藥物分析巴比妥類藥物的分析ppt課件

1、第五章 巴比妥類藥物的分析 巴比妥類藥物是一類臨床常用的催眠鎮(zhèn)靜藥。由于這類藥物運(yùn)用廣泛，容易因不合理運(yùn)用而引起中毒。因此，需求對(duì)本類藥物的原料、制劑進(jìn)展分析，有時(shí)也需求對(duì)生物樣品中微量巴比妥類藥物進(jìn)展分析。 本章重點(diǎn)引見：本章重點(diǎn)引見：一、化學(xué)構(gòu)造與性質(zhì)一、化學(xué)構(gòu)造與性質(zhì)化學(xué)性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系化學(xué)性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系二、鑒別實(shí)驗(yàn)二、鑒別實(shí)驗(yàn)三、含量測定三、含量測定 5,55,5取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物1,5,51,5,5取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物5,55,5取代的硫代巴比妥類藥物取代的硫代巴比妥類藥物CCCONONC OR1R2R3543216HHCCCONONC

2、 OH5C2H5C2HH巴比妥BarbitalCCCONONC OH5C2HH苯巴比妥PhenylbarbitalCCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥鈉SecobarbitalCCCONONC ONaC2H5CHCH2CH2CH3CH3H異戊巴比妥鈉CNHCNHCOOOH5C2CH3(CH2)2CHCH3戊巴比妥戊巴比妥CCNHCNHOOOH5C2環(huán)己烯巴比妥環(huán)己烯巴比妥CCNCNHOOOH3CCH31,5,5-1,5,5-取代的巴比妥類藥物取代的巴比妥類藥物 己瑣巴比妥己瑣巴比妥51硫噴妥鈉HCCCONONCSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3 區(qū)別各

3、種巴比妥類藥物區(qū)別各種巴比妥類藥物 環(huán)狀丙二酰脲、環(huán)狀丙二酰脲、1,3-1,3-二酰亞胺二酰亞胺基團(tuán)決議巴比妥類藥物的特性基團(tuán)決議巴比妥類藥物的特性 1. 1. 環(huán)狀母核部分環(huán)狀母核部分2. 2. 取代基部分取代基部分構(gòu)造特征構(gòu)造特征 1. 1.白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉未，具有固定的熔點(diǎn)。的熔點(diǎn)。 2. 2.游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于游離巴比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉鹽那水，易溶于乙醇及有機(jī)溶劑；其鈉鹽那么易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。么易溶于水，而不溶于有機(jī)溶劑。 一物理性質(zhì)一物理性質(zhì) 二二 化學(xué)性質(zhì)化學(xué)性質(zhì) 巴比妥類藥物分子構(gòu)造中都有巴比

4、妥類藥物分子構(gòu)造中都有1,3-1,3-二二酰亞胺基團(tuán)，能發(fā)生酮式和烯醇式的互酰亞胺基團(tuán)，能發(fā)生酮式和烯醇式的互變異構(gòu)，在水溶液中可以發(fā)生二級(jí)電離。變異構(gòu)，在水溶液中可以發(fā)生二級(jí)電離。因此，本類藥物的水溶液顯弱酸性因此，本類藥物的水溶液顯弱酸性pKapKa為為7.3-8.47.3-8.4，可與強(qiáng)堿構(gòu)成水溶，可與強(qiáng)堿構(gòu)成水溶 性的鹽類。性的鹽類。 1. 1.弱酸性弱酸性CCCONONC OHR1R2HCCCONONC OR1R2HHCCCONONC OR1R2HCCCONONC OR1R2+ H+ H+pK1=8+ H+ H+pK2=12與強(qiáng)堿的成鹽反響：與強(qiáng)堿的成鹽反響：CO NHCNCOOHR

5、1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O 2. 水解反響1巴比妥類藥物的水解：其根本構(gòu)造中具有酰亞胺構(gòu)造，與堿溶液共沸即水解產(chǎn)生氨氣。 + 2Na2CO3COONaR1R2+2NH3 CONHCNCOOHR1R2+ 5NaOH2 2巴比妥類鈉鹽的水解：在吸濕的巴比妥類鈉鹽的水解：在吸濕的情況下，本類藥物的鈉鹽也能水解成情況下，本類藥物的鈉鹽也能水解成無效物質(zhì)無效物質(zhì) 。NHCOCNCOR1R2ONaR1 COONaR2 CONHCONH2CCHCONHCONH23. 3. 與重金屬離子反響與重金屬離子反響1 1與銀鹽的反響與銀鹽的反響- -丙二酰脲類鑒別反響丙二酰脲類鑒別反

6、響二銀鹽白色可溶性一銀鹽取代的巴比妥類藥物，3323AgNO CONa AgNO55可溶性一銀鹽取代的巴比妥類藥物，323CONa AgNO5512 2與銅鹽的反響與銅鹽的反響ZwikkerZwikker反響反響 酰亞胺構(gòu)造溶于吡啶時(shí)，易發(fā)生酰亞胺構(gòu)造溶于吡啶時(shí)，易發(fā)生烯醇化異構(gòu)景象。烯醇化構(gòu)造與銅吡烯醇化異構(gòu)景象。烯醇化構(gòu)造與銅吡啶試液作用，生成穩(wěn)定的配位化合物。啶試液作用，生成穩(wěn)定的配位化合物。巴比妥類藥物 +紫色或紫色 銅吡啶試液吡啶硫噴妥鈉 +綠色銅吡啶試液吡啶用于巴比妥類與硫代巴比妥類的區(qū)別用于巴比妥類與硫代巴比妥類的區(qū)別3 3與鈷鹽反響與鈷鹽反響ParriParri實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn) 反響條

7、件反響條件: : 無水條件無水條件 常用試劑：無水乙醇或常用試劑：無水乙醇或甲醇，醋酸鈷、硝酸鈷或氧化鈷；甲醇，醋酸鈷、硝酸鈷或氧化鈷； 堿性：異丙胺或吡啶。堿性：異丙胺或吡啶。紫堇色鈷鹽巴比妥類藥物堿性 4 4與汞鹽的反響多發(fā)生在與汞鹽的反響多發(fā)生在1 1位位 與硝酸汞或氯化汞試液反響，生與硝酸汞或氯化汞試液反響，生成白色汞鹽沉淀，沉淀能溶于氨試成白色汞鹽沉淀，沉淀能溶于氨試液中。液中。NHCOCOCNHCOR1R2HgNO3N-HgNO3COCOCNHCOR1R2N-HgNO3COC-OHCNHCOR1R2NH3H2O沉淀溶解沉淀溶解4. 4. 與香草醛與香草醛VanillinVanill

8、in的反響的反響 分子構(gòu)造中丙二酰脲基團(tuán)中分子構(gòu)造中丙二酰脲基團(tuán)中的氨比較活潑，可與香草醛在的氨比較活潑，可與香草醛在濃硫酸存在下發(fā)生縮合反響，濃硫酸存在下發(fā)生縮合反響，生成棕紅色產(chǎn)物。生成棕紅色產(chǎn)物。1 1巴比妥類藥物巴比妥類藥物 酸性溶液：酸性溶液：5 5，5-5-二取代、二取代、 1 1，5 5，5-5-三取代均無吸收。三取代均無吸收。 巴比妥類藥物的紫外吸收光譜特征巴比妥類藥物的紫外吸收光譜特征和其電離的程度有關(guān)。和其電離的程度有關(guān)。 5. 5. 紫外吸收光譜特征紫外吸收光譜特征 pH10 pH10的堿性溶液：的堿性溶液：5 5，5-5-二取代、二取代、 1 1，5 5，5-5-三取代

9、均在三取代均在240nm240nm處有最大吸收處有最大吸收 pH13 pH13的強(qiáng)堿性溶液：的強(qiáng)堿性溶液：5 5，5-5-二取代在二取代在255nm255nm處有最大吸收；處有最大吸收；1 1，5 5，5-5-三取代在三取代在240nm240nm處有最大吸收。處有最大吸收。H2SO4溶溶液液(0.05mol/L)pH9.9緩沖緩沖溶液溶液NaOH溶液溶液(0.1mol/L) (pH 13)巴比妥類藥物的紫外吸收光譜巴比妥類藥物的紫外吸收光譜nm2 2含硫巴比妥類含硫巴比妥類 酸性溶液、堿性溶液中均有明顯酸性溶液、堿性溶液中均有明顯紫外吸收峰。紫外吸收峰。 硫噴妥的紫外吸收光譜硫噴妥的紫外吸收光

10、譜HCl 溶液溶液 (0.1mol/L) NaOH 溶液溶液 (0.1mol/L) 6、薄層色譜行為特征、薄層色譜行為特征巴比妥類藥物具有不同的分子構(gòu)造，那么其色巴比妥類藥物具有不同的分子構(gòu)造，那么其色譜行為亦不同，可根據(jù)譜行為亦不同，可根據(jù)Rf不同以鑒別不同以鑒別.常用的方法有薄層色譜法和高效液相色譜法等常用的方法有薄層色譜法和高效液相色譜法等7 7、顯微結(jié)晶、顯微結(jié)晶 巴比妥類藥物可根據(jù)其本身或與某種試劑的反響巴比妥類藥物可根據(jù)其本身或與某種試劑的反響產(chǎn)物的特殊晶型，進(jìn)展鑒別產(chǎn)物的特殊晶型，進(jìn)展鑒別 此法亦適用于生物樣品中微量巴比妥類藥物的檢驗(yàn)此法亦適用于生物樣品中微量巴比妥類藥物的檢驗(yàn)巴

11、比妥與苯巴比妥的顯微結(jié)晶巴比妥與苯巴比妥的顯微結(jié)晶巴比妥銅吡啶結(jié)晶巴比妥銅吡啶結(jié)晶一、與重金屬離子反響丙二酰一、與重金屬離子反響丙二酰脲類鑒別實(shí)驗(yàn)脲類鑒別實(shí)驗(yàn) 苯巴比妥苯巴比妥 ChP ChP20002000【鑒別】【鑒別】1 1本品顯丙二酰脲類的鑒本品顯丙二酰脲類的鑒 別反響附錄別反響附錄三、三、 鑒別實(shí)驗(yàn)鑒別實(shí)驗(yàn) 取供試品約取供試品約0.1g0.1g，加碳酸鈉試液，加碳酸鈉試液1ml1ml與水與水10m110m1，振搖，振搖2min2min，濾過，濾液中，濾過，濾液中逐滴參與硝酸銀試液，即白色沉淀，振逐滴參與硝酸銀試液，即白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴

12、加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。銀試液，沉淀不再溶解。 1. 1. 與銀鹽的反響與銀鹽的反響附錄附錄 普通鑒別實(shí)驗(yàn)普通鑒別實(shí)驗(yàn) 取供試品約取供試品約50mg50mg，加吡啶溶液，加吡啶溶液1101105m15m1，溶解后，加銅吡啶試液，溶解后，加銅吡啶試液硫酸銅硫酸銅4g4g，水，水90ml90ml溶解后，加吡啶溶解后，加吡啶30m130m1，即得，即得1m11m1，即顯紫色或生成紫，即顯紫色或生成紫色沉淀。色沉淀。2. 2. 與銅鹽的反響與銅鹽的反響二、測定熔點(diǎn)二、測定熔點(diǎn)1 1司可巴比妥鈉的鑒別司可巴比妥鈉的鑒別97972 2苯巴比妥鈉的鑒別苯巴比妥鈉的鑒別1741741781783 3

13、巴比妥的鑒別巴比妥的鑒別150150三、利用特殊取代基或元素的鑒別實(shí)驗(yàn)三、利用特殊取代基或元素的鑒別實(shí)驗(yàn)1 1利用不飽和取代基的鑒別實(shí)驗(yàn)利用不飽和取代基的鑒別實(shí)驗(yàn)1 1與碘試液的反響：與碘或溴試液發(fā)生加成與碘試液的反響：與碘或溴試液發(fā)生加成反響，使其顏色消褪。反響，使其顏色消褪。2 2與高錳酸鉀的反響：與高錳酸鉀在堿性溶液中與高錳酸鉀的反響：與高錳酸鉀在堿性溶液中反響，使紫色反響，使紫色KMnO4KMnO4復(fù)原為棕色的復(fù)原為棕色的MnO2 MnO2 。例：司巴比妥鈉與碘或高錳酸鉀反響，使之褪色。例：司巴比妥鈉與碘或高錳酸鉀反響，使之褪色。2 2利用芳環(huán)取代基的鑒別實(shí)驗(yàn)利用芳環(huán)取代基的鑒別實(shí)驗(yàn)1

14、 1硝化反響與硝酸鉀、硫酸共熱，生成黃色的硝基化硝化反響與硝酸鉀、硫酸共熱，生成黃色的硝基化產(chǎn)物產(chǎn)物(2)(2)苯巴比妥苯巴比妥 + + 硫酸硫酸 + + 亞硝酸鈉亞硝酸鈉-橙黃色橙黃色-橙紅色橙紅色. .(3)(3)苯巴比妥苯巴比妥 + + 甲醛甲醛 + + 硫酸硫酸-玫瑰紅色玫瑰紅色 此鑒別方法收載于中國藥典此鑒別方法收載于中國藥典, ,可用于區(qū)別苯巴比妥和其它可用于區(qū)別苯巴比妥和其它巴比妥類藥物巴比妥類藥物. .3 3、硫元素的鑒別實(shí)驗(yàn)、硫元素的鑒別實(shí)驗(yàn) 巴比妥類藥物分子構(gòu)造中含有硫的藥巴比妥類藥物分子構(gòu)造中含有硫的藥物，經(jīng)有機(jī)破壞后硫元素轉(zhuǎn)化為無機(jī)硫物，經(jīng)有機(jī)破壞后硫元素轉(zhuǎn)化為無機(jī)硫離

15、子，再與鉛離子反響生成離子，再與鉛離子反響生成 PbS PbS 黑色黑色沉淀。沉淀。( (一一) ) 苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查苯巴比妥的特殊雜質(zhì)檢查 1 1酸度酸度控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲控制副產(chǎn)物苯基丙二酰脲其酸度比苯巴比妥藥物強(qiáng)，能使甲基紅呈紅色其酸度比苯巴比妥藥物強(qiáng)，能使甲基紅呈紅色 2 2溶液的廓清度溶液的廓清度控制乙醇不溶物控制乙醇不溶物 3 3中性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì)控制堿中不溶副產(chǎn)物的生成控制堿中不溶副產(chǎn)物的生成四、四、 特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查( (二二) ) 司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查司可巴比妥鈉的特殊雜質(zhì)檢查1 1溶液的廓清度溶液的廓清度控制乙醇不溶物控制乙醇不溶物2 2中

16、性或堿性物質(zhì)中性或堿性物質(zhì)控制堿中不溶控制堿中不溶副產(chǎn)物和分解產(chǎn)物的生成副產(chǎn)物和分解產(chǎn)物的生成一、銀量法一、銀量法 基于巴比妥類藥物在適當(dāng)?shù)膲A性溶基于巴比妥類藥物在適當(dāng)?shù)膲A性溶液中，可與銀離子定量成鹽的性質(zhì)，采液中，可與銀離子定量成鹽的性質(zhì)，采用銀量法測定本類藥物及制劑的含量。用銀量法測定本類藥物及制劑的含量。五、五、 含量測定含量測定原理：原理：二銀鹽白色可溶性一銀鹽取代的巴比妥類藥物，3323AgNO CONa AgNO55終點(diǎn)指示：電位法指示終點(diǎn)指示：電位法指示AgAg電極為電極為 指示指示電極，飽和甘汞電極為參比電極電極，飽和甘汞電極為參比電極 本身指示本身指示 反響摩爾比反響摩爾比1

17、111溶劑系統(tǒng)：甲醇溶劑系統(tǒng)：甲醇+3%+3%無水碳酸鈉無水碳酸鈉優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，專屬性強(qiáng)。優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，專屬性強(qiáng)。缺陷：滴定終點(diǎn)察看有誤差，受溫度影響缺陷：滴定終點(diǎn)察看有誤差，受溫度影響例：異戊巴比妥鈉的含量測定：例：異戊巴比妥鈉的含量測定： 取供試品取供試品0.2052g依法用依法用0.1010mol/L硝酸銀滴硝酸銀滴定液滴定，耗費(fèi)定液滴定，耗費(fèi)8.10ml,每每1ml 0.1mol/lL 硝酸銀滴硝酸銀滴定液相當(dāng)于定液相當(dāng)于24.83mg的異戊巴比妥鈉，試計(jì)算異戊的異戊巴比妥鈉，試計(jì)算異戊巴比妥鈉的含量巴比妥鈉的含量.0.10100.18.1024.83100%100%98.99%2

18、05.2VFTW二、溴量法二、溴量法凡取代基中含有雙鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵凡取代基中含有雙鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵可與溴定量地發(fā)生加成反響，故可采用溴量法進(jìn)展可與溴定量地發(fā)生加成反響，故可采用溴量法進(jìn)展測定。測定。 如司可巴比妥鈉及其膠囊的測定原理為：如司可巴比妥鈉及其膠囊的測定原理為： 司巴比妥鈉司巴比妥鈉 + Br2(過量過量- Br2剩余剩余 KI Na2S2O3- I2- I- 藍(lán)色消逝藍(lán)色消逝 淀粉指示劑淀粉指示劑例司巴比妥鈉含量測定：例司巴比妥鈉含量測定： 取供試品取供試品0.1301g，依溴量法測定，供試品耗費(fèi)，依溴量法測定，供試品耗費(fèi)0.0999mol/L硫代硫酸鈉滴

19、定液硫代硫酸鈉滴定液25.05ml,空白耗費(fèi)空白耗費(fèi)15.05ml;每每1ml 0.1mol/L溴滴定液相當(dāng)于溴滴定液相當(dāng)于13.01mg的司可巴比妥鈉，計(jì)算司可巴比妥鈉的含量的司可巴比妥鈉，計(jì)算司可巴比妥鈉的含量.()100%VVFTW樣空0.09990.1(25.0515.05)13.01100%99.90%205.2三、酸堿滴定法三、酸堿滴定法 巴比妥類藥物呈弱酸性，可采用酸堿滴定測含量。巴比妥類藥物呈弱酸性，可采用酸堿滴定測含量。例：異戊巴比妥因溶劑也耗費(fèi)堿量，所以要做空白例：異戊巴比妥因溶劑也耗費(fèi)堿量，所以要做空白 1E 1cm四、紫外分光光度法四、紫外分光光度法 巴比妥類藥物紫外吸

20、收波長、吸收系數(shù)見巴比妥類藥物紫外吸收波長、吸收系數(shù)見P124表：表：詳細(xì)方法：詳細(xì)方法： 一直接紫外分光光度法一直接紫外分光光度法 本法是將樣品溶解后，根據(jù)溶液的本法是將樣品溶解后，根據(jù)溶液的pHpH值選用其相應(yīng)的值選用其相應(yīng)的 maxmax處進(jìn)展直接測處進(jìn)展直接測定。定。二經(jīng)提取分別后的紫外分光光度法二經(jīng)提取分別后的紫外分光光度法1. 1. 吸收系數(shù)法吸收系數(shù)法lEAC1%1cm)g/100ml(ClEA%1cm1100)g/ml(1%1cmlEAC 0 C1 C2 C3 C4 CX C5 C A 5 A X A 4 A 3 A 2 A 1 A2. 2. 規(guī)范曲線法規(guī)范曲線法 3. 3.

21、對(duì)照法對(duì)照法 對(duì)樣對(duì)樣AACC對(duì)樣對(duì)樣CCAAlCElCEAA對(duì)%1cm1樣%1cm1對(duì)樣 取兩份相等的供試溶液，分別制成兩取兩份相等的供試溶液，分別制成兩種不同的化學(xué)環(huán)境如在其一中加酸、堿種不同的化學(xué)環(huán)境如在其一中加酸、堿或緩沖液改動(dòng)溶液的或緩沖液改動(dòng)溶液的pHpH，或在其一中加，或在其一中加能與供試品發(fā)生某種化學(xué)反響的試劑，能與供試品發(fā)生某種化學(xué)反響的試劑，然后將兩者分別稀釋至同樣濃度，一份置然后將兩者分別稀釋至同樣濃度，一份置樣品池中，另一份置參比池中，于適當(dāng)波樣品池中，另一份置參比池中，于適當(dāng)波長長 處，測其吸收度的差值處，測其吸收度的差值 A A值。值。三差示分光光度法三差示分光光度

22、法 A A法法1. 1. 測定方法測定方法2. 2. 必要條件必要條件 1 1供試品在不同的化學(xué)環(huán)境中以不同的供試品在不同的化學(xué)環(huán)境中以不同的分子方式存在，它們的吸收光譜有顯著的分子方式存在，它們的吸收光譜有顯著的差別。差別。 2 2干擾物的吸收不受測定時(shí)化學(xué)環(huán)境的干擾物的吸收不受測定時(shí)化學(xué)環(huán)境的影響，光譜行為不變。影響，光譜行為不變。 供試品在兩種不同的化學(xué)環(huán)境中分別供試品在兩種不同的化學(xué)環(huán)境中分別以以x x、y y 表示，干擾物用表示，干擾物用 z z 表示表示3. 3. 定量根據(jù)定量根據(jù)ClAAAAAAAAAyxyxzyzx)( )()(樣2樣1CA即，吸收度差值即，吸收度差值 A A僅與待測組分的僅與待測組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無關(guān)，即干擾濃度有關(guān)，而與干擾組分無關(guān)，即干擾組分的干擾被消除。組分的干擾被消除。 可用對(duì)照法或規(guī)范曲線法定量可用對(duì)照法或規(guī)范曲線法定量 保管了通常的分光光度法簡易快速、保管了通常的分光光度法簡易快速、直接讀數(shù)的優(yōu)點(diǎn)，又無需事先分別，并直接讀數(shù)的優(yōu)點(diǎn)，又無需事先分別，并能消除干擾。能消除干擾。4. 4. 特點(diǎn)特點(diǎn)5、高效液相色譜法、高效液相色譜法高效液相色譜法多用于制劑及體液中巴比妥類高效液