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文檔簡(jiǎn)介
1、課時(shí)跟蹤檢測(cè)(三十九) 微生物的培養(yǎng)和利用一、題點(diǎn)練1下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說(shuō)法,正確的是( )A. 天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基B. 接種前需對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理C. 大腸桿菌的純化培養(yǎng)過(guò)程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段D. 分離分解尿素的細(xì)菌時(shí),尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源解析:選 C 天然培養(yǎng)基是指用天然物質(zhì)制成的培養(yǎng)基,但也需要加工;實(shí)驗(yàn)操作者的 雙手應(yīng)消毒,不能滅菌;分離分解尿素的細(xì)菌時(shí),尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源,不是碳源, 需加入不含氮元素的有機(jī)物 (如葡萄糖 ) 作為碳源。2平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微
2、生物的兩種常用方法,下列描述正確的是( )A. 都要將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B. 平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過(guò)接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面C. 稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)D. 都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落解析:選 D 平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋,稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌 液涂布到固體培養(yǎng)基的表面。 平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌 落。3下列關(guān)于“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)的敘述,錯(cuò)誤的是()A. 土壤取樣時(shí)應(yīng)選取距地表約 38 cm 的土壤層B.測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量,一般選用104、105和 106倍的稀釋液C
3、. 土壤中能合成脲酶的細(xì)菌能分解尿素D. 向以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入剛果紅溶液可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌解析:選 D 測(cè)定細(xì)菌數(shù)量,一般選用104、 105和 106倍稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng);測(cè)定真菌的數(shù)量,一般選用 102、 103和 104倍稀釋液;測(cè)定放線菌的數(shù)量,一般選用103、 104和 105倍稀釋液。鑒定分解尿素的細(xì)菌時(shí)需向以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。4 做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí),下列敘述正確的是 ()A 高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí),打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后,開(kāi)啟鍋蓋B 倒平板時(shí),應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C 為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)
4、趁熱快速挑取菌落D 用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上解析:選 D 在高壓滅菌的操作過(guò)程中,加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,待壓 力表的指針指22到零時(shí),打開(kāi)放氣閥,旋松螺栓,打開(kāi)蓋子。倒平板時(shí),用左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)3一條稍大于瓶口的縫隙, 而不是完全取下放到一邊。 接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷 卻后,再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中,一般將培養(yǎng)皿倒置, 在皿底上用記號(hào)筆做標(biāo)記。5.在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn),在a、b、c 處分別貼浸有不同抗生素(濃度相同)的無(wú)菌濾紙片,d 處濾紙片浸有無(wú)菌水。 培養(yǎng)后的結(jié)果如圖所示。以下判斷錯(cuò)誤的是()A. a 處抑菌效果小于 b
5、 處B. b 處的濾紙片沒(méi)有瀝干C. c 處抗生素?zé)o效D. d 為對(duì)照解析:選 A 培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周透明圈的大小不同,透明圈越大,說(shuō)明浸有的抗生素抑菌效果越好。a 處的透明圈并不小于 b 處;b 處不是圓形的透明圈,可能是濾紙片沒(méi) 有瀝干,抗生素流出濾紙片;c 處無(wú)透明圈,說(shuō)明 c 處抗生素對(duì)大腸桿菌無(wú)效;d 為空白對(duì)照。二、題型練6.農(nóng)業(yè)和林業(yè)生產(chǎn)上每年都有大量的富含纖維素的下腳料,如農(nóng)作物秸稈和木屑等。這些下腳料中的纖維素經(jīng)過(guò)微生物的轉(zhuǎn)化可以形成葡萄糖,而葡萄糖既是生物體內(nèi)重要的能源物質(zhì),也是食品和制藥工業(yè)的重要原料。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:(1) 許多微生物都能產(chǎn)生分解利用纖維素的纖維
6、素酶,這種酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分: _、_和_。在纖維素酶的作用下,農(nóng)業(yè)和林業(yè)下腳料中的纖維素最終將被分解為 _ 。(2) 分解纖維素的微生物可以從土壤中分離獲得,分離的基本過(guò)程如下:土壤取樣T選擇培養(yǎng)T梯度稀釋T將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上T挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。其中選擇培養(yǎng)的目的是_ ,選擇培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中唯一的碳源是 _。鑒別纖 維素分解菌的培養(yǎng)基中需要加入的特殊物質(zhì)是_ ,該物質(zhì)能夠與纖維素反應(yīng)生成_ ;如果某個(gè)菌落的周圍出現(xiàn)了透明圈,說(shuō)明該種微生物能夠 _。(3) 從土壤中分離纖維素分解菌需要采用_ 技術(shù),例如對(duì)培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行_處理,接種工具應(yīng)該進(jìn)行
7、_ 處理。答案:(1)Ci酶 CX酶 葡萄糖苷酶葡萄糖(2) 增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從樣品中分離到所需的微生物纖維素 剛果紅紅色復(fù)合物 產(chǎn)生纖維素酶,分解纖維素(3) 無(wú)菌高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌Cd247.尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,不能直接被農(nóng)作物吸收,只有當(dāng)土壤中的微生物將尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,對(duì)土壤中分解尿素的微生物進(jìn)行分離和鑒定具有重要5意義?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1) 對(duì)土壤中分解尿素的微生物的分離過(guò)程如下:第一步:土壤取樣。取土樣用的工具和盛土樣的信封等在使用前都需要 _(填“消毒”或“滅菌”)。第二步:樣品稀釋。通常分離不同種類的微生物要采用不同的稀釋度,原因是第
8、三步:微生物的培養(yǎng)與觀察。 將一定稀釋度的樣品接種在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上,并在適宜的條件下培養(yǎng)。分解尿素的微生物能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖,而_ 則不能生長(zhǎng)繁殖。(2) 若對(duì)土壤懸液進(jìn)行梯度稀釋時(shí),未經(jīng)振蕩而直接取上層懸液進(jìn)行梯度稀釋,用稀釋倍數(shù)為 104的樣液涂布到平板上進(jìn)行培養(yǎng)和計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)往往比正確操作統(tǒng)計(jì)出的菌落數(shù)_ 。(3) 若要對(duì)上述初步篩選出的分解尿素的微生物作進(jìn)一步的鑒定,需在如表所示培養(yǎng)基配方中添加的物質(zhì)是 _ 、_ 。若分離得到的是尿素分解菌,則培養(yǎng)基中pH 升高使酚紅指示劑變?yōu)榧t色,pH 升高的原因是_。成分KHPQN&HPQMgSQ 7H2O酚紅指示劑
9、尿素蒸餾水培養(yǎng)基(含量)1.4 g2.1 g0.2 g0.01 g1.0 g1 000 mL答案:(1)滅菌土壤中各類微生物的數(shù)量不同不能利用尿素的微生物(2 ) 偏 高(3 )葡萄糖瓊脂尿素分解菌合成的脲酶將尿素分解成氨&高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉嗜熱菌樣品中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過(guò)程如下圖所示:/挑岀酋落【號(hào)口號(hào) 思嗜熱蘭樣品培養(yǎng)妹 培彝菲(1) 進(jìn)行過(guò)程的目的是 _,過(guò)程所使用的接種方法是 _ 法。(2) 從用途上來(lái)說(shuō),1號(hào)培養(yǎng)基屬于 _培養(yǎng)基,配制時(shí)僅以_ 作為唯一碳源;從物理狀態(tài)上來(lái)說(shuō),n號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,配制時(shí)應(yīng)加入_
10、作為凝固劑。(3)I、n號(hào)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí),滅菌與調(diào)節(jié) pH 的先后順序是 _。-般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用 _ 法滅菌。(4) 培養(yǎng)一段時(shí)間后,應(yīng)從I號(hào)培養(yǎng)基上挑出 _的菌落,接種到n號(hào)培養(yǎng)基26上。解析:(1)分析題圖可知,過(guò)程是梯度稀釋,目的是對(duì)樣品進(jìn)行稀釋;過(guò)程是用稀7釋涂布平板法進(jìn)行接種。(2)本題實(shí)驗(yàn)的目的是篩選咼效產(chǎn)生咼溫淀粉酶的嗜熱菌,從用途 上來(lái)說(shuō),i號(hào)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源;從物理狀態(tài)上來(lái)說(shuō),n號(hào)培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,配制時(shí)應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑。(3)培養(yǎng)基配制和滅菌時(shí)應(yīng)先調(diào)節(jié) pH,然后再進(jìn)行滅菌,如果先滅菌再調(diào)節(jié) pH,在調(diào)節(jié) pH 時(shí)會(huì)污染培養(yǎng)基;
11、一般對(duì)配制的 培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。(4)能分解淀粉的嗜熱菌在I號(hào)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)可釋放淀粉酶,分解培養(yǎng)基中的淀粉,在菌落周圍形成透明圈,透明圈越大淀粉酶的活性越強(qiáng),所以 要從I號(hào)培養(yǎng)基上挑出透明圈大的菌落,接種到n號(hào)培養(yǎng)基上。答案:(1)稀釋 稀釋涂布平板(2)選擇 淀粉 瓊脂(3)先調(diào)節(jié) pH,后滅菌 高壓蒸汽滅菌(4)透明圈大9.2016 年 7 月鄭州市衛(wèi)生計(jì)生委發(fā)布的第 3 期衛(wèi)生監(jiān)測(cè)信息顯示有 15 家美容美發(fā)場(chǎng) 所的毛巾、理發(fā)(美容)用具大腸桿菌嚴(yán)重超標(biāo)。 如圖甲為大腸桿菌含量檢測(cè)操作簡(jiǎn)圖,圖乙為伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基配方。晶砒培祥慕100 mL即乳糖解液2 nU.淵忖紅水懈狀D砧
12、艾藍(lán)水常液ImL回答下列相關(guān)問(wèn)題:(1)圖甲中濾膜的孔徑應(yīng) _ (填“大于”或“小于”)大腸桿菌。受此啟發(fā),對(duì)某些不耐高溫的試劑可以怎樣除菌? _(2)配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí), 除了水分、無(wú)機(jī)鹽以外,還應(yīng)加入 _ (一種營(yíng)養(yǎng)成分),以及_ 。待各成分都溶化后和分裝前, 要進(jìn)行的是 _ 和滅菌,對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的常用器具是 _。倒平板時(shí)要待平板冷凝后, 將平板倒置,其主要目的是_伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)深紫色,從功能上劃分,該培養(yǎng)基屬于_ 培養(yǎng)基。(3)用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌,操作時(shí),接種環(huán)通過(guò)灼燒滅菌,在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端開(kāi)始劃線的目的是_ 。要檢
13、測(cè)樣液中的大腸桿菌含量,取25 cm2毛巾樣本,加 5 mL 蒸餾水,浸潤(rùn)半小時(shí),然后在3 個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1 mL 樣液;在37C的培養(yǎng)箱中放置 48 小時(shí),3 個(gè)平板上的黑色菌落數(shù)分別為49、48 和 47。據(jù)此可得出25 cm2毛巾樣液中的活菌數(shù)為_(kāi)。解析:(1)圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌,濾膜過(guò)濾才能獲得大腸桿菌,對(duì)不耐高 溫的試劑除菌時(shí)無(wú)法用高壓蒸汽滅菌法,可以用濾膜過(guò)濾達(dá)到除菌目的。濾膜濾液I(2)配制圖乙中的28基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí),除了水分、無(wú)機(jī)鹽以外,還應(yīng)加入氮源以及瓊脂。配制的培養(yǎng)基在溶化后和 分裝前需要先進(jìn)行調(diào) pH 和滅菌。高壓蒸汽滅菌法常用高壓蒸汽滅菌鍋對(duì)培養(yǎng)
14、基等進(jìn)行滅菌。倒平板后將平板倒置的主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。從功能上劃分,伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。(3)接種環(huán)灼燒滅菌后,在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端開(kāi)始劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落。348+ 47) - 3-0.1X5= 2.4X10 。答案:(1)小于 用濾膜過(guò)濾除茵(2)氮源 培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染鑒別菌落 2.4X10310.纖維素酶在生物燃料制作、布料處理中起重要作用。目前,利用微生物提高纖維素酶產(chǎn)量是主要發(fā)展方向。如圖甲,用紫外線照射含有纖維素分解菌的土樣,分離、培養(yǎng),再檢測(cè)各菌株的纖維素酶的產(chǎn)生量。請(qǐng)回
15、答下列相關(guān)問(wèn)題:解析:(1)紫外線屬于誘發(fā)基因突變的物理因素,通過(guò)紫外線照射后細(xì)菌突變頻率大大25 cm1 2 3毛巾樣本中的活菌數(shù)為(49 +瓊脂調(diào)整 pH 高壓蒸汽滅菌鍋防止(3)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)提高,從而可能篩選出人類需要的高產(chǎn)菌株;A組未經(jīng)紫外線處理,為對(duì)照組。(2)用手i取素與素提雎提唯提ffiaKMO :甲韻著覃解的產(chǎn)M9摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶剛剛不燙手時(shí)的溫度是50C左右。(3)以纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基上,只有產(chǎn)纖維素酶的細(xì)菌才能存活。(4)據(jù)圖乙可知 A5組纖維素酶的含量與對(duì)照組相同,由于基因突變具有低頻性的特點(diǎn),該組可能沒(méi)有發(fā)生基因突變。答案:(1)誘發(fā)基因
16、突變,提高突變頻率,獲得高產(chǎn)的纖維素分解菌對(duì)照(2)用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶剛剛不燙手(3)纖維素 (4)A5沒(méi)有發(fā)生基因突變11.(2017 貴陽(yáng)一檢)某研究小組的同學(xué)用所學(xué)的微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的方法進(jìn)行“變質(zhì)牛奶中金黃色葡萄球菌的分離和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)”,部分實(shí)驗(yàn)處理和結(jié)果如圖所示。(注:培養(yǎng)皿旁的數(shù)字代表菌落數(shù)目;實(shí)驗(yàn)條件適宜;實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范等2120 Q /32O鱸一鱸一O39O*O;(1)在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物,一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的 條件;另一方面需要確保無(wú)處不在的其他微生物無(wú)法混入。(2)據(jù)圖,研究小組采用的是 _ 法分離和計(jì)數(shù)金黃色葡萄球菌。由樣品到 4 號(hào)試管的操作中,第一步
17、,將分別盛有 9 mL 生理鹽水的 4 支試管_,并編號(hào) 14 號(hào);第二步,用移液管從樣品中吸取1 mL 牛奶,注入 1 號(hào)試管中,充分搖勻;第三步,重復(fù)第二步驟操作,以此類推。4 號(hào)試管的稀釋倍數(shù)是 _。(3)資料顯示,金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在 10%- 15%NaCI 肉湯中生長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)可配制含 10%氯化鈉的培養(yǎng)基,使之成為 _培養(yǎng)基,以利于金黃色葡萄球菌生長(zhǎng),抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。(4)在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),需按照菌落計(jì)數(shù)的要求計(jì)數(shù),以保證計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確。據(jù)圖可得出 1mL 牛奶樣品中金黃色葡萄球菌的活菌數(shù)為 _。解析:(1)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物,即要為微生物提供營(yíng)養(yǎng)和適宜溫度等環(huán)境條件,還要防 止被其他微生物污染。(2)圖示所用的分離方法是稀釋涂布平板法;圖示中每一次稀釋都稀 釋了 10 倍,因此 4 號(hào)試管的稀釋倍數(shù)為104倍。(3)含有較高濃度 NaCI 的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(4)圖示中 2 號(hào)試管和 4 號(hào)試管稀釋度下各有 2 個(gè)和 1 個(gè)培養(yǎng)皿,偶然性較大,應(yīng) 以 3 號(hào)試管稀釋度的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算,即(32 + 39 + 37)十 3-0.
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