實驗實驗十 、細菌的生理生化實驗(二)

1、LOGOLOGOCompany name 實驗十實驗十 細菌的生理生化反應(yīng)細菌的生理生化反應(yīng)www.themegallery.coCompany Logo一、目的一、目的1 1、了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重、了解糖發(fā)酵的原理和在腸道細菌鑒定中的重要作用；要作用；2 2、了解吲哚、甲基紅、伏、了解吲哚、甲基紅、伏- -普反應(yīng)的原理及其普反應(yīng)的原理及其在腸道菌鑒定中的意義和方法。在腸道菌鑒定中的意義和方法。www.themegallery.coCompany Logo二、基本原理二、基本原理 糖分解試驗是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)，在腸糖分解試驗是常用的鑒別微生物的生化反應(yīng)，在腸道細菌的

2、鑒定上尤為重要。道細菌的鑒定上尤為重要。 絕大多數(shù)細菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是絕大多數(shù)細菌都能利用糖類作為碳源和能源，但是它們在分解糖類物質(zhì)的能力上有很大的差異。它們在分解糖類物質(zhì)的能力上有很大的差異。 發(fā)酵培養(yǎng)基含有蛋白胨，指示劑，倒置的德漢氏小發(fā)酵培養(yǎng)基含有蛋白胨，指示劑，倒置的德漢氏小管和不同的糖類。管和不同的糖類。 www.themegallery.coCompany Logo 當發(fā)酵產(chǎn)酸時，溴甲酚紫指示劑可由紫色（當發(fā)酵產(chǎn)酸時，溴甲酚紫指示劑可由紫色（pH6.8pH6.8）變?yōu)辄S色（變?yōu)辄S色（pH5.2pH5.2）。）。 氣體的產(chǎn)生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明氣體的產(chǎn)

3、生可由倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明。 吲哚、甲基紅、伏吲哚、甲基紅、伏- -普這三個試驗主要是用來快速鑒別普這三個試驗主要是用來快速鑒別大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌，多用于水的細菌學(xué)檢查。大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌，多用于水的細菌學(xué)檢查。 大腸桿菌雖非致病菌，但在飲用水中若超過一定數(shù)量，大腸桿菌雖非致病菌，但在飲用水中若超過一定數(shù)量，則表示受糞便污染。則表示受糞便污染。 產(chǎn)氣桿菌也廣泛存在于自然界中，因此檢查水時要將產(chǎn)氣桿菌也廣泛存在于自然界中，因此檢查水時要將兩者分開。兩者分開。www.themegallery.coCompany Logo三、實驗材料三、實驗材料1 1、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、變形桿菌等

4、。、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、變形桿菌等。2 2、培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基，、培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基，PDAPDA液體培養(yǎng)基、葡萄糖液體培養(yǎng)基、葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管、蛋白胨水培養(yǎng)基、葡萄發(fā)酵培養(yǎng)基試管和乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基試管、蛋白胨水培養(yǎng)基、葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基糖蛋白胨水培養(yǎng)基3 3、試劑：呂氏堿性美蘭染色液、中性紅染色液、碘液、甲、試劑：呂氏堿性美蘭染色液、中性紅染色液、碘液、甲 基紅基紅指示劑，指示劑，4040KOHKOH，5 5-萘酚，乙醚，吲哚試劑等。萘酚，乙醚，吲哚試劑等。4 4、儀器或其他用具：、儀器或其他用具： 顯微鏡、酒精燈、載玻片、蓋玻片等。顯微鏡

5、、酒精燈、載玻片、蓋玻片等。www.themegallery.coCompany Logo四、操作步驟四、操作步驟1 1、細菌的生理生化反應(yīng)：、細菌的生理生化反應(yīng)： 將供試菌株分別接種在相應(yīng)的培養(yǎng)液中，置適宜的溫箱中將供試菌株分別接種在相應(yīng)的培養(yǎng)液中，置適宜的溫箱中恒溫培養(yǎng)。在規(guī)定的時間內(nèi)，選用相應(yīng)的指示劑測定和觀察恒溫培養(yǎng)。在規(guī)定的時間內(nèi)，選用相應(yīng)的指示劑測定和觀察試驗結(jié)果。試驗結(jié)果。（1 1）糖發(fā)酵試驗）糖發(fā)酵試驗 菌株菌株 糖液中糖液中 培養(yǎng)培養(yǎng) 觀察結(jié)果觀察結(jié)果 www.themegallery.coCompany Logo (2) v-p(2) v-p試驗（伏試驗（伏- -普試驗）普

6、試驗） 菌株菌株 葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 培養(yǎng)培養(yǎng) 取培養(yǎng)液取培養(yǎng)液2ml+2mlv-p2ml+2mlv-p試劑試劑 混合均勻混合均勻 3737度培養(yǎng)度培養(yǎng)3030分鐘分鐘 觀察結(jié)果觀察結(jié)果 (3)(3)甲基紅試驗甲基紅試驗 菌株菌株 葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 培養(yǎng)培養(yǎng) 取培養(yǎng)液取培養(yǎng)液2ml+22ml+2滴甲基紅試劑滴甲基紅試劑 混合均勻混合均勻 觀察結(jié)果觀察結(jié)果 (4)(4)吲哚試驗吲哚試驗 菌株菌株 蛋白胨水培養(yǎng)基蛋白胨水培養(yǎng)基 培養(yǎng)培養(yǎng) 取乙醚取乙醚2ml2ml加入到加入到培養(yǎng)液培養(yǎng)液 觀察結(jié)果觀察結(jié)果www.themegallery.coCompany Logowww.themegallery.coCompany Logowww.themegallery.coCompany Logo吲哚試驗吲哚試驗www.themegallery.coCompany Logowww.themegallery.coCompany Logo乙酰甲基甲醇試驗（伏乙酰甲基甲醇試驗（伏- -普試驗）普試驗）www.themegallery.coCompany Logowww.themegallery.coCompany Logo五、實驗報告五、實驗報告 1 1、列表說明各供試菌對糖類的分解利用情、列表說明各供試菌對