦及其疫苗的發(fā)展現狀綜述如下。1 疾病概況流行性腦膜炎（以下簡稱“流腦”）是由腦膜炎雙球菌（Nm菌）引起腦膜發(fā)炎的急性呼吸道傳染病1。腦膜炎雙球菌主要包括A、B、C、DX、Y、Z、EH、I、K、L、W共13個菌群2。流腦的發(fā)病周期大約為35年，每810年發(fā)生一次大流行。臨床流腦的病情復雜多變，輕重不一，有3種臨床表現，即普通型、暴發(fā)型、慢性敗血癥型。潛伏期17d,一般為23do腦膜炎雙球菌隱藏于患者或帶菌者的鼻、咽分泌物中，主要通過咳嗽、打噴嚏、說話等由飛沫直接從空氣傳播，傳染性很強，進入呼吸道而引起感染。通常以14歲以下、尤其是7歲以下兒童發(fā)病率最高，學校、工地等人群集中地區(qū)為易發(fā)地，免

3、疫力較低的成年人也易被感染。常見的病征包括發(fā)高燒、劇烈頭痛、后頸僵硬，甚至嗜睡、嘔吐、懼光或皮疹，更嚴重的可引致腦部受損甚至死亡。流腦需采取綜合性措施預防，病人應早發(fā)現、早診斷、早治療、早隔離。在流行季節(jié)（24月）和地區(qū)，要警惕流腦的發(fā)生，不能誤診為感冒處理，以免延誤病情3。流腦在嬰兒時期發(fā)生最為危險，因為此時流腦癥狀不典型，診斷較困難，如果不及時治療，也有發(fā)生后遺癥的危險。流腦常見的并發(fā)癥為關節(jié)炎、硬腦膜下積液或積膿。流腦的后遺癥有失明失聰、肢體癱瘓、弱智及精神改變、腦積水等。發(fā)現早期對普通型病兒采用恰當治療可以徹底治愈此病4。作者單位：成都康華生物制品有限公司（成都610100）作者簡介：

4、蔡勇（1973-）,男，本科，中級工程師，生物制品研發(fā)通訊作者：侯文禮（1983-）,男，碩士，中級工程師，生物醫(yī)藥，leccohou2 疫情的處理及預防接種疫苗是預防流腦的主要措施，如果在未實施菌苗免疫的地區(qū)或只對幼兒進行免疫的地區(qū)，暴發(fā)或發(fā)生流腦，不僅對此地90%以上的15歲以下兒童給予應急接種疫苗，而且對與病人經常密切接觸的其他成年人，需根據實際情況應急注射疫苗。通過流腦血清學檢查確定患者感染了哪一群流腦細菌，一旦發(fā)現是A群以外的菌群，必須對病人周圍密切接觸的人群進行抗菌藥物預防5。2.1 藥物預防預防原則是要全程足量，磺胺喀咤，成人2g/d,兒童75100mg/kg/d;復方磺胺甲口惡

5、哇，3050mg/kg，分2次，共3d。但是監(jiān)測結果發(fā)現30%左右的腦膜炎雙球菌Nm菌株對磺胺耐藥，因此建議兒童口服頭抱拉定，頭抱克的等類頭抱菌素，成人口服氧氟沙星、環(huán)丙沙星，每日早晚各1次，服用3d。還有人主張在耐磺胺藥時口服利福平，也有主張利福平與二甲胺四環(huán)素合用，可使帶菌率降至零6。但為了避免出現藥物不良反應，一般不建議大規(guī)模服用預防藥物。濫用藥物會造成耐藥的Nm增多，影響防?B效果7。在檢出腦膜炎球菌后，要迅速進行藥敏實驗，以便為臨床治療選擇藥物，這對控制疫情有著重要的指導意義。2.2 流腦疫苗注射A群腦膜炎球菌多糖菌苗，0.5ml/次。6個月至2周歲的兒童，使用A群流腦疫苗初免兩針，

6、間隔3個月；2周歲、5周歲各加強一針A+C群二價流腦疫苗。推薦615周歲的兒童接種A+C群二價流腦疫苗。成人也可以自愿接種。接種后68h,局部可能有紅暈或壓痛感，24h后可逐漸消退5。2.3 不適宜接種流腦疫苗的人群食物和藥物的過敏者；發(fā)熱或正處于疾病的急性期的患者，但可以等康復后補種；有高熱驚厥史的患者；臟器功能不全的患者；中樞神經系統(tǒng)感染患者；有精神系統(tǒng)疾病和精神病的患者5。流腦預防控制的重點應從易感人群和傳播途徑管理2個方面入手，在流腦的流行期間應做好宣傳預防工作，動員居民搞好室內和環(huán)境衛(wèi)生，保持室內空氣新鮮，被褥日用品和生活用具要勤曬太陽，并且要加強體育鍛煉，增強體質，減少大型集體活動

7、，發(fā)現流腦患者要及時隔離治療，對病人密切接觸者口服敏感藥物預防，控制傳染源，在沒有疫苗的情況下，加強病例管理8。必要時擴大接種年齡范圍。堅持早發(fā)現、早診斷、早報告、早隔離和早治療，對于減少本病的傳播、降低病死率具有重要意義9,10。同時加強監(jiān)測，包括流行病學監(jiān)測、病原學監(jiān)測及健康人群的帶菌率和抗體水平監(jiān)測，尤其是要抓緊時機采取病人標本進行實驗室檢驗，同時根據監(jiān)測資料進行流行預測11,12。擴大監(jiān)控范圍，了解我國流腦流行特征的變化和免疫接種水平，加大疫情監(jiān)測和提高疫情報告質量。通過預測流腦發(fā)病的趨勢合理地制訂有效的預防措施。3 流腦疫苗的供應狀況從腦膜炎球菌多糖疫苗問世以后，流腦的疫苗預防才取得

8、了重要進展。目前在國內外上市的流腦疫苗主要有多糖疫苗和多糖結合疫苗兩大類13,包括A群與C群單價、A+C群雙價、A+C+Y+W135群四價的多糖（CPS疫苗售品14。腦膜炎球菌多糖疫苗（Meningococcalpolysaccharidevaccine,MPV）是由提取的腦膜炎球菌的莢膜多糖制成的疫苗，莢膜多糖決定腦膜炎球菌菌體本身毒力強弱的，不具有莢膜多糖的突變型腦膜炎球菌在血清中很快被補體系統(tǒng)清除，也不具備病原性，由免疫系統(tǒng)誘導產生針對莢膜多糖的血清抗體是對抗腦膜炎球菌的主要作用物質?，F有的多糖疫苗均是基于此原理發(fā)展而來。此莢膜多糖是非T細胞依賴性抗原，為半抗原，其誘導的免疫應答沒有T淋

9、巴細胞參與，不能產生免疫記憶。所以WHO曾建議流腦多糖疫苗一般不用于2歲以下嬰、幼兒的常規(guī)免疫接種。國際市場上的有A+C群腦膜炎球菌多糖疫苗和ACYW135群腦膜炎球菌多糖疫苗兩種。1971年，美國軍方成功研發(fā)了A+C群腦膜炎球菌多糖疫苗；1981年，賽諾菲-巴斯德的4價多糖疫苗上市（W品名Menomune）15,4價MPV是由A、CYW135群腦膜炎球菌提取制成熱穩(wěn)定的純化凍干的莢膜多糖，單劑疫苗含有相應血清群多糖各為50科go此疫苗安全性很好，基本上無明顯的全身性不良反應，最常見的不良反應為接種部位紅腫和輕度疼痛，持續(xù)12d。在安全性和免疫原性方面，2價和4價MPV之間未見明顯差異。腦膜炎

10、球菌多糖結合疫苗（Meningococcalpolysaccharideconjugatevaccine,MCV）是借助化學連接劑將腦膜炎球菌的莢膜多糖與其中一種蛋白載體（白喉CRM197蛋白、白喉類毒素、破傷風類毒素、腦膜炎球菌的外膜蛋白OMP）連接構成結合的疫苗，此種疫苗的抗原是T細胞依賴性抗原，為全抗原，其誘導的免疫應答有T淋巴細胞參與，能產生免疫記憶16。流腦多糖結合疫苗的接種范圍較流腦多糖疫苗擴大，還可用于2歲以下嬰、幼兒的常規(guī)免疫接種。國際市場上的C群MCV有3種，其中2種MCV是凱龍和惠氏的產品，其蛋白載體為無毒的變異白喉毒素（CRMl97）,另外1種是Baxter公司產品，其蛋

11、白載體為破傷風類毒素，均可誘導產生高滴度的抗莢膜IgG抗體和B記憶細胞。從1999年開始，英國將C群MCV納入國家免疫規(guī)劃，嬰兒可在2、3、4月齡時首次接種，并可對413月齡的兒童和青少年進行初次強化免疫。英國進行的大規(guī)模血清學研究表明，接種1劑MCV后16個月，12歲兒童有保護性抗體的高達88%,并且96%的1517歲青少年有保護性抗體13。賽諾菲-巴斯德公司研發(fā)的4價多糖結合疫苗(A+C+Y+W135)商品名為Menactra)的載體蛋白為白喉毒素，研究數據顯示在1118歲的人群中有100%的保護效率，在美國于2005年被批準用于1155歲的人群中，并于2007年被批準用于210歲的流腦高

12、危人群15。諾華公司用半合成技術，生產出的4價多糖結合疫苗(A+C+Y+W135)尚品名為Menveo),的載體蛋白為變異白喉毒素，分別結合A群莢膜多糖(10g)和CY、W135群莢膜多糖各5g,分含鋁佐劑與不含鋁佐劑兩種產品17。但這幾種4價結合疫苗的價格昂貴，在發(fā)展中國家一般難以推廣使用。4流腦疫苗研究新進展在流腦的防治過程中，疫苗應用不可或缺。目前中國流腦疫苗有多糖疫苗和結合疫苗2種。多糖疫苗在預防性接種還和應急接種中，對保護人類健康作出了巨大貢獻。該類疫苗應用后能激活具有群特異性的機體免疫反應，對相應群的菌株感染具有免疫作用。目前全球已經臨床應用的多糖疫苗有A群單價、AC群2價、A+C

13、+Y+W135四價3種，基本涵蓋了當前致病性較高引發(fā)病例較多的菌群，前兩種目前已納入國家免疫規(guī)劃。研究表明，用流腦A+C結合疫苗代替A群多糖疫苗，可使小月齡嬰兒得到免疫保護，有利于進一步降低嬰幼兒流腦的發(fā)病率；用ACYW135群4價多糖疫苗代替AC二價多糖疫苗，可同時獲得4種常見腦膜炎球菌菌群的免疫保護，有利于防止丫和W135群引起的發(fā)病或流行18?，F在新疫苗的開發(fā)主要集中在B群流腦的預防。對于在歐美國家流行較多而全球各地散發(fā)的B群腦膜炎球菌菌株，尚未開發(fā)出預防此菌群的有效疫苗。這是因為B群與其他種群的腦膜炎球菌莢膜多糖存在巨大差異，為解決抵御B群腦膜炎球菌的疫苗，以蛋白作為抗原的流腦疫苗的研

14、究正在逐漸興起，最早以蛋白為抗原的疫苗含有去污劑提取的外膜囊，這種外膜囊所含的成分比較復雜，其中主要蛋白為外膜孔蛋白(Porin)。這幾年基于純化蛋白抗原的其它研究也逐漸開展，雖然由于腦膜炎球菌的抗原蛋白的基因多樣性和免疫原性的多樣性導致純化具有疫苗價值的抗原蛋白難度非常大，但“反向疫苗學”(Reversevaccinology)方法使得這些具有疫苗價值的抗原蛋白譜逐漸清晰。最近幾年，研發(fā)人員多途徑地研發(fā)能預防B群腦膜炎球菌的疫苗，B群流腦疫苗也進入臨床研究。荷蘭采用DNA重組技術構建了一種6價外膜囊泡B群腦膜炎球菌疫苗。我國也篩選獲得了一種免疫原性強、菌型之間交叉反應強的B群Nm外膜蛋白復合

15、物(OMPC),此種OMPC還可作為載體，將它與國產的A群腦膜炎球菌多糖疫苗偶聯到一起，構建了一種ACPS-BOMPC勺偶聯物，初步試驗證明了此偶聯物既增強了A群腦膜炎球菌多糖的免疫原性，還具有B群腦膜炎球菌OMPC免疫原性，而且它的安全性和穩(wěn)定性也比較好14。這些實驗數據表明研制一種能誘導產生對所有B群腦膜炎球菌有真正交叉保護性應答的疫苗是很有希望的O烏干達進行的使用1/5和1/10劑量的ACYW135多糖疫苗的研究數據表明19,接種1/5劑量的A和W135群疫苗后的血清殺菌抗體（SBA）活性并不低于接種全劑量疫苗者，但C和Y群疫苗的情況并非如此。這些結果提示，如果疫苗供應緊張，必要時可減少

16、接種劑量。另外，有人提出用外膜囊OMV疫苗作為莢膜下抗原來提供保護作用的可能性，但需進一步研究。盡管已有外膜囊（OMV）疫苗，但尋找一種能誘導交叉反應性免疫應答的“通用”疫苗的工作一直在進行。由于OMV疫苗含有脂多糖（LPS）而LPS有一定的毒性，有報道稱，Toll樣受體3（TLR3卜TLR4TLR7和TLR9可增強對LPS缺陷型外膜蛋白復合物的免疫應答，是一種有希望的外膜蛋白疫苗佐劑19。要解決在疫苗緊張的狀態(tài)是開發(fā)一種廉價的結合疫苗，接種1劑即可提供長期保護性免疫，并能誘導產生群體免疫19。腦膜炎疫苗項目/美國帕斯適宜衛(wèi)生科技組織（MeningitisVaccineProject/Prog

17、rammeForAppropriateTechnologyandHealth,MVP/PATH）已完成了A群結合疫苗的研究，其價格可望降低到0.5美元。在成年人中進行的I期臨床試驗顯示，疫苗是安全的和有免疫原性的，免疫后SBA持續(xù)時間比A/C群多糖疫苗長。現在這種疫苗正在進行n期臨床試驗，希望此疫苗能減少非洲撒哈拉沙漠以南地區(qū)流腦的流行。俄羅斯科學院生物有機化學研究所已研制出能夠有效抵抗多種腦膜炎細菌的疫苗20,且在實驗鼠身上的試驗已獲得成功。該疫苗的主要成分是含有腦膜炎球菌外膜蛋白質的片段。腦膜炎球菌有A和B兩組類型，目前尚無有效抵抗B型細菌的疫苗。B細菌微生物的外層多糖殼隱藏在神經系統(tǒng)細胞

18、分子甚至胚胎組織之下，因此，利用它來研制疫苗對生命機體有很大危險。最理想的疫苗成分應該是病原體的外膜蛋白質，但它們的結構各種各樣，在這樣的蛋白質基礎上合成的疫苗，只對一種細菌有效。研究人員利用了由2030個氨基酸組成的蛋白質片段作主要成分來研制新疫苗，最終在肽合成器上利用固相法用3個腦膜炎球菌外膜蛋白質中合成了9個氨基酸順序。隨后，研究人員在實驗鼠上對新疫苗進行了試驗。他們首先將疫苗注射給實驗鼠，然后用各種腦膜炎細菌來感染實驗鼠，結果發(fā)現，被肽混合物免疫后的實驗鼠血液中，有生命的細菌要比任何使用了單一的肽所免疫的實驗鼠血液中低得多：沒有注射疫苗的實驗鼠死亡的數量是注射過疫苗的3倍，這意味著疫苗在實驗鼠的試驗中獲得了成功。專家指出，該科研成果對研究可